Белки сыворотки крови фракции получаемые при электрофорезе

Для разделения белков сыворотки крови на их составляющие используют метод электрофореза, основанный на различной подвижности белков сыворотки крови в электрическом поле.

Принцип разделения белков сыворотки крови на фракции состоит в том, что в электрическом поле белки сыворотки крови движутся по смоченной буферным раствором хроматографической бумаге (ацетатцеллюлозной пленке, крахмаловому, агаровом гелям) со скоростью, зависящей в основном от величины электрического заряда и молекулярной массы частиц.

Вследствие этого белки сыворотки крови разделяются обычно на пять основных фракций: альбумины, альфа-1-глобулины, альфа-2-глобулины, бета-глобулины, гамма-глобулины, содержание которых определяется с помощью фотометрии или денситометрии.

Электрофорез в агаровом, крахмальном и особенно полиакриламидном геле дает лучшие результаты: четкое разделение и большое количество белковых фракций сыворотки. Недостатки метода: сложность процедуры приготовления геля (дороговизна готовых гелевых пластин).

Преимущества электрофореза на ацетатцеллюлозной пленке:

1. Химическая однородность пленки и одинаковый размер пор

2. Требует малый объем пробы (0,2-2 мкл) для разделения

3. Быстрота разделения и окраски белков, легкость отмывания фона

В сыворотке крови здорового человека при электрофорезе можно обнаружить шесть белковых фракций: преальбумины, альбумины, альфа-1-глобулины, альфа-2-глобулины, бета-глобулины и гамма-глобулины.

Это исследование в диагностическом отношении более информативно чем определение только общего белка или альбумина. При многих заболеваниях изменяется процентное соотношение белковых фракций, хотя общее содержание белка в сыворотке крови остается в пределах нормы.

Анализ фореграммы белков позволяет установить, за счет какой фракции происходит увеличение или дефицит белка, а также судить о специфичности изменений, характерных для данной патологии. Исследование белковых фракций, позволяет судить о характерном для какого-либо заболевания избытке или дефиците белка только в самой общей форме.

Белковые фракции сыворотки крови в норме:

Фракции	Содержание, %
Преальбумины	2-7
Альбумины	52-65
Альфа-1-глобулины	2,5-5,0
Альфа-2-глобулины	7,0-13,0
Бета-глобулины	8,0-14,0
Гамма-глобулины	12,0-22,0

При анализе результатов исследования сыворотки крови на белковые фракции выявляются три типа нарушений:

1. Диспротеинемия (изменение соотношения белковых фракций)

2. Генетические дефекты синтеза белков

3. Парапротеинемия (аномальные белки в крови)

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Сдача сессии и защита диплома — страшная бессонница, которая потом кажется страшным сном. 8770 — | 7143 — или читать все.

195.133.146.119 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)
очень нужно

источник

В плазме человеческой крови находится множество белковых компонентов. Они различны по своему составу, строению и подвижности в определенной среде, проводящей электрический ток. На этом и строится разделение общего белка, который локализуется в плазме, на различные белковые фракции. При проведении электрофореза сыворотки крови выясняют количественное отношение отдельных белковых составляющих и структур. Это необходимо для определения наличия у человека различных патологических явлений, например инфекций или онкологии. Именно электрофорез белков сыворотки крови имеет большое значение при проведении диагностики различных болезней.

Для расщепления белковых фракций применяют электрофорез сыворотки крови, принцип которого основан на разной подвижности белковых компонентов в созданном электрическом поле. Такой метод исследования является более точным и информативным, в отличие от стандартного общего анализа крови. Но при этом электрофорез показывает только количество определённой фракции белка, характер и степень патологического процесса в общей форме. Анализ проведенных исследований позволяет медицинским специалистам выяснить, какое именно соотношение белковых фракций наблюдается в организме человека, и определить специфику патологии, присущую конкретному заболеванию.

Большую часть основной биологической жидкости человека, или крови, составляют белки. В общем количестве их норма находится в пределах 60-80 г/л. Для получения точного анализа проводится электрофорез сыворотки крови на бумаге. Это исследование является самым распространенным способом анализа. Основной средой является особая фильтровальная бумага. Главная ее особенность – высокая гигроскопичность. Такая бумага может поглотить воды больше своего веса в 130-200 раз. В зависимости от применяемого оборудования электрофорез на бумаге длится 4-16 часов. Происходит подразделение белковых структур. Затем полосы бумаги обрабатывают специальными красками для получения анализа. Такая методика является самой распространенной в работе медицинских лабораторий. За счёт воздействия электрического тока белковые фракции, заряженные отрицательно, двигаются в сторону положительно заряженного электрода. Благодаря этому белковые составляющие крови подразделяются на 5 известных фракций:

Альбумины заряжены отрицательно, имеют маленькую, по сравнению с другими фракциями, молекулярную массу. За счет этого скорость их передвижения гораздо выше, чем у остальных фракций, и они дальше всех локализуются от участка старта. Первые три фракции глобулина передвигаются с более низкой скоростью из-за своей массы. Но самая маленькая скорость регистрируется у γ-глобулинов. Эти белки имеют большую массу и крупные, относительно других, размеры. Их заряд почти нейтрален, поэтому данная белковая фракция практически не сдвигается с линии старта.

В настоящее время электрофорез сыворотки крови часто проводимый анализ для постановки точного диагноза болезни. Этот анализ могут назначить как терапевты, так врачи узкого профиля. Показаниями по проведению исследований будут:

различные воспаления;
болезни хронической природы;
патологические процессы в соединительной ткани;
внутреннее кровотечение;
злокачественные новообразования.

Для того чтобы полученные результаты поведенных исследований были верными, не менее чем за 8 часов до сдачи крови необходимо отказаться от приёма еды. Кроме того, необходимо согласовать прием лекарственных средств, если таковые имеются, с лечащим врачом.

Для того чтобы результаты не были по ошибке завышены, необходимо снизить до минимума возможность свертывания крови для определения показателя белковых фракций и общего белка. Электрофорез сыворотки крови проводится аккуратно, поскольку существует вероятность искажения полученных результатов из-за фибриногена. Он может прятать ненормальные белки или быть спутанным с ними.

