Гост методы капиллярного электрофореза

ГОСТ Р 52841-2007 Продукция винодельческая. Определение органических кислот методом капиллярного электрофореза

Текст ГОСТ Р 52841-2007 Продукция винодельческая. Определение органических кислот методом капиллярного электрофореза

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

Цели и принципы стандартизации е Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N9 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0—2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения »

1 РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением «Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства» Россельхозакадемии (ГНУ «СКЗНИИСиВ» Россельхозакадемии)

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 «Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность»

3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 27 декабря 2007 г. № 470-ст

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется е ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликоеано е ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

3 Требования безопасности. 2

4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы. 2

7 Метрологические характеристики. 3

7.2 Прецизионность метода. 3

8 Требования к условиям выполнения измерений. 3

9 Подготовка к выполнению измерений. 3

9.1 Приготовление буферных и вспомогательных растворов. 3

9.2 Подготовка прибора и порядок проведения анализа. 4

9.3 Приготовление градуировочных растворов. 4

10 Проведение измерений. 5

11 Обработка и оформление результатов измерений. 5

Приложение А (справочное) Электрофореграммы стандартного раствора органических кислот

и образца винолродукции. 6

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Определение органических кислот методом капиллярного электрофореза

Determination of organic acids by capillary electrophoresis method

Настоящий стандарт распространяется на винодельческую продукцию и устанавливает метод определения содержания органических кислот — винной, яблочной, янтарной, лимонной и молочной в диапазоне измерений с учетом разбавления от 0,001 до 0.050 г/дм 3 на основе измерения их массовых концентраций посредством капиллярного электрофореза.

Требования к контролируемым показателям по массовой концентрации лимонной кислоты установлены в ГОСТ Р 52404. ГОСТ Р 52523 и ГОСТ Р 52558.

8 настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р ИСО 5725-2—2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений

ГОСТ Р ИСО 5725-3—2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений

ГОСТР 51144—98 Продукты винодельческой промышленности. Правила приемки и методы отбора проб

ГОСТ Р 52404—2005 Вина специальные и виноматериалы специальные ГОСТ Р 52523—2006 Вина столовые и виноматериалы столовые. Общие технические условия ГОСТ Р 52558—2006 Вина газированные и вина газированные жемчужные. Общие технические условия

ГОСТ 12.1.007—76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019—79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 1770—74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118—77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия ГОСТ 4328—77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия ГОСТ 24104—2001 Весы лабораторные. Общие технические требования ГОСТ 29227—91 (ИСО 635-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулирование и метрологии в сети Интернет, который опубликован по

состоянию на 1 января текущего годе, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям. опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей зту ссылку.

3.1 Требования электробезоласности при работе с приборами — поГОСТ 12.1.019.

3.2 При выполнении анализов необходимо выполнять требования безопасности при работе с химическими реактивами согласно ГОСТ 12.1.007.

3.3 К выполнению измерений методом капиллярного электрофореза допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера, прошедшие соответствующий курс обучения, или лица, имеющие удостоверения на право работы методом газовой или высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Прибор (система) капиллярного электрофореза, оснащенный кварцевым капилляром длиной не менее 50 см до детектора, внутренним диаметром 75 мкм, фотометрическим детектором, работающим на длине волны 254 нм. или слекгрофотометричесхим детектором в интервале длин волн от 200 до 300 нм иэлектронно-вычислительной машиной (компьютером)с программным обеспечением для обработки электрофореграмм. например система капиллярного электрофореза «Капель» (НПФ Люмэкс).

Весы лабораторные по ГОСТ 24104с пределами допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более ± 0.0002 г.

Пипетки мерные 2-го класса точности по ГОСТ 29227.

Колбы мерные 2-го класса точности по ГОСТ 1770.

Пробирки одноразовые (типа Эппекдорфа) вместимостью 1.5 см * * 3 .

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота соляная по ГОСТ 3118.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.

Кислота винная с содержанием основного вещества не менее 99,0 %*’.

Кислота яблочная с содержанием основного вещества не менее 99,0 % 2 >.

Кислота янтарная с содержанием основного вещества не менее 99.0 % J >.

Кислота лимонная ссодержанием основного вещества не менее 99.0 % 4) * .

Лактат лития с содержанием основного вещества не менее 95,0 % 5) .

Кислота дипиколиновая ссодержанием основного вещества не менее 99,0 %*>.

Тетраметилэтилендиамин с содержанием основного вещества не менее 99.5 % 7 >.

Этилендиамикдиуксусная кислота ссодержанием основного вещества не менее 99.0 %*>.

Примечание — Средства измерений должны быть поверены в установленные сроки. Допускается использовать средства измерений, вспомогательное оборудование и реактивы с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками.

Отбор проб — по ГОСТ Р 51144.

Например, производства фирмы Sigma (наименование по каталогу T206-25G, D-tarteric acid. 99 %).

2> Например, производства фирмы Sigma (наименование по каталогу 112577-25G. L-malic acid. 99 %).

э> Например, производства фирмы Sigma (наименование по каталогу 27616-250G . Succinic acid. 9914).

41 Например, производства фирмы Sigma (наименование по каталогу 01857-1000. Citric acid anhydroue. 99 %).

51 Например, производства фирмы Sigma (наименование по каталогу 440469-50G. Lithium lactate. 95 %>.

б) Например, производства фирмы Sigma (наименование по каталогу 007S9-2SG. Dipicolmic acid, 99 %).

^ Например, производства фирмы Sigma (наименование по каталогу 411019-100ML. N.N.N’.N’-tetramethyiei-hylenedlamine.99.S %).

81 Например, производства фирмы Sigma (наименование по каталогу 03575-SG. Elhylenedtamme-N.N’-diacetic acid. 99 %).

