Белковые фракции методом электрофореза гамма

Нормы для белковых фракций в лаборатории Хеликс 1 :

Справочник Л.А.Даниловой, 2014 2 :

Факторы влияния на результат

• Экспериментальные исследования показывают, что даже умеренный психологический стресс небольшой продолжительности может привести к значимым изменениям белковых фракций 3 .
• Гемолиз (искусственное или природное разрушение эритроцитов) может увеличить количество бета-глобулинов;
• Лечение пенициллином приводит к расщеплению альбуминов, что снижает их концентрацию в общем белке;
• Исследование с радиоконтрастными компонентами (ложный результат);
• Гемодиализ (метод внепочечного очищения крови) препятствует интерпретации теста;
• Плазмаферез (очищение крови от токсинов) снижает количество гамма-глобулинов;
• Наличие множественной миеломы (в 10% случаев соотношение белковых фракций остается в нормальных пределах);
• Нарушение правил подготовки тесту и процедуры забора крови.

Расшифровку результата анализа на белковые фракции может проводить врач-гематолог, а также онколог, терапевт, хирург и т.д.

Биоматериал для исследования – сыворотка венозной крови.

Метод забора – венепункция локтевой вены.

Время забора крови – утренние часы (до 11.00).

Обязательное требование – процедура проводится строго натощак!

Дополнительные требования к подготовке

• За 2 недели до теста необходимо исключить прием следующих лекарств:
  • оральные контрацептивы;
  • фенитоин;
  • гормоны (тестостерон, эстроген, андрогены);
  • аспарагиназа;
  • глюкокортикоиды;

  За 3 дня до теста нельзя менять меню и режим питания (запрещены диеты, голодания, посты, переход на вегетарианство и т.д.);

  Накануне венепункции исключить из рациона жирные, копченые и острые продукты, жареные блюда, алкоголь и энергетики;

  В день анализа можно пить только воду без газа;

  За 1-3 часа до забора крови не рекомендуется курить.

  Важно! Лечащему врачу необходимо заранее сообщить о текущем или недавно законченном приеме каких-либо лекарственных препаратов, витаминов, биологически активных добавок (с указанием их названия, дозировок, продолжительности лечения).

  • 1. Данные лабораторий Инвитро и Хеликс.
  • 2. Л.А.Данилова, д.м.н., проф. Анализы крови, мочи и других биологических жидкостей человека в различные возрастные периоды, — СпецЛит, 2014г.
  • 3. Van Hunsel F. The influence of psychological stress on total serum protein and patterns obtained in serum protein electrophoresis. — Psychological medicine, Mar, 1998.
  • 4. Sherilyn Alvaran Tuazon, MD. Serum Protein Electrophoresis. — Medscape, Sep, 2014.

  Важно! Все материалы носят справочный характер и ни в коей мере не являются альтернативой очной консультации специалиста.

  Этот сайт использует cookie-файлы для идентификации посетителей сайта: Google analytics, Yandex metrika, Google Adsense. Если для вас это неприемлемо, пожалуйста, откройте эту страницу в анонимном режиме.

  источник

  Определение количественных и качественных изменений основных фракций белка крови, используемое для диагностики и контроля лечения острых и хронических воспалений инфекционного и неинфекционного генеза, а также онкологических (моноклональных гаммапатий) и некоторых других заболеваний.

  Синонимы английские

  Serum Protein Electrophoresis (SPE, SPEP).

  Электрофорез на пластинках с агарозным гелем.

  Г/л (грамм на литр), % (процент).

  Какой биоматериал можно использовать для исследования?

  Как правильно подготовиться к исследованию?

  1. Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
  2. Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение и не курить в течение 30 минут до исследования.

  Общая информация об исследовании

  Общий белок сыворотки крови включает в себя альбумин и глобулины, которые в норме находятся в определенном качественном и количественном соотношении. Оно может быть оценено с помощью нескольких лабораторных методов. Электрофорез белков в агарозном геле – это метод разделения белковых молекул, основанный на различной скорости их движения в электрическом поле в зависимости от размера, заряда и формы. При разделении общего белка сыворотки крови удается выявить 5 основных фракций. При проведении электрофореза белковые фракции определяются в виде полос различной ширины с характерным, специфичным для каждого типа белка местоположением в геле. Для определения доли каждой фракции в общем количестве белка оценивают интенсивность полос. Так, например, основная белковая фракция сыворотки – это альбумин. На его долю приходится около 2/3 всего белка крови. Альбумин соответствует самой интенсивной полосе, полученной при электрофорезе белков сыворотки крови здорового человека. К другим фракциям сыворотки, выявляемым с помощью метода электрофореза, относят: альфа-1 (преимущественно альфа-1-антитрипсин), альфа-2 (альфа-2-макроглобулин и гаптоглобин), бета (трансферрин и С3-компонент комплемента) и гамма-глобулины (иммуноглобулины). Различные острые и хронические воспалительные процессы и опухолевые заболевания сопровождаются изменением нормального соотношения белковых фракций. Отсутствие какой-либо полосы может указывать на дефицит белка, что наблюдается при иммунодефицитах или недостаточности альфа-1-антитрипсина. Избыток какого-либо белка сопровождается увеличением интенсивности соответствующей полосы, что наиболее часто наблюдается при различных гаммапатиях. Результат электрофоретического разделения белков может быть представлен графически, при этом каждая фракция характеризуется определенной высотой, отражающей ее долю в общем белке сыворотки. Патологическое увеличение доли какой-либо фракции носит название «пик», например «М-пик» при множественной миеломе.

