Электрофорез гемоглобина сколько времени делается

Электрофорез гемоглобина — это диагностический метод, который направлен на определение различных типов гемоглобина, которые могут быть обнаружены в крови. Гемоглобин или Hb представляет собой белок, присутствующий в красных кровяных клетках, ответственных за связывание с кислородом, что позволяет переносить их в ткани. Узнайте больше о гемоглобине.

Из идентификации типа гемоглобина можно проверить, имеет ли человек какое-либо заболевание, связанное с синтезом гемоглобина, например, талассемию или серповидноклеточную анемию. Однако для подтверждения диагноза требуются другие гематологические и биохимические тесты.

Электрофорез гемоглобина необходим для выявления структурных и функциональных изменений, связанных с синтезом гемоглобина. Таким образом, врач может рекомендовать диагностировать серповидноклеточную анемию, заболевание гемоглобином С и дифференцировать талассемию, например.

Кроме того, может быть предложено генетически посоветовать пары, которые хотели иметь детей, например, сообщая, есть ли вероятность того, что у ребенка есть какой-то тип расстройства крови, связанный с синтезом гемоглобина. Электрофорез гемоглобина также может быть запрошен как обычное последующее обследование для пациентов, уже диагностированных с различными типами гемоглобина.

В случае новорожденных детей тип гемоглобина идентифицируется с помощью теста на ногу, что важно, например, для диагностики анемии серповидноклеточных клеток. Посмотрите, какие заболевания обнаруживаются при проверке стопы.

Электрофорез гемоглобина осуществляется путем сбора образца крови обученным специалистом в специализированной лаборатории, поскольку неправильный сбор может привести к гемолизу, то есть уничтожению красных кровяных телец, что может повлиять на результат. Поймите, как производится сбор крови.

Сбор должен проводиться с пациентом, голодающим в течение не менее 4 часов, и образец, указанный для лабораторного анализа, в котором идентифицируются типы гемоглобина, присутствующие в пациенте. В некоторых лабораториях нет необходимости поститься для сбора. Поэтому важно получить рекомендации от лаборатории и врача относительно поста для теста.

Тип гемоглобина идентифицируется электрофорезом при щелочном рН (около 8, 0 — 9, 0), что является методом, основанным на скорости миграции молекулы при подаче электрического тока, с визуализацией полос в зависимости от размера и веса молекулы. Согласно образцу полученных полос, проводится сравнение с нормальным стандартом и, таким образом, производится идентификация аномальных гемоглобинов.

В соответствии с моделью представленных полос можно идентифицировать тип гемоглобина пациента. Гемоглобин A1 (HbA1) имеет более высокую молекулярную массу, при этом отмечается меньшая миграция, тогда как HbA2 легче, глубже в геле. Этот образец полос интерпретируется в лаборатории и высвобождается в виде отчета для врача и пациента, информирующего о найденном типе гемоглобина.

Фетальный гемоглобин (HbF) присутствует при более высоких концентрациях у ребенка, однако, по мере развития, концентрации HbF снижаются, а HbA1 увеличивается. Таким образом, концентрации каждого типа гемоглобина изменяются в зависимости от возраста и обычно:

От 7 до 12 месяцев: до 3, 5%;

От 12 до 18 месяцев: до 2, 8%;

Тип гемоглобина	Нормальное значение
HbF
HbA1c	Равен или выше 95%
HbA2	От 1, 5 до 3, 5%

Тем не менее, некоторые люди имеют структурные или функциональные изменения, связанные с синтезом гемоглобина, что приводит к аномальным гемоглобинам или вариантам, таким как HbS, HbC, HbH и Bbs Hb.

Таким образом, из электрофореза гемоглобинов можно идентифицировать наличие аномальных гемоглобинов, и с помощью другого диагностического метода, называемого ВЭЖХ, можно проверить концентрацию нормальных и аномальных гемоглобинов, что может быть показателем:

Наличие этого типа гемоглобина указывает на серьезное заболевание, известное как плодовые водоросли, что может привести к гибели плода и, следовательно, к аборту. Узнайте больше о плодовых водорослей.

Результат гемоглобина	Диагностическая гипотеза
Наличие HbSS	Серповидноклеточная анемия, которая характеризуется изменением формата гемоцитов из-за мутации в бета-цепи гемоглобина. Знать симптомы серповидноклеточной анемии.
Наличие HbAS	Сердечная клеточная черта, в которой человек несет ген, ответственный за серповидноклеточную анемию, но не имеет симптомов, но может передавать этот ген другим поколениям:
Наличие HbC	Показатель заболевания гемоглобином С, в котором кристаллы HbC можно наблюдать в мазке крови, особенно когда пациент HbCC, в котором человек имеет переменную гемолитическую анемию.
Присутствие Hb de Barts
Наличие HbH	Показатель заболеваемости гемоглобином H, который характеризуется осаждением и внесосудистым гемолизом.

В случае диагноза анемии с серповидно-клеточной анестезией с помощью теста на ногу нормальный результат — HbFA (т.е. у ребенка есть как HbA, так и HbF, что является нормальным), тогда как результаты HbFAS и HbFS указывают на характер клеток серпа и серповидноклеточная анемия соответственно.

Дифференциальный диагноз талассемии также может быть сделан с помощью ВЭЖХ-связанного гемоглобинового электрофореза, где они проверяются в концентрациях альфа-, бета-, дельта-и гамма-цепей, проверяя отсутствие или частичное присутствие этих глобиновых цепей и, согласно определить тип талассемии. Узнайте, как определить талассемию.

Чтобы подтвердить диагноз любого заболевания, связанного с гемоглобином, необходимо заказать другие тесты, такие как дозировка железа, ферритин, трансферрин и полный анализ крови. Вот как интерпретировать счет крови.

источник

Тест на электрофорез в гемоглобине — это анализ крови, используемый для измерения и идентификации различных типов гемоглобина в вашем кровотоке. Гемоглобин — это белок внутри эритроцитов, ответственный за транспортировку кислорода в ваши ткани и органы.

Генетические мутации могут привести к тому, что ваше тело вырабатывает гемоглобин, который образуется некорректно. Этот аномальный гемоглобин может вызвать слишком мало кислорода для достижения ваших тканей и органов.

Существуют сотни различных типов гемоглобина. Они включают:

Гемоглобин F: Это также известно как фетальный гемоглобин. Это тип, который встречается у растущих плодов и новорожденных. Он заменен гемоглобином вскоре после рождения.
Гемоглобин A: Это также известно как взрослый гемоглобин. Это самый распространенный тип гемоглобина. Он встречается у здоровых детей и взрослых.
Гемоглобин C, D, E, M и S: Это редкие типы аномального гемоглобина, вызванные генетическими мутациями.