В течение суток после сдачи пробы будет готов анализ на электрофорез белков сыворотки крови. Норма полученных показателей по категориям у взрослых людей:

Общий белок – 63-82 г/л.
Альбумины – 40-60 % от общего количества фракций.
α₁-глобулины – 2-5 %.
α₂-глобулины – 7-13 %.
β-глобулины – 8-15 %
γ-глобулины – 12-22 %.

Изменение количества любой белковой фракции в большую или меньшую сторону может свидетельствовать о развитии той или иной патологии. Для получения достоверной информации об этом необходим электрофорез белков сыворотки крови. Расшифровка результатов облегчит медицинским специалистам постановку диагноза и выбор лечения.

В самом начале при анализе полученных результатов определяют количество альбумина. Увеличение этой фракции может говорить об обезвоживании. Такое может произойти, если у больного отмечается затяжная рвота или нарушения в пищеварительной системе. Также увеличение альбумина происходит при ожогах большой площади кожного покрова.

Гораздо опаснее, если в организме снижается количество альбуминов, это может говорить о следующих патологиях:

Поражения почек и печени.
Патологии желудочно-кишечного тракта.
Инфекционные процессы.
Нарушения в деятельности сердечно-сосудистой системы.
Кровотечения.
Злокачественные новообразования.
Сепсис.
Ревматизм.

Незначительное уменьшение количества альбуминов может быть также:

У будущих матерей.
При превышении дозы лекарственных препаратов.
При длительной лихорадке.
У заядлых курильщиков.

Уменьшение количества a1-глобулинов регистрируется при недостатке α₁-антитрипсина. Увеличение же отмечают при обострении воспалений в организме, нарушениях в работе печени, при тканевом распаде.

Регистрируют его при сахарном диабете, воспалительных процессах в поджелудочной железе, у новорожденных детей при желтухе, при гепатитах токсического происхождения. Свидетельствует оно и о неправильном, несбалансированном питании.

Происходит при наличии следующих заболеваний:

Воспаления, особенно с присутствием гнойного экссудата (воспаление легких и другие процессы с наличием гноя).
Поражения соединительной ткани (например, ревматизм).
Злокачественные новообразования.
Периоды восстановления после ожогов.
Поражение почек.

Кроме того, такое явление характерно для гемолиза крови в пробирке во время проведения исследования.

Проявляется при гиперлипопротеидемии (увеличении количества липидов в крови), патологиях печени и почек. Можно обнаружить при открытой язве желудка, а также гипотиреозе (нарушение работы щитовидной железы). Снижение фракции регистрируют при гипобеталипопротеинемии (повышение в крови компонента беталипопротеин).

Эта фракция включает в свой состав иммуноглобулины. Поэтому увеличение γ-глобулинов регистрируется при сбоях в иммунитете. Обычно это происходит при различных инфекциях, развитии воспалительного процесса, изменениях ткани и ожоговых поражениях. Рост γ-глобулинов отмечают у больных хронической формой гепатита. Практически такая же картина характерна для цирроза печени. При запущенных случаях данного заболевания количество белковой фракции γ-глобулинов значительно выше показателя альбуминов. При определенных болезнях могут возникать сбои в образовании γ-глобулинов, и происходит развитие измененных протеинов в крови – парапротеинов. Для выяснения характера такого развития производится дополнительное исследование – иммуноэлектрофорез. Такая картина характерна для миеломного заболевания и патологии Вальденстрема.

Увеличение количества γ-глобулинов также присуще следующим патологиям:

красной волчанке;
эндотелиоме;
ревматоидной форме артрита;
остеосаркоме;
хронической форме лимфолейкоза;
кандидомикозу.

Снижение показателя γ-глобулинов подразделяют на 3 вида:

Физиологический (характерен для детей в возрасте от трех до пяти месяцев).
Врожденный (развивается с момента рождения).
Идиопатический (когда причину развития установить не удается).

Вторичное снижение регистрируется при развитии заболеваний, которые вызывают истощение иммунной системы. В последнее время в медицинской практике все чаще проводится анализ на определение количества преальбуминов. Обычно такое исследование проводят больным, находящимся в реанимации.

Уменьшение количества преальбуминов очень важный и точный тест на определение недостаточности белковых структур в организме пациента. При проведении анализа на преальбумины выполняют коррекцию белкового метаболизма у таких пациентов.

Принцип проведения подобного анализа схож с технологией выполнения электрофореза сыворотки крови. Проводят его для более точной постановки диагноза или обнаружения других патологий. Кроме того такой анализ поможет выявить у больного наличие протеинурии.

Электрофорез сыворотки крови и мочи – важные методы в диагностике различных инфекционных заболеваний. Благодаря методике исследования и высокой точности они помогают определить вид патологии. Точный диагноз – верный путь к правильному лечению и полному выздоровлению.

источник

Белки – высокомолекулярные органические азотсодержащие полимеры, структурной единицей которых являются аминокислоты, и имеющие высокий уровень структурной организации, что в конечном итоге и определяет их важные биологические функции (в процессе свертывания крови, реакциях гуморального иммунитета, регуляции КЩР, устойчивости эритроцитов и лейкоцитов в кровотоке и ряд других). Современные физико – химические и иммунохимические методы исследования позволяют выявить в плазме крови более 100 белковых фракций.

В условиях клинических лабораторий для разделения белков сыворотки крови наибольшее распространение получил метод электрофореза.

Амидошварц 1% раствор (1г амидошварца растворить в 100мл 2% уксусной кислоты); агар (агароза) 1,2% (к 12гр агарозы добавить 1л раствора мединало – вероналового буфера pH 8,6 при нагревании на водяной бане); буфер веронал – мединаловый pH8,6 (8,76г мединала и 1,38г веронала поместить в колбу на 1л, добавить 750мл воды; растворить при нагревании на водяной бане, довести водой до метки, при необходимости pH довести до 8,6).

Штатив с пробирками, пипетки на 5 и 10 мл, предметные стекла, прибор для электрофореза, денситометр, СФ или ФЭК, термостат.

Сыворотка крови (или другая биологическая жидкость).

Принцип метода – различные по молекулярной массе, заряду и изоэлектрической точке в постоянном электрическом поле перемещаются с различной скоростью, что и положено в основу их разделения и последующего количественного определения.