Метод капиллярного электрофореза определения массовой концентрации органических кислот основан на миграции и разделении анионных форм анализируемых компонентов под действием электрического поля вследствие их различной электрофоретической подвижности. Для детектирования кислот используют косвенный метод, регистрируя поглощение в ультрафиолетовой области спектра при 254 или 270 нм.

Диапазон измеряемых концентраций с учетом разбавления — от 0.001 до 0.050 г/дм 3 .

Показатели прецизионности метода определены в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-2. ГОСТ Р ИСО 5725-3 и представлены втаблице 1.

Таблица 1— Показатели прецизионности метода определения массовых концентраций органических кислот

Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости) п,. %

Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости) ОН, Ч

Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений) г.Ч.Р* 0.95. п ■ 2

Предел воспроизводимости R. Ч. Р * 0.95. п » 2

Границы относительной погрешности при вероятности г 6. Ч. Р ■ 0.95. л ■ 2

Подготовку проб и измерения проводят в лабораторных условиях при температуре окружающего воздуха (23 ± 5) °С. атмосферном давлении от 87 до 107 кПа, относительной влажности воздуха не более 80 % при температуре 25 *С. частоте переменного тока (50.0 ± 0.4) Гц. напряжении всети 220 в.

9.1 Приготовление буферных и вспомогательных растворов

9.1.1 Раствор гидроксида натрия массовой долей 4 %

8 50 — 60 см 3 дистиллированной воды растворяют 4 г гидроксида натрия. По окончании растворения разбавляют дистиллированной водой до объема 100 см 3 . Срок хранения в сосуде из полиэтилена с плотно завинчивающейся крышкой — 2 мес.

9.1.2 Раствор соляной кислоты массовой долей 3,5 %

В мерную колбу вместимостью 100 см 3 помещают 8.3 см 3 соляной кислоты плотностью 1.18 г/см 3 , затем добавляют дистиллированную воду до метки и перемешивают. Срок хранения не ограничен.

9.1.3 Раствор дипиколиновой кислоты массовой долей 0,21 %

6 стакан вместимостью 50 см 3 отбирают навеску 0,105 г дипиколиновой кислоты с точностью 0.001 г. В стакан добавляют 40 см 3 горячей (температурой не более 90 *С) дистиллированной воды (хранившейся с момента приготовления не более 4 сут) и перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения. Для интенсификации растворения допускается выдерживание раствора естакане на водяной бане при температуре не более 90 °С. Затем раствор охлаждают до 20 в С, количественно переносят в мерную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 50 см 3 , доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают.

9.1.4 Раствор тетраметилэтилендиамика массовой долей 2,32 %

В стакан вместимостью 25 см 3 отбирают навеску 0.580 г тетраметилэтилецдиамина с точностью 0.001 г. В стакан добавляют 10 см 3 дистиллированной воды (хранившейся с момента приготовления не болев 4 сут) и перемешивают стеклянной палочкой. Затем раствор переносят в мерную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 25 см 3 , доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают.

9.1.5 Раствор этилеидиаминдиуксусной кислоты массовой долей 0,176 %

В стакан вместимостью 25 см 3 отбирают навеску 0,044 г этилеидиаминдиуксусной кислоты с точностью 0.001 г. В стакан добавляют 10 см 3 горячей (температурой не более 90 «С) дистиллированной воды (хранившейся с момента приготовления не более 4 сут) и перемешивают стеклянной палочкой до полногорастворения. Для интенсификации растворения допускается выдерживание раствора в стакане на водяной бане при температуре не более 90 *С. Затем раствор охлаждают до 20 в С, переносят в мерную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 25 см 3 , доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают.

9.1.6 Рабочий буферный раствор

Раствор дипиколиновой кислоты по 9.1.3. раствор тетраметилэтилендиамина по 9.1.4. раствор этипендиаминдиуксусной кислоты ло 9.1.5 смешивают в объемном соотношении 8:1:1. Полученный рабочий буферный раствор помещают в пробирки Эппендорфа в количестве 0.8 см 3 и центрифугируют 4 мин при 6000 об/мин: не допускают хранение рабочего буферного раствора более 2 сут с момента приготовления при нормальных условиях. Исходные растворы (по 9.1.3.9.1.4.9.1.5) хранят при комнатной температуре в плотно закрытых стеклянных емкостях не более Юсут с момента приготовления.

9.2 Подготовка прибора и порядок проведения анализа

Прибор подготавливают к работе в соответствии с руководством (инструкцией) ло эксплуатации и устанавливают следующие рабочие параметры:

• длина волны спектрофотометрического детектора — 270 нм, фотометрического — 254 нм;

— дозирование пробы — пневматическое при 30 мБар в течение 5 с при напряжении 0 кВ:

• рекомендуется термостатирование капилляра при температуре 20 *С.

Перед измерением подготавливают капилляр к работе, промывая его 3.5 %-ным раствором соляной кислоты (см. 9.1.2) в течение 3 мин. затем дистиллированной водой — 3 мин. затем 4 %-ным раствором гидроокиси натрия (см. 9.1.1) в течение 3 мин. затем дистиллированной водой в течение 3 мин и далее рабочим буферным раствором (см. 9.1.6) в течение 3 мин.

Капилляр промывают каждый раз при включении прибора. Результаты первого измерения отбрасывают. Содержимое одной пробирки с рабочим буферным раствором можно использовать для выполнения не более пяти измерений.

9.3 Приготовление градуировочных растворов

9.3.1 Основной градуировочный раствор смеси кислот концентрацией 1 г/дм 3

Отбирают навески винной, яблочной, янтарной, лимонной кислот массой 0.100 г каждую (для моногидрата лимонной кислоты навеска составляет 0,109 г), лактата лития массой 0.117 гс точностью 0,001 г и вносят в мерную колбу вместимостью 100 см 3 , добавляют 50—70 см 3 дистиллированной воды, растворяют содержимое и затем доводят до метки. Срок хранения основного градуировочного раствора — не более 1 мес в стеклянной таре с пришлифованной пробкой при температуре 2 °С—8 ‘С.