Диаграмма нормальных уровней

Тест на электрофорез в гемоглобине не говорит вам о количестве гемоглобина в крови — это делается при полном анализе крови. Уровни, на которые ссылается тест на электрофорез в гемоглобине, — это проценты различных типов гемоглобина, которые могут быть найдены в вашей крови. Это различно у младенцев и взрослых:

Гемоглобин в основном состоит из гемоглобина F у плодов. Гемоглобин F по-прежнему составляет большинство гемоглобина у новорожденных.

Возраст	Гемоглобин F%
новорожденный	от 60 до 80%
1+ год	от 1 до 2%

Нормальные уровни типов гемоглобина у взрослых:

Тип гемоглобина	Процент
гемоглобин A	95% до 98%
гемоглобин A2	2% до 3%
гемоглобин F	1% до 2%
гемоглобин S	0%
гемоглобин C	0%

Вы приобретаете различные аномальные типы гемоглобина, наследуя мутации генов на гены, ответственные за продуцирование гемоглобина. Ваш врач может рекомендовать тест на электрофорез в гемоглобине, чтобы определить, есть ли у вас расстройство, вызывающее появление аномального гемоглобина. Причины, по которым ваш врач может захотеть провести тест на электрофорез в гемоглобине, включают:

1. В рамках обычной проверки: Ваш врач может проверить ваш гемоглобин, чтобы пройти полный анализ крови во время обычного физического состояния.

2. Чтобы диагностировать расстройства крови: Возможно, у вашего врача есть тест на электрофорез в гемоглобине, если вы проявляете симптомы анемии.Тест поможет им найти любые ненормальные типы гемоглобина в крови. Это может быть признаком расстройств, включая:

серповидноклеточная анемия
талассемия
полицитемия vera

3. Чтобы контролировать лечение: Если вас лечат от состояния, вызывающего ненормальные типы гемоглобина, ваш врач будет контролировать ваши уровни различных типов гемоглобина с помощью электрофореза на гемоглобине.

4. Для скрининга на генетические условия: Люди, у которых есть семейная история унаследованных анемий, таких как талассемия или серповидноклеточная анемия, могут выбрать для скрининга этих генетических заболеваний до рождения детей. Электрофорез гемоглобина будет указывать, имеются ли какие-либо ненормальные типы гемоглобина, вызванные генетическими нарушениями. Новорожденных также регулярно скринируют на эти генетические нарушения гемоглобина. Ваш врач может также захотеть проверить вашего ребенка, если у вас есть семейная история аномального гемоглобина или у них есть анемия, которая не вызвана дефицитом железа.

Вам не нужно делать что-либо особенное для подготовки к электрофорезу гемоглобина.

Вам, как правило, нужно пойти в лабораторию, чтобы получить вашу кровь. В лаборатории поставщик медицинских услуг берет образец крови из руки или руки: сначала они очищают сайт мазкой спиртов. Затем они вставляют маленькую иглу с трубкой, прикрепленной для сбора крови. Когда набирается достаточное количество крови, они удаляют иглу и закрывают сайт марлевой подушкой. Затем они отправляют ваш образец крови в лабораторию для анализа.

В лаборатории процесс, называемый электрофорезом, пропускает электрический ток через гемоглобин в вашем образце крови. Это приводит к разложению различных типов гемоглобина в разные полосы. Затем ваш образец крови сравнивают со здоровым образцом, чтобы определить, какие типы гемоглобина присутствуют.

Как и при любом анализе крови, существуют минимальные риски. К ним относятся:

кровоподтеки
кровотечение
инфекция на месте прокола

В редких случаях вены могут набухать после того, как кровь нарисована. Это состояние, известное как флебит, можно обрабатывать теплым компрессом несколько раз в день. Постоянное кровотечение может быть проблемой, если у вас расстройство кровотечения или вы принимаете кровоточащие лекарства, такие как варфарин (кумадин) или аспирин (буферин).

Результаты и следующие шаги

Если ваши результаты показывают аномальные уровни гемоглобина, они могут быть вызваны:

заболеванием гемоглобина С, генетическим расстройством, которое приводит к тяжелая анемия
редкая гемоглобинопатия, группа генетических нарушений, вызывающих аномальное производство или структура красных кровяных телец
анемия серповидно-клеточной анемии
талассемия

Ваш врач будет проводить контрольные тесты, если тесты на электрофорез в гемоглобине показывают что у вас ненормальные типы гемоглобина.

источник

Вид гемоглобина	Нормальные значения	Возможные изменения при серповидноклеточной анемии
HbA	Более 95%.	Менее 50%.
HbA2	Менее 2%.	В норме или снижено.
HbF	1 – 1,5 %.	В норме или слегка повышено.
HbS	Отсутствует.	50% и более.

При серповидноклеточной анемии метод УЗИ может выявить:

увеличение селезенки и печени;
наличие инфарктов во внутренних органах (в селезенке, печени, почках и других);
нарушение кровообращения во внутренних органах;
нарушение кровотока в конечностях.

Рентгенологическое исследование позволяет выявить:

деформацию и расширение тел позвонков ;
деформацию и истончение костей скелета
наличие остеомиелита

Основные методы лечения серповидно-клеточной анемии направлены на снятие симптоматики (то есть, лечение является симптоматичным) и лечение сопутствующих или фоновых заболеваний. Симптоматика при острых кризах блокируется с помощью антибиотиков и гидратации (вливания жидкости). В более запущенных состояниях применяются обезболивающие препараты, кислород.

Принципами лечения серповидноклеточной анемии являются:

правильный образ жизни;
повышение количества эритроцитов и гемоглобина;
кислородотерапия;
устранение болевого синдрома;
устранение избытка железа в организме;
профилактика и лечение инфекционных заболеваний.

Образ жизни пациентов с серповидноклеточной анемией

Если у человека диагностирована серповидноклеточная анемия, ему следует соблюдать определенные рекомендации, которые позволят облегчить течение заболевания и минимизировать риск развития осложнений.

Пациентам с серповидноклеточной анемией рекомендуется:

проживать на высоте не более 1500 метров над уровнем моря;
проживать в зоне с умеренным климатом (исключающим воздействие экстремально низких или высоких температур);
употреблять не менее 1,5 литров жидкости ежедневно;
исключить прием алкогольных напитков и наркотиков;
отказаться от курения (как самому больному человеку, так и членам его семьи);
избегать тяжелых физических нагрузок;
выбирать профессию, не связанную с тяжелой физической работой или воздействием высоких/низких температур.

Соблюдение перечисленных выше правил может предотвратить появление любых симптомов серповидноклеточной анемии у людей с гетерозиготной формой заболевания, однако пациентам с гомозиготной формой требуются и другие лечебные мероприятия.