Провести в электрофоретической камере с крышкой, внутренние кюветы которой заполнены агаром и буферным раствором с pH 8,6. внутренние кюветы камеры залить горячим раствором агара и оставить до застывания. В наружные ввести мединал – вероналовый буферный раствор. Подготовить пластины с носителем агаром – на рамку, предварительно помещенную на горизонтальном столике, поместить предметные стекла 3*4см, залить горячим агаром с толщиной слоя 3мм, выровнять горизонтальный уровень и оставить для застывания (пузырьки воздуха, попавшие в агар, должны быть удалены до застывания). Пользоваться гелем рекомендуется не ранее, чем через сутки после заливки. В геле с помощью специального шаблона (или обломком лезвия безопасной бритвы) сделать канавки размером 5*0,3мм, агар из них удалить кусочком плотной фильтровальной бумаги (канавки не должны доходить до стекла, в то же время они должны быть такого размера, чтобы в них поместилось нужное количество (1 – 3 мкл) анализируемой белковой смеси). Хорошие результаты дает также другой способ – внесение разделяемой смеси в кусочки плотной хроматографической бумаги соответствующего размера, вставляемой в гель.

Рамку с пластинами поместить в электрофоретическую камеру. Для создания контакта между гелем кювет и агаром пластин создать перемычку путем внесения расплавленного геля.

Подготовленную электрофоретическую камеру подключить к источнику питания и проводить электрофорез (режим работы – при градиенте потенциала порядка 15V/см при 25 – 35 мА в течение 30 минут).

После отключения прибора стекла с рамкой извлечь и зафиксировать в 12% растворе уксусной кислоты на этаноле в течение 12 часов, а затем 24 часа в дистиллированной воде с добавлением антисептика, с последующим отмыванием антисептика. Затем стекла завернуть в фильтровальную бумагу, смоченную дистиллированной водой и выдержать 24 часа в термостате при 37°С. По истечении времени стекла осторожно отмыть от бумаги и поместить на 2 часа в раствор амидошварца, затем пластины отмыть 10% уксусной кислотой при комнатной температуре в вертикальном положении. При этом выступают различной интенсивности окраски пятна, соответствующие определенным белковым фракциям.

Для количественного определения окрашенных фракций применяют как денситометрию, так и элюцию красителя. В последнем случае пятна вырезают и элюируют в 5мл 0,01N растворе NaOH. Интенсивность элюированной окраски измеряют на спектрофотометре при длине волны 595нм или на ФЭКе с зеленым светофильтром. Исходя из показателей экстинкции, строят кривую распределения фракции белков на электрофореграмме. Для каждой пробы ставят два параллельных исследования и вычисляют среднее значение. Процентное содержание фракций вычисляют по формуле С_фр=(Е_фр*100)/Е_{всех фр}

Для большей точности рекомендуется в пробирки для элюции вносить следующие количества элюирующего раствора: альбумина – 20мл, α₁-глобулинов-5мл, α₂-, β-, γ-глобулинов – 10мл, что делается для того, чтобы сделать более близкими величины экстинкций при фотометрировании. После фотометрирования полученные величины экстинкций умножают на соответствующий фактор – для альбумина – 4, α₁-глобулина – 1, α₂-, β-, γ- 2 и ставят эти величины в формулу для определения соотношения фракций.

В норме содержание белковых фракций в процентном отношении следующее: α₁-глобулина – 2,5 – 5, α₂-глобулина – 7 – 13, β-глобулина 8 – 14, γ-глобулина – 12 – 22, альбумина – 50 – 61.

При различных патологических состояниях происходит изменение протеинограммы. Острый воспалительный процесс характеризуется уменьшением содержание альбуминов и возрастанием количества α-глобулинов; а в более поздние сроки – увеличением концентрации γ-глобулинов. Для хронического воспаления более типично выраженное повышение уровня α_2- и γ-глобулинов и умеренное снижение альбуминов в сыворотке крови. При злокачественных новообразованиях резко снижается содержание альбуминов с одновременным существенным увеличением всех глобулиновых фракций. Поражения печени (гепатиты, цирроз) сопровождаются снижением альбуминов, которые синтезируются в печеночной ткани, и относительным увеличением γ-глобулинов. Вследствие увеличения IgA, происходящего при некоторых формах цирроза печени, отмечается слияние β- и γ-фракций.

Методом электрофореза может быть выявлена недостаточность α₁-антитрипсина. Этот белок является основным компонентом полосы α₁-глобулинов и у пациентов с недостаточностью α₁-антитрипсина (гомозиготных) эта полоса может быть очень неотчетливой, но у гетерозиготных пациентов полоса может казаться нормальной.

При электрофорезе иммуноглобулины ведут себя в большей степени как γ-глобулины, хотя IgA и IgM могут двигаться с β- или α₂-глобулинами. Поскольку концентрация IgG в нормальной плазме существенно превышает содержание других иммуноглобулинов, полоса γ-глобулинов, получаемая при электрофорезе нормальной сыворотки, в значительной степени представлена IgG. Уменьшение или увеличение концентрации иммуноглобулинов в плазме могут иметь как физиологический, так и патологический характер.

источник

Для разделения белковых фракций обычно используют метод электрофореза, основанный на различной подвижности белков сыворотки в электрическом поле. Это исследование в диагностическом отношении более информативно, чем определение только общего белка или альбумина. С другой стороны, исследование белковых фракций позволяет судить о характерном для какого-либо заболевания избытке или дефиците белка только в самой общей форме. Фракции белков сыворотки крови, выделяемые при электрофорезе, представлены в табл.. Анализ результатов электрофореза белков позволяет установить, за счёт какой фракции у больного произошло увеличение или уменьшение концентрации общего белка, а также судить о специфичности изменений, характерных для данной патологии.

Таблица Белковые фракции сыворотки крови в норме

Изменения фракции альбуминов. Увеличения абсолютного содержания альбуминов, как правило, не наблюдают.

Изменения фракции а₁-глобулинов. Основные компоненты данной фракции включают а_:-антитрипсин, а_глипопротеид, кислый а_ггликопротеид.

■ Увеличение фракции а_гглобулинов наблюдают при острых, подост-рых, обострении хронических воспалительных процессов; поражении

печени; всех процессах тканевого распада или клеточной пролиферации.

