Меню Рубрики

Анализ на электрофорез белков мочи

Электорофорез белков мочи – метод выявления в моче патологических белков (парапротеинов) при ряде опухолевых заболеваний (множественная миелома). Основные показания к применению: уточнение причин протеинурии, клинические признаки множественной миеломы.

Наиболее ранним и постоянным признаком миеломной болезни (при развитии миеломной почки) является протеинурия, обнаруживаемая у 65% и более больных. В ряде случаев стойкая протеинурия является единственным признаком миеломной болезни. При помощи электрофореза мочи можно установить природу появления белка, в данном случае Бенс-Джонса. Белок Бенс-Джонса представляет собой димеры легких цепей иммуноглобулинов (моноклональные каппа или лямбда цепи иммуноглобулинов — L-цепи), синтезируемых плазматическими клетками в избыточных количествах при миеломе, болезни Ходжкина, макроглобулинемии Вальденстрема, хронических лейкозах. Поэтому, в случае обнаружения протеинурии неясной этиологии в разовой или суточной моче обычными биохимическими методами, следует проводить электрофорез белков мочи. Обнаружение белка Бенс-Джонса в моче является диагностическим критерием множественной миеломы. Этот белок, проникая в канальцы почек, повреждает их эпителий, что в конечном итоге приводит к склерозированию стромы почек и ведет к почечной недостаточности (одной из причин смерти при миеломной болезни). Исследование содержания этого белка имеет большое и прогностическое значение. Стойкое наличие этого белка свидетельствует о развитии необратимой почечной недостаточности.

  • Моча собирается за сутки в контейнер на 3 литра. В начале сбора первая порция мочи (утренняя) отбрасывается и далее собирается за 24 часа. На время сбора контейнер хранят в темном прохладном месте. После сбора моча перемешивается, определяется ее объем и переливается в сосуд меньшего объема. Для проведения анализа достаточно 20-30 мл мочи.
  • В норме парапротеины в моче не обнаруживаются.
  • Уточнить природу иммуноглобулинопатий. Ранняя диагностика множественной миеломы.

    Множественная миелома. Макроглобулинемия Вальденстрема. Хронический лейкоз.

    Электорофорез белков мочи – метод выявления в моче патологических белков (парапротеинов) при ряде опухолевых заболеваний (множественная миелома). Основные показания к применению: уточнение причин протеинурии, клинические признаки множественной миеломы.

    Наиболее ранним и постоянным признаком миеломной болезни (при развитии миеломной почки) является протеинурия, обнаруживаемая у 65% и более больных. В ряде случаев стойкая протеинурия является единственным признаком миеломной болезни. При помощи электрофореза мочи можно установить природу появления белка, в данном случае Бенс-Джонса. Белок Бенс-Джонса представляет собой димеры легких цепей иммуноглобулинов (моноклональные каппа или лямбда цепи иммуноглобулинов — L-цепи), синтезируемых плазматическими клетками в избыточных количествах при миеломе, болезни Ходжкина, макроглобулинемии Вальденстрема, хронических лейкозах. Поэтому, в случае обнаружения протеинурии неясной этиологии в разовой или суточной моче обычными биохимическими методами, следует проводить электрофорез белков мочи. Обнаружение белка Бенс-Джонса в моче является диагностическим критерием множественной миеломы. Этот белок, проникая в канальцы почек, повреждает их эпителий, что в конечном итоге приводит к склерозированию стромы почек и ведет к почечной недостаточности (одной из причин смерти при миеломной болезни). Исследование содержания этого белка имеет большое и прогностическое значение. Стойкое наличие этого белка свидетельствует о развитии необратимой почечной недостаточности.

    источник

    В плазме человеческой крови находится множество белковых компонентов. Они различны по своему составу, строению и подвижности в определенной среде, проводящей электрический ток. На этом и строится разделение общего белка, который локализуется в плазме, на различные белковые фракции. При проведении электрофореза сыворотки крови выясняют количественное отношение отдельных белковых составляющих и структур. Это необходимо для определения наличия у человека различных патологических явлений, например инфекций или онкологии. Именно электрофорез белков сыворотки крови имеет большое значение при проведении диагностики различных болезней.

    Для расщепления белковых фракций применяют электрофорез сыворотки крови, принцип которого основан на разной подвижности белковых компонентов в созданном электрическом поле. Такой метод исследования является более точным и информативным, в отличие от стандартного общего анализа крови. Но при этом электрофорез показывает только количество определённой фракции белка, характер и степень патологического процесса в общей форме. Анализ проведенных исследований позволяет медицинским специалистам выяснить, какое именно соотношение белковых фракций наблюдается в организме человека, и определить специфику патологии, присущую конкретному заболеванию.

    Большую часть основной биологической жидкости человека, или крови, составляют белки. В общем количестве их норма находится в пределах 60-80 г/л. Для получения точного анализа проводится электрофорез сыворотки крови на бумаге. Это исследование является самым распространенным способом анализа. Основной средой является особая фильтровальная бумага. Главная ее особенность – высокая гигроскопичность. Такая бумага может поглотить воды больше своего веса в 130-200 раз. В зависимости от применяемого оборудования электрофорез на бумаге длится 4-16 часов. Происходит подразделение белковых структур. Затем полосы бумаги обрабатывают специальными красками для получения анализа. Такая методика является самой распространенной в работе медицинских лабораторий. За счёт воздействия электрического тока белковые фракции, заряженные отрицательно, двигаются в сторону положительно заряженного электрода. Благодаря этому белковые составляющие крови подразделяются на 5 известных фракций:

    Альбумины заряжены отрицательно, имеют маленькую, по сравнению с другими фракциями, молекулярную массу. За счет этого скорость их передвижения гораздо выше, чем у остальных фракций, и они дальше всех локализуются от участка старта. Первые три фракции глобулина передвигаются с более низкой скоростью из-за своей массы. Но самая маленькая скорость регистрируется у γ-глобулинов. Эти белки имеют большую массу и крупные, относительно других, размеры. Их заряд почти нейтрален, поэтому данная белковая фракция практически не сдвигается с линии старта.

    В настоящее время электрофорез сыворотки крови часто проводимый анализ для постановки точного диагноза болезни. Этот анализ могут назначить как терапевты, так врачи узкого профиля. Показаниями по проведению исследований будут:

    • различные воспаления;
    • болезни хронической природы;
    • патологические процессы в соединительной ткани;
    • внутреннее кровотечение;
    • злокачественные новообразования.

    Для того чтобы полученные результаты поведенных исследований были верными, не менее чем за 8 часов до сдачи крови необходимо отказаться от приёма еды. Кроме того, необходимо согласовать прием лекарственных средств, если таковые имеются, с лечащим врачом.

    Для того чтобы результаты не были по ошибке завышены, необходимо снизить до минимума возможность свертывания крови для определения показателя белковых фракций и общего белка. Электрофорез сыворотки крови проводится аккуратно, поскольку существует вероятность искажения полученных результатов из-за фибриногена. Он может прятать ненормальные белки или быть спутанным с ними.

    В течение суток после сдачи пробы будет готов анализ на электрофорез белков сыворотки крови. Норма полученных показателей по категориям у взрослых людей:

    1. Общий белок – 63-82 г/л.
    2. Альбумины – 40-60 % от общего количества фракций.
    3. α1-глобулины – 2-5 %.
    4. α2-глобулины – 7-13 %.
    5. β-глобулины – 8-15 %
    6. γ-глобулины – 12-22 %.

    Изменение количества любой белковой фракции в большую или меньшую сторону может свидетельствовать о развитии той или иной патологии. Для получения достоверной информации об этом необходим электрофорез белков сыворотки крови. Расшифровка результатов облегчит медицинским специалистам постановку диагноза и выбор лечения.

    В самом начале при анализе полученных результатов определяют количество альбумина. Увеличение этой фракции может говорить об обезвоживании. Такое может произойти, если у больного отмечается затяжная рвота или нарушения в пищеварительной системе. Также увеличение альбумина происходит при ожогах большой площади кожного покрова.