  Исследование белковых фракций играет особую роль при диагностике моноклональных гаммапатий. В эту группу заболеваний входят множественная миелома, моноклональная гаммапатия неясного генеза, макроглобулинемия Вальденстрема и некоторые другие состояния. Эти заболевания характеризуются клональной пролиферацией В-лимфоцитов или плазматических клеток, при которой происходит бесконтрольная выработка одного вида (одного идиотипа) иммуноглобулинов. При разделении сывороточного белка пациентов с моноклональной гаммапатией с помощью электрофореза наблюдаются характерные изменения – появление узкой интенсивной полосы в зоне гамма-глобулинов, которая называется М-пик, или М-белок. М-пик может отражать гиперпродукцию любого иммуноглобулина (как IgG при множественной миеломе, так и IgM при макроглобулинемии Вальденстрема и IgA при моноклональной гаммапатии неясного генеза). Важно отметить, что метод электрофореза в агарозном геле не позволяет дифференцировать различные классы иммуноглобулинов между собой. Для этой цели используют иммуноэлектрофорез. Кроме того, данное исследование позволяет дать приблизительную оценку количества патологического иммуноглобулина. В связи с этим исследование не показано для дифференциальной диагностики множественной миеломы и моноклональной гаммапатии неясного генеза, так как она требует более точного измерения количества М-белка. С другой стороны, если диагноз «множественная миелома» был верифицирован, метод электрофореза в агарозном геле может быть использован для оценки динамики М-белка при контроле лечения. Следует отметить, что у 10 % пациентов с множественной миеломой нет никаких отклонений в протеинограмме. Таким образом, нормальная протеинограмма, полученная с помощью электрофореза в агарозном геле, не позволяет полностью исключить это заболевание.

  Другим примером гаммапатии, выявляемой с помощью электрофореза, является ее поликлональная разновидность. Она характеризуется гиперпродукцией различных видов (различных идиотипов) иммуноглобулинов, что определяется как однородное увеличение интенсивности полосы гамма-глобулинов при отсутствии каких-либо пиков. Поликлональная гаммапатия наблюдается при многих хронических воспалительных заболеваниях (инфекционных и аутоиммунных), а также при патологии печени (вирусных гепатитах).

  Исследование белковых фракций сыворотки крови используют для диагностики различных синдромов иммунодефицита. Примером может послужить агаммаглобулинемия Брутона, при которой снижается концентрация всех классов иммуноглобулинов. Электрофорез белков сыворотки пациента с болезнью Брутона характеризуется отсутствием или крайне низкой интенсивностью полосы гамма-глобулинов. Низкая интенсивность альфа-1-полосы – характерный диагностический признак недостаточности альфа-1-антитрипсина.

  Широкий спектр состояний, при которых наблюдаются качественные и количественные изменения протеинограммы, включает самые разные заболевания (от хронической сердечной недостаточности до вирусных гепатитов). Несмотря на наличие некоторых типичных отклонений протеинограммы, позволяющих в ряде случаев с определенной уверенностью диагностировать заболевание, обычно результат электрофореза белков сыворотки не может служить однозначным критерием постановки диагноза. Поэтому интерпретацию исследования белковых фракций крови проводят с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

  Для чего используется исследование?

  • Для оценки качественного и количественного соотношения основных белковых фракций у пациентов с острыми и хроническими инфекционными заболеваниями, аутоиммунными состояниями и некоторыми болезнями печени (хронические вирусные гепатиты) и почек (нефротический синдром).
  • Для диагностики и контроля лечения моноклональных гаммапатий (множественной миеломы и моноклональной гаммапатии неясного генеза).
  • Для диагностики синдромов иммунодефицита (агаммаглобулинемии Брутона).

  Когда назначается исследование?

  • При обследовании пациента с острыми или хроническими инфекционными заболеваниями, аутоиммунными состояниями и некоторыми болезнями печени (хронические вирусные гепатиты) и почек (нефротический синдром).
  • При симптомах множественной миеломы: патологических переломах или болях в костях, немотивированной слабости, персистирующей лихорадки, рецидивирующих инфекционных заболеваниях.
  • При отклонениях в других лабораторных анализах, позволяющих заподозрить множественную миелому: гиперкальциемии, гипоальбуминемии, лейкопении и анемии.
  • При подозрении на недостаточность альфа-1-антитрипсина, болезнь Брутона и другие иммунодефициты.

  источник

  Организм человека – сложная система, в которой каждую секунду происходят различные химические процессы: вырабатываются гормоны, фракции белков крови, пигменты и т. п. С развитием медицины людям стали доступны многие исследования для определения уровня таких веществ. Отклонения от нормы могут свидетельствовать о развитии болезни или быть следствием физиологических факторов.

  Существует немало состояний, когда повышаются отдельные фракции белка крови. Что это такое, о чем могут свидетельствовать подобные показатели, знают немногие.

  Эти вещества являются неотъемлемой частью плазмы крови и состоят из сложных аминокислот.

  Выполняют очень важные функции:

  1. Транспортируют необходимые вещества (это могут быть составляющие принимаемых медикаментов, липиды, витамины, минералы, пигменты и т. д.).
  2. Отвечают за свертываемость.
  3. Поддерживают кислотно-щелочной баланс.
  4. Регулируют равновесие лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов.
  5. Влияют на состояние иммунитета.

  От их уровня зависит консистенция крови. Густая и тягучая жидкость хуже проходит по кровеносным руслам, ухудшая тем самым работу всей сердечно-сосудистой системы.

  Для определения фракции белка проводят специальный анализ — протеинограмму.

  Такое лабораторное исследование является одним из самых информативных и популярных. Его назначают практически всем пациентам, проходящим стационарное лечение.

  Оно позволяет оценить общее состояние организма и работу отдельных органов по различным показателям.