■ Снижение фракции а1-глобулинов наблюдают при дефиците а_:-анти-трипсина, гипо-а1липопротеидемии.

Изменения фракции а₂-глобулинов. а₂-Фракция содержит а₂-макроглобу-лин, гаптоглобин, аполипопротеины А, В (апо-А, апо-B), С, церулоплазмин.

■ Увеличение фракции а₂-глобулинов наблюдают при всех видах острых воспалительных процессов, особенно с выраженным экссудативным и гнойным характером (пневмонии, эмпиема плевры, другие виды гнойных процессов); заболеваниях, связанных с вовлечением в патологический процесс соединительной ткани (коллагенозы, аутоиммунные заболевания, ревматические заболевания); злокачественных опухолях; в стадии восстановления после термических ожогов; нефротическом синдроме; гемолизе крови в пробирке.

■ Снижение фракции а₂-глобулинов наблюдают при сахарном диабете, панкреатитах (иногда), врождённой желтухе механического происхождения у новорождённых, токсических гепатитах.

К а-глобулинам относится основная масса белков острой фазы. Увеличение их содержания отражает интенсивность стрессорной реакции и воспалительных процессов при перечисленных видах патологии.

Изменения фракции р-глобулинов. Р-Фракция содержит трансферрин, ге-мопексин, компоненты комплемента, Ig и липопротеины (ЛП).

■ Увеличение фракции р-глобулинов выявляют при первичных и вторичных гиперлипопротеинемиях (ГЛП) (особенно II типа), заболеваниях печени, нефротическом синдроме, кровоточащей язве желудка, гипотиреозе.

■ Пониженные величины содержания р-глобулинов выявляют при гипо-Р -липопротеинемии.

Изменения фракции у-глобулинов. у-Фракция содержит Ig (IgG, IgA, IgM, IgD, IgE), поэтому повышение содержания у-глобулинов отмечают при реакции системы иммунитета, когда происходит выработка АТ и аутоанти-тел: при вирусных и бактериальных инфекциях, воспалении, коллагенозах, деструкции тканей и ожогах. Значительная гипергаммаглобулинемия, отражая активность воспалительного процесса, характерна для хронических активных гепатитов и циррозов печени. Повышение фракции у-глобулинов наблюдают у 88-92% больных хроническим активным гепатитом (причём у 60-65% больных оно весьма выраженное — до 26 г/л и выше). Почти такие же изменения отмечают у больных при высокоактивном и далеко зашедшем циррозе печени, при этом нередко содержание у-глобулинов превышает содержание альбуминов, что считают плохим прогностическим признаком.

При определённых заболеваниях возможен повышенный синтез белков, попадающих в фракцию у-глобулинов, и в крови появляются патологические протеины — парапротеины, которые выявляют при электрофорезе. Для уточнения характера этих изменений необходим иммуноэлектрофорез. Подобные изменения отмечают при миеломной болезни, болезни Вальденстрёма.

Повышение содержания в крови у-глобулинов также наблюдают при ревматоидном артрите, СКВ, хроническом лимфолейкозе, эндотелиоме, остео-саркоме, кандидамикозе.

Уменьшение содержания у-глобулинов бывает первичным и вторичным. Различают три основных вида первичных гипогаммаглобулинемий: физиологическую (у детей в возрасте 3-5 мес), врождённую и идиопатическую. Причинами вторичных гипогаммаглобулинемий могут быть многочисленные заболевания и состояния, приводящие к истощению иммунной системы.

Сопоставление направленности изменений содержания альбуминов и глобулинов с изменениями общего содержания белка даёт основание для заключения, что гиперпротеинемия чаще связана с гиперглобулинемиями, в то время как гипопротеинемия обычно обусловлена гипоальбуминемией.

В прошлом широко применяли вычисление альбумин-глобулинового коэффициента, то есть отношения величины фракции альбуминов к величине фракции глобулинов. В норме этот показатель составляет 2,5-3,5. У больных хроническими гепатитами и циррозами печени этот коэффициент понижается до 1,5 и даже до 1 за счёт снижения содержания альбумина и повышения фракции глобулинов.

В последние годы всё больше внимания уделяют определению содержания преальбуминов, особенно у тяжёлых реанимационных больных, находящихся на парентеральном питании. Снижение концентрации пре-альбуминов — ранний и чувствительный тест белковой недостаточности в организме больного.

источник

Этот анализ является исследованием, которое позволяет определить их количественные и качественные показатели по тому, как белки распределяются в электрическом поле. Исследование основано на том, что белковые молекулы несут заряды, положительные или отрицательные в зависимости от того, какой кислотностью будет обладать среда, в которой будет проводиться непосредственно электрофорез. Молекулы, которые окажутся положительно заряженными, будут адсорбироваться лучше, нежели чем те, которые несут отрицательный заряд.

Носителями, которые будут применяться для электрофореза, могут быть хроматографическая бумага, агаровый гель, полиакриловой гель, ацетатцеллюлозная бумага или акриловый гель. Значительно реже применяется капиллярный электрофорез.

Во время анализа белки разделяют на 5 или 6 фракций, в зависимости от применяемого метода. Это будут гамма-глобулины, которые делятся на бета-1 и бета-2, альбумины — альфа-1 и альфа-2, а также бета-глобулины.

Имеются установленные нормы белковых фракций, которые должны присутствовать в крови. Отклонение их от показателей является признаком нарушения в организме, что требует проведения обследования для выявления причины.

Фракция	Норма в г/л
Альбумин	35-44
Глобулин альфа-1	1-3
Глобулин альфа-2	5-8
Бета-глобулин	4-10
Гамма-глобулин	5-12

Значения показателей, в зависимости от того какие реактивы применяются в конкретной лаборатории, могут несколько изменяться. Поэтому в бланке результатов исследования в каждом медицинском учреждении обязательно указываются значения нормы, которые приняты в нем. На них будет ориентироваться врач при расшифровке анализа.