9.3.2 Рабочие градуировочные растворы (массовой концентрацией 0.001. 0,005. 0,010. 0,025 и 0.050 г/дм 3 ) готовят из основного градуировочного раствора no 9.3.1. Для этого вносят в пять мерных колб (с пришлифованными пробками) вместимостью 1000 см 3 пипетками 1.5.10.25 и 50 см 3 основного градуировочного раствора, соответственно, затем доводят объемы растворовв колбах до метки дистиллированной водой, закрывают колбы пробками и тщательно перемешивают. Срок хранения растворов не более двух суток в стеклянной таре с пришлифованной пробкой при температуре 2 в С—8 *С.

9.3.3 Градуировочные растворы концентрацией 0,001, 0,005.0.010. 0,025. 0.050 г/дм 3 отбирают мерной пипеткой в объеме 0,8 см 3 в пробирку Эппендорфа и центрифугируют 4 мин при 6000 об/мин для удаления растворенного воздуха. Проводят измерение по 9.2. На основе полученных данных строят градуировочные зависимости. Градуировка признается удовлетворительной, если коэффициент корреляции. рассчитанный программой, будет не менее 0.99. Градуировка системы обязательно проводится заново в следующих случаях:

при замене хотя бы одного из компонентов буферного раствора:

при изменении рабочего напряжения;

при изменении времени ввода пробы и давления ввода;

при отрицательных результатах контроля стабильности градуировочной характеристики. Примеры электрофореграмм приведены в приложении А.

9.3.4 Приготовление раствора для контроля стабильности градуировочной характерно-

8 мерную колбу вместимостью 1000 см 3 вносят навески винной и лимонной кислот по 0,05 г каждой, разбавляют до метки дистиллированной водой и перемешивают. Массовая концентрация винной и лимонной кислот — 0.05 г/дм 3 . Срок хранения раствора — 1 мес при температуре 2 *С—8 ®С. Контроль* ный раствор используют для проверки работоспособности прибора и контроля стабильности градуировочной характеристики.

Перед проведением измерений по 9.2 исследуемые пробы разбавляют в 50—100 раз дистиллированной водой до концентрации анализируемых кислот не более 0.050 г/дм 3 и центрифугируют. В случае необходимости идентификации какой-либо из кислот следует добавить эту кислоту е анализируемый образец и выполнить измерение повторно.

11.1 Используя электрофореграмму. зарегистрированную при помощи программного обеспечения к прибору, рассчитывают массовую концентрацию соответствующих кислот по установленным градуировочным характеристикам (см. 9.3.3).

Массовую концентрацию органических кислот в исследуемой пробе X. г/дм 3 , вычисляют по формуле

где к — коэффициент разбавления пробы (см. раздел 9);

С — концентрация кислоты, найденная по градуировочному графику, г/дм 3 .

11.2 За окончательный результат определения принимают среднеарифметическое значение Х _{3 , двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости}

тдеХ_гХ_г — результаты двух параллельных измерений массовой концентрации кислоты в пробе, г/дм 3 ; Х_ср — среднееэначениедеухпараллельныхизмерениймассовойконцентрациикислоты в пробе. г/дм 3 ;

г — значение предела повторяемости (см. таблицу 1), %.

11.3 Результат анализа представляют в виде: Х _{3 ,}

гдеХ_ср — среднеарифметическое значениедвух определений массовой концентрации кислоты епробе, признанных приемлемыми, г/дм 3 ;

д — граница абсолютной погрешности определения, г/дм 3 , при доверительной вероятности Р = 0.95.

11.4 Границу абсолютной погрешности д вычисляют по формуле

где 5— граница относительной погрешности измерения (см. таблицу 1), %.

Числовое значение результата определения должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение границы абсолютной погрешности.

Электрофореграммы стандартного раствора органических кислот и образца винопродукции

Рисунок А.1 — Электрофорегрвмма стандартного раствора кислот, с концентрацией 0.05 г/дм 3

Рисунок А.2 — Электрофорегрвмма образца винопродукции

Примечание — На электрофореграммвх возможно появление пиков неидентифицироеанных кислот, не мешающих проведению количественного анализа.

УДК 663.2.001.4:006.354 ОКС 67.160.10 Н79

Ключевые слова: продукция винодельческая, органические кислоты, буферный раствор, капиллярный электрофорез, элекгрофореграмма

Редактор Л.0. Коретникоаа Технический редактор Н.С Гришаноаа Корректор U.H. Паршина Компьютерная еерстка И. А. Нопеикинои

Сдано а набор 03.03.2009. Подписано а печать 19.03.2009. Формат 90 ■ 84 Бумага офсетная. Гарнитура Ариап. Печать офсетная. Усп печ л. 1,40. Уч.-иэд. л. 0.95. Тираж 293 окз. Зак. 271

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ». 123935 Москва. Гранатный лер.. 4. inlo@9oslin!o ги

Набрано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» на ПЭВМ.

Отпечатано а филиале ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» — тип. • Московский печатник». 105062 Москва. Лялин пер., в.