    Гораздо опаснее, если в организме снижается количество альбуминов, это может говорить о следующих патологиях:

    1. Поражения почек и печени.
    2. Патологии желудочно-кишечного тракта.
    3. Инфекционные процессы.
    4. Нарушения в деятельности сердечно-сосудистой системы.
    5. Кровотечения.
    6. Злокачественные новообразования.
    7. Сепсис.
    8. Ревматизм.

    Незначительное уменьшение количества альбуминов может быть также:

    1. У будущих матерей.
    2. При превышении дозы лекарственных препаратов.
    3. При длительной лихорадке.
    4. У заядлых курильщиков.

    Уменьшение количества a1-глобулинов регистрируется при недостатке α1-антитрипсина. Увеличение же отмечают при обострении воспалений в организме, нарушениях в работе печени, при тканевом распаде.

    Регистрируют его при сахарном диабете, воспалительных процессах в поджелудочной железе, у новорожденных детей при желтухе, при гепатитах токсического происхождения. Свидетельствует оно и о неправильном, несбалансированном питании.

    Происходит при наличии следующих заболеваний:

    1. Воспаления, особенно с присутствием гнойного экссудата (воспаление легких и другие процессы с наличием гноя).
    2. Поражения соединительной ткани (например, ревматизм).
    3. Злокачественные новообразования.
    4. Периоды восстановления после ожогов.
    5. Поражение почек.

    Кроме того, такое явление характерно для гемолиза крови в пробирке во время проведения исследования.

    Проявляется при гиперлипопротеидемии (увеличении количества липидов в крови), патологиях печени и почек. Можно обнаружить при открытой язве желудка, а также гипотиреозе (нарушение работы щитовидной железы). Снижение фракции регистрируют при гипобеталипопротеинемии (повышение в крови компонента беталипопротеин).

    Эта фракция включает в свой состав иммуноглобулины. Поэтому увеличение γ-глобулинов регистрируется при сбоях в иммунитете. Обычно это происходит при различных инфекциях, развитии воспалительного процесса, изменениях ткани и ожоговых поражениях. Рост γ-глобулинов отмечают у больных хронической формой гепатита. Практически такая же картина характерна для цирроза печени. При запущенных случаях данного заболевания количество белковой фракции γ-глобулинов значительно выше показателя альбуминов. При определенных болезнях могут возникать сбои в образовании γ-глобулинов, и происходит развитие измененных протеинов в крови – парапротеинов. Для выяснения характера такого развития производится дополнительное исследование – иммуноэлектрофорез. Такая картина характерна для миеломного заболевания и патологии Вальденстрема.

    Увеличение количества γ-глобулинов также присуще следующим патологиям:

    • красной волчанке;
    • эндотелиоме;
    • ревматоидной форме артрита;
    • остеосаркоме;
    • хронической форме лимфолейкоза;
    • кандидомикозу.

    Снижение показателя γ-глобулинов подразделяют на 3 вида:

    1. Физиологический (характерен для детей в возрасте от трех до пяти месяцев).
    2. Врожденный (развивается с момента рождения).
    3. Идиопатический (когда причину развития установить не удается).

    Вторичное снижение регистрируется при развитии заболеваний, которые вызывают истощение иммунной системы. В последнее время в медицинской практике все чаще проводится анализ на определение количества преальбуминов. Обычно такое исследование проводят больным, находящимся в реанимации.

    Уменьшение количества преальбуминов очень важный и точный тест на определение недостаточности белковых структур в организме пациента. При проведении анализа на преальбумины выполняют коррекцию белкового метаболизма у таких пациентов.

    Принцип проведения подобного анализа схож с технологией выполнения электрофореза сыворотки крови. Проводят его для более точной постановки диагноза или обнаружения других патологий. Кроме того такой анализ поможет выявить у больного наличие протеинурии.

    Электрофорез сыворотки крови и мочи – важные методы в диагностике различных инфекционных заболеваний. Благодаря методике исследования и высокой точности они помогают определить вид патологии. Точный диагноз – верный путь к правильному лечению и полному выздоровлению.

    источник

    Исследование, направленное на определение количественного соотношения основных белковых фракций мочи для выявления типа протеинурии, характерного для заболеваний почек или патологических процессов внепочечной локализации.

    Электрофорез белков мочи; белковые фракции мочи; тип протеинурии.

    Electrophoresis of urine proteins; protein electrophoresis; urine electrophoresis; the type of proteinuria.

    Какой биоматериал можно использовать для исследования?

    Суточную мочу, среднюю порцию утренней мочи.

    Как правильно подготовиться к исследованию?

    • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
    • Исключить (по согласованию с врачом) прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи.

    Общая информация об исследовании

    Повышение уровня белка в моче, или протеинурия, представляет собой состояние, которое может сопровождать патологический процесс в почках, а также иметь преренальное и постренальное происхождение. Электрофоретический метод — это способ пространственного разделения молекул, имеющих разный заряд и размеры, путем помещения их в электрическое поле. Данный метод позволяет оценить количественное соотношение основных белковых фракций мочи в зависимости от молекулярной массы, предположить и описать тип протеинурии, что помогает в дальнейшей диагностике заболеваний или назначении лечения.

    В норме в результате процессов фильтрации и реабсорбции в почках количество белка, выделяемой с мочой, не превышает 100-150 мг/сут. При этом основное количество белка приходится на альбумин. Микроальбуминурия – это экскреция с мочой микроальбуминов в количестве от 30 до 300 мг/сут или от 20 до 200 мг/л в утренней моче. Она является ранним признаком нарушения функции клубочков почек. При выделении с мочой более 300 мг/сут белка развивается протеинурия.

    Важно отметить, что протеинурия не всегда является признаком патологического процесса и только у 2 % населения служит причиной серьезного заболевания. В остальных случаях развиваются функциональные, или транзиторные, протеинурии. Эта разновидность протеинурии не связана с заболеванием почек, и потеря белка при ней незначительна (менее 2 г/сутки). У новорождённых детей может отмечаться физиологическая протеинурия в первые 4-10 суток, и количество белка не превышает 0,5 г/л. Транзиторные протеинурии могут возникать после повышенной физической нагрузки, при эмоциональном стрессе, лихорадке, остром инфекционном заболевании, после перегрева или переохлаждения организма, при потере жидкости, при приеме пищи, богатой белком. При устранении этиологического фактора такие протеинурии быстро проходят. Уровень белка в моче может достигать 3-5 г/л. Известен вариант ортостатической протеинурии, которая появляется, только когда человек стоит, и исчезает в горизонтальном положении. Данный вариант протеинурии наиболее характерен для детей дошкольного и школьного возраста и может быть связан с особенностями развития и роста. Существует вариант гиперлордотической протеинурии, когда концентрация белка в моче неизменна в положениях стоя и лежа. Такие варианты доброкачественных протеинурий могут исчезать, но часто могут являться предвестниками почечной патологии.

    Преренальная протеинурия характеризуется появлением в плазме крови патологических белков в избыточном количестве и не связана с заболеваниями почек. Данные белки имеют низкую молекулярную массу, свободно проходят через неповреждённую почечную мембрану и обнаруживаются в моче. Отмечается увеличенное количество общего белка в моче, фракция альбумина в пределах нормы. Различают гемоглобинурию при гемолитической анемии, миоглобинурию при обширном поражении мышечной ткани, застойную протеинурию при сердечной недостаточности и нейрогенный вариант протеинурии.

    Появление в крови патологических белков – парапротеинов характерно для множественной миеломы, амилоидоза, макроглобулинемии Вальденстрема, болезни тяжелых цепей и ряда других заболеваний. Для диагностики парапротеинемий необходим одновременный анализ как сыворотки крови, так и мочи. Это связано с большой вариабельностью результатов, полученных при исследовании данных биоматериалов. Фрагменты иммуноглобулинов — каппа- и лямбда-легкие цепи — из-за низкой молекулярной массы легко фильтруются через нормальный почечный фильтр, формируя агрегаты и образуя в моче белок Бенс-Джонса. При этом легкие цепи иммуноглобулинов не обнаруживаются в крови, а могут быть обнаружены только при электрофорезе белков в моче (белок Бенс-Джонса). Чувствительность данного метода лимитирована процессом реабсорбции легких цепей, то есть легкие цепи не могут быть обнаружены в моче до начала развития поражения почечных канальцев. При доброкачественных парапротеинемиях данный белок в моче не обнаруживается.