Электрофорез белков крови назначают не очень часто, так как сегодня современные лабораторные исследования позволяют провести анализ на определенный белок, что ускоряет процесс диагностики. Абсолютным показанием к электрофорезу является наличие монолокальной гаммапатии. Также иногда анализ может быть показан в таких случаях:

чрезмерно высокая скорость оседания эритроцитов, когда она превышает 50 мм/ч;
значительно повышенный уровень гамма-глобулинов;
скрининговое обследование для контроля эффективности лечения миеломной болезни;
чрезмерно высокий общий белок в крови;
ряд аутоиммунных заболеваний, поражающих печень и почки;
слабость, для которой нет выраженной причины;
развитие патологических переломов костей и постоянные боли в костях;
частые рецидивы инфекционных заболеваний;
нарушения, обнаруженные в прочих анализах, указывающие на то, что у человека могут развиваться анемии, лейкемии, гиперкальциемия или гипоальбуминемия.

При общей диспансеризации и получении медицинских справок для трудоустройства данное исследование крови не осуществляется. Не требуется оно и в процессе подготовки человека к хирургическому вмешательству.

Для получения наиболее точных результатов рекомендуется соблюдение правил подготовки к анализу. Они включают в себя голодную диету в течение 15 часов до того как будет взята кровь, когда пациент может употреблять только чистую не газированную воду. За 90 минут до проведения исследования необходимо полностью исключить нагрузки как эмоциональные, так и физические, и курение в активной или пассивной форме. Чтобы не допустить искажение данных, забор материала не проводят сразу после того, как был осуществлен гемодиализ или проведена процедура, при которой использовались радиоконтрастные составы. Важно также, чтобы за несколько дней до исследования полностью было исключено лечение пенициллином, так как он вызывает расщепление амбулина, что исказит результат.

Фракция	Повышение	Понижение
Амбулин	Злоупотребление алкоголем, период вынашивания ребёнка, дегидрация	Холецистит в острой форме, лейкоз, миелома, саркоидоз, пневмония, остеомиелит, системная красная волчанка, лимфома
Глобулин альфа-1	Цирроз печени, стрессовые состояния, лимфогранулематоз, период вынашивания ребёнка, язва желудка, острое или хроническое воспаление	Гепатит вирусной природы в острой форме
Глобулин альфа-2	Сахарный диабет, остеомиелит, гломерулонефрит в острой форме, стрессовые состояния, системная красная волчанка, узловатый полиартрит, цирроз	Гипертиреоз, гепатит вирусной природы в острой форме, гемолиз интраваскулярный
Бета-глобулин	Сахарный диабет, саркоидоз, ревматоидный артрит, беременность, гломерулонефрит, желтуха подпеченочная, нефротический синдром	Лейкоз, цирроз, склеродермия имеющая системный характер, лимфома, системная красная волчанка
Гамма-глобулин	Цирроз, склеродермия системного характера, ревматоидный артрит, лимфолейкоз в хронической форме, муковисцидоз, синдром Шегрена	Лейкоз, склеродермия, гепатит вирусной природы в острой форме, лимфома, гломерулонефрит

Исказить показатели, кроме неправильной подготовки к проведению анализа, могут 2 фактора: недавно проведенная процедура гемодиализа, из-за которой произошло разрушение эритроцитов в крови, и повышенный уровень билирубина в организме. В любом из этих случаев потребуется пересдача анализа через некоторое время, которое определит врач.

источник

Организм человека – сложная система, в которой каждую секунду происходят различные химические процессы: вырабатываются гормоны, фракции белков крови, пигменты и т. п. С развитием медицины людям стали доступны многие исследования для определения уровня таких веществ. Отклонения от нормы могут свидетельствовать о развитии болезни или быть следствием физиологических факторов.

Существует немало состояний, когда повышаются отдельные фракции белка крови. Что это такое, о чем могут свидетельствовать подобные показатели, знают немногие.

Эти вещества являются неотъемлемой частью плазмы крови и состоят из сложных аминокислот.

Выполняют очень важные функции:

Транспортируют необходимые вещества (это могут быть составляющие принимаемых медикаментов, липиды, витамины, минералы, пигменты и т. д.).
Отвечают за свертываемость.
Поддерживают кислотно-щелочной баланс.
Регулируют равновесие лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов.
Влияют на состояние иммунитета.

От их уровня зависит консистенция крови. Густая и тягучая жидкость хуже проходит по кровеносным руслам, ухудшая тем самым работу всей сердечно-сосудистой системы.

Для определения фракции белка проводят специальный анализ — протеинограмму.

Такое лабораторное исследование является одним из самых информативных и популярных. Его назначают практически всем пациентам, проходящим стационарное лечение.

Оно позволяет оценить общее состояние организма и работу отдельных органов по различным показателям.

Фракции белка в биохимическом анализе крови являются очень важной частью, который проводят всем лицам, входящим в группу риска по некоторым группам заболеваний.

Чаще всего исследование фракции белков назначают при подозрении на следующие патологии:

миеломную болезнь;
моноклональные гаммапатии.

Проведение протеинограммы показано пациентам с:

аутоиммунными процессами (склеродермией, красной волчанкой, тиреодитом Хасимото);
хроническими и острыми инфекционными заболеваниями (герпесами, гепатитами всех типов, вирусом Эпштейна-Барра и цитомегаловирусом);
симптомами мальобсорбции (хроническим нарушением пищеварения, проявляющимся диареей, стеатореей, которые приводят к нарушению всасывания полезных веществ);
нарушениями питания (отсутствием или повышением аппетита, избирательной тягой к некоторым продуктам).

Дополнительно она может быть назначена при общем обследовании организма (скрининге различных заболеваний).

Решение о необходимости проведения исследования должен принимать лечащий врач (терапевт) на основании жалоб, истории болезни больного, результатов анализов и пр.

Всем пациентам, кому назначили исследование фракции белков в крови, необходимо знать:

Процедура проводится натощак, рано утром. До начала сдачи нельзя употреблять пищу на протяжении 8 часов.
Накануне рекомендуется придерживаться строгой диеты (исключить алкоголь, жирное, копченое, жареное, острое, фастфуд, майонез, кетчуп и другие вредные продукты). Желательно ограничить употребление белка.
За 30-60 мин. нельзя курить.
Избегать инструментальных методов исследования: флюорографии, рентгена, УЗИ и т. п. за несколько дней до анализа.
Накануне нельзя нервничать и заниматься тяжелыми физическими нагрузками.
Детям младшего возраста при прорезывании зубов процедуру не проводят.