источник

ГОСТ Р 52181-2003. Вода питьевая. Определение содержания анионов методами ионной хроматографии и капиллярного электрофореза

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПО
СТАНДАРТИЗАЦИИ И МЕТРОЛОГИИ

Определение содержания анионов методами
ионной хроматографии и капиллярного
электрофореза

ИПК Издательство стандартов

Задачи, основные принципы и правила проведения работ по государственной стандартизации в Российской Федерации установлены ГОСТ Р 1.0-92 «Государственная система стандартизации Российской Федерации. Основные положения» и ГОСТ Р 1.2-92 «Государственная система стандартизации Российской Федерации. Порядок разработки государственных стандартов»

1 РАЗРАБОТАН Техническим комитетом по стандартизации ТК 343 «Качество воды» (Государственное унитарное предприятие «Центр исследования и контроля воды» (ГУП «ЦИКВ»), Закрытым акционерным обществом «РОСА» (ЗАО «РОСА»), Научно-производственной фирмой аналитического приборостроения «ЛЮМЭКС» (НПФ «ЛЮМЭКС»), Федеральным государственным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт стандартизации» (ФГУП «ВНИИстандарт»)

ВНЕСЕН Управлением стандартизации Госстандарта России

2 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 29 декабря 2003 г. № 411-ст

3 В настоящем стандарте учтены требования международного стандарта ИСО 10304-1:1992 «Качество воды. Определение растворенных фторида, хлорида, нитрита, ортофосфата, бромида, нитрата и сульфата методом жидкостной ионной хроматографии. Часть 1. Метод для вод с малыми степенями загрязнений» («Water quality — Determination of dissolved fluoride, chloride, nitrite, orthophosphate, bromide, nitrate and sulfate ions, using chromatography of ions — Part 1: Method for water with low contamination») (раздел 4 настоящего стандарта)

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Определение содержания анионов методами ионной хроматографии и капиллярного электрофореза

Drinking water. Determination of anions content by ion chromatography and capillary electrophoresis methods

Настоящий стандарт устанавливает методы ионной хроматографии и капиллярного электрофореза питьевой и природной вод, в том числе вод источников питьевого водоснабжения, для определения содержания неорганических анионов:

хлорид-, сульфат-, нитрат-, нитрит-ионов — от 0,5 до 50 мг/дм3;

фосфат-ионов — от 0,5 до 20 мг/дм3;

фторид-ионов — от 0,3 до 20 мг/дм3.

Допускается применять методы для определения более высоких концентраций анионов разбавлением анализируемой пробы воды, но не более чем в 100 раз, при условии, что в разбавленной пробе концентрации всех одновременно или индивидуально определяемых анионов будут соответствовать указанным значениям.

Методы могут применяться для целей сертификации.

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 8.315-97 Государственная система обеспечения единства измерений. Стандартные образцы состава и свойств веществ и материалов. Основные положения

ГОСТ 83-79 Натрий углекислый. Технические условия

ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118-77 Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 3760-79 Аммиак водный. Технические условия

ГОСТ 4328-77 Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 4461-77 Кислота азотная. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9293-74 (ИСО 2435-73) Азот газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 10157-79 Аргон газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 10652-73 Соль динатриевая этилендиамин-N, N, N’, N’-тетрауксусной кислоты 2-водная (трилон Б). Технические условия

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия

ГОСТ 20301-74 Смолы ионообменные. Аниониты. Технические условия

ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 50779.42-99 (ИСО 8258-91) Статистические методы. Контрольные карты Шухарта

ГОСТ Р 51392-99 Вода питьевая. Определение содержания летучих галогенорганических соединений газожидкостной хроматографией

ГОСТ Р 51592-2000 Вода. Общие требования к отбору проб

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов по указателю «Национальные стандарты», составленному на 1 января текущего года, и по соответствующим информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный документ заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться замененным (измененным) стандартом. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

Требования к отбору проб — ГОСТ Р 51592 и ГОСТ Р 51593. Объем отобранной пробы воды должен быть не менее 100 см3. Пробы отбирают в емкости, изготовленные из полимерного материала или стекла. При определении содержания в воде фторид-ионов пробы хранят в емкостях из полимерного материала, не содержащего фтор. При определении содержания нитрат-, нитрит- и фосфат-ионов пробы следует хранить не более 8 ч при температуре не более 25 °С. Хранение проб более 8 ч проводят по ГОСТ Р 51592.

Метод основан на хроматографическом разделении анионов вследствие их различной подвижности в процессе миграции по ионной хроматографической колонке с последующей регистрацией электропроводности элюата.

Хроматограф жидкостный ионный, оснащенный хроматографическими аналитической и подавительной колонками, кондуктометрическим детектором, самописцем или электронно-вычислительной машиной (компьютером) со специальным программным обеспечением для обработки хроматограмм.

Государственные стандартные образцы (ГСО) по ГОСТ Р 8.315 состава водных растворов анионов (фторид-, хлорид-, сульфат-, нитрат-, нитрит-, фосфат-ионов) с относительной погрешностью аттестованного значения не более 1 %.

Весы лабораторные по ГОСТ 24104, с наибольшим пределом взвешивания 210 г и ценой деления 0,1 мг.

Пипетки градуированные по ГОСТ 29227 или с одной отметкой по ГОСТ 29169 2-го класса точности или дозаторы с погрешностью дозирования объема не более 2,5 %.

Цилиндры по ГОСТ 1770 2-го класса точности.

Фильтры целлюлозно-ацетатные или фильтры Шотта, размером пор 0,45 — 0,55 мкм или бумажные обеззоленные типа «синяя лента».

Вода деионизованная (дистиллированная вода по ГОСТ 6709, пропущенная через колонку с ионообменной смолой по ГОСТ 20301) электропроводностью менее 2 мкСм/см. Для получения деионизованной воды рекомендуется использовать специальную установку.

Бумага индикаторная для контроля рН растворов.

Допускается применять другие средства измерений, вспомогательные устройства и реактивы с метрологическими или техническими характеристиками не хуже указанных.

Элюент готовят в соответствии с рекомендациями производителя хроматографической колонки.

Например, для приготовления 1 дм3 элюента 0,25 г карбоната натрия растворяют в колбе вместимостью 1 дм3, доводя объем раствора до метки деионизованной водой, и перемешивают. После приготовления элюент фильтруют, а перед использованием дегазируют инертным газом или вакуумированием. Срок хранения раствора в емкости из полимерного материала — не более 1 мес.

Для приготовления 1 дм3 раствора смешивают 190 см3 этилового спирта и 810 см3 деионизованной воды. Срок хранения раствора — не более одного года.