Повышение количества эритроцитов и гемоглобина

Одним из основных факторов, определяющих тяжесть течения заболевания, является анемия (недостаток эритроцитов и гемоглобина в крови), развивающаяся на фоне усиленного разрушения красных клеток крови. Устранение анемии может предотвратить появление определенных симптомов заболевания и улучшить состояние пациента в целом.

Повышение количества эритроцитов и уровня гемоглобина

Способ применения и дозы

Немедикаментозные методы

Основным показанием для переливания донорских эритроцитов является резкое снижение уровня гемоглобина ниже 70 г/л (например, при гемолитическом кризе). В таком случае устанавливается катетер в одну или сразу в несколько центральных вен (в яремные, расположенные на шее или в подключичные), и производится переливание эритроцитарной массы. Целевой уровень гемоглобина при этом составляет не менее 100 г/л.

Перед началом переливания проводится целый ряд тестов, направленных на определение совместимости крови донора и реципиента.

Название препарата

Механизм леченого действия

Эритроцитарная масса

Перелитые донорские эритроциты в течение некоторого времени (обычно не более 100 дней) могут транспортировать дыхательные газы в организме больного. Данный метод используется крайне редко, ввиду возможности развития тяжелых побочных реакций.

Критериями эффективности лечения являются:

повышение уровня гемоглобина (определенное лабораторно);
исчезновение одышки;
нормализация цвета кожи.

Медикаментозные методы

Препарат из группы цитостатиков (используется в лечении опухолей). Механизм действия данного медикамента связан с повышением уровня фетального гемоглобина (HbF) в эритроцитах. Это облегчает течение заболевания и предотвращает развитие многих осложнений.

Применение гидроксимочевины в лечении серповидноклеточной анемии считается экспериментальной методикой. Широкомасштабных исследований, оценивающих эффективность препарата и возможные побочные реакции, еще не проводилось.

Начальная доза препарата составляет 15 миллиграмм на килограмм массы тела в сутки (мг/кг/сут). При отсутствии эффекта доза может быть увеличена в два раза. Во время лечения следует раз в 2 недели сдавать общий анализ крови, так как возможно развитие побочных реакций, наиболее опасной из которых является угнетение кроветворения в красном костном мозге.

Основным показателем эффективности лечения является увеличение концентрации фетального гемоглобина, определяемое методом электрофореза. Обычно доля HbF не превышает 20 – 25%, однако этого достаточно, чтобы значительно облегчить течение тяжелых форм заболевания.

Кислородотерапия

Частота и выраженность гемолитических кризов определяет тяжесть клинического течения серповидноклеточной анемии. Как уже говорилось, развитию гемолитического криза предшествуют различные состояния, сопровождающиеся гипоксией. Применение кислорода в первые минуты или часы после начала гемолиза предотвращает образование и последующее разрушение серповидных эритроцитов. Это облегчает течение заболевания, уменьшает риск развития осложнений и улучшает качество жизни пациента.

Пациент с развивающимся гемолитическим кризом должен быть госпитализирован как можно скорее. Непосредственно в машине скорой помощи ему дается кислородная маска, которая обеспечивает подачу кислорода со скоростью 4 – 6 литров в минуту. После поступления в стационар кислородотерапия продолжается на протяжении нескольких часов или дней.

Устранение болевого синдрома

Как говорилось ранее, закупорка кровеносных сосудов приводит к развитию ишемии пораженного органа, что сопровождается сильнейшей болью. С целью устранения болевого синдрома применяются наркотические анальгетики (обезболивающие средства), так как ишемические боли не купируются другими медикаментами. Вначале препараты вводятся внутривенно (быстрее наступает обезболивающий эффект). После купирования острого приступа боли переходят на таблетированные формы препаратов.

Дата добавления: 2018-04-15 ; просмотров: 791 ; ЗАКАЗАТЬ РАБОТУ

источник

Принцип метода одинаков с заложенным в основу электрофоретического отделения сывороточных белков. В данном электрическом поле частицы, несущие определенную электрическую зарядку, перемещаются более или менее в зависимости от силы электрического поля, электрической зарядки, величины и формы молекулы.

Что касается гемоглобина основным фактором электрофоретического отделения является электрическая зарядка, поскольку форма и величина молекулы одинаковы для различных видов гемоглобина.

Электрофорез гемоглобина практикуется во всех используемых вариантах в отношении белков, в том числе, электрофорез на бумаге, в агаровом геле, в геле и блоке крахмала, в геле полиакриламида, на уксуснокислом целлюлозе. Каждая из этих разновидностей представляет свое преимущество, которое следует учитывать при выборе соответствующего метода.

Необходимая аппаратура — электрический источник питания и бак (ванна) для буфера; используемые материалы в качестве миграционной питательной среды почти полностью соответствуют применяемым для электрофореза сывороточных белков.

Электрофорез гемоглобина в блоке крахмала отличается рядом преимуществ, в силу которых ему отдается предпочтение при исследовании гемоглобинопатии. На этой питательной среде можно отделить почти все виды физиологического и патологического гемоглобина, даже когда он находится в малом концентрации. Не требует окраски. Промывание и количественная оценка осуществляются легко, используемый крахмал не требует специальной обработки, дешевый и побывается без затруднений.

Материалы для электрофореза гемоглобина в блоке крахмала: картофельный крахмал; аппарат для электрофореза, слагающийся из выпрямителя, бака для буфера и пластинки из плексигласса, на которую наносится крахмал; буфер веронал-мединал — 8,8 показатель водорода и 0,5 ионная мощность; веронал 1,84; мединал 10,8; лактат кальция 0,384; дистилированная вода до 1000 мл; 2% раствор цианистого натрия.

В стекляную или эмалированную посуду насыпать 150—200г крахмала и залить 300—400 мл дистилированной воды. Помешать, после осаждения крахмала слить воду и налить буфер веронал-мединал; хорошо перемешать и оставить 30—40 минут, в случае надобности можно сохранить на ночь в холодильнике. После гомогенизации приготовленный таким образом крахмал наносится на пластинку плексигласса, при этом слой его должен иметь 5 мм толщины.

Поскольку по краям пластинки имеется ободочек соответствующей толщины, крахмал не стекает с пластинки. Слой оседаемого крахмала однородный. Лишнее количество буфера удалить фильтровальной бумагой.

На одну пластинку крахмала можно нанести одновременно несколько проб для миграции, причем их число зависит от величины пластинки. Наносить их (по 2—3 капли) на расстоянии 4—5 см от края пластинки, между образцами оставлять расстояние 3—4 см.

До начала миграции гемолизаты обработать цианистым натрием в целях преобразования гемоглобина в цианметгемоглобин — весьма устойчивый вид. На 5—6 капель раствора гемоглобина добавить каплю 2% раствора цианистого натрия.