    Читайте также:  Электрофорез при незрелости тазобедренного сустава у новорожденного

    Ренальная протеинурия характерна для многих заболеваний почек и разделяется на клубочковую, тубулярную и смешанную. Клубочковая протеинурия возникает при повреждении базальной мембраны клубочков почек, а тубулярная – в результате нарушения функции реабсорбции белка в почечных канальцах.

    Клубочковая (гломерулярная) протеинурия характерна для всех заболеваний почек, протекающих с поражением коркового вещества почек. К таким заболеваниям относятся острый и хронический гломерулонефрит, липоидный нефроз, идиопатический мембранозный гломерулонефрит, фокальный сегментарный гломерулярный склероз и другие первичные гломерулопатии, а также нефропатии при сахарном диабете, беременности, при болезнях соединительной ткани, опухолях почек.

    Селективная гломерулярная протеинурия возникает в результате увеличения проницаемости клубочков для анионных белков средней молекулярной массы, в частности альбумина и трансферрина, с количеством белка около 0,03-0,3 г/сут. Картина электрофоретического разделения белков мочи не соответствует картине белков сыворотки крови, так как почечный фильтр остается непроницаем для высокомолекулярных белков – глобулинов. Данный тип протеинурии характерен для диабетической нефропатии, нефропатии беременных, при хроническом гломерулонефрите в стадии компенсации.

    При неселективной гломерулярной протеинурии увеличивается проницаемость почечной мембраны как для низкомолекулярных, так и для высокомолекулярных белков массой более 100 кДа, в частности альбумина, иммуноглобулинов классов IgG, IgG. Белки с очень большой молекулярной массой — иммуноглобулин IgM и альфа-2-макроглобулин — не проникают через базальную мембрану и не обнаруживаются в моче. Электрофорез белков мочи идентичен электрофорезу белков крови. Этот тип протеинурии встречается при заболеваниях, сопровождающихся нефротическим синдромом и увеличением количества белка более 3 г/сут. К ним относятся различные варианты гломерулонефритов, в том числе волчаночного нефрита, а также тяжелые варианты нефропатий.

    При тубулярной протеинурии нарушается реабсорбция белков в проксимальном отделе нефрона или усиливается продукция специфического белка клетками почечного эпителия дистального отдела нефронов (белка Тамма — Хорсфалла). В моче обнаруживаются низкомолекулярные белки: альфа-1-микроклобулин, бета-1-микроглобулин, бета-2-микроглобулин, цистатин С. Тубулярная протеинурия встречается при гипертензивном нефроангиосклерозе, интоксикации солями свинца и ртути, при синдроме Фанкони, врождённом дефекте почечных канальцев, интоксикации нефротоксичными препаратами, а также при применении нестероидных противовоспалительных препаратов и некоторых антибиотиков.

    При смешанной протеинурии электрофореграммы белков мочи могут показывать как низкомолекулярные, так и высокомолекулярные белки плазмы крови. Она может возникать при пиелонефрите, острой почечной недостаточности.

    Причиной постренальной протеинурии является кровотечение или воспалительный процесс в мочевыводящих путях, а также она может наблюдаться при доброкачественных и злокачественных процессах мочевого пузыря. При электрофорезе белков мочи могут быть обнаружены плазменные белки: альбумин, иммуноглобулины, альфа-2-макроглобулин.

    Для чего используется исследование?

    • Для выяснения типа протеинурии в зависимости от выявления белковых фракций мочи электрофоретическим методом;
    • для диагностики и подтверждения варианта парапротеинемий;
    • для описания типа протеинурии в целях предположения патологического процесса, заболевания, возможно, назначения дополнительных методов лабораторной диагностики и лечения.

    Когда назначается исследование?

    • При симптомах поражения почек, сопровождающихся развитием нефротического синдрома;
    • при изменениях в общем анализе мочи, при повышении количества общего белка в моче;
    • при подозрении на функциональный тип протеинурии в зависимости от возраста обследуемого, протеинурии, возникающий после эмоционального стресса, физической нагрузки, инфекционно-воспалительных процессов, при чрезмерном употреблении белковой пищи;
    • для исключения типа протеинурии, не связанной с патологией почек, в частности при подозрении на заболевания, сопровождающиеся парапротеинемией, при гемолитической анемии, обширном повреждении мышц, при кровотечениях, воспалительных и опухолевых заболеваниях мочевыводящих путей;
    • в комплексной диагностике и для предположения типа протеинурии в зависимости от выявляемых белковых фракций в моче;
    • для комплексной диагностики заболеваний почек: гломерулонефритов, пиелонефритов, гломерулопатий, нефропатий, в том числе при беременности, сахарном диабете;
    • при назначении нефротоксичных препаратов: аминогликозидов, пенициллинов, циклоспорина, нестероидных противовоспалительных препаратов, диуретиков и некоторых других.

    Белок в моче: не обнаружен.

    Общий белок мочи: 0 — 0,1 г/л.

    • первичные заболевания почек: липоидный нефроз, идиопатический мембранозный гломерулонефрит, фокальный сегментарный гломерулярный склероз, IgA-гломерулонефрит, мембранопролиферативный гломерулонефрит, пиелонефрит, синдром Фанкони, острый тубулоинтерстициальный нефрит;
    • поражения почек при других заболеваниях и патологических состояниях: сахарном диабете, артериальной гипертензии, системных заболеваниях соединительной ткани, амилоидозе, преэклампсии, эклампсии, злокачественных новообразованиях (легких, желудочно-кишечного тракта, крови);
    • поражение почек при лечении нефротоксическими препаратами: нестероидными противовоспалительными препаратами, диуретиками, аминогликозидами, пенициллинами, циклоспорином;
    • поражение почек при отравлении солями свинца и ртути.
    • множественная миелома, амилоидоз, макроглобулинемия Вальденстрема, болезни тяжелых цепей, лимфома, хронический лимфолейкоз;
    • гемоглобинурия при гемолитической анемии;
    • миоглобинурия при повреждении мышечной ткани;
    • застойная протеинурия при заболеваниях сердца в стадии декомпенсации, при асцитах, вызванным метастазами и онкологическими процессами в брюшной полости;
    • нейрогенная протеинурия при черепно-мозговых травмах, психоневрологических нарушениях.

    3. Протеинурия в результате кровотечений или воспалительных процессов в мочевыводящих путях, при доброкачественных и злокачественных процессах мочевого пузыря.

    4. Транзиторная (доброкачественная) протеинурия: дегидратация, стресс, диета с высоким содержанием белка, значительная физическая нагрузка, лихорадка, ортостатическая протеинурия.

    уменьшение белковых фракций для определения типа протеинурии диагностически неинформативно. Возможно снижение одной белковой фракции при увеличении другой.

    Что может влиять на результат?

    [02-006] Общий анализ мочи с микроскопией осадка [06-114] Альбумин в моче (микроальбуминурия) [08-019] Бета-2-микроглобулин в моче [13-101] Белок Бенс-Джонса, количественно (иммунофиксация мочи)

    Кто назначает исследование?

    Терапевт, врач общей практики, нефролог, уролог, гематолог, онколог, ревматолог, иммунолог, педиатр.

    1. Johnson DW. Global proteinuria guidelines: are we nearly there yet? / Clin Biochem // Rev. 2011 May;32(2):89-95.
    2. McTaggart MP1, Lindsay J, Kearney EMReplacing urine protein electrophoresis with serum free light chain analysis as a first-line test for detecting plasma cell disorders offers increased diagnostic accuracy and potential health benefit to patients/Am J Clin Pathol. // 2013 Dec;140(6):890-7.
    3. Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
    4. Долгов В.В., Меньшиков В.В. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство. – Т. I. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2012. – 928 с.