Для приготовления 1 дм3 раствора в колбе вместимостью 1000 см3, наполовину заполненной раствором этанола (4.2.2), растворяют, при перемешивании, 53 г карбоната натрия и добавляют до метки раствор этанола (4.2.2). Срок хранения раствора — не более 3 мес.

Для приготовления 1 дм3 раствора 20 г гидроксида натрия растворяют в деионизованной воде, при перемешивании, в термостойком стакане. Переносят раствор в колбу вместимостью 1000 см3 и добавляют до метки деионизованной воды. Срок хранения раствора в емкости из полимерного материала — не более 6 мес.

4.2.5 Приготовление раствора аммиака

Для приготовления 1 дм3 раствора в колбу вместимостью 1000 см3, наполовину заполненную деионизованной водой, цилиндром вместимостью 25 см3 наливают 13 см3 25 %-ного аммиака, доводят объем раствора до метки деионизованной водой и перемешивают. Срок хранения раствора — не более одного года.

Для приготовления 1 дм3 раствора в колбе вместимостью 1000 см3, наполовину заполненной раствором аммиака (4.2.5), растворяют, при перемешивании, 20 г трилона Б и добавляют до метки раствор аммиака (4.2.5). Срок хранения раствора — не более одного года.

4.2.7 Растворы, приготовленные по 4.2.3, 4.2.4, 4.2.6, перед применением фильтруют.

Для приготовления 1 дм3 раствора в колбу вместимостью 1000 см3, наполовину заполненную деионизованной водой, цилиндром вместимостью 50 см3 наливают 34 см3 концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора в колбе до метки деионизованной водой и перемешивают. Срок хранения раствора — не более одного года.

Регенерацию аналитической колонки проводят в соответствии с рекомендациями производителя.

Например, колонку отсоединяют от детектора и подавительной колонки и пропускают через нее 200 см3 раствора карбоната натрия в этаноле (4.2.3), затем 150 — 200 см3 раствора гидроксида натрия (4.2.4). После этого промывают колонку деионизованной водой до нейтральной реакции рН раствора. Перед началом измерений (4.6) аналитическую колонку промывают раствором элюента (4.2.1).

Пригодность колонки к работе определяют по 4.4.1.

Регенерацию колонки или ее замену проводят в соответствии с рекомендациями производителя, как правило, через 8 — 10 ч ее работы.

Например, через подавительную колонку пропускают 200 см3 раствора трилона Б (4.2.6), затем 200 см3 раствора азотной кислоты (4.2.8) и после этого промывают колонку деионизованной водой до нейтральной реакции рН раствора.

Пригодность колонки к работе определяют по 4.4.2.

Для приготовления градуировочных растворов смеси анионов рекомендуется применять ГСО состава водных растворов индивидуальных анионов или их смесей номинальной концентрации индивидуальных анионов 0,1, 0,5 и 1,0 мг/дм3.

В мерные колбы пипетками соответствующей вместимости вносят рассчитанные объемы ГСО состава водных растворов необходимых анионов и доводят раствор до метки деионизованной водой, чтобы концентрация этих анионов соответствовала применяемому диапазону измерений. Процедуру разбавления ГСО проводят в соответствии с инструкцией по их применению. Готовят пять-шесть градуировочных растворов. Рекомендуемые номинальные концентрации анионов в градуировочных растворах приведены в таблице 1. Растворы используют свежеприготовленными.

Концентрация аниона в растворе, мг/дм3

4.4.1 На хроматографе анализируют (4.6) не менее двух раз градуировочные растворы (4.2.11), идентифицируют пики каждого аниона и устанавливают соответствующее им время удерживания, которое в дальнейшем используют для идентификации анионов в исследуемых рабочих пробах воды. Рекомендуется проводить идентификацию пиков анионов по градуировочным растворам 3 — 5 (таблица 1).

Сходимость времени удерживания анионов признают удовлетворительной при выполнении условия

, (1)

где Тmах — максимальное время удерживания пика аниона;

Tmin — минимальное время удерживания пика аниона;

rт — предел сходимости времени удерживания аниона (rт = 10 %).

По полученным хроматограммам определяют площади пиков аниона (анионов), вычисляют их средние значения и проверяют сходимость полученных значений для каждой концентрации аниона в градуировочных растворах (4.2.11).

Сходимость площадей пиков анионов признают удовлетворительной при выполнении условия

где Smax — максимальная площадь пика аниона;

Smin — минимальная площадь пика аниона;

rS — предел сходимости площадей пика аниона, %, числовое значение из таблицы 2.

4.4.2 При удовлетворительных результатах контроля обоих параметров пика — времени удерживания и площади — устанавливают градуировочную характеристику: зависимость среднеарифметического значения площадей пика конкретного аниона от концентрации этого аниона в градуировочном растворе (4.2.11).

При неудовлетворительных результатах контроля повторяют регенерацию колонки (4.2.9) и градуировку прибора.

Хроматограф градуируют после регенерации аналитической колонки или ее замене, смены элюента, основных реактивов, но не реже чем один раз в 3 мес.

При необходимости отделения взвесей 20 — 50 см3 пробы анализируемой воды пропускают через сухой фильтр в сухую посуду, отбрасывая первую порцию (5 — 10 см3) фильтрата.

Ввод пробы в хроматограф и дальнейшие измерения электропроводности элюата проводят в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации хроматографа при рабочих параметрах, установленных по 4.3 и 4.4.

При применении в качестве регистратора выходных сигналов хроматографа самописца в случае отсутствия у прибора автоматического увеличения множителя шкалы блока измерения электропроводности (уменьшения чувствительности детектора) и «зашкаливания» хроматографических пиков анионов анализ пробы повторяют, увеличив множитель шкалы блока измерения электропроводности или разбавив пробу деионизованной водой, фиксируя множитель разбавления пробы Кр.