Пластинку спустить в бак, при этом пятна направляются в сторону отрицательных электродов; связь с буферным раствором наладить с помощью фильтровальной бумаги. Миграция происходит при напряжении 200 вольт, ампераж в зависимости от размеров пластинки с крахмалом и толщины слоя последнего. Время миграции 18—20 часов.

В описанных условиях проба гемоглобина от человека в норме мигрирует от отрицательного к положительному полюсу и делится на две фракции: основную (97—98%) на первом плане, представляющую собой гемоглобин А1, а позади, на расстоянии 3—4 см, вторую (2—3%), составляющую гемоглобин А2.

При таких условиях из крови пуповины также отделяются две фракции: одна из них составляет 30—40% — гемоглобин А1, вторая — гемоглобин Ф, расположенная между гемоглобином А1 и гемоглобином А2, на очень близком расстоянии от первого.

Количественное определение отделенных, путем электрофореза, фракций осуществляется промыванием а затем фотометрированием.

Отделенные пятна вырезать и каждый из них вложить в пробирку. В другой пробирке промыть участок чистого крахмала, соответствующего по величине площади, занимаемой гемоглобином А2, в качестве контрольного препарата для фотометрирования.

В каждую пробирку влить одинаковое количество буфера. Взболтать, гемоглобин переходит в раствор, в то время как крахмал оседает на дно пробирки. После оседания надосадочную массу профильтровать, процентрифугировать и прочитать результат с помощью фотометра или спектрофотометра с фильтром, соответствующим длине волны 540 нм. Значение данной фракции в процентном отношении выводится из суммы экстинкий, составляющей 100% экстинкций каждой фракции, деленной на общую экстинкцию.

Нормальные физиологические значения гемоглобина, полученные в подобных условиях, составляют 2—3% гемоглобина А2 и 97—98% гемоглобина А1.

Если подвергнуть электрофорезу раствор гемоглобина из крови больного с аномальным гемоглобином, то последняя, в зависимости от имеющейся в ней электрической зарядки, мигрирует медленнее или быстрее нормального гемоглобина, тем самым способствуя ее отделению и количественному определению.

Вливаемый в ванну буфер можно исплоьзовать несколько раз, при условии изменения направления тока после каждой миграции.

источник

Электрофорез гемоглобина (в щелочном растворе)

С ПОМОЩЬЮ РУЧНОЙ МЕТОДИКИ

Наборы Hellabio гемоглобин (в щелочи) используются для идентификации различных форм молекул гемоглобина (выделение гемоглобина в отдельные полосы HbA, HbF, HBS (HBG, HBD, Лепор) HbA2 (HBC, HBE и HBO)) и позволяют проводить лабораторную диагностику нормальных и патологических гемоглобинов, определяя состояния, обозначаемые как гемоглобинозы, или гемоглобинопатии.

Каждый из основных типов гемоглобина имеет электрический заряд разной степени, поэтому наиболее эффективным методом разделения и измерения нормального и аномального гемоглобина является электрофорез.

В норме у взрослого человека 96.5-98.5% от общего гемоглобина приходится на HbA. Незначительную долю около 1.5-3,5% занимает HbA2. В период внутриутробного развития основным гемоглобином является HbF.

КЛИНИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ, ХРАНЕНИЕ.

· Венозную кровь человека (забор производится натощак) поместить в пробирку с сахаром без антикоагулянта (оксалат, гепарин или ЭДТА, обработанная кровь);

Добавить около 100-200 мкл цельной крови в пробирку с 10 мл физиологического раствора, центрифугировать (5 минут при 3g) и удалить супернатант;

· Взять 30 мкл осадка и добавить в пробирку с 130 мкл гемолизирующего раствора, смешать (Гемолизат);

· Гемолизат стабилен в течении 5-7 дней. Хранить в холодильнике, соблюдать условия асептики, избегать попадания прямых солнечных лучей.

• Работать только в одноразовых перчатках — буфер токсичен.

• Все реагенты должны быть использованы в соответствии с инструкциями, и до истечения даты, указанной на наборе;

• Работа с уксусной кислотой требует наличия вытяжных шкафов;

• Не использовать агарозный гель, если он недостаточно просушен;

• Агарозный гель не замораживать;

• Хранить набор в горизонтальном положении;

• Не использовать гемолизированную сыворотку или плазму (фибриноген).

1. Источник питания 25-250B «Hellabio».

2. Камера для электрофореза «Hellabio».

3. Держатель геля «Hellabio».

4. Набор контейнеров для окрашивания /отмывки «Hellabio».

5. Сушительная камера геля «Hellabio».

6. Вортекс «Micro-Spin», «Minigen.

7. Компьютер, сканер, принтер.

8. Программное обеспечение HELLABIOSCAN GEL ANALYZER или денситометр (520 – 600нм).

9. Набор автоматических пипеток переменного объема.

10. Халат и одноразовые перчатки.

11. Одноразовые микропробирки на 1,5мл.

12. Штатив для микропробирок.

13. Одноразовые наконечники для пипеток переменного объема 5-40 мкм.

14. Емкость для хранения буфера объемом 1000мл.

15. Емкость для хранения окрашивающего раствора объемом 500 мл.

16. Мерный цилиндр объемом 1000 мл.

18. Емкость с дезинфицирующим раствором.

2. НЕОБХОДИМЫЕ реагенты и оборудование – содержаться в каждом наборе Hellabio.

Внимание! Для получения наилучших результатов реагенты, входящие в комплект, должны быть использованы вместе.

Содержимое наборов (необходимые реагенты):

Агарозные гели (Agarose Gels)

Электрофорезный буфер (Electrophoresis Bufffer)

Окрашивающий раствор (Staining Solution)

Фильтровальные полосы для геля (Gel Blotter Strips)

Гемолизирующий раствор (Hemolyzing Solution)

Шаблоны для образцов (Sample Templates)

Инструкция (Instruction) на русском и английском языках

Подготовка реактивов для проведения электрофореза:

Все реактивы фирмы Hellabio должны храниться при температуре 4-25°C до истечения даты, указанной на комплекте. Внимание: буфер токсичен, работать в перчатках.

1. Приготовление рабочего буфера: взять мерный цилиндр на 1000 мл.

2. Развести 40 мл концентрированного буфера(Protein Electrophoresis Buffer) в 960 мл дистиллированной воды.

3. Перелить рабочий буфер в подготовленную емкость и пометить дату, рабочий буфер хранится 3 месяца, с даты изготовления, при комнатной температуре в темном прохладном месте, в закрытой колбе.

4. Приготовление рабочего окрашивающего раствора: хорошо взболтать окрашивающий раствор (Protein Staining Solution).

5. Взять мерный цилиндр на 250 мл и смешать 210 мл 10% уксусной кислоты с 40 мл окрашивающего раствора (Protein Staining Solution).