  Фракции белка в биохимическом анализе крови являются очень важной частью, который проводят всем лицам, входящим в группу риска по некоторым группам заболеваний.

  Чаще всего исследование фракции белков назначают при подозрении на следующие патологии:

  • миеломную болезнь;
  • моноклональные гаммапатии.

  Проведение протеинограммы показано пациентам с:

  • аутоиммунными процессами (склеродермией, красной волчанкой, тиреодитом Хасимото);
  • хроническими и острыми инфекционными заболеваниями (герпесами, гепатитами всех типов, вирусом Эпштейна-Барра и цитомегаловирусом);
  • симптомами мальобсорбции (хроническим нарушением пищеварения, проявляющимся диареей, стеатореей, которые приводят к нарушению всасывания полезных веществ);
  • нарушениями питания (отсутствием или повышением аппетита, избирательной тягой к некоторым продуктам).

  Дополнительно она может быть назначена при общем обследовании организма (скрининге различных заболеваний).

  Решение о необходимости проведения исследования должен принимать лечащий врач (терапевт) на основании жалоб, истории болезни больного, результатов анализов и пр.

  Всем пациентам, кому назначили исследование фракции белков в крови, необходимо знать:

  1. Процедура проводится натощак, рано утром. До начала сдачи нельзя употреблять пищу на протяжении 8 часов.
  2. Накануне рекомендуется придерживаться строгой диеты (исключить алкоголь, жирное, копченое, жареное, острое, фастфуд, майонез, кетчуп и другие вредные продукты). Желательно ограничить употребление белка.
  3. За 30-60 мин. нельзя курить.
  4. Избегать инструментальных методов исследования: флюорографии, рентгена, УЗИ и т. п. за несколько дней до анализа.
  5. Накануне нельзя нервничать и заниматься тяжелыми физическими нагрузками.
  6. Детям младшего возраста при прорезывании зубов процедуру не проводят.

  Нарушение любого пункта из вышеперечисленного списка может исказить результат, ввести больного и врача в заблуждение. Поэтому крайне важно придерживаться списка рекомендаций.

  Что еще может вызвать отклонения в результатах:

  • внутривенное вливание инфузионных растворов;
  • чрезмерная потливость;
  • беременность;
  • лактация;
  • сильные нагрузки;
  • постельный режим;
  • злоупотребление белковой пищей.

  Фракции белков являются составляющей частью общего белка. Последний определяется путем проведения вышеописанного биохимического анализа крови. Для более подробной оценки равновесия его частиц необходимы другие исследования.

  Наиболее информативной и популярной является методика электрофореза, которая может проводиться при помощи специального материала:

  • хроматогрофической бумаги;
  • ацетатцеллюлозной пленки;
  • агарового или крахмалового геля.

  Она происходит путем воздействия электрического тока на белки крови, которые помещаются на специальную бумагу или гель. В процессе вещества приобретают отрицательный заряд, где под влиянием законов физики передвигаются к аноду и могут быть выделены в 6 различных фракций, а именно:

  • альбумины;
  • глобулины (альфа-1 и альфа-2);
  • глобулины (бета и гамма);
  • преальбумины.

  Помимо определения фракции белков крови методом электрофореза, лаборантами могут быть использованы и другие, менее популярные методы:

  • гель-фильтрация;
  • иммунологический;
  • осаждение;
  • седиментационный.

  Анализ проводится достаточно быстро, а результат можно получить уже на следующий день.

  На показатели фракций белков влияют многие факторы. В среднем их нормальное количество в крови должно составлять (г/дл):

  Общий коэффициент белка должен находиться в пределах 6,4–8,3 г/дл.

  Фракции белка крови в норме должны находиться в определенном соотношении, которое характеризует общее состояние организма человека.

  Нарушение этого баланса выделено в отдельное заболевание, именуемое диспротеинемией.

  В зависимости от сдвига определенной фракции можно говорить о некоторых патологиях, скрыто или явно протекающих в организме. Если повышен уровень:

  • альбуминов — это может свидетельствовать о заболеваниях печени и почек; например, при гепатитах, циррозах, карциномах, пиелонефритах и других;
  • глобулинов альфа-1 (2) — может указывать на наличие воспалений, сильные стрессы или запущенную стадию рака с метастазами;
  • бета — в организме может присутствовать гиперлипопротеинемия (нарушение липидного обмена);
  • гамма — рост показателя характерен для проникновения инфекции (бактериальной или вирусной).

  Если при проведении протеинограммы на тестовой полоске обнаруживается аномальный моноклональный белок, то в большинстве случаев это является основанием заподозрить миелому – рак плазматических клеток. Поэтому при проведении обследования на эту патологию протеинограмму относят к одному из наиболее ценных и информативных методов.

  Многие больные могут обнаружить в своих результатах уменьшение общего белка и отдельных его фракций. Это может быть как вариантом нормы, так и патологическим отклонением.

  Такое состояние называют гипопротеинемией. Оно может быть спровоцировано:

  • недостаточным употреблением белка с продуктами питания;
  • длительными диетами;
  • анемией;
  • менструациями;
  • послеоперационным периодом;
  • лихорадками;
  • инфекционными процессами;
  • интоксикациями;
  • болезнями почек;
  • гепатитами;
  • недосыпанием;
  • общим упадком сил;
  • кровотечениями.

  К физиологическим причинам (т. е. не связанным с болезнью) существенного понижения белка в крови (ниже отметки 50 г/л) относят:

  • лактацию;
  • последний триместр беременности;
  • гиподинамию, последствие длительного пребывания в постели;
  • чрезмерную физическую активность.