    источник

    Биоматериал: моча суточная

    Срок выполнения (в лаборатории): 4 р.д. *

    В клинической практике электрофорез белков мочи используется для уточнения происхождения и прогноза парапротеинемии и определения типа протеинурии. При парапротеинемии увеличение концентрации сывороточных протеинов, особенно макроглобулинов, которые объединены в иммунные комплексы с факторами свертывания крови или другими антигенами, обуславливает повышение вязкости крови и приводит к нарушению кровообращения в мелких сосудах, повреждению их стенок иммунными комплексами.
    В этом случае в первую очередь страдают почки, что проявляется протеинурией, причиной которой является появление патологических белков в моче. Увеличенное содержание общего белка мочи отмечается в 90 % у таких больных. Определение типа протеинурии при заболеваниях почек с помощью электрофореза белков мочи имеет значение для диагностики заболеваний почек, определения прогноза их течения и выбора правильной тактики лечения.

    Электрофорез белков мочи позволяет выявить патологические иммуноглобулины А, М, G, Н-цепи, парапротеины, белок Бенс-Джонса. В 20 % случаев множественные миеломы синтезируют только легкие цепи иммуноглобулинов. Из-за своей низкой молекулярной массы они быстро удаляются из кровотока и не обнаруживаются в сыворотке крови. Идентификация белка Бенс-Джонса в моче имеет важное диагностическое и прогностическое значение. Он проникает в канальцы, повреждает их эпителий, что в конечном итоге приводит к развитию почечной недостаточности, которая является наиболее частой причиной смертности при миеломной болезни.
    Выделение белка Бенс-Джонса с мочой свидетельствует также о наличии опухолевого процесса, поэтому выявление его даже в следовых концентрациях должно стать отправной точкой для ранней диагностики множественной миеломы.

    На данное исследование скидки не предоставляются (см. Положение о скидках)

    Уточнения происхождения и прогноза парапротеинемий (иммуноглобулинопатий);

    Определение селективности (типа) протеинурии;

    Диагностика миеломное болезни.

    Накануне сдачи анализа не употреблять овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свекла, морковь и др.), исключить острую, соленую пищу. Не принимать препараты-диуретики за 48 часов до исследования. Исключить физическое и эмоциональное напряжение.

    Правила сбора мочи:

    ВАЖНО: Перед сбором суточной мочи необходимо получить в лаборатории набор для сбора суточной мочи с консервантом и инструкцию по его использованию! Суточная моча собирается в чистую тару объемом до 2,5-3 литров. В процессе сбора мочу хранить при +4°С.
    1. Утром опорожнить мочевой пузырь (эта порция мочи выливается в унитаз). Зафиксировать время мочеиспускания.
    2. Все последующие порции мочи, выделенные в течение дня, ночи и первую утреннюю порцию следующего дня (в течение суток) собрать в контейнер без консерванта. Последнее мочеиспускание произвести утром через 24 часа от отмеченного накануне времени.
    3. После завершения сбора мочи, содержимое емкости нужно измерить и записать объем суточной мочи (диурез). Тщательно перемешать, 15-30 раз плавно переворачивая плотно закрытый контейнер и отобрать в вакуумную пробирку.
    4. Доставить в лабораторию

    Загрязнение образца обильными уретральными или вагинальными выделениями, а также чрезмерное употребление жидкости накануне может привести к снижению количества белка в моче.

    Интерпретация результатов:

    Повышение референсных значений:
    Результаты обследования оценивает врач на основании клинической картины, жалоб, данных инструментальных и дополнительных методов обследования.

    Понижение референсных значений:
    Протеинурия не обнаружена.

    Адреса медицинских центров, в которых можно заказать исследование, уточняйте по телефону 8-800-100-363-0
    Все медицинские центры СИТИЛАБ в г. Москва >>

    Код Наименование Цена Заказ
    21-20-004 Щелочная фосфатаза от 1 р.д. 280.00 р.
    21-85-008 Альфа-амилаза панкреатическая в моче (разовая порция) от 1 р.д. 410.00 р.
    22-20-001 Общий белок от 1 р.д. 290.00 р.
    22-20-002 Альбумин от 1 р.д. 330.00 р.
    23-12-001 Глюкоза от 1 р.д. 260.00 р.

    * На сайте указан максимально возможный срок выполнения исследования. Он отражает время выполнения исследования в лаборатории и не включает время на доставку биоматериала до лаборатории.
    Приведенная информация носит справочный характер и не является публичной офертой. Для получения актуальной информации обратитесь в медицинский центр Исполнителя или call-центр.

    источник

    Этот анализ является исследованием, которое позволяет определить их количественные и качественные показатели по тому, как белки распределяются в электрическом поле. Исследование основано на том, что белковые молекулы несут заряды, положительные или отрицательные в зависимости от того, какой кислотностью будет обладать среда, в которой будет проводиться непосредственно электрофорез. Молекулы, которые окажутся положительно заряженными, будут адсорбироваться лучше, нежели чем те, которые несут отрицательный заряд.

    Носителями, которые будут применяться для электрофореза, могут быть хроматографическая бумага, агаровый гель, полиакриловой гель, ацетатцеллюлозная бумага или акриловый гель. Значительно реже применяется капиллярный электрофорез.

    Во время анализа белки разделяют на 5 или 6 фракций, в зависимости от применяемого метода. Это будут гамма-глобулины, которые делятся на бета-1 и бета-2, альбумины — альфа-1 и альфа-2, а также бета-глобулины.

    Имеются установленные нормы белковых фракций, которые должны присутствовать в крови. Отклонение их от показателей является признаком нарушения в организме, что требует проведения обследования для выявления причины.

    Фракция Норма в г/л
    Альбумин 35-44
    Глобулин альфа-1 1-3
    Глобулин альфа-2 5-8
    Бета-глобулин 4-10
    Гамма-глобулин 5-12

    Значения показателей, в зависимости от того какие реактивы применяются в конкретной лаборатории, могут несколько изменяться. Поэтому в бланке результатов исследования в каждом медицинском учреждении обязательно указываются значения нормы, которые приняты в нем. На них будет ориентироваться врач при расшифровке анализа.

    Электрофорез белков крови назначают не очень часто, так как сегодня современные лабораторные исследования позволяют провести анализ на определенный белок, что ускоряет процесс диагностики. Абсолютным показанием к электрофорезу является наличие монолокальной гаммапатии. Также иногда анализ может быть показан в таких случаях:

    • чрезмерно высокая скорость оседания эритроцитов, когда она превышает 50 мм/ч;
    • значительно повышенный уровень гамма-глобулинов;
    • скрининговое обследование для контроля эффективности лечения миеломной болезни;
    • чрезмерно высокий общий белок в крови;
    • ряд аутоиммунных заболеваний, поражающих печень и почки;
    • слабость, для которой нет выраженной причины;
    • развитие патологических переломов костей и постоянные боли в костях;
    • частые рецидивы инфекционных заболеваний;
    • нарушения, обнаруженные в прочих анализах, указывающие на то, что у человека могут развиваться анемии, лейкемии, гиперкальциемия или гипоальбуминемия.

    При общей диспансеризации и получении медицинских справок для трудоустройства данное исследование крови не осуществляется. Не требуется оно и в процессе подготовки человека к хирургическому вмешательству.

    Для получения наиболее точных результатов рекомендуется соблюдение правил подготовки к анализу. Они включают в себя голодную диету в течение 15 часов до того как будет взята кровь, когда пациент может употреблять только чистую не газированную воду. За 90 минут до проведения исследования необходимо полностью исключить нагрузки как эмоциональные, так и физические, и курение в активной или пассивной форме. Чтобы не допустить искажение данных, забор материала не проводят сразу после того, как был осуществлен гемодиализ или проведена процедура, при которой использовались радиоконтрастные составы. Важно также, чтобы за несколько дней до исследования полностью было исключено лечение пенициллином, так как он вызывает расщепление амбулина, что исказит результат.