6. Перелить рабочий раствор окрашивающего раствора в емкость для хранения. Расход окрашивающего раствора обеспечивает возможность постановки соответственно комплектации набора (10 пластинок).

7. В качестве отмывочного раствора будет использоваться 10% уксусная кислота.

· Взять 30 мкл осадка и добавить в пробирку с 130 мкл гемолизирующего раствора, смешать (Гемолизат);

1. Отобрать необходимое количество микропробирок, включая контроль. Приготовить гемолизат.

2. Заполнить электрофорезные камеры необходимым количеством рабочего буфера в зависимости от объема камеры;

3. Раскрыть упаковку агарозного геля. Используя одноразовый наконечник приподнять пластину агарозного геля (место обозначено стрелкой) и извлечь гель из упаковки. Положить в горизонтальном положении на крышку упаковки.

4. Извлечь фильтровальную полосу (Gel Blotter Strips) из упаковки. Промокнуть гель фильтровальной полосой в зоне нанесения образца (отмечено двумя точками на краях геля). Удалить фильтровальную полосу с агарозного геля.

5. Извлечь шаблон образцов из упаковки (Sample Tamplates). Установить шаблон для образцов в зоне нанесения. Провести указательным пальцем по шаблону, для усиления контакта шаблона с гелем и предотвращения попадания пузырьков воздуха в лунку для образца.

6. В каждую лунку шаблона образцов внести по 5мкл гемолизата и оставить на 20-30сек (не более!).

7. Взять фильтровальную полосу. Промокнуть шаблон образцов фильтровальной полосой. Удалить шаблон образцов и фильтровальную полосу с поверхности геля.

8. Установить гель в гелевый держатель. Опустить гелевый держатель в элекрофорезную камеру. Образцы находятся на катодной стороне.

9. Подключить камеру к источнику тока, соблюдая полярность. При использывании камеры и источника питания «Hellabio» параметры следущие : напряжение напряжение 200 В, время электрофореза 20 минут (в случае использования мини гелей, на 3 лунки — 18 мин/200 В).

10. Отключить источник питания от электрофорезной камеры. Извлечь гель из гелевого держателя.

11. Поместить гель в сушильную камеру (температура 60°С). Высушить гель полностью (отсутствуют пятна на пластине геля).

12. Заполнить один контейнер рабочим окрашивающим раствором, три контейнера 10% уксусной кислотой.

13. Поместить высушенную гелевую пленку в контейнер для окрашивания на 5 минут.

14. Извлечь окрашенную гелевую пленку. Промыть пленку по 5 минут в 3-х контейнерах для промывки.

15. Поместить гель в сушильную камеру (температура 60°С). Просушить гелевую пластину.

16. Перенести гель в сканер. Получить изображение геля и оценить результаты в программе HellabioScan или используя фильтр денситометра 580 нм.

Предполагаемые показатели нормы: HbA: 96.5-98.5%, HbA2 1.5-3.5%

Коэффициент отклонения значений не превышает 5%.

Гемолизат известного гемоглобина или коммерчески доступный гемолизат контроля качества должен быть включен в каждую процедуру электрофореза.

Качественная интерпретация результатов может быть произведена визуально путем сравнения образца с шаблоном. Для количественной интерпретации результатов используют программу HellabioScan или денситометр (580нм)

Оценку электрофореграмм при гемоглобинопатиях можно легко сделать визуально. Для количественного анализа должен быть использован денситометр (580нм).

МОДЕЛИ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА НА АГАРОЗНЫХ ГЕЛЯХ HELLABIO

Электрофорез гемоглобина в щелочи:

___

Электрофорез гемоглобина в кислоте:

(Дифференциация HbS от HbG, D,Lep.) 1= HbS

___

Электрофорез гемоглобина в щелочи:

Примечание: чтобы определить вид нетипичного гемоглобина (HbC, HbS, HbD, HbE, Lepore), нужно использовать электрофорез гемоглобина в кислой среде.

источник

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет определить процентное содержание основных изоформ гемоглобина и провести скрининг гемоглобинопатий. В норме в крови взрослого человека не менее 96,5 % гемоглобина представлено изоформой HbA, которая состоит из двух пар полипептидных цепей (глобинов): 2α и 2β, каждая из которых связана с гемом. Гемоглобинопатии связаны с наличием аномального варианта гемоглобина. Посредством электрофореза гемоглобина можно проводить скрининг состояний, связанных со структурными аномалиями гемоглобина. При этом метод не позволяет установить тип и характер гемоглобинопатии.

Синонимы английские

Serum Hemoglobin Electrophoresis.

Электрофорез и денситометрия.

Мг/дл (миллиграмм на децилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет определить процентное содержание основных изоформ гемоглобина и провести скрининг гемоглобинопатий. В норме в крови взрослого человека не менее 96,5 % гемоглобина представлено изоформой HbA, которая состоит из двух пар полипептидных цепей (глобинов) — 2α и 2β, — каждая из которых связана с гемом. HbA обеспечивает адекватный газообмен и тканевую оксигенацию. Фракция HbA2 — второстепенная форма гемоглобина, имеет формулу 2α2δ. Также у взрослого допустимо наличие следовых количеств фетального гемоглобина HbF (2α2γ), который является преобладающей фракцией в течение внутриутробного периода. В течение первых 6 месяцев жизни HbF замещается HbA.

Нарушения структуры гемоглобина обычно разделяют на две группы: гемоглобинопатии и талассемии, хотя талассемии являются формой гемоглобинопатии. Талассемии представляют собой нарушения синтеза α-, β- или обеих цепей гемоглобина. Также могут отмечаться нарушения синтеза δ-, γ- цепей. Большинство вариантов α- и β-талассемий сопровождается изменением уровня HbF и HbA₂, поэтому определение этих изоформ может быть использовано для скрининга этих состояний.

Остальные гемоглобинопатии связаны с наличием аномального варианта гемоглобина. Наиболее распространённые и клинически значимые аномальные варианты гемоглобина: S, D, E, C. Варианты HbS и HbD — патологические формы гемоглобина, которые обладают идентичной миграцией в щелочном геле и являются результатом точечных мутаций гена, кодирующего β-глобин. Варианты Е и С при данном методе мигрируют в составе фракции HbA₂, при их наличии фракция HbA2 достигает более 25 %. Наибольшее клиническое значение представляет HbS-вариант, который приводит к серповидноклеточной анемии.

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет проводить скрининг состояний, связанных со структурными аномалиями гемоглобина. При этом метод не позволяет установить тип и характер гемоглобинопатии.

Электрофорез является чувствительным методом, с помощью которого можно исключить гемоглобинопатии либо определить тактику дальнейшего обследования для установления точного диагноза заболевания. Метод характеризуется высокой внутрипостановочной (SD Когда назначается исследование?