  При получении неудовлетворительных показателей анализа на фракции белков не стоит сразу впадать в панику. Необходимо обратиться к врачу и постараться вспомнить, что могло спровоцировать подобное состояние.

  На основе собранного анамнеза доктор посоветует повторить анализ позже или назначит дополнительное обследование.

  В первую очередь необходимо будет пройти:

  Инструментальные методы будут назначены на основании жалоб больного. К примеру, если на фоне изменения уровня альбумина у пациента будет болеть живот, то ему потребуется провести УЗИ органов брюшной полости, рентген этой области и т. п.

  Как показывает медицинская практика, изолированное повышение общего белка в крови чаще является вариантом нормы, чем при сдвиге его фракций. Такие состояния требуют более тщательного обследования и изучения истории болезни пациента. Если же человек себя хорошо чувствует, у него ничего не болит и остальные анализы в порядке, с большой долей вероятности можно говорить о том, что он здоров. В более редких случаях ранние стадии тяжелых болезней, таких как онкология, цирроз и т. п., на фоне видимого благополучия вызывают изменения некоторых фракций белков. Поэтому любое отклонение от нормы говорит о необходимости обратить внимание на свое здоровье.

  источник

  Этот анализ является исследованием, которое позволяет определить их количественные и качественные показатели по тому, как белки распределяются в электрическом поле. Исследование основано на том, что белковые молекулы несут заряды, положительные или отрицательные в зависимости от того, какой кислотностью будет обладать среда, в которой будет проводиться непосредственно электрофорез. Молекулы, которые окажутся положительно заряженными, будут адсорбироваться лучше, нежели чем те, которые несут отрицательный заряд.

  Носителями, которые будут применяться для электрофореза, могут быть хроматографическая бумага, агаровый гель, полиакриловой гель, ацетатцеллюлозная бумага или акриловый гель. Значительно реже применяется капиллярный электрофорез.

  Во время анализа белки разделяют на 5 или 6 фракций, в зависимости от применяемого метода. Это будут гамма-глобулины, которые делятся на бета-1 и бета-2, альбумины — альфа-1 и альфа-2, а также бета-глобулины.

  Имеются установленные нормы белковых фракций, которые должны присутствовать в крови. Отклонение их от показателей является признаком нарушения в организме, что требует проведения обследования для выявления причины.

  Фракция	Норма в г/л
  Альбумин	35-44
  Глобулин альфа-1	1-3
  Глобулин альфа-2	5-8
  Бета-глобулин	4-10
  Гамма-глобулин	5-12

  Значения показателей, в зависимости от того какие реактивы применяются в конкретной лаборатории, могут несколько изменяться. Поэтому в бланке результатов исследования в каждом медицинском учреждении обязательно указываются значения нормы, которые приняты в нем. На них будет ориентироваться врач при расшифровке анализа.

  Электрофорез белков крови назначают не очень часто, так как сегодня современные лабораторные исследования позволяют провести анализ на определенный белок, что ускоряет процесс диагностики. Абсолютным показанием к электрофорезу является наличие монолокальной гаммапатии. Также иногда анализ может быть показан в таких случаях:

  • чрезмерно высокая скорость оседания эритроцитов, когда она превышает 50 мм/ч;
  • значительно повышенный уровень гамма-глобулинов;
  • скрининговое обследование для контроля эффективности лечения миеломной болезни;
  • чрезмерно высокий общий белок в крови;
  • ряд аутоиммунных заболеваний, поражающих печень и почки;
  • слабость, для которой нет выраженной причины;
  • развитие патологических переломов костей и постоянные боли в костях;
  • частые рецидивы инфекционных заболеваний;
  • нарушения, обнаруженные в прочих анализах, указывающие на то, что у человека могут развиваться анемии, лейкемии, гиперкальциемия или гипоальбуминемия.

  При общей диспансеризации и получении медицинских справок для трудоустройства данное исследование крови не осуществляется. Не требуется оно и в процессе подготовки человека к хирургическому вмешательству.

  Для получения наиболее точных результатов рекомендуется соблюдение правил подготовки к анализу. Они включают в себя голодную диету в течение 15 часов до того как будет взята кровь, когда пациент может употреблять только чистую не газированную воду. За 90 минут до проведения исследования необходимо полностью исключить нагрузки как эмоциональные, так и физические, и курение в активной или пассивной форме. Чтобы не допустить искажение данных, забор материала не проводят сразу после того, как был осуществлен гемодиализ или проведена процедура, при которой использовались радиоконтрастные составы. Важно также, чтобы за несколько дней до исследования полностью было исключено лечение пенициллином, так как он вызывает расщепление амбулина, что исказит результат.

  Фракция	Повышение	Понижение
  Амбулин	Злоупотребление алкоголем, период вынашивания ребёнка, дегидрация	Холецистит в острой форме, лейкоз, миелома, саркоидоз, пневмония, остеомиелит, системная красная волчанка, лимфома
  Глобулин альфа-1	Цирроз печени, стрессовые состояния, лимфогранулематоз, период вынашивания ребёнка, язва желудка, острое или хроническое воспаление	Гепатит вирусной природы в острой форме
  Глобулин альфа-2	Сахарный диабет, остеомиелит, гломерулонефрит в острой форме, стрессовые состояния, системная красная волчанка, узловатый полиартрит, цирроз	Гипертиреоз, гепатит вирусной природы в острой форме, гемолиз интраваскулярный
  Бета-глобулин	Сахарный диабет, саркоидоз, ревматоидный артрит, беременность, гломерулонефрит, желтуха подпеченочная, нефротический синдром	Лейкоз, цирроз, склеродермия имеющая системный характер, лимфома, системная красная волчанка
  Гамма-глобулин	Цирроз, склеродермия системного характера, ревматоидный артрит, лимфолейкоз в хронической форме, муковисцидоз, синдром Шегрена	Лейкоз, склеродермия, гепатит вирусной природы в острой форме, лимфома, гломерулонефрит

  Исказить показатели, кроме неправильной подготовки к проведению анализа, могут 2 фактора: недавно проведенная процедура гемодиализа, из-за которой произошло разрушение эритроцитов в крови, и повышенный уровень билирубина в организме. В любом из этих случаев потребуется пересдача анализа через некоторое время, которое определит врач.