    Фракция Повышение Понижение
    Амбулин Злоупотребление алкоголем, период вынашивания ребёнка, дегидрация Холецистит в острой форме, лейкоз, миелома, саркоидоз, пневмония, остеомиелит, системная красная волчанка, лимфома
    Глобулин альфа-1 Цирроз печени, стрессовые состояния, лимфогранулематоз, период вынашивания ребёнка, язва желудка, острое или хроническое воспаление Гепатит вирусной природы в острой форме
    Глобулин альфа-2 Сахарный диабет, остеомиелит, гломерулонефрит в острой форме, стрессовые состояния, системная красная волчанка, узловатый полиартрит, цирроз Гипертиреоз, гепатит вирусной природы в острой форме, гемолиз интраваскулярный
    Бета-глобулин Сахарный диабет, саркоидоз, ревматоидный артрит, беременность, гломерулонефрит, желтуха подпеченочная, нефротический синдром Лейкоз, цирроз, склеродермия имеющая системный характер, лимфома, системная красная волчанка
    Гамма-глобулин Цирроз, склеродермия системного характера, ревматоидный артрит, лимфолейкоз в хронической форме, муковисцидоз, синдром Шегрена Лейкоз, склеродермия, гепатит вирусной природы в острой форме, лимфома, гломерулонефрит
    Читайте также:  Калий йод для электрофореза показания

    Исказить показатели, кроме неправильной подготовки к проведению анализа, могут 2 фактора: недавно проведенная процедура гемодиализа, из-за которой произошло разрушение эритроцитов в крови, и повышенный уровень билирубина в организме. В любом из этих случаев потребуется пересдача анализа через некоторое время, которое определит врач.

    источник

    Почечная (истинная) протеинурия бывает функциональной и органической. Среди функциональной почечной протеинурии наиболее часто наблюдаются следующие ее виды:

    — физиологическая протеинурия новорожденных, которая исчезает на 4— 10-й день после рождения, а у недоношенных несколько позже;
    — ортостатическая альбуминурия, которая характерна для детей в возрасте 7—18 лет и появляется только в вертикальном положении тела;
    — транзиторная (инсультная) альбуминурия, причиной которой могут быть различные заболевания органов пищеварения, тяжелая анемия, ожоги, травмы или физиологические факторы: тяжелая физическая нагрузка, переохлаждение, сильные эмоции, обильная, богатая белком пища и др.

    Органическая (почечная) протеинурия наблюдается вследствие прохождения белка из крови через поврежденные участки эндотелия почечных клубочков при заболеваниях почек (гломерулонефрит, нефроз, нефросклероз, амилоидоз, нефропатия беременных), расстройствах почечной гемодинамики (почечная венная гипертензия, гипоксия), трофических и токсических (в том числе лекарственных) воздействиях на стенки капилляров клубочков.

    Большинство качественных и количественных методов определения белка в моче основаны на его коагуляции в объеме мочи или на границе сред (мочи и кислоты).

    Среди качественных методов определения бедка в моче наибольшее распространение получили унифицированная проба с сульфосалициловой кислотой и кольцевая проба Геллера.

    Унифицированная проба с сульфасалициловой кислотой проводится следующим образом. В 2 пробирки наливают по 3 мл профильтрованной мочи. В одну из них прибавляют 6—8 капель 20 % раствора сульфасалициловой кислоты. На темном фоне сравнивают обе пробирки. Помутнение мочи в пробирке с сульфасалициловой кислотой указывает на наличие белка. Перед исследованием необходимо определить реакцию мочи, и если она щелочная, то подкислить 2—3 каплями 10 % раствора уксусной кислоты.

    Проба Геллера основана на том, что при наличии белка в моче на границе азотной кислоты и мочи происходит его коагуляция и появляется белое кольцо. В пробирку наливают 1—2 мл 30 % раствора азотной кислоты и осторожно по стенке пробирки наслаивают точно такое же количество профильтрованной мочи. Появление белого кольца на границе двух жидкостей указывает на наличие белка в моче. Следует помнить, что иногда белое кольцо образуется при наличии большого количества уратов, но в отличие от белкового кольца оно появляется несколько выше границы между двумя жидкостями и растворяется при нагревании [Плетнева Н.Г., 1987].

    Из количественных методов наиболее часто применяются:

    1) унифицированный метод Брандберга—Робертса—Стольникова, в основу которого положена кольцевая проба Геллера;
    2) фотоэлектроколориметрический метод количественного определения белка в моче по помутнению, образующемуся при добавлении сульфасалициловой кислоты;
    3) биуретовый метод.

    Выявление белка в моче упрощенным ускоренным методом проводят колориметрическим методом с помощью индикаторной бумаги, которую выпускают фирмы «Lachema» (Словакия), «Albuphan», «Ames» (Англия), «Albustix», «Boehringer» (Германия), «Comburtest» и др. Метод заключается в погружении в мочу специальной бумажной полоски, пропитанной тетрабромфеноловым синим и цитратным буфером, которая меняет свой цвет от желтого до синего в зависимости от содержания белка в моче. Ориентировочно концентрацию белка в исследуемой моче определяют с помощью стандартной шкалы. Для получения правильных результатов необходимо соблюдать следующие условия. рН мочи должна быть в пределах 3,0—3,5; при слишком щелочной моче (рН 6,5) будет получен ложноположительный результат, а при слишком кислой моче (рН 3,0) — ложноотрицательный.

    Бумага должна находиться в контакте с исследуемой мочой не дольше, чем указано в инструкции, в противном случае тест даст ложноположительную реакцию. Последнюю также наблюдают и при содержании в моче большого количества слизи. Чувствительность различных видов и серий бумаги может быть различной, поэтому к количественной оценке белка в моче этим методом следует относиться осторожно. Определение его количества в суточной моче при помощи индикаторной бумаги невозможно [Плетнева Н.Г., 1987]

    Существует несколько способов определения количества белка, выделившегося с мочой за сутки. Наиболее простым является метод Брандберга —Робертса—Стольникова.

    Методика. 5-10 мл тщательно перемешанной суточной мочи наливают в пробирку и осторожно по стенкам ее добавляют 30 % раствор азотной кислоты. При наличии белка в моче в количестве 0,033 % (т.е. 33 мг на 1 л мочи) через 2-3 мин появляется тонкое, но четко видимое белое кольцо. При меньшей его концентрации проба отрицательная. При большем содержании белка в моче его количество определяют путем многократных разведений мочи дистиллированной водой до тех пор, пока не перестанет образовываться кольцо. В последней пробирке, в которой еще видно кольцо, концентрация белка будет составлять 0,033 %. Умножив 0,033 на степень разведения мочи, определяют содержание белка в 1 л неразведенной мочи в граммах. Затем рассчитывают содержание белка в суточной моче по формуле:

    где К — количество белка в суточной моче (г); х — количество белка в 1 л мочи (г); V — количество мочи, выделенное за сутки (мл).

    В норме в течение суток с мочой выделяется от 27 до 150 мг (в среднем 40—80 мг) белка.

    Указанная проба позволяет определить в моче только мелкодисперсные белки (альбумины). Более точные количественные методы (колориметрический метод Кьельдаля и др.) довольно сложны и требуют специальной аппаратуры.

    При почечной протеинурии с мочой выделяются не только альбумины, но и другие виды белка. Нормальная протеинограмма (по Зейцу и соавт., 1953) имеет следующее процентное содержание: альбуминов — 20 %, α1-глобулинов — 12 %, α2-глобулинов — 17 %, γ-глобулинов — 43 % и β-глобулинов — 8 %. Отношение альбуминов к глобулинам изменяется при различных заболеваниях почек, т.е. нарушается количественное соотношение между белковыми фракциями.

    Наиболее распространенными методами фракционирования уропротеинов являются следующие: высаливание нейтральными солями, электрофоретическое фракционирование, иммунологические методы (реакция радиальной иммунодиффузии по Манчини, иммуноэлектрофоретический анализ, преципитационный иммуноэлектрофорез), хроматография, гель-фильтрация, а также ультрацентрифугирование.