Скрининг гемоглобинопатий;
наличие семейного анамнеза гемоглобинопатий, планирование семьи;
микроцитарная анемия, не связанная с дефицитом железа;
гемолитическая анемия неустановленной этиологии;
обнаружение изменённых эритроцитов (серповидная деформация) при микроскопическом исследовании крови.

Тест обладает высокой достоверностью при скрининге β-талассемий, вариантов, приводящих к серповидноклеточной анемии, и синдромов персистенции фетального гемоглобина.
При использовании данного метода может быть затруднена индентификация α+-талассемии (талассемия с одной мутацией).

источник

Испытание гемоглобина электрофореза является анализ крови используется для измерения и идентификации различных типов гемоглобина в крови. Гемоглобин представляет собой белок внутри красных кровяных клеток, ответственных за транспортировку кислорода к тканям и органам.

Генетические мутации могут вызвать ваше тело, чтобы произвести гемоглобин, который формируется неправильно. Это ненормальное гемоглобина может привести к слишком мало кислорода для достижения ваших тканей и органов.

Есть сотни различных типов гемоглобина. Они включают:

Гемоглобин F: Это также известно как фетальный гемоглобин. Это тип , найденный в выращивании плодов и новорожденных. Он заменен гемоглобин А вскоре после рождения.
Гемоглобин: Это также известно как взрослый гемоглобин. Это наиболее распространенный тип гемоглобина. Она нашла у здоровых детей и взрослых.
Гемоглобин С, D, Е, М и S: Это редкие виды аномального гемоглобина , вызванным генетической мутацией.

Тест гемоглобина электрофореза не говорит вам о количестве гемоглобина в крови — что это сделано в полном анализе крови . Уровни , что тест — электрофорез гемоглобина относится к являются процентами различных типов гемоглобина , которые могут быть обнаружены в крови. Это отличается у детей и взрослых:

Гемоглобин в основном из гемоглобина F в плодах. Гемоглобин F все еще составляет большую часть гемоглобина у новорожденных. Он быстро снижается к тому времени ваш ребенок годик:

Нормальные уровни этих типов гемоглобина у взрослых:

Тип гемоглобина	процент
гемоглобин	95% до 98%
гемоглобин А2	2% до 3%
гемоглобин F	От 1% до 2%
гемоглобин S	0%
гемоглобин C	0%

Вы приобретаете различные патологические типы гемоглобина, унаследовав генные мутации на гены, которые отвечают за выработку гемоглобина. Ваш врач может порекомендовать тест гемоглобин электрофореза, чтобы определить, если у вас есть заболевание, которое вызывает выработку аномального гемоглобина. Причины, по которым ваш врач может попросить вас сделать тест гемоглобина электрофорез включают:

1. В рамках обычной проверки: Ваш врач может иметь свой гемоглобин испытанный следить за полный анализ крови во время обычного физического.

2. Для диагностики заболеваний крови: Ваш врач может назначить Вам тест на гемоглобин электрофореза , если вы показываете симптомы анемии. Тест поможет им найти любые ненормальные типы гемоглобина в крови. Это может быть признаком нарушений в том числе:

3. Для контроля лечения: Если вы лечите условие , которое вызывает патологические типы гемоглобина, ваш врач будет контролировать ваши уровни различных типов гемоглобина с гемоглобином электрофорезом.

4. экран для генетических условий: Люди , которые имеют семейную историю наследственных анемий , таких как талассемия или серповидно — клеточная анемия может выбрать для скрининга этих генетических нарушений , прежде чем иметь детей. Электрофорез гемоглобина будет указывать, есть ли какие — либо аномальные типы гемоглобина , вызванные генетическими нарушениями. Новорожденные также регулярно скрининг для этих генетических нарушений гемоглобина. Ваш доктор может также хотеть проверить свой ребенок , если у вас есть семейная история аномального гемоглобина или у них есть анемия , которая не вызвана дефицитом железа.

Вам не нужно делать ничего особенного, чтобы подготовиться к электрофореза гемоглобина.

Обычно вам нужно пойти в лабораторию, чтобы нарисовали вашу кровь. В лаборатории, медицинский работник берет образец крови из руки или рук: они первый очистить участок с тампоном спирта. Затем они вставляют небольшую иглу с трубкой, прикрепленной для сбора крови. Когда достаточное количество крови была обращена, они удаляют иглу и покрывают участок с марлевым тампоном. Затем они отправить образец крови в лабораторию для анализа.

В лаборатории, процесс, называемый электрофорезом проходит электрический ток через гемоглобин в вашем образце крови. Это приводит к тому, различным типам гемоглобина разделиться на разные диапазоны. Ваш образец крови, затем сравниваются здоровым образец, чтобы определить, какие типы гемоглобина присутствует.

источник

Некоторые аномальные гемоглобины, выявляемые электрофорезом, включают гемоглобины S, С, Е. Гемоглобины S и С обнаружены в серповидных больных клетках. Это заболевание обнаружено у 50000 черных американцев. Оно возникает у 1 из 625 черных новорожденных в США. Смертность от серповидного заболевания клеток может достигать 30—35% при неправильном лечении инфекции. Основными причинами младенческой смертности является бактериальный сепсис и острая реакция печеночного отторжения.

Лица, выжившие после младенческих приступов, обычно страдают анемией и подвержены резким шокам и другим осложнениям. Совокупность симптомов серьезно изменяется в течение жизни, поскольку часть пациентов умирает в младенчестве, а часть доживает до среднего возраста. Лечение этого хронического заболевания может оказаться дорогостоящим и причинить серьезные страдания и пациенту, и ухаживающим за ним.

Более 2-х миллионов американцев страдают серповидным изменением клеток. Оно выявлено у около 8% негритянского населения. Хотя переносчики серповидных клеток сами не очень подвержены этому заболеванию, в случае, когда оба родителя являются переносчиками этой болезни, вероятность передать болезнь детям равна 25%. Одна из каждых 150 негритянских пар в США (около 3 тысяч беременностей в год) подвержена риску рождения ребенка, страдающего серповидным заболеванием клеток.

Бета-талассемия наблюдается в основном среди выходцев из Средиземноморского и Юго-Азиатского регионов. Более чем 1000 американцев поражены средиземноморской бета-талассемией, или анемией Кули. Хотя некоторые жертвы этой болезни страдают еще от разных анемий и зависят от постоянных переливаний крови, современные переливания и железохелатная терапия помогают улучшить клинический прогноз.

Некоторые пациенты доживают теперь до 30 лет. Бета-талассемийный признак является гетерозиготным и наличествует у 1,5% американских негров, 3—4% выходцев из Италии, 5% выходцев из Греции и примерно 3—9% юго-азиатов 9,11. Существует 25% вероятность, что при каждой беременности, наблюдающейся от двух гетерозиготных родителей, ребенок, будет иметь средиземноморскую талассемию.