  источник

  Количественное соотношение фракций общего белка крови, отражающее физиологические и патологические изменения состояния организма.

  Общий белок сыворотки состоит из смеси белков с разной структурой и функциями. Разделение на фракции основано на разной подвижности белков в разделяющей среде под действием электрического поля.

  Обычно методом электрофореза выделяют 5 — 6 стандартных фракций: 1 — альбумины и 4 — 5 фракций глобулинов (альфа1-, альфа2-, бета- и гамма-глобулины, иногда отдельно выделяют фракции бета-1 и бета-2 глобулинов). Глобулиновые фракции более разнородны.

  Фракция альфа1-глобулина включает в себя острофазные белки: альфа1-антитрипсин (основной компонент этой фракции) — ингибитор многих протеолитических ферментов — трипсина, химотрипсина, плазмина и т. д., а также альфа1-кислый гликопротеин (орозомукоид). Он обладает широким спектром функций, в зоне воспаления способствует фибриллогенезу. К глобулинам относятся транспортные белки: тироксинсвязывающий глобулин, транкортин (функции — связывание и транспорт кортизола и тироксина соответственно), альфа1-липопротеин (функция — участие в транспорте липидов).

  Фракция альфа2-глобулинов преимущественно включает острофазные белки — альфа2-макроглобулин, гаптоглобин, церулоплазмин. Альфа2-макроглобулин (основной компонент фракции) участвует в развитии инфекционных и воспалительных реакций. Гаптоглобин — это гликопротеин, который образует комплекс с гемоглобином, высвобождающимся из эритроцитов при внутрисосудистом гемолизе, утилизирующийся затем клетками ретикулоэндотелиальной системы. Церулоплазмин — специфически связывает ионы меди, а также является оксидазой аскорбиновой кислоты, адреналина, диоксифенилаланина (ДОФА), способен инактивировать свободные радикалы. Фракция бета-глобулинов содержит трансферрин (белок-переносчик железа), гемопексин (связывает гем, что предотвращает его выведение почками и потерю железа), компоненты комплемента (участвующие в реакциях иммунитета) и часть иммуноглобулинов. Фракция гамма-глобулинов состоит из иммуноглобулинов, (в порядке количественного убывания — IgG, IgA, IgM, IgE), функционально представляющих собой антитела, обеспечивающие гуморальную иммунную защиту организма от инфекций и чужеродных веществ.

  При многих заболеваниях встречается нарушение соотношения фракций белков плазмы (диспротеинемия). Диспротеинемии наблюдаются чаще, чем изменение общего количества белка и при наблюдении в динамике могут характеризовать стадию заболевания, его длительность, эффективность проводимых лечебных мероприятий.

  Парапротеинемия – появление на электрофореграмме дополнительной дискретной полосы, свидетельствующей о присутствии в большом количестве однородного (моноклонального) белка, обычно иммуноглобулинов или отдельных компонентов их молекул, синтезирующихся в В-лимфоцитах. Большие концентрации М-белка (больше 15 г/л) с большой вероятностью указывают на миелому.

  Исследование белковых фракций при подозрении на миелому имеет особую диагностическую ценность. Лёгкие цепи иммуноглобулинов (белок Бенс-Джонса) свободно проходят через сывороточный фильтр и на электрофореграмме сыворотки могут не определяться. Малые М-белки иногда могут наблюдаться при хронических гепатитах, доброкачественно — у пациентов престарелого возраста. Имитировать малую парапротеинемию могут большие концентрации С-реактивного белка и некоторых других острофазных белков, присутствие в сыворотке фибриногена, иногда – лекарственные препараты на основе моноклональных антител в пиковой концентрации (используются в качестве противоопухолевых препаратов, иммунодепрессантов и др.).

  Внимание! Данное исследование отдельно не выполняется, только в комплексе с тестами: №28 Общий белок (в крови) (Protein total) .

  источник

  Белки формируются за счет аминокислотных цепей, и представляют собой важную составляющую часть всех тканей и клеток организма. Организм человека насчитывает более 100 видов белковых молекул, выполняющих различные функции, например, гормоны, составляющие сыворотки крови — гемоглобин, иммуноглобулины, глобулины, альбумины и т.д.
  Плазма крови человека насчитывает более 100 видов белковых фракций, из них 90 процентов составляют липопротеины, иммуноглобулины, альбумины, трансферрин, фибриноген, а также другие белки сыворотки крови, которые составляют незначительный процент. Синтезирование и выделение белков сыворотки крови выполняется двумя системами в организме человека:

  • печень — отвечает за выработку фибриногена и белков — альбуминов, большего процента альфа — и бета — глобулинов;
  • ретикулоэндотелиальная система в костном мозге и лимфатической системе — вырабатывает преимущественно иммуноглобулины.

  Выделение белковых фракций можно выполнить разными способами, но наибольшей популярностью пользуется электрофорез белков крови и электрофорез белков мочи.

  Электрофорез белков разделяет белки сыворотки на альбумины и глобулины. Использование метода электрофореза белка позволило вывести диагностику на качественно новый уровень.
  Альбумины — это наибольшая белковая молекула из всех фракций сыворотки крови человека. Количество альбуминов является зеркальным отражением протеинового статуса крови и многих внутренних органов.