    В связи с внедрением методов фракционирования уропротеинов, основанных на изучении электрофоретической подвижности, вариабильности молекулярной массы, размеров и формы молекул уропротеинов, появилась возможность выделять характерные для того или иного заболевания типы протеинурии, изучать клиренсы индивидуальных плазменных белков. К настоящему времени в моче идентифицировано свыше 40 плазменных белков, В том числе в нормальной моче 31 плазменный белок [Berggard, 1970].

    В последние годы появилось понятие селективности протеинурии. В 1955 г. Hardwicke и Squire сформулировали понятие «селективная» и «неселективная» протеинурия, определив, что фильтрация плазменных белков в мочу подчиняется определенной закономерности: чем больше молекулярная масса белка, экскретируемого в мочу, тем меньше его клиренс и тем ниже концентрация его в окончательной моче. Протеинурия, соответствующая этой закономерности, является селективной в отличие от неселективной, для которой характерным является извращение выведенной закономерности.

    Обнаружение в моче белков с относительно большой молекулярной массой свидетельствует об отсутствии избирательности почечного фильтра и выраженном его поражении. В этих случаях говорят о низкой селективности протеинурии. Поэтому в настоящее время широкое распространение получило определение белковых фракций мочи с использованием методов электрофореза в крахмальном и полиакриламидном геле. По результатам этих методов исследования можно судить о селективности протеинурии.

    По данным В.С.Махлиной (1975), наиболее оправданным является определение селективности протеинурии путем сравнения клиренсов 6—7 индивидуальных белков плазмы крови (альбумина, транеферрина, α2 — макроглобулина, IgA, IgG, IgM) с использованием точных и специфичных количественных иммунологических методов реакции радиальной иммунодиффузии по Манчини, иммуноэлектрофоретического анализа и преципитального иммуноэлектрофореза. Степень селективности протеинурии определяют по индексу селективности, представляющего собой отношение сравниваемого и эталонного белков (альбумина).

    Изучение клиренсов индивидуальных плазменных белков позволяет получить достоверные сведения о состоянии фильтрационных базальных мембран клубочков почки. Связь между характером экскретируемых в мочу белков и изменениями базальных мембран клубочков настолько выражена и постоянна, что по уропротеинограмме можно косвенно судить о патофизиологических изменениях в клубочках почек. В норме средний размер пор гломерулярной базальной мембраны составляет 2,9—4 А° НМ, которые могут пропускать белки, имеющие молекулярную массу до 10 4 (миоглобулин, кислый α1 — гликопротеин, легкие цепи иммуноглобулинов, Fc и Fab — фрагменты IgG, альбумин и трансферрин).

    При гломерулонефрите, нефротическом синдроме размеры пор в базальных мембранах клубочков увеличиваются, в связи с чем базальная мембрана становится проницаемой для белковых молекул большого размера и массы (церулоплазмин, гаптоглобин, IgG, IgA и др.). При крайней степени повреждения клубочков почек в моче появляются гигантские молекулы белков плазмы крови (α2-макроглобулин, IgM и β2-липопротеин).

    Определяя белковый спектр мочи, можно сделать заключение о преимущественном поражении тех или иных участков нефрона. Для гломерулонефрита с преимущественным поражением гломерулярных базальных мембран характерно наличие в моче крупно- и среднемолекулярных белков. Для пиелонефрита с преимущественным поражением базальных мембран канальцев характерны отсутствие крупномолекулярных и наличие повышенных количеств средне- и низкомолекулярных белков.

    Концентрацию этого белка в плазме крови и моче определяют радиоиммунологическим методом с помощью стандартного набора «Phade-bas β2-mikroiest» (фирма «Pharmaсia», Швеция). В сыворотке крови здоровых людей содержится в среднем 1,7 мг/л (колебания от 0,6 до 3 мг/л), в моче — в среднем 81 мкг/л (максимально 250 мкг/л) β2-микроглобулина. Превышение его в моче свыше 1000 мкг/л — явление патологическое. Содержание β2-микроглобулина в крови увеличивается при заболеваниях, сопровождающихся нарушением клубочковой фильтрации, в частности при остром и хроническом гломерулонефрите, поликистозе почек, нефросклерозе, диабетической нефропатии, острой почечной недостаточности.

    Концентрация β2-микроглобулина в моче повышается при заболеваниях, сопровождающихся нарушением реабсорбционной функции канальцев, что приводит к увеличению экскреции его с мочой в 10—50 раз, в частности, при пиелонефрите, ХПН, гнойной интоксикации и др. Характерно, что при цистите в отличие от пиелонефрита не наблюдается увеличения концентрации β2-микроглобулина в моче, что может быть использовано для дифференциальной диагностики этих заболеваний. Однако при интерпретации результатов исследования надо учитывать, что любое повышение температуры всегда сопровождается увеличением экскреции β2-микроглобулина с мочой.

    Средние молекулы (СМ), иначе называемые белковыми токсинами, представляют собой вещества с молекулярной массой 500—5000 дальтон. Физическая структура их неизвестна. В состав СМ входят по меньшей мере 30 пептидов: окситоцин, вазопрессин, ангиотензин, глюкагон, адренокортикотропный гормон (АКТГ) и др. Избыточное накопление СМ наблюдается при снижении функции почек и содержании в крови большого количества деформированных белков и их метаболитов. Они обладают разнообразным биологическим действием и нейротоксичны, вызывают вторичную иммунодепрессию, вторичную анемию, угнетают биосинтез белка и эритропоэз, тормозят активность многих ферментов, нарушают течение фаз воспалительного процесса.

    Уровень СМ в крови и моче определяют скрининговым тестом, а также путем спектрофотометрии в ультрафиолетовой зоне по длине волны 254 и 280 мм на спектрофотометре ДИ-8Б, а также динамической спектрофотометрии с компьютерной обработкой в диапазоне волн 220—335 нм на том же спектрометре фирмы Beckman. За норму принимают содержание СМ в крови, равное 0,24 ± 0,02 усл. ед., а в моче — 0,312 ± 0,09 усл. ед.
    Будучи нормальными продуктами жизнедеятельности организма, они удаляются из него в норме ночками путем гломерулярной фильтрации на 0,5 %; 5 % их утилизируется другим путем. Все фракции СМ подвергаются канальцевой реабсорбции.

    Кроме белков плазмы крови, в моче могут быть неплазменные (тканевые) протеины. По данным Buxbaum и Franklin (1970), неплазменные белки составляют приблизительно 2/3 всех биоколлоидов мочи и значительную часть уропротеинов при патологической протеинурии. Тканевые белки попадают в мочу непосредственно из почек или органов, анатомически связанных с мочевыми путями, или попадают из других органов и тканей в кровь, а из нее через базальные мембраны клубочков почки — в мочу. В последнем случае экскреция в мочу тканевых протеинов происходит аналогично выведению плазменных белков различной молекулярной массы. Состав неплазменных уропротеинов чрезвычайно разнообразен. Среди них гликопротеины, гормоны, антигены, ферменты (энзимы).

    Тканевые протеины в моче выявляют с помощью обычных методов белковой химии (ультрацентрифугирование, гель-хроматография, различные варианты электрофореза), специфических реакций на ферменты и гормоны и иммунологических методов. Последние позволяют также определить концентрацию неплазменного уропротеина в моче и в ряде случаев определить тканевые структуры, ставшие источником его появления. Основным методом выявления в моче неплазменного белка является иммунодиффузионный анализ с антисывороткой, полученной иммунизацией экспериментальных животных мочой человека и истощенной (адсорбированной) в последующем белками плазмы крови.

    При патологическом процессе наблюдаются глубокие нарушения жизнедеятельности клеток, сопровождающиеся выходом внутриклеточных ферментов в жидкостные среды организма. Энзимодиагностика базируется на определении ряда ферментов, выделившихся из клеток пораженных органов и не свойственных сыворотке крови.
    Исследования нефрона человека и животных показали, что в отдельных его частях имеется высокая ферментативная дифференциация, тесно связанная с функциями, которые выполняет каждый отдел. В клубочках почки содержится относительно небольшое количество различных энзимов.