Альфа-талассемия наблюдается в основном среди лиц азиатского, африканского или средиземноморского происхождения. Заболевание состоит из четырех различных синдромов, зависящих от числа делеций альфаглобинового гена. Новорожденные с многоводьем, наблюдающимся при четырех делециях, страдают от тяжелой анемии и умирают до или сразу после родов. Женщины в таких случаях могут страдать токсикозом в течение беременности и послеродовым кровотечением.

Заболевание гемоглобином Н, в котором отсутствует три гена альфа, наблюдается у 1% юго-азиатов. Эти лица страдают гемалитической анемией, которая может быть смягчена применением окислительных препаратов и может потребовать переливания крови. Точное распространение малой альфа-талассемии (отсутствуют один или два гена) не выяснено, но она составляет 5—30% среди негров и 15—30% среди юго-азиатов. Эти лица обычно страдают микроцитозом средней тяжести и требуют дальнейшего генетического обследования.

Аномалия гемоглобина Е — третья по распространенности гемоглобинопатия в мире и наиболее общая гемоглобинопатия в Южной Азии, где ее распространенность достигает 30%. Потомство таких лиц может болеть большой талассемией, если второй партнер также имел соответствующий признак. Такая комбинация является основной причиной возникновения тяжелых талассемий в Южной Азии. Массовая иммиграция в США 630 тысяч индокитайцев, более половины которых моложе 18 лет, может привести к удвоению или утроению числа тяжелых талассемий в США.

Электрофорез на ацетатно- или цитратно-целлюлозном агаре или изоэлектрическая фокусировка являются основными скрининговыми тестами для гемоглобиновых заболеваний. Общее тестирование всех новорожденных в отличие от тестирования новорожденных в специфических этнических группах показывает сравнительно небольшую распространенность клинически существенных гемоглобинопатии.

В предыдущем исследовании в ходе общего обследования 84663 новорожденных было обнаружено 89 детей (0,11%) с серповидно-клеточной аномалией и 20 новорожденных (0,02%) с клинически существенной талассемией (гемоглобины FE, F, Н). Хотя результат, возможно, не является существенным, электрофорез высокоспецифичен для таких гемоглобиновых заболеваний, как серповидно-клеточная аномалия.

В одном исследовании каждый из 138 детей с гемоглобином S, обнаруженных при обследовании 3976 черных младенцев, показал наличие того же заболевания через 3—5 лет. Другое исследование 131 ребенка обнаружило только 9 случаев, в которых требовалась переклассификация болезни.

Эффективность обследования беременных женщин зависит от уровня риска в обследуемой популяции. Так, электрофорез в сочетании с подсчетом кровяных телец был поставлен у 298 черных и юго-азиатских женщин. 94 женщины (31,5%) имели отклонение по гемоглобину (включая гемоглобин Е, гены альфа- и бета-талассемий, гемоглобины Н и С, или серповидно-клеточную аномалию).

При исследовании среды 6641 обычной пациентки было обнаружено 185 женщин (3%) с серповидно-клеточной анемией, 68 (1%) с гемоглобином С, 30 (0,5%) с бета-талассемией и 17 (0,3%) с другими отклонениями. Эти результаты были получены комбинацией электрофореза с проверкой красных кровяных телец. Когда применялся гематокрит как единственный тест для определения талассемии, результат был только 0,3 — 0,5%.

В предыдущие годы новая техника диагностики сделала возможным обнаружение серповидно-клеточной аномалии и других гемоглобинопатии у плода, когда у обоих родителей имеются гены заболевания. Ранние анализы включают анализы крови плода, проводимые с помощью фетоскопии или плацентарной аспирации.

Текущие генетические исследования подсказали более безопасную и практичную технику анализа, когда амниоциты наблюдаются с помощью амниоцентеза и хромосомные мутации определяются прямо через рекомбинантную DNA технологию. Эти анализы отличаются высокой точностью (уровень ошибки менее 1 %) при определении серповидно-клеточной аномалии и других форм талассемий.

Принципиальное неудобство состоит, однако, в том, что амниоцентез не может быть проведен до 16 недели беременности. Новая техника, хорионическое синовиальное тестирование может быть проведено на 8—10 неделе беременности.

Обследование на гемоглобиновые отклонения в основном применяется к двум группам населения: новорожденным и взрослым репродуктивного возраста. У новорожденных с серповидно-клеточной аномалией раннее обнаружение помогает предотвратить развитие сепсиса с помощью профилактических антибиотиков. Кроме того, семья может быть достаточно подготовлена к тому, чтобы самостоятельно следить за симптомами и поместить ребенка под медицинское наблюдение.

Серия оптимизированных контрольных опытов показала, что анализы, за которыми следовало профилактическое оральное введение пенициллина новорожденным и маленьким детям, снизило заболеваемость пневмококкальной септицемией на 84%. Продолжавшееся 7 лет изучение показало более низкую смертность у детей, у которых серповидно-клеточное заболевание было диагносцировано при рождении, чем у детей, у которых оно было диагносцировано в возрасте 3 месяцев (2% против 8%).

Но исследователи не замерили соответствующие параметры в контрольной группе. Более краткое исследование (8—20 месяцев) не обнаружило смертей среди 131 новорожденного, отобранных с помощью обследования. Обследование старших детей и подростков имеет своей целью обнаружить носителей признаков: серповидно-клеточного; бета-талассемийного и других, которые часто бывают пропущены в период первых лет жизни. Хотя неочевидно, что эти гетерозиготные лица заболеют, это может иметь важное значение для их потомства.

Идентификация носителей до брака позволяет им получить генетическую консультацию при выборе партнера и пройти диагностические тесты при известии о беременности. Лица, получающие такие формы консультаций, побуждают к этому других лиц — таких, как их партнеры. Обследование 142 пациентов показало, что 62(43%) склонили к обследованию других лиц.

При сравнении с контрольной группой лица, получившие консультацию, демонстрировали существенно лучшее понимание талассемии. Не существует, однако, прямых указаний, что индивидуальные генетические консультации сами по себе существенно определяют репродуктивное поведение или число новорожденных с различными гемоглобиновыми заболеваниями.

Определение статуса родителей особенно важно в течение беременности для выяснений необходимости исследования плода на гемоглобинопатию. Если тест положителен, у них есть время на обсуждение продолжения беременности и обеспечение наилучшего ухода за их ребенком. Исследования показывают, что беременные женщины с положительным тестом на талассемию приводят на тестирование своего партнера, и если тест отца тоже положителен, около 60% прибегают к камниоцентезу.