  Основная цель фракций альбумина — поддержание коллоидного осмотического давления, которое удерживает жидкую систему в пределах кровеносного русла. Исходя из этого, можно объяснить патогенез таких патологических состояний, как отеки, асцит, легочные отеки и т.д.
  Глобулины подразделяются на следующие группы — альфа — 1, альфа — 2, бета 1 и бета 2, гамма — глобулины. Их количественное разделение в лаборатории возможно благодаря клиническому анализу — электрофорез. Составляющие компоненты всех фракций белков — глобулинов:

  • альфа — 1 — содержат часть альфа — 1 анти — трипсина и тироксинсвязывающего глобулина;
  • альфа — 2 — содержит компоненты гаптоглобина, церулоплазмина, HDL — и альфа — 2 — макроглобулина;
  • Бета часть содержит компоненты трансферрина, комплемента и бета — липопротеидов;
  • Гамма часть содержит отличные виды антител — иммуноглобулины М, G, A, D, E.

  Электрофорез белка с увеличением фракций альфа 1 и 2 свидетельствует об инициации воспалительного процесса в организме.

  В норме электрофорез белка крови соответствует следующим данным:

  • альбумин — 3,5 — 5, 0 г/дл;
  • альфа — 1 глобулин — 0,1 — 0,3 г/дл;
  • альфа — 2 глобулин — 0,6 — 1,0 г/дл;
  • бета — глобулин 0,7 — 1,2 г/дл;
  • гамма — глобулин 0, 7 — 1, 6 г/дл;
  • в общем — 6,4 — 8,3 г/дл.

  Существует большое количество способов разделения белковых фракций по различных критериям, но самым распространенным методом фракционирования по праву является электрофорез. Данный лабораторный метод является единственным способом выявления парапротеинов в некоторых биологических средах организма, в частности, в моче и сыворотки крови. Электрофорез — это специальный клинический метод, обеспечивающий обнаружение любых изменений сывороточных белков, что является проявлением некоторых патологических состояний. Электрофорез — доступный метод для каждого нуждающегося в его проведении, а также электрофорез проводиться в каждой клинической лаборатории. Электрофорез и его достоинства — быстрые и точные результаты, приемлемая стоимость. Изменения, которые может обнаружить расшифровка:

  • изменение структуры белковой молекулы;
  • изменение количественного соотношения компонентов в молекуле белка.

  Капиллярный электрофорез определяет некоторые виды белков в сыворотке крови, однако, определенные молекулы, кроме альбумина, не могут быть обнаружены данным клиническим методом. Для решения этой задачи измеряют белковые фракции или группы, например, альбумин, альфа 1 — альфа 2 — гамма глобулин и т.д. Уровень различных белковых фракций возможно определить выполняя измерение количества общего белка сыворотки крови, затем полученное число умножить на относительный процент каждой доли белковой группы. Все это можно выполнить быстрее и проще, используя аппарат HellabioScan.
  Электрофорез сыворотки непременно должен выполняться совместно с измерением концентраций молекул иммунной системы — иммуноглобулины G, A, M. Варианты с большим содержанием иммуноглобулинов А и М, которые не могут быть отдельно изучены, следует отправить на повторный анализ, для исключения иммунофиксации небольших групп парапротеинов. Электрофорез белка сыворотки помогает выявить начало заболеваний печени и почек, генетические деформации, образование злокачественных опухолей и инициацию острых и хронических инфекций. Выделяют ряд «электрофоретических синдромов», которые выявляет расшифровка клинического анализа:
  Повышение процента альфа1 — альфа2 — глобулинов, С- реактивного белка, фибриногена и некоторых острофазных белков сыворотки — это является явным проявлением острого воспаления с инициацией работы системы комплемента. Простой гематологический анализ, в случае острого воспаления, проявит лишь увеличение СОЭ и лейкоцитоз;
  Умеренное возрастание альфа 2 и бета — глобулинов, гамма — глобулинов, незначительное снижение альбумина сыворотки — хроническое воспаление, коллагенозы, аллергические реакции, малигнизация доброкачественных новообразований, аутоиммунные заболевания;
  Снижение абсолютного содержания белков — альбуминов сыворотки крови свидетельствует о тяжелых патологиях печени. Хронические гепатиты и циррозы печени — повышение относительного и абсолютного количества гамма — глобулинов. Если расшифровка электрофореграммы предоставляет данные о превышении гамма — глобулинов над альбуминами следует немедленно повторить анализ и пройти комплексное обследование;
  Если расшифровка электрофореграммы свидетельствует о повышении уровня фильтрации белков на уровне почечных канальцев и селективной протеинурией (выведение вместе с мочой значительного количества белков — альбуминов и небольшого процента низкомолекулярных глобулинов) у пациента устанавливается диагноз «нефротический синдром». Одновременно с прогрессированием нефротического синдрома отмечается усиленный синтез в печени больших по размеру протеинов из группы альфа2 — глобулины, которые скапливаются в жидкой части крови, отчего формируется следующая картина — уменьшение количества альбумина, повышение альфа2 — глобулина;