    Клетки почечных канальцев, особенно проксимальных отделов, содержат максимальное количество энзимов. Высокая их активность наблюдается в петле Генле, прямых канальцах и собирательных трубочках. Изменения активности отдельных энзимов при различных заболеваниях почек зависят от характера, остроты и локализации процесса. Они наблюдаются до появления морфологических изменений в почках. Поскольку содержание различных ферментов четко локализовано в нефроне, определение того или иного фермента в моче может способствовать топической диагностике патологического процесса в почках (клубочки, канальцы, корковый или мозговой слой), дифференциальной диагностике почечных заболеваний и определению динамики (затухание и обострение) процесса в почечной паренхиме.

    Дли дифференциальной диагностики заболеваний органов мочеполовой системы применяют определение активности в крови и моче следующих ферментов: лактатдегидрогеназы (ЛДГ), лейцинаминопептидазы (ЛАП), кислой фосфатазы (КФ), щелочной фосфатазы (ЩФ), β-глюкуронидазы, глютамино-щавелевоуксусной трансаминазы (ГЩТ), альдолазы, трансамидиназы и др. Активность ферментов в сыворотке крови и в моче определяют с помощью биохимических, спектрофотометрических, хроматографических, флуориметрических и хемилюминесцентных методов.

    Читайте также:  Кортексин электрофорез методика процедуры

    Энзимурия при заболеваниях почек более выражена и закономерна, чем энзимемия. Она особенно сильно выражена в острой стадии заболевания (острый пиелонефрит, травма, распад опухоли, инфаркт почки и т.д.). При этих заболеваниях обнаруживается высокая активность трансамидиназы, ЛДГ, ЩФ и КФ, гиалуронидазы, ЛАП, а также таких неспецифических энзимов, как ГЩТ, каталаза [Полянцева Л.Р., 1972].

    Селективная локализация ферментов в нефроне при обнаружении ЛАП и ЩФ в моче позволяет с уверенностью говорить об острых и хронических заболеваниях почек (острая почечная недостаточность, некроз почечных канальцев, хронический гломерулонефрит) [Шеметов В.Д., 1968]. По данным А.А.Карелина и Л.Р.Полянцевой (1965), трансамидиназа содержится лишь в двух органах — почке и поджелудочной железе. Она является митохондриальным ферментом почек и в норме в крови и моче отсутствует. При различных заболеваниях почек трансамидиназа появляется в крови и в моче, а при поражении поджелудочной железы — только в крови.

    Дифференциальным тестом в диагностике гломерулонефрита и пиелонефрита Krotkiewski (1963) считает активность ЩФ в моче, повышение которой более характерно для пиелонефрита и диабетического гломерулосклероза, чем для острого и хронического нефрита. Нарастающая в динамике амилаземия при одновременном снижении амилазурии может указывать на нефросклероз и сморщивание почки, ЛАП имеет наибольшее значение при патологических изменениях в клубочках и извитых канальцах почки, поскольку содержание ее в этих отделах нефрона более высокое [Шепотиновский В.П. и др., 1980]. Для диагностики волчаночного нефрита рекомендуется определение β-глюкуронидазы и КФ [Приваленко М.Н. и др., 1974].

    При оценке роли энзимурии в диагностике заболеваний почек следует учитывать следующие положения. Энзимы, будучи по своей природе белками, при малой молекулярной массе могут проходить через неповрежденные клубочки, определяя так называемую физиологическую энзимурию. Среди этих энзимов постоянно определяются в моче α-амилаза (относительная молекулярная масса 45 ООО) и уропепсин (относительная молекулярная масса 38000).

    Наряду с низкомолекулярными энзимами в моче здоровых лиц могут быть обнаружены в небольшой концентрации и другие энзимы: ЛДГ, аспартат- и аланинаминотрансферазы, ЩФ и КФ, мальтаза, альдолаза, липаза, различные протеазы и пептидазы, сульфатаза, каталаза, рибонуклеаза, пероксидаза [King, Воусе, 1963].

    Высокомолекулярные энзимы с относительной молекулярной массой больше 70000-100000, по мнению Richterich (1958) и Hess (1962), могут проникать в мочу лишь при нарушении проницаемости клубочкового фильтра. Нормальное содержание ферментов в моче не позволяет исключить патологический процесс в почке при окклюзии мочеточника. При эпзимурии возможен выход энзимов не только из самих почек, но и из других паренхиматозных органов, клеток слизистых оболочек мочевых путей, предстательной железы, а также форменных элементов мочи при гематурии или лейкоцитурии.

    Большинство энзимов неспецифично по отношению к почке, поэтому откуда происходят энзимы, обнаруженные в моче здоровых и больных, установить трудно. Однако степень энзимурии даже дли неспецифичных энзимов при поражении почек бывает выше нормы или той, которая наблюдается при заболеваниях других органов. Более ценную информацию может дать комплексное исследование в динамике ряда ферментов, особенно органоспецифичных, таких как трансаминаза.

    В решении вопроса о почечном происхождении энзима в моче помогает исследование изоэнзимов с выявлением фракций, типичных для изучаемого органа. Изоэнзимы — это энзимы, изогенные по действию (катализируют одну и ту же реакцию), но гетерогенные по химической структуре и другим свойствам. Каждая ткань имеет характерный для нее изоэнзимный спектр. Ценными методами разделения изоэнзимов являются электрофорез в крахмальном и полиакриламидном геле, а также ионообменная хроматография.

    При миеломной болезни и макроглобулинемии Вальденстрема в моче обнаруживают белок Бенс-Джонса. Метод обнаружения названного белка в моче основан на реакции термопреципитации. Применявшиеся ранее методы, с помощью которых оценивают растворение этого белка при температуре 100 °С и повторное осаждение при последующем охлаждении, ненадежны, так как не все белковые тела Бенс-Джонса обладают соответствующими свойствами.

    Более достоверно выявление этого парапротеина путем осаждения его при температуре 40 -60 °С. Однако и в этих условиях осаждения может не произойти в слишком кислой (рН 6,5) моче, при низкой ОПМ и низкой концентрации белка Бенс-Джонса. Наиболее благоприятные условия для его осаждения обеспечивает методика, предложенная Patnem: 4 мл профильтрованной мочи смешивают с 1 мл 2 М ацетатного буфера рН 4,9 и согревают 15 мин на водяной бане при температуре 56 °С. При наличии белка Бенс-Джонса в течение первых 2 мин появляется выраженный осадок.

    При концентрации белка Бенс-Джонса меньше 3 г/л проба может быть отрицательной, но на практике это встречается крайне редко, поскольку его концентрация в моче, как правило, более значительна. На пробы с кипячением нельзя вполне полагаться. С полной достоверностью он может быть обнаружен в моче иммуно-электрофоретическим методом с использованием специфических сывороток против тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов.

    источник

    Позвоните в клинику, и мы расскажем, как правильно подготовиться к сдаче необходимых вам анализов. Строгое соблюдение правил гарантирует точность исследований.

    Накануне сдачи анализов необходимо воздержаться от физических нагрузок, приема алкоголя и существенных изменений в питании и режиме дня. Большинство исследований сдаются строго натощак, то есть должно пройти не менее 12 и не более 16 часов после последнего приема пищи.

    За два часа до сдачи следует воздержаться от курения и кофе. Все анализы крови сдаются до проведения рентгенографии УЗИ и физиотерапевтических процедур. По возможности воздержитесь от приема лекарств, а если это невозможно, предупредите доктора, назначающего вам анализы.

    Все анализы рекомендуется сдавать в утреннее время, так как лабораторные нормы рассчитаны именно для утренних показателей. Исключение составляют случаи, когда докторунеобходимо оценить ваше состояние на данный момент.

    Очень важно точно следовать указанным рекомендациям в избежание ошибок на преаналитическом этапе проведения исследования!

    Исследования крови

    Общий анализ крови

    Кровьсдается из пальца или из вены. Подготовка: кровь сдается натощак. Перед сдачей анализа избегайте физический нагрузок, стрессов. Время и место забора материала: в течение дня, в клинике.