Нарушение любого пункта из вышеперечисленного списка может исказить результат, ввести больного и врача в заблуждение. Поэтому крайне важно придерживаться списка рекомендаций.

Что еще может вызвать отклонения в результатах:

внутривенное вливание инфузионных растворов;
чрезмерная потливость;
беременность;
лактация;
сильные нагрузки;
постельный режим;
злоупотребление белковой пищей.

Фракции белков являются составляющей частью общего белка. Последний определяется путем проведения вышеописанного биохимического анализа крови. Для более подробной оценки равновесия его частиц необходимы другие исследования.

Наиболее информативной и популярной является методика электрофореза, которая может проводиться при помощи специального материала:

хроматогрофической бумаги;
ацетатцеллюлозной пленки;
агарового или крахмалового геля.

Она происходит путем воздействия электрического тока на белки крови, которые помещаются на специальную бумагу или гель. В процессе вещества приобретают отрицательный заряд, где под влиянием законов физики передвигаются к аноду и могут быть выделены в 6 различных фракций, а именно:

альбумины;
глобулины (альфа-1 и альфа-2);
глобулины (бета и гамма);
преальбумины.

Помимо определения фракции белков крови методом электрофореза, лаборантами могут быть использованы и другие, менее популярные методы:

гель-фильтрация;
иммунологический;
осаждение;
седиментационный.

Анализ проводится достаточно быстро, а результат можно получить уже на следующий день.

На показатели фракций белков влияют многие факторы. В среднем их нормальное количество в крови должно составлять (г/дл):

Общий коэффициент белка должен находиться в пределах 6,4–8,3 г/дл.

Фракции белка крови в норме должны находиться в определенном соотношении, которое характеризует общее состояние организма человека.

Нарушение этого баланса выделено в отдельное заболевание, именуемое диспротеинемией.

В зависимости от сдвига определенной фракции можно говорить о некоторых патологиях, скрыто или явно протекающих в организме. Если повышен уровень:

альбуминов — это может свидетельствовать о заболеваниях печени и почек; например, при гепатитах, циррозах, карциномах, пиелонефритах и других;
глобулинов альфа-1 (2) — может указывать на наличие воспалений, сильные стрессы или запущенную стадию рака с метастазами;
бета — в организме может присутствовать гиперлипопротеинемия (нарушение липидного обмена);
гамма — рост показателя характерен для проникновения инфекции (бактериальной или вирусной).

Если при проведении протеинограммы на тестовой полоске обнаруживается аномальный моноклональный белок, то в большинстве случаев это является основанием заподозрить миелому – рак плазматических клеток. Поэтому при проведении обследования на эту патологию протеинограмму относят к одному из наиболее ценных и информативных методов.

Многие больные могут обнаружить в своих результатах уменьшение общего белка и отдельных его фракций. Это может быть как вариантом нормы, так и патологическим отклонением.

Такое состояние называют гипопротеинемией. Оно может быть спровоцировано:

недостаточным употреблением белка с продуктами питания;
длительными диетами;
анемией;
менструациями;
послеоперационным периодом;
лихорадками;
инфекционными процессами;
интоксикациями;
болезнями почек;
гепатитами;
недосыпанием;
общим упадком сил;
кровотечениями.

К физиологическим причинам (т. е. не связанным с болезнью) существенного понижения белка в крови (ниже отметки 50 г/л) относят:

лактацию;
последний триместр беременности;
гиподинамию, последствие длительного пребывания в постели;
чрезмерную физическую активность.

При получении неудовлетворительных показателей анализа на фракции белков не стоит сразу впадать в панику. Необходимо обратиться к врачу и постараться вспомнить, что могло спровоцировать подобное состояние.

На основе собранного анамнеза доктор посоветует повторить анализ позже или назначит дополнительное обследование.

В первую очередь необходимо будет пройти:

Инструментальные методы будут назначены на основании жалоб больного. К примеру, если на фоне изменения уровня альбумина у пациента будет болеть живот, то ему потребуется провести УЗИ органов брюшной полости, рентген этой области и т. п.

Как показывает медицинская практика, изолированное повышение общего белка в крови чаще является вариантом нормы, чем при сдвиге его фракций. Такие состояния требуют более тщательного обследования и изучения истории болезни пациента. Если же человек себя хорошо чувствует, у него ничего не болит и остальные анализы в порядке, с большой долей вероятности можно говорить о том, что он здоров. В более редких случаях ранние стадии тяжелых болезней, таких как онкология, цирроз и т. п., на фоне видимого благополучия вызывают изменения некоторых фракций белков. Поэтому любое отклонение от нормы говорит о необходимости обратить внимание на свое здоровье.

источник

Электрофорез белков сыворотки крови (протеинограмма) является лабораторным исследованием, позволяющим определить количественные и качественные изменения основных белковых фракций. Данное исследование позволяет выявить острые и хронические воспаления инфекционной и неинфекционной природы, онкологические (моноклональные гаммапатии) и многие другие патологии, а также контролировать их лечение.

Благодаря ультрасовременной аппаратуре Юсуповской больницы и огромному опыту наших высококвалифицированных диагностов, грамотно интерпретирующих результаты исследования, обеспечиваются максимально точные результаты анализа в короткие сроки. Комплексным обследованием занимается мультидисциплинарная команда врачей, которые, в целях уточнения диагноза, назначают электрофорез белков сыворотки крови и другие высокотехнологичные лабораторные и инструментальные исследования, позволяющие выявить патологию на ранних стадиях развития, благодаря чему каждому пациенту подбирается наиболее эффективная индивидуальная схема лечения.

В состав общего белка сыворотки крови входят альбумины и глобулины, которые в норме находятся в определенных качественных и количественных соотношениях. Для оценки соотношения альбумина и глобулина в крови проводится электрофорез белков с применением агарозного геля.

Изменение качественного и количественного соотношения в протеинограмме может свидетельствовать о наличии в организме самых различных заболеваний (от вирусного гепатита до хронической сердечной недостаточности).

Для постановки точного диагноза, кроме результатов электрофореза белков крови, специалисты Юсуповской больницы назначают дополнительные клинические, лабораторные и инструментальные исследования.