Если измеренная концентрация анализируемого аниона (анионов) превышает верхнюю границу диапазона измерений (установленной градуировочной зависимости), пробу разбавляют деионизованной водой, фиксируя множитель разбавления пробы Кр.

Хроматографирование каждой пробы проводят не менее двух раз.

На полученных хроматограммах по времени удерживания пиков идентифицируют содержащиеся в пробе анионы, определяют площади пиков каждого аниона. По полученным градуировочным характеристикам (4.4) определяют концентрацию каждого аниона в пробе.

За результат измерений концентрации аниона в исходной пробе dоды у, мг/дм3, принимают среднеарифметическое значений полученных концентраций с1 и с2, мг/дм3.

Расхождение между результатами измерений анализируемой пробы с1 и с2, мг/дм3, не должно превышать предела повторяемости (сходимости) r (таблица 2). Результат измерений считают удовлетворительным при условии

Если условие (3) не выполняется, то проводят повторные измерения (4.6) и проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (сходимости) по ГОСТ Р ИСО 5725-6.

Если пробу разбавляли в соответствии с 4.6, то концентрацию аниона в пробе воды у, мг/дм3, вычисляют по формуле

где cр — концентрация аниона в анализируемой пробе, определенная по градуировочной зависимости, мг/дм3;

Кр — множитель разбавления пробы, Kp = Vp/V0 (Vp — объем разбавленной пробы, см3;

V0 — объем исходной пробы, взятый для разбавления, см3).

4.8 Характеристики погрешности измерений

Метод обеспечивает получение результатов с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в таблице 2, при доверительной вероятности Р = 0,95.

Диапазон измерений концентраций анионов, мг/дм3

Границы интервала, в котором погрешность находится с доверительной вероятностью Р = 0,95, ±d, %

Стандартное отклонение повторяемости sr, %

Предел повторяемости r, %, при п = 2

Предел воспроизводимости R, %, при р = 2

источник

С перечнем вступающих в силу ГОСТ и областью их применения можно ознакомиться в таблице:

С ГОСТ, вступившими в силу в январе 2019 года можно ознакомиться по ссылке.

С ГОСТ, вступившими в силу в июле 2019 года можно ознакомиться по ссылке.

источник

ГОСТ 31765-2012 ВИНА И ВИНОМАТЕРИАЛЫ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ КРАСИТЕЛЕЙ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА

Добавил: Богдан Кривошея

Дата: [31.03.2017]

ГОСТ 31765-2012 ВИНА И ВИНОМАТЕРИАЛЫ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ КРАСИТЕЛЕЙ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА

Дата введения — 1 июля 2013 г.

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

1 Подготовлен Государственным научным учреждением «Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства» Россельхозакадемии (ГНУ «СКЗНИИСиВ» Россельхозакадемии)

2 Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 15 ноября 2012 г. N 42)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Госстандарт Республики Беларусь

Госстандарт Республики Казахстан

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 29 ноября 2012 г. N 1686-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 31765-2012 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2013 года

5 Настоящий стандарт подготовлен на основе применения ГОСТ Р 53154-2008

Настоящий стандарт разработан в целях установления требований к проведению испытания по определению массовой концентрации синтетических красителей в винодельческой продукции методом капиллярного электрофореза.

Метод определения массовой концентрации синтетических красителей с использованием капиллярного электрофореза обеспечивает необходимую точность и позволяет отказаться от длительного процесса пробоподготовки и использования специфической аппаратуры, применяемой при решении подобных задач другими аналитическими методами, в частности, методами тонкослойной и высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Метод обеспечивает получение сопоставимых результатов и повышает достоверность информации для потребителя.

Настоящий стандарт распространяется на винодельческую продукцию и устанавливает метод определения массовой концентрации синтетических красителей в диапазоне измерений от 0, 002 до 0, 200 г/дм 3 на основе измерения их массовых концентраций посредством капиллярного электрофореза.

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ ИСО 5725-2-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 3652-69 Реактивы. Кислота лимонная моногидрат и безводная. Технические условия

ГОСТ 3956-76 Силикагель технический. Технические условия

ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 10652-73 Реактивы. Сольдинатриевая этилендиамин-N, N, N`, N`-тетрауксусной кислоты 2-водная (трилон Б). Технические условия

ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 31730-2012 Продукция винодельческая. Правила приемки и методы отбора проб

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов по указателю «Национальные стандарты», составленному по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

Требования электробезопасности при работе с приборами — по ГОСТ 12.1.019.

При выполнении анализов необходимо выполнять требования безопасности при работе с химическими реактивами согласно ГОСТ 12.1.007.

К выполнению измерений методом капиллярного электрофореза допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера, прошедшего соответствующий курс обучения.

Прибор капиллярного электрофореза, оснащенный кварцевым капилляром длиной не менее 50 см до детектора, внутренним диаметром 75 мкм, фотометрическим детектором, работающим на длине волны 254 нм или спектрофотометрическим детектором в интервале длин волн от 200 до 300 нм и блоком высокого напряжения отрицательной полярности и электронно-вычислительная машина (компьютер) с программным обеспечением для регистрации и обработки электрофореграмм.

Спектрофотометр, позволяющий измерять оптическую плотность растворов, с диапазоном измерения длин волн от 400 до 700 нм.

Весы лабораторные по ГОСТ 24104 с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания ±0, 0001 г.

Шкаф сушильный с диапазоном температур в рабочей камере от 40°С до 200°С и основной погрешностью стабилизации температуры ±1°С.

Термометр жидкостный стеклянный с диапазоном измерения от 0°С до 100°С и ценой деления 1°С по ГОСТ 28498.

Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1, 2, 5, 10 см 3 по ГОСТ 29227.

Колбы мерные 2-250-2, 2-100-2, 2-50-2, 2-25-2 по ГОСТ 1770.

Стаканы химические по ГОСТ 25336.