    Биохимический анализ крови

    Кровь сдается из вены. Определение биохимических показателей позволяет оценить все обменные процессы, протекающие в организме, а также функцию органов и систем. Подготовка: кровь сдается натощак. Время и место забора материала: до 14 часов, в клинике (электролиты — в будние дни до 09.00).

    Глюкозотолерантный тест

    Соблюдение правил подготовки к сдаче анализа позволит получить достоверные результаты и правильно оценить работу поджелудочной железы, а следовательно, назначить адекватное лечение. Подготовка: необходимо соблюдать правила подготовки и рекомендации по питанию, данные вашим лечащим врачом. Количество углеводов в пище должно быть не менее 125 г. в день в течение 3-х дней перед проведением теста. Физические нагрузки не допускаются в течение 12 часов перед началом теста и во время его проведения. Время и место забора материала: ежедневно до 12.00, в клинике.

    Гормональные исследования

    Гормоны — вещества, концентрация которых в крови изменяется циклически и имеет суточные колебания, поэтому анализ должен забираться в строгом соответствии с физиологическими циклами или по рекомендации вашего лечащего врача. Подготовка: кровь сдается натощак. Время и место забора материала: ежедневно до 11.00, в клинике.

    Исследование системы гемостаза

    Кровь сдается из вены. Подготовка: кровь сдается натощак. Время и место забора материала: в будние дни до 09.00, в клинике.

    Определение группы крови

    Кровь сдается из вены. Подготовка: кровь сдается натощак. Время и место забора материала: до 14 часов, в клинике.

    Определение антител к возбудителям

    Кровь сдается из вены. Подготовка: кровь сдается натощак. Время и место забора материала: до 14 часов, в клинике.

    Гепатиты (В, С)

    Кровь сдается из вены. Подготовка: кровь сдается натощак. Время и место забора материала: до 14 часов, в клинике.

    Кровь сдается из вены. Подготовка: кровь сдается натощак. Время и место забора материала: до 14 часов, в клинике.

    Экспресс-анализ на ВИЧ

    Кровь сдается из вены. Подготовка: кровь сдается натощак. Время и место забора материала: в течение дня, в клинике.

    Исследования мочи

    Для получения адекватных результатов исследования мочи необходимо тщательно соблюдать правила гигиены наружных половых органов перед забором материала для анализа.

    • вымойте руки с мылом;
    • движениями спереди назад вымойте область наружных половых органов;
    • удерживая половые губы разведенными, выпустите немного мочи и приостановите мочеиспускание;
    • подставьте емкость и наполните ее;
    • тщательно закройте емкость крышкой.
    • вымойте руки с мылом;
    • тщательно (с мылом) вымойте головку полового члена;
    • удерживая крайнюю плоть в отведенном положении, наполните емкость;
    • тщательно закройте емкость крышкой.

    Общий анализ мочи

    Собирается первая утренняя моча в сухую, чистую, широкогорлую пластиковую посуду. Избегайте охлаждения материала. Подготовка: тщательная гигиена наружных половых органов. Время и место забора материала: до 09.00, забор может быть осуществлен как в клинике, так и вне клиники. Количество материала, необходимое для исследования: 50 — 100 мл. Время сдачи материала в клинику: в течение дня.

    Проба по Нечипоренко

    Первую порцию мочи следует спустить в унитаз, среднюю порцию в количестве 15-20 мл. собрать в чистую, сухую, широкогорлую посуду. Избегайте охлаждения материала. Подготовка: тщательная гигиена наружных половых органов. Время и место забора материала: в течение дня, забор может быть осуществлен как в клинике, так и вне клиники. Количество материала, необходимое для исследования: 15 — 20 мл. Время сдачи материала в клинику: до 14 часов.

    Проба Зимницкого

    В 6:00 утра следует опорожнить мочевой пузырь в унитаз. Затем через 3 часа вся накопленная за это время моча собирается в емкость №1 (9:00), через следующие 3 часа в емкость №2 (12:00). Так каждые 3 часа: №3 — 15:00, №4 — 18:00, №5 — 21:00, №6 — 00:00, №7 — 3:00, №8 — 6:00. Каждая порция после сбора закрывается и хранится в прохладном месте. Одновременно ведется учет выпитой жидкости. Очень важно правильно собрать мочу, не пропуская установленного времени, это позволит объективно оценить выделительную и концентрационную функции почек. Подготовка: емкости для сбора мочи (8 штук) заранее берут в клинике. Тщательная гигиена наружных половых органов. Время и место забора материала: вся моча за сутки, вне клиники. Количество материала, необходимое для исследования: вся моча за сутки. Время сдачи материала в клинику: до 14 часов.

    Трехстаканная проба

    Самую первую порцию мочи в количестве 10 мл. собирают в емкость №1, среднюю порцию (50-100 мл.) в емкость №2. В емкость №3 собирается самая последняя моча перед завершением мочеиспускания, то есть последние 10 мл. Очень важно строгое соблюдение сбора мочи, что позволит установить локализацию патологического процесса. Подготовка: емкости для сбора мочи (3 штуки) заранее берут в клинике. Тщательная гигиена наружных половых органов. Время и место забора материала: до 09.00, забор может быть осуществлен как в клинике, так и вне клиники. Количество материала, необходимое для исследования: 10 мл. / 50 — 100 мл. / 10 мл. Время сдачи материала в клинику: до 14 часов.

    Проба Реберга

    Моча собирается сутки, желательно начать с 7:00 утра. В 7:00 опорожнить мочевой пузырь в унитаз, затем всю мочу в течение времени до 07.00 следующего дня собирать в одну емкость и хранить в прохладном месте. Одновременно ведется учет выпитой жидкости. Вся собранная моча доставляется в лабораторию. Очень важно собрать всю мочу выделенную за сутки, так как только в этом случае будут получены достоверные результаты исследования. Подготовка: емкость для сбора мочи заранее берут в клинике. Тщательная гигиена наружных половых органов. При сдаче материала в клинику, необходимо сдать кровь из вены натощак (до 09.00). Время и место забора материала: вся моча за сутки, сбор материала осуществляется вне клиники. Количество материала, необходимое для исследования: вся моча за сутки, либо 100 мл, с указанием общего объема мочи за сутки. Время сдачи материала в клинику: до 12 часов.

    Моча для проведения ПЦР исследований

    Собираются первые 20 мл после сна. При сборе мочи желательно использовать широкий сосуд с крышкой, по возможности собирать мочу сразу в посуду, в которой она будет доставлена в лабораторию в количестве 20 мл. Собранную мочу доставляют в лабораторию в течение 1-3 часов без дополнительного охлаждения. Длительное хранение мочи при комнатной температуре до исследования приводит к изменению не только ее физических свойств и разрушению клеток, но и к размножению бактерий. Подготовка: моча сдается натощак. Тщательная гигиена наружных половых органов. Пробу мочи собирают только в стерильную посуду. Стерильную посуду необходимо заранее взять в клинике. Время и место забора материала: до 09.00, забор может быть осуществлен как в клинике, так и вне клиники. Количество материала, необходимое для исследования: 20 мл. Время сдачи материала в клинику: до 09.00 в будние дни.

    Моча для проведения бактериологических исследований

    Мочу необходимо сдать до начала антибактериального лечения или спустя 3 дня после терапии. Если больной принимает антибактериальные препараты, то нужно решить вопрос об их временной отмене. Первую порцию мочи спустить в унитаз, среднюю порцию в количестве 3-5 мл. собрать в стерильную герметически закрывающуюся посуду. Мочу следует доставить в лабораторию в течение 1-2 часов. Подготовка: тщательная гигиена наружных половых органов. Пробу мочи собирают только в стерильную посуду. Стерильную посуду необходимо заранее взять в клинике. Время и место забора материала: до 09.00, забор может быть осуществлен как в клинике, так и вне клиники. Количество материала, необходимое для исследования: 20 мл. Время сдачи материала в клинику: до 09.00 в будние дни.

    источник