Электрофорез белков крови позволяет точно оценить качественное и количественное соотношение основных белковых фракций у пациентов, страдающих следующими патологиями:

острые и хронические инфекционные заболевания;
заболевания печени (например, хронический вирусный гепатит);
аутоиммунные состояния;
почечные патологии (нефротический синдром);
моноклональные гаммапатии (моноклональная гаммапатия неясного происхождения и множественная миелома);
синдром иммунодефицита (агаммаглобулинемия Брутона).

Электрофорез белков сыворотки крови является довольно информативным исследованием, которое назначается пациентам Юсуповской больницы при подозрении на следующие заболевания и состояния:

острые и хронические инфекционные заболевания, определенные заболевания печени и почек, аутоиммунные состояния;
немотивированная слабость, множественная миелома, персистирующая лихорадка, патологические переломы или боли в костях, рецидивирующие инфекционные заболевания;
подозрение на недостаточный уровень альфа-1-антитрипсина, синдром Брутона и другие иммунодефицитные состояния;
отклонения в других лабораторных исследованиях, которые могут свидетельствовать о множественной миеломе: гиперкальциемия, гипоальбуминемия, лейкопения, анемия.

Нормальными значениями общего белка у детей считаются 44-80 г/л, в зависимости от возраста ребенка, у взрослых людей – от 64 до 83 г/л.:

альбумина – от 55,8 до 66,1 %;
альфа-1-глобулина – от 2,9 до 4,9%;
альфа-2-глобулина – от 7,1 до 11,8%;
бета-1-глобулина – от 4,7 до 7,2%;
бета-2-глобулина – от 3,2 до 6,5%;
гамма-глобулина – от 11,1 до 18,8%.

Изменение баланса тех или иных белковых фракций крови может сигнализировать о наличии в организме каких-либо патологических процессов.

Фракция альбумина может быть повышена при:

Фракция альбумина понижается при:

остром холецистите;
воспалительных и опухолевых заболеваниях ЖКТ;
лейкозе;
язвенной болезни;
острой ревматической лихорадке;
нефротическом синдроме;
макроглобулинемии;
сахарном диабете;
саркоидозе;
множественной миеломе;
пневмонии;
хронической сердечной недостаточности;
остеомиелите;
неспецифическом язвенном колите;
системной красной волчанке;
лимфоме;
приеме глюкокортикоидов.

Фракция альфа-1-глобулина повышается при:

лимфогранулематозе;
острых или хронических воспалительных заболеваниях;
язвенной болезни;
циррозе печени;
стрессе;
беременности;
приеме гормональных контрацептивов.

Фракция альфа-1-глобулина понижается при:

остром вирусном гепатите;
недостаточности альфа-1-антитрипсина;

Фракция альфа-2-глобулина повышается при:

хроническом гломерулонефрите;
острой ревматической лихорадке;
сахарном диабете;
циррозе печени;
саркоидозе;
лимфогранулематозе;
узловатом полиартериите;
нефротическом синдроме;
системной красной волчанке;
остеомиелите;
ревматоидном артрите;
пневмонии;
диспротеинемии;
стрессе;
язвенной болезни;
пожилом и младенческом возрасте;
мальабсорбции;
неспецифическом язвенном колите.

Фракция альфа-2-глобулина понижается при:

гипогаптоглобинемии;
остром вирусном гепатите;
гипертиреозе;
интраваскулярном гемолизе;
мальабсорбции.

Фракция бета-глобулина повышается при:

сахарном диабете;
гломерулонефрите;
острых воспалительных заболеваниях;
гиперхолестеринемии;
диспротеинемии;
саркоидозе;
макроглобулинемии;
подпеченочная желтуха;
железодефицитной анемии;
нефротическом синдроме;
ревматоидном артрите;
беременности;
приеме гормональных контрацептивов.

Фракция бета-глобулина понижается при:

лейкозе;
аутоиммунных заболеваниях;
системной склеродермии;
циррозе печени;
лимфоме;
нефротическом синдроме;
системной красной волчанке;
стеаторее;
неспецифическом язвенном колите.

Фракция гамма-глобулина повышается при:

циррозе печени;
хроническом лимфолейкозе;
амилоидозе;
множественной миеломе;
муковисцидозе;
моноклональной гаммапатии неясного генеза;
ювенильном ревматоидном артрите;
синдроме Шегрена;
системной склеродермии;
системной красной волчанке;
тиреоидите Хашимото;
криоглобулинемии;
саркоидозе;
ревматоидном артрите;
макроглобулинемии Вальденстрема.

Фракция гамма-глобулина понижается при:

агаммаглобулинемии;
остром вирусном гепатите;
склеродермии;
мальабсорбции;
лейкозе;
нефротическом синдроме;
стеаторее;
лимфоме;
гломерулонефрите;
неспецифическом язвенном колите.

За 12-15 часов до исследования рекомендуется отказаться от приема пищи.

Минимум за час-полтора до забора крови для анализа необходимо избегать физического и эмоционального перенапряжения, исключить курение.

Во избежание получения искаженных результатов не стоит проводить электрофорез белков сыворотки крови сразу после процедуры гемодиализа и процедур с использованием радиоконтрастных веществ. Необходимо также исключить прием пенициллина, который может привести к расщеплению полосы альбумина.

Электрофорез белков сыворотки крови является важной частью комплексного обследования пациентов в Юсуповской больнице. Данное исследование назначается при подозрении на наличие в организме той или иной из вышеперечисленных патологий.

Узнать стоимость услуг лабораторной диагностики и записаться на проведение исследования можно по телефону или онлайн на сайте Юсуповской больницы.

источник

Определение количественных и качественных изменений основных фракций белка крови, используемое для диагностики и контроля лечения острых и хронических воспалений инфекционного и неинфекционного генеза, а также онкологических (моноклональных гаммапатий) и некоторых других заболеваний.

Синонимы английские

Serum Protein Electrophoresis (SPE, SPEP).

Электрофорез на пластинках с агарозным гелем.