Стаканчик СВ-14/8 по ГОСТ 25336.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Центрифуга лабораторная с частотой вращения ротора не менее 6000 об/мин.

Пробирки одноразовые (типа Эппендорфа) вместимостью 1, 5 см 3 .

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота соляная по ГОСТ 3118.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.

Кислота лимонная безводная по ГОСТ 3652.

Тетраметилэтилендиамин (N, N, N, N-tetramethylethylenediamine) с содержанием основного вещества 99, 5%.

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии с содержанием основного вещества не менее 99%.

Красители синтетические стандартные в соответствии с приложением А.

Допускается применение средств измерений и вспомогательного оборудования с аналогичными метрологическими и техническими характеристиками, а также реактивов по качеству не хуже указанных.

Отбор проб — по ГОСТ 31730.

Метод капиллярного электрофореза для определения массовых концентраций синтетических пищевых красителей основан на разделении их под действием электрического поля в капилляре в условиях, способствующих подавлению влияния посторонних веществ. Идентификацию и количественное определение анализируемых красителей проводят, регистрируя поглощение при длине волны 254 или 215 нм.

Диапазон измеряемых концентраций с учетом разбавления от 0, 002 до 0, 200 г/дм 3 .

Показатели прецизионности метода определены в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-2 и представлены в таблице 1.

Предел повторяемости r, %, Р = 0, 95

Предел воспроизводимости R, %, Р = 0, 95

Границы относительной погрешности ±5 при вероятности Р = 0, 95, %

Подготовку проб и измерения проводят в лабораторных условиях при температуре окружающего воздуха (23±5)°С, атмосферном давлении от 87 до 107 кПа, относительной влажности воздуха не более 80%, частоте переменного тока (50±0, 4) Гц, напряжении в сети 220 В.

9.1 Приготовление буферных и вспомогательных растворов

9.1.1 Раствор гидроксида натрия массовой долей 4%

В 50 — 60 см 3 дистиллированной воды растворяют 4 г гидроксида натрия. По окончании растворения разбавляют дистиллированной водой до объема 100 см 3 .

Срок хранения в сосуде из полиэтилена с плотно завинчивающейся крышкой — 2 мес.

9.1.2 Раствор соляной кислоты массовой долей 3, 5%

В мерную колбу вместимостью 100 см 3 помещают 8, 3 см 3 соляной кислоты плотностью 1, 18 г/см 3 , затем добавляют дистиллированную воду до метки и перемешивают. Срок хранения не ограничен.

9.1.3 Раствор лимонной кислоты молярной концентрации 0, 05 моль/дм 3

В стакан вместимостью 25 см 3 отбирают навеску (0, 240±0, 001) г безводной лимонной кислоты. В стакан добавляют 15 см 3 дистиллированной воды и перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения. Затем раствор количественно переносят в мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 25 см 3 , доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают.

Срок хранения раствора при комнатной температуре — одна неделя.

9.1.4 Раствор тетраметилэтилендиамина молярной концентрации 0, 05 моль/дм 3

В стакан вместимостью 25 см 3 отбирают навеску (0, 145±0, 001) г тетраметилэтилендиамина. В стакан добавляют 10 см 3 дистиллированной воды (хранившейся с момента приготовления не более 4 сут) и перемешивают стеклянной палочкой. Затем раствор переносят в мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 25 см 3 , доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают.

Срок хранения раствора в плотно закупоренной емкости при комнатной температуре — две недели.

9.1.5 Раствор трилона Б молярной концентрации 0, 05 моль/дм 3

В стакан вместимостью 25 см 3 отбирают навеску (0, 465±0, 001) г трилона Б. В стакан добавляют 15 см 3 дистиллированной воды и перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения. Затем раствор количественно переносят в мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 25 см 3 , доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают.

Срок хранения раствора при комнатной температуре — 1 мес.

9.1.6 Рабочий буферный раствор

Раствор лимонной кислоты по 9.1.3, раствор тетраметилэтилендиамина по 9.1.4, раствор трилона Б по 9.1.5 и ацетонитрил смешивают в объемных соотношениях 4:3:1:1. Не допускают хранение рабочего буферного раствора более 2 сут с момента приготовления при нормальных условиях в плотно закупоренной емкости с пришлифованной или полиэтиленовой пробкой. Полученный рабочий буферный раствор помещают в пробирки типа Эппендорф в количестве 0, 8 см 3 и центрифугируют 4 мин при 6000 об/мин.

9.2 Подготовка прибора и порядок проведения анализа

9.2.1 Прибор подготавливают к работе в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации и устанавливают следующие рабочие параметры:

— длина волны — 254 нм или 215 нм;

— дозирование пробы — пневматическое при 30 мБар в течение 5 с при напряжении 0 кВ;

— рекомендуется термостатирование капилляра при температуре 25°С.

Перед измерениями подготавливают капилляр к работе, промывая его 3, 5% раствором соляной кислоты (см. 9.1.2) в течение 3 мин, затем дистиллированной водой — 3 мин, затем 4%-ным раствором гидроокиси натрия (см. 9.1.1) в течение 3 мин, затем дистиллированной водой в течение 3 мин и далее рабочим буферным раствором (см. 9.1.6) в течение 3 мин. Капилляр промывают каждый раз при включении прибора. Между анализами капилляр промывают рабочим буфером в течение 2 мин. При сильном загрязнении капилляра, что проявляется в искажении электрофореграммы, допускается повторение начальной промывки.

9.2.2 Определение синтетических красителей в градуировочном растворе или исследуемой пробе проводится путем пневматического дозирования проб (30 мБар, 5с) и регистрации полученных данных в течение 12 мин в виде электрофореграмм. Процедуры градуировки и анализа исследуемых проб должны проводиться на одной длине волны.