Если обнаружена серповидно-клеточная аномалия у плода, около 50% родителей делают аборт. Существуют данные из некоторых европейских стран с высоким распространением бета-талассемии, что число больных новорожденных существенно сократилось после введения общего пренатального обследования, аналогичные данные получены по Северной Америке.

Общее обследование новорожденных на серповидно-клеточную аномалию было рекомендовано Национальным институтом здоровья. Обследование детей из групп высокого риска рекомендовалось ВОЗ и Британским обществом гематологии. Обследование новорожденных на серповидно-клеточную аномалию рекомендуется также в многочисленной медицинской литературе. Обследование новорожденных на гемоглобинопатии обязательно во многих штатах.

Обследование детей старшего возраста и молодых взрослых, в общем, не рекомендуется. Некоторые штаты настаивают на обязательном обследовании школьников, но многие авторы возражают против этого. Канадские ученые отмечают низкую эффективность поголовного обследования на талассемию, но рекомендуют обследованию выходцев из Азии, Африки и Средиземноморья.

Британское общество гематологов рекомендует подсчет красных кровяных телец для всех беременных женщин и гемоглобиновый электрофорез для женщин из групп риска. Аналогичные рекомендации для пренатального обследования дает Американский колледж акушеров и гинекологов и другие ведущие эксперты.

Хотя гемоглобинопатии эксклюзивно проявляются среди определенных этнических и расовых групп, некоторые эксперты настаивают на поголовном обследовании новорожденных. Аргументом в защиту избирательного тестирования в группах высокого риска является высокая себестоимость анализа, проводимого среди большого числа лиц низкого риска, для определения редких больных гемоглобинопатиями.

Продолжается обсуждение масштабов обследования на гемоглобинопатии лиц репродуктивного возраста. Критики этого положения утверждают, что проводившаяся в прошлом программа по выявлению гемоглобинопатии показала большую разницу между носителями признака и больными. Кроме того, неясно, смогут ли генетические консультации серьезно сократить число рождающихся больных детей. Сторонники метода говорят, что при раннем диагносцировании врачи могут поставить индивидуальный диагноз, определить риск для пациента и для его будущего потомства.

Анализы крови из пуповины или пятки должны наблюдаться у всех новорожденных из групп риска на гемоглобинопатию. Такие дети должны быть проверены на гемоглобинопатии электрофорезом или другими анализами сравнительной точности. В географических ареалах с широким распространением лиц с риском возникновения гемоглобинопатии общее тестирование новорожденных более предпочтительно, чем выборочное.

Детям с серповидно-клеточной аномалией требуется дальнейшее тестирование, иммунологическая профилактика, профилактика антибиотиками и регулярные клинические наблюдения за ростом и питанием. Их семьи должны получать генетические консультации, касающиеся тестирования семьи и будущего потомства, информацию о болезни, ранних симптомах серьезных осложнений и методах их лечения.

Обсуждается также тестирование подростков и молодых людей с риском гемоглобинопатии. Совет должен включать описание серьезности заболевания и последствий для индивидуума и потомства. Электрофорез должен применяться во время первого пренатального визита у всех негритянок. Носители признака должны быть информированы о необходимости прохождения тестирования отцу и необходимости пренатальной диагностики, если тестирование отца показывает положительный результат.

Г. И. Гаева, И. В. Левандовского, А. И. Спирина

источник

Гемоглобин – металлопротеин, белок, содержащий гем. Гемоглобин составляет около 98% белков, содержащихся в цитоплазме эритроцита. Основная функция гемоглобина – перенос кислорода.

Структура гемоглобина определяет способность переноса кислорода эритроцитами. К 4–6 месяцам жизни ребенка происходит замена фетального гемоглобина на взрослую форму. В норме в крови взрослого человека фетальный гемоглобин составляет не более 1%. Фетальный гемоглобин обладает повышенным сродством к кислороду и сниженным ответом на регулятор передачи кислорода к тканям, 2,3 дифосфоглицерат. Поэтому увеличенное содержание фетального гемоглобина у взрослого человека приводит к недостаточному поступлению кислорода к тканям, т. е. гипоксии.

Изменение структуры гемоглобина (гемоглобинопатии) приводит к нарушению связывания с кислородом, необратимому связыванию гемоглобина с углекислым газом и, последовательно, изменению формы эритроцитов от двояковогнутого эластичного диска до искаженных жестких структур.

Кроме оценки форм и концентрации гемоглобина представляет интерес определение фракций гемоглобина, связанного не только с кислородом, но и другими газами.

Способность крови (эритроцитов) транспортировать кислород к тканям за счет формирования оксигемоглобина может существенно снижаться при вдыхании продуктов горения углерода, серы, ингаляцией оксидом азота которые вступают в необратимое соединение с гемоглобином, образуя дисгемоглобины, и препятствуя формированию оксигемоглобина. В нормальных условиях кислородпереносящая фракция гемоглобина, О2-Hb составляет 95–99%. В этой фракции гемоглобин находится в обратимой связи с кислородом, в окисленном состоянии Fe2+. Небольшой процент (до 1–2%) восстановленного гемоглобина +H+Hb всегда присутствует в крови. Его количество резко возрастает при гемолизе эритроцитов.

В патологических фракциях дисгемоглобинов (метгемоглобин, сульфгемоглобин, карбоксигемоглобин) железо гемоглобина переходит в более окисленную форму (Fe3+), не способную связывать и переносить кислород. В нормальных условиях фракция дисгемоглобинов составляет не более 1,5% общего гемоглобина. Причиной значительного повышения фракции карбоксигемоглобина (до 10%) является курение.

В развернутом клиническом анализе крови может встречаться показатель среднего содержания гемоглобина в эритроците (MCH и MCHC).

Определение формы гемоглобина и выявление гемоглобинопатий возможно с помощью электрофореза.

Определение концентрации гемоглобина (общий гемоглобин, tHb) выполняется различными методами. Принцип определения гемоглобина заключается в лизисе эритроцитов пробы и последующей обработке реактивом, дающим окраску в комплексе с гемоглобином. Референтным методом определения гемоглобина является гемоглобинцианидный.

При оценке уровня гемоглобина следует помнить:

суточные колебания концентрации гемоглобина в периферической крови достигают 15% с максимальными значениями в утренние часы;
длительное наложение жгута при взятии крови и плохо перемешанная проба крови приводят к получению неверных результатов.

Сгущение крови, вызванное дегидратацией (неукротимая рвота, полиурия, диарея, малое потреблении жидкости в жаркое время);
эритремия (полицитемия), симптоматические реактивные эритроцитозы;
длительное пребывание на больших высотах;
гипертриглицеридемия, лейкоцитоз (выше 25,0109/л), наличие в крови парапротеинов.

Анемии различной этиологии;
анемия хронических заболеваний;
перенесенные кровопотери;
злокачественные новообразования;
нарушение синтетической функции печени.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.