Г/л (грамм на литр), % (процент).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение и не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Общий белок сыворотки крови включает в себя альбумин и глобулины, которые в норме находятся в определенном качественном и количественном соотношении. Оно может быть оценено с помощью нескольких лабораторных методов. Электрофорез белков в агарозном геле – это метод разделения белковых молекул, основанный на различной скорости их движения в электрическом поле в зависимости от размера, заряда и формы. При разделении общего белка сыворотки крови удается выявить 5 основных фракций. При проведении электрофореза белковые фракции определяются в виде полос различной ширины с характерным, специфичным для каждого типа белка местоположением в геле. Для определения доли каждой фракции в общем количестве белка оценивают интенсивность полос. Так, например, основная белковая фракция сыворотки – это альбумин. На его долю приходится около 2/3 всего белка крови. Альбумин соответствует самой интенсивной полосе, полученной при электрофорезе белков сыворотки крови здорового человека. К другим фракциям сыворотки, выявляемым с помощью метода электрофореза, относят: альфа-1 (преимущественно альфа-1-антитрипсин), альфа-2 (альфа-2-макроглобулин и гаптоглобин), бета (трансферрин и С3-компонент комплемента) и гамма-глобулины (иммуноглобулины). Различные острые и хронические воспалительные процессы и опухолевые заболевания сопровождаются изменением нормального соотношения белковых фракций. Отсутствие какой-либо полосы может указывать на дефицит белка, что наблюдается при иммунодефицитах или недостаточности альфа-1-антитрипсина. Избыток какого-либо белка сопровождается увеличением интенсивности соответствующей полосы, что наиболее часто наблюдается при различных гаммапатиях. Результат электрофоретического разделения белков может быть представлен графически, при этом каждая фракция характеризуется определенной высотой, отражающей ее долю в общем белке сыворотки. Патологическое увеличение доли какой-либо фракции носит название «пик», например «М-пик» при множественной миеломе.

Исследование белковых фракций играет особую роль при диагностике моноклональных гаммапатий. В эту группу заболеваний входят множественная миелома, моноклональная гаммапатия неясного генеза, макроглобулинемия Вальденстрема и некоторые другие состояния. Эти заболевания характеризуются клональной пролиферацией В-лимфоцитов или плазматических клеток, при которой происходит бесконтрольная выработка одного вида (одного идиотипа) иммуноглобулинов. При разделении сывороточного белка пациентов с моноклональной гаммапатией с помощью электрофореза наблюдаются характерные изменения – появление узкой интенсивной полосы в зоне гамма-глобулинов, которая называется М-пик, или М-белок. М-пик может отражать гиперпродукцию любого иммуноглобулина (как IgG при множественной миеломе, так и IgM при макроглобулинемии Вальденстрема и IgA при моноклональной гаммапатии неясного генеза). Важно отметить, что метод электрофореза в агарозном геле не позволяет дифференцировать различные классы иммуноглобулинов между собой. Для этой цели используют иммуноэлектрофорез. Кроме того, данное исследование позволяет дать приблизительную оценку количества патологического иммуноглобулина. В связи с этим исследование не показано для дифференциальной диагностики множественной миеломы и моноклональной гаммапатии неясного генеза, так как она требует более точного измерения количества М-белка. С другой стороны, если диагноз «множественная миелома» был верифицирован, метод электрофореза в агарозном геле может быть использован для оценки динамики М-белка при контроле лечения. Следует отметить, что у 10 % пациентов с множественной миеломой нет никаких отклонений в протеинограмме. Таким образом, нормальная протеинограмма, полученная с помощью электрофореза в агарозном геле, не позволяет полностью исключить это заболевание.

Другим примером гаммапатии, выявляемой с помощью электрофореза, является ее поликлональная разновидность. Она характеризуется гиперпродукцией различных видов (различных идиотипов) иммуноглобулинов, что определяется как однородное увеличение интенсивности полосы гамма-глобулинов при отсутствии каких-либо пиков. Поликлональная гаммапатия наблюдается при многих хронических воспалительных заболеваниях (инфекционных и аутоиммунных), а также при патологии печени (вирусных гепатитах).

Исследование белковых фракций сыворотки крови используют для диагностики различных синдромов иммунодефицита. Примером может послужить агаммаглобулинемия Брутона, при которой снижается концентрация всех классов иммуноглобулинов. Электрофорез белков сыворотки пациента с болезнью Брутона характеризуется отсутствием или крайне низкой интенсивностью полосы гамма-глобулинов. Низкая интенсивность альфа-1-полосы – характерный диагностический признак недостаточности альфа-1-антитрипсина.

Широкий спектр состояний, при которых наблюдаются качественные и количественные изменения протеинограммы, включает самые разные заболевания (от хронической сердечной недостаточности до вирусных гепатитов). Несмотря на наличие некоторых типичных отклонений протеинограммы, позволяющих в ряде случаев с определенной уверенностью диагностировать заболевание, обычно результат электрофореза белков сыворотки не может служить однозначным критерием постановки диагноза. Поэтому интерпретацию исследования белковых фракций крови проводят с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для оценки качественного и количественного соотношения основных белковых фракций у пациентов с острыми и хроническими инфекционными заболеваниями, аутоиммунными состояниями и некоторыми болезнями печени (хронические вирусные гепатиты) и почек (нефротический синдром).
Для диагностики и контроля лечения моноклональных гаммапатий (множественной миеломы и моноклональной гаммапатии неясного генеза).
Для диагностики синдромов иммунодефицита (агаммаглобулинемии Брутона).

Когда назначается исследование?

При обследовании пациента с острыми или хроническими инфекционными заболеваниями, аутоиммунными состояниями и некоторыми болезнями печени (хронические вирусные гепатиты) и почек (нефротический синдром).
При симптомах множественной миеломы: патологических переломах или болях в костях, немотивированной слабости, персистирующей лихорадки, рецидивирующих инфекционных заболеваниях.
При отклонениях в других лабораторных анализах, позволяющих заподозрить множественную миелому: гиперкальциемии, гипоальбуминемии, лейкопении и анемии.
При подозрении на недостаточность альфа-1-антитрипсина, болезнь Брутона и другие иммунодефициты.

источник

Таблица Белковые фракции сыворотки крови в норме

Изменения фракции альбуминов. Увеличения абсолютного содержания альбуминов, как правило, не наблюдают.

печени; всех процессах тканевого распада или клеточной пролиферации.

■ Снижение фракции а1-глобулинов наблюдают при дефиците а_:-анти-трипсина, гипо-а1липопротеидемии.

■ Пониженные величины содержания р-глобулинов выявляют при гипо-Р -липопротеинемии.

источник