Первое измерение на каждой порции буфера повторяют не менее двух раз. При сильном расхождении результатов первый отбрасывают. Содержимое одной пробирки с рабочим буферным раствором можно использовать для выполнения не более пяти измерений.

9.3 Приготовление градуировочных растворов

9.3.1 Приготовление исходных растворов синтетических красителей

В необходимое число стаканов вместимостью 50 см 3 каждый отбирают навески стандартных синтетических красителей с записью результата до четвертого знака.

Массу навески стандартного синтетического красителя m, г, рассчитывают с учетом массовой доли основного красящего вещества в образце по формуле

где 0, 1 — масса основного красящего вещества, содержащегося в навеске стандартного синтетического красителя, г;

100 — коэффициент пересчета в проценты;

X — массовая доля основного красящего вещества в стандартном синтетическом красителе, %.

Массовую долю основного красящего вещества Х в стандартном синтетическом красителе определяют в соответствии с приложением Б.

В каждый стакан с навеской стандартного синтетического красителя прибавляют 20 см 3 дистиллированной воды и перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения. Для интенсификации растворения допускается нагревание раствора в стакане на водяной бане до температуры не более 90°С. Затем раствор охлаждают до 20°С, количественно переносят в мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 100 см 3 , доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают.

Полученный раствор контрольного образца синтетического красителя имеет массовую концентрацию основного красящего вещества 1 г/дм 3 .

Срок хранения растворов контрольных образцов синтетических красителей в плотно закрытых склянках при температуре 2°С — 8°С — 3 мес.

9.4.1 Рабочие градуировочные растворы (массовой концентрацией 0, 025 и 0, 050 г/дм 3 ) готовят из растворов контрольных образцов синтетических красителей по 9.3.1. Для этого вносят в две мерные колбы (с пришлифованными пробками) вместимостью 100 см 3 пипетками по 2, 5 и 5 см 3 раствора контрольных образцов синтетического красителя соответственно, затем доводят объемы растворов в колбах до метки дистиллированной водой, закрывают колбы пробками и тщательно перемешивают.

Срок хранения растворов в плотно закрытых склянках не более двух недель при температуре 2°C — 8°С.

9.4.2 Градуировочные растворы концентрацией 0, 025, 0, 050 г/дм 3 отбирают мерной пипеткой в объеме 0, 8 см 3 в пробирку Эппендорфа и центрифугируют 4 мин при 6000 об/мин для удаления растворенного воздуха. Проводят измерение (см. 9.2). Градуировочную характеристику получают, обрабатывая полученные экспериментальные данные при помощи программного обеспечения. Градуировка признается удовлетворительной, если коэффициент корреляции, рассчитанный программой, будет не менее 0, 99. Градуировка прибора обязательно проводится заново в следующих случаях:

при замене хотя бы одного из компонентов буферного раствора;

при изменении рабочего напряжения;

при изменении времени ввода пробы и давления ввода;

при отрицательных результатах контроля стабильности градуировочной характеристики. Пример электрофореграммы приведен в приложении В.

9.4.3 Приготовление раствора для контроля стабильности градуировочной характеристики

В мерную колбу вместимостью 100 см 3 вносят по 1 см 3 контрольных образцов синтетических красителей кармуазин (азорубин, Е122) и красный очаровательный AC (Е129), разбавляют до метки дистиллированной водой и перемешивают. Действительное значение массовой концентрации синтетических красителей составляет 0, 010 г/дм 3 .

Срок хранения раствора в плотно закрытых склянках из темного стекла не более двух недель при комнатной температуре. Контрольный раствор используется для проверки работоспособности прибора и для контроля стабильности градуировочной характеристики.

Исследуемые пробы разбавляют в 10 — 50 раз дистиллированной водой до концентрации анализируемых синтетических красителей не более 0, 050 г/дм 3 и центрифугируют 4 мин при 6000 об/мин. Измерение проводят по 9.2.

В случае затруднения идентификации какого-либо красителя рекомендуется использовать метод добавок. Для этого в анализируемую пробу вносится этот краситель с расчетом на увеличение концентрации на (100±50)%, и измерение повторяется. Увеличение высоты соответствующего пика свидетельствует о правильной идентификации.

11.1 Используя электрофореграмму подготовленных проб (см. раздел 10), при помощи программного обеспечения к прибору рассчитывают массовую концентрацию соответствующих синтетических красителей по установленным градуировочным зависимостям (см. 9.4.2). Массовую концентрацию синтетических красителей в исследуемой пробе X, г/дм 3 , вычисляют по формуле

где k — коэффициент разбавления пробы (раздел 10);

С — концентрация красителя, найденная по градуировочному графику, г/дм 3 .

11.2 За окончательный результат определения принимают среднеарифметическое значение Х_ср, г/дм 3 , двух параллельных определений массовой концентрации красителя, полученных в условиях повторяемости, если выполняется условие приемлемости

где Х_макс — максимальная массовая концентрация красителя в пробе, г/дм 3 ;

Х_мин — минимальная массовая концентрация красителя в пробе, г/дм 3 ;

Х_ср — среднее значение двух параллельных измерений массовой концентрации красителя в пробе, г/дм 3 ;

r — значение предела повторяемости (см. таблицу), %.

11.3 Результат анализа представляют в виде

где Х_ср — среднеарифметическое значение двух определений массовой концентрации красителя в пробе, признанных приемлемыми, г/дм 3 ;

Δ- границы абсолютной погрешности определения, г/дм 3 , при доверительной вероятности Р = 0, 95.

11.4 Границы абсолютной погрешности Δ вычисляют по формуле

где δ — границы относительной погрешности измерения (см. таблица 1), %;

X — среднеарифметическое значение двух определений массовой концентрации синтетических красителей в исследуемой пробе, г/дм 3 .

Числовое значение результата определения должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение границы абсолютной погрешности.

Приложение А
(обязательное)

Наименование синтетического красителя

Удельный коэффициент светопоглощения,

источник