  Кроме нефротического синдрома существенные потери белков возможны при синдроме Лаэлла, ожогах, затрагивающих большую площадь кожного покрова, заболеваниях пищеварительной системы и т.д. В последнем случае расшифровка протеинограммы свидетельствует об уменьшении процента альбумина при параллельном равномерном возрастании всех фракций глобулинов. Регулировать уровень общего белка и альбумина в сыворотке крови, можно постоянно проводя электрофорез, при этом осуществлять введение препаратов, замещающих белковые элементы крови;
  Выраженное снижение гамма — глобулиновой фракции свидетельствует о тяжелом иммунодефиците врожденного или приобретенного характера. По мнению специалистов для выявления полной картины заболевания следует провести дополнительное определение количества иммуноглобулинов G, А и М;
  Электрофорез белков — единственный метод выбора, позволяющий выявить парапротеинемию, симптом, характерный для прогрессированного роста злокачественных и доброкачественных опухолей. В крови накопление моноклональных иммуноглобулинов и фрагментов их цепей (характерно для миеломной болезни и некоторых лейкозах), протеинограмма проявляет острый пик от альфа2 до гамма — глобулинов — М — градиент. Электрофорез белковых фракций мочи, проведенный одновременно, проявит подобный пик в такой же области. Для различия парапротеинов и определения белковых цепей показано проводить более совершенную модификацию электрофореза — иммунофиксацию. Для ее проведения производятся специальные гелевые пластины с наполнителем — антисывороткой.
  

  источник

  Исследование белковых фракций (протеинограмма) сыворотки крови и лабораторные исследования, опирающиеся на протеинограмму, нашли разнообразное применение в диагностике заболеваний. Следует заметить, что потенциал протеинограмммы недостаточно используется специалистами и до сих пор не раскрыт полностью.

  Основой протеинограмммы является разделение биологических жидкостей, содержащихся в организме человека, на составляющие с помощью электрофореза — метода, основанного на различной подвижности белков в электрическом поле.. Белковые фракции преимущественно определяют в сыворотке крови, хотя в отдельных случаях можно использовать мочу и спинномозговую жидкость.

  Исследование отдельных белков сыворотки крови даёт больше информации, чем определение только общего белка или альбумина. Однако следует понимать, что исследование на белковые фракции позволяет судить о избытке или дефиците белка, которые характерны для некоторых болезней, только в самой общей форме.

  В клинических лабораториях для разделения белковых фракций используют агарозный гель, а отдельные фракции проявляют красителем (Amido black). Кроме агарозного геля для протеинограмммы также используют среды на основе целлюлозы (ацетата целлюлозы). Также может быть применен современный метод – капиллярный зональный электрофорез, который фактически не нуждается в твердой или гелеобразной среде, а перемещение ионов происходит в водном буфере. Для определения фракций в капиллярном электрофорезе применяют поглощения света в ультрафиолетовом диапазоне или мощный лазер с последующей фиксацией люминесценции.

  В электрическом поле аппарата для электрофореза отрицательно заряженные протеины перемещаются по агарозному гелю к положительно заряженному электроду (аноду) и разделяются по своему заряду. Чем больше заряд, тем ближе к аноду будет находиться фракция. При электрофорезе белков они разделяются на две основные группы: альбумины (50-70% всей массы белков) и глобулины (у здоровых лиц — преимущественно иммуноглобулин G или сокращенно IgG).

  Альбумин обладает наибольшим отрицательным зарядом, поэтому мигрирует ближе всего к аноду, по сравнению с глобулинами. В зоне электрофореза на геле можно выделить пять различных полос: преальбумины, альбумины, и глобулины — альфа-1, альфа-2, бета и гамма. Иногда бета-глобулины можно разделить на отдельные подфракции: бета-1 и бета-2. Иммуноглобулины (IgM, IgG, IgD и IgE) находятся в гамма-полосе. Электрофорез высокого разрешения позволяет определять большое количество отдельных белков: преальбумин, α1-липопротеин, липопротеины высокой и низкой плотности, α1-кислый гликопротеин, α1-антихимотрипсин, церулоплазмин и т.д.

  Электрофорез с иммунофиксацией является расширением обычного электрофореза, в котором сначала разделяют белки под действием электрического поля, а затем обрабатываются антителам, специфическим для определенных антигенов, с целью идентификации компонентов каждой полосы. Этот способ применяется для определения изотипов тяжелых (IgM, IgG, IgD или IgE) и легких (каппа или лямбда) цепей, для идентификации специфических парапротеинов.

  Усредненные диапазоны нормы белковые фракции сыворотки крови (протеинограммы) для взрослых

  Фракция	Содержание белковых фракций, %
  Преальбумины	2-7
  Альбумины	52-65
  Альфа-1-глобулины	2,5-5
  Альфа-2-глобулины	7-13
  Бета-глобулины	8-14
  Гамма-глобулины	12-22

  Точные диапазоны нормы зависят от метода, использованного для проведения исследования.

  Диапазоны нормы протеинограммы для детей (исследование капиллярным электрофорезом)

  Возраст	Альбумин	Альфа-1-глобулины	Альфа-2-глобулины	Бета-глобулины	Гамма-глобулины
  1-2	54,7-70,4	4,2-8,5	7,0-15,6	7,5-11,6	4,7-16,0
  3-4	53,9-70,4	4,8-8,1	7,6-15,2	7,4-11,6	7,1-17,8
  5-9	52,6-66,3	4,2-7,6	7,4-13,5	7,9-11,3	8,5-18,7
  10-14	54,1-69,1	4,4-8,0	6,8-11,4	8,5-12,9	8,8-17,6

  В качестве диагностического теста, протеинограмма имеет целый ряд приложений. Она особенно полезна при повышении уровня сывороточного иммуноглобулина для различения типа роста: моноклонального или поликлонального. Классическое применение электрофореза сывороточного белка заключается в диагностике пролиферативных заболеваний плазматических клеток (плазмоциты – клетки, которые синтезируют антитела, конечный этап развития В-лимфоцита), в которых производится избыточное количество моноклональных иммуноглобулинов. И наоборот, выявление поликлонального увеличение иммуноглобулина дает основания для проведения дальнейших тестов с целью выявления воспалительных заболеваний – инфекции, аутоиммунного заболевания или, реже, злокачественного новообразования.

  Протеинограмма может быть полезным инструментом в случаях хронических аномалий белкового состава крови, например при постоянно повышенном уровне иммуноглобулинов. В ревматологии определение белковых фракций крови особенно полезно при исследовании общих воспалительных состояний. Также это исследование может быть назначен при диагностировании первичного амилоидоза.

  Протеинограмма мочи также полезна для исследования протеинурия и определении, где именно происходит потеря белка – в клубочках (гломерулах) или канальцах (тубуларах). При клубочковом заболевании почек в мочу попадают крупные белки; следовательно, на протеинограмме будет увеличен уровень альбумина. Напротив, следствием повреждения аппарата канальцев является неэффективная реабсорбция белков с низким молекулярным весом, что приводит к увеличению белковых фракций альфа-1 и бета-2.

  Интересным применения электрофореза белков является определение белковых фракций спинномозговой жидкости при диагностировании рассеянного склероза. Олигоклональные полосы IgG (две или более), найденные на электрофорезе белков спинномозговой жидкости является дополнительным критерием диагноза рассеянный склероз, хотя и не специфическими, поскольку они могут быть найдены при других воспалительных и аутоиммунных неврологических расстройствах.

  Значение изменения отдельных белковых фракций

  Фракция альбуминов. Увеличение содержания альбуминов наблюдается крайне редко. Основные причины уменьшения содержания альбуминов (гипоальбуминемий) приведены в описании исследования «Альбумин (сыворотка крови)».

  Фракция альфа-глобулинов. Увеличение содержания альфа-глобулинов отражает интенсивность реакции организма на воспалительный процесс, особенно в его острых стадиях. Различают альфа-1-глобулины (альфа-1-антитрипсин, альфа-1-липопротеид, кислый альфа-1-гликопротеид) и альфа-2-глобулины (альфа-2-макроглобулин, гаптоглобин, аполипопротеины А, В, С, церулоплазмин).

  • Альфа-1-глобулины:увеличение фракции наблюдается при различных воспалительных процессах: острых, подострых и обострении хронических, а также при поражении печени; всех процессах распада тканей организма или интенсивном делении клеток. Снижение фракции альфа-1-глобулинов наблюдается при недостатке альфа-1-антитрипсина, гипо-альфа-1-липопротеидемии.
  • Альфа-2-глобулины:увеличение фракции наблюдается при всех видах острых воспалительных процессов, особенно с выраженным выделением жидкости в полости тела или гнойным характером (пневмония, эмпиема плевры, другие виды гнойных процессов); заболеваниях соединительной ткани (коллагенозы, аутоиммунные заболевания, ревматические заболевания); злокачественных опухолях; в стадии восстановления после ожогов; нефротическом синдроме. Снижение фракции альфа-2-глобулинов наблюдается при сахарном диабете, изредка при панкреатите, токсических гепатитах и врожденной желтухе новорожденных.

  Фракция бета-глобулинов. Бета-глобулины включают в себя трансферрин, гемопексин, иммуноглобулины и липопротеиды. Увеличение фракции бета-глобулинов выявляют при первичных и вторичных гиперлипопротеидемиях, заболеваниях печени, нефротическом синдроме, кровоточащей язве желудка, гипотиреозе. Пониженные величины содержания бета-глобулинов выявляются при гипо-бета-липопротеинемии.

  Фракция гамма-глобулинов. Эта фракция содержит иммуноглобулины G, А, М, D, Е. Повышение содержания гамма-глобулинов наблюдается при реакции системы иммунитета, когда происходит выработка антител и аутоантител: при вирусных и бактериальных инфекциях, воспалении, коллагенозе, разрушении тканей и ожогах.

  При активных гепатитах и циррозе печени наблюдается значительное повышение содержания гамма-глобулинов (у 88–92 % больных хроническим активным гепатитом). Плохим признаком при циррозе печени считают превышение содержания гамма-глобулинов над содержанием альбуминов.

  Также, повышение содержания в крови гамма-глобулинов, может сопровождать следующие заболевания: ревматоидный артрит, системная красная волчанка, хронический лимфолейкоз, эндотелиомы, остеосаркомы, кандидомикоз.

  Уменьшение содержания гамма-глобулинов бывает физиологическим (у детей в возрасте 3–5 мес), которое легко проходит, а также врожденным. Патологическими причинами уменьшения этой фракции могут быть многочисленные заболевания и состояния, приводящие к истощению иммунной системы и уменьшению уровня иммунного ответа организма.

  При некоторых заболеваниях могут наступить нарушения при образовании гамма-глобулинов, и в крови появляются «неправильные» патологические протеины – парапротеины, которые обнаруживаются при проведении протеинограммы. Такие изменения отмечаются при миеломной болезни, болезни Вальденстрема.

  Возникает вопрос — какие меры нужно принять, если результаты протеинограмммы отличаются от нормальных? Все зависит от степени изменений и от фракции, где они обнаружены. Если результаты намекают на возможное пролиферативное заболевания плазматических клеток (например множественную миелому), то немедленные действия крайне важны для сохранения здоровья пациента. В таком случае необходимо определить суммарные иммуноглобулины (как минимум – IgG, IgM и IgA), β2-микроглобулин, содержание свободных легких цепей иммуноглобулинов, полный клинический анализ крови с СОЭ включительно, кальций сыворотки крови, мочевину и креатинин. На базе этих и других исследований гематолог выставляет диагноз.

  источник

  Понравилась статья? Поделись с друзьями!

  41