Меню Рубрики

Камера для электрофореза инструкция

Пользовался камерой почти месяц (как я понял образец не для продажи). Камера для электрофореза имеет следующие плюсы: компактность (совмещена с блоком питания), хорошая комплектация (много гребенок и несколько подложек для гелей разных размеров), можно проанализировать почти 100 образцов за один раз, блок питания с таймером, цена. Есть у камеры и минусы: фиксированные положения регулятора напряжения в блоке питания (4 значения), одна емкость для заливки гелей (она двухсторонняя, два больших геля одновременно не зальешь), качество пластика гребенок покажет время, фирма китайская малоизвестная (будет ли возможность через пару лет докупить гребенки и заливочные плашки?).

Очень хорошая камера для горизонтального электрофореза. Два прибора в одном: источник и собственно сама камера. Много вариантов заливки геля. Есть гребенки как для препаративного, так и для аналитического электрофореза. Размеры геля оптимальны для рутинных работ в лаборатории. Экономичный объем камеры позволяет снизить расход электродного буфера. Трансформатор со 110V на 220V немного великоват, но это не критичн

Плюсы: 1) таймер, благодаря которому образцы «не убегут», 2) наличие небольшого размера заливочных рамок, чтобы сэкономить на агарозе, если нужно анализировать лишь пару образцов. 3) большое количество гребенок как для аналитического так и для препаративного электрофореза 4) собственный источник питания Минусы: 1) искривление полосок образцов при электрофорезе в маленьких рамках, 2) только одна гребенка со стандартным размером размером зубцов, куда может войти большое количество образца и сразу 4 гребенки с мелкими зубцами 3) без крышки не запускается электрофорез, а под крышкой не виден фронт красителя 4) довольно сложно наносить образцы, темная полоса не дает видеть четко те лунки, куда образец уже нанесен.

Электрофорезная камера без проводов- непривычно, но студенты не перепутают «плюс» и «минус» разъемы на источнике тока — и это плюс для работы. Второй плюс- гребенки и заливочный столик в комплекте. Минус — непрозрачная форезная камера, лунки видно хуже, чем в прозрачной камере на темном фоне. Работаем с короткими фрагментами, производительность хорошая.

ООО “Пущинские Лаборатории” осуществляет доставку любого из представленных на сайте товаров, а так же товаров из каталогов фирм-производителей отображенных на нашем сайте.

По Москве доставка осуществляется собственной курьерьской службой

В любой город России и стран СНГ с помощью ТК «Деловые линии», «СДЭК», DPD

Возможен самовывоз товара из нашего офиса, находящегося по адресу: МО, г. Пущино, микрорайон «Д», д.20А, пом. 4Б
Схема проезда

Доставка до терминалов ТК «Деловые линии», «СДЭК», DPD производится бесплатно.

Продукция, поставляемая компанией Пущинские Лаборатории, отвечает заявленным техническим характеристикам, транспортируется согласно условиям, рекомендованных производителями. По требованию клиента на все реактивы предоставляется сертификат анализа (на бумажном носителе или в электронном виде).

На оборудование, поставляемое компанией Пущинские Лаборатории, распространяется гарантийное и пост гарантийное обслуживание, согласно гарантийному талону и условиям производителя. В случае необходимости, в комплекте с прибором предоставляются регистрационное удостоверение и сертификат соответствия (при его наличие на данный товар).

Получить консультацию Вы можете по телефону 8 (499) 110-03-07 или отправьте запрос на info@laboratorii.com.

Компания «Пущиские лаборатории» работает с физическими и юридическими лицами.
Физическое лицо (частный покупатель) может приобрести у нас товар:

  • В интернет-магазине или из каталогов производителей, размещенных на сайте, по безналичной форме оплаты товара.
  • Для формирования квитанции для оплаты в любом банке вам необходимо обратится в отдел продаж по телефону 8(499) 110-03-07 или написать письмо по электронной почте info@laboratorii.com
  • Оплата доставки товара может быть включена в стоимость товара. Также вы можете вызвать транспортную компанию или самостоятельно забрать товар со склада в городе Пущино, часы работы указаны на сайте laboratorii.com.
  • При наличии товара на складе, вы можете забрать его в рабочее время после поступления денежных средств на расчетный счет. Наличие товара нужно уточнить у менеджеров.
  • При приобретении товаров в интернет-магазине, выбранная вами позиция поставляется под заказ (нет в наличии), выставляется счет на оплату, заключается договор поставки товара. Поставка заказных позиций осуществляется после 100% предоплаты, срок постаки оговаривается с менеджером по продукции и прописывается в договоре.

Юридическое лицо может приобрести у нас товар товар:

источник

1. Устройство прибора для электрофореза. Прибор состоит из выпрямителя, подающего постоянный ток необходимого напряжения, и камеры для электрофореза. Сама камера состоит из 2-х ванн; в одной из них имеется неподвижная перегородка, куда помещается платиновый электрод (+ анод), а в другой находится электрод из нержавеющей стали (- катод). Между ваннами, заполненными соответствующим буфером, имеется соединительный мост, на который помещают полоски специальной фильтровальной бумаги.

2. Проведение электрофореза. Заполнить обе ванны камеры раствором вероналового буфера с pH 8,6. Буферного раствора в ваннах должно быть столько, чтобы он покрывал неподвижную перегородку, но был ниже подвижных перегородок.

Вставить в ванны электроды. Вырезать из фильтровальной бумаги полосы необходимого размера в зависимости от величины камеры (обычно шириной 4-6 см) и простым карандашом отметить место, на которое впоследствии будет наноситься сыворотка (старт). Смочить эти полоски в вероналовом буфере. Вставить в ванны-камеры соединительный мост. Поместить полоски бумаги на сухие пластинки щипцами, погрузив концы полосок в ванны с буфером, и на заранее отмеченные участки бумаги нанести сыворотку по 0,025-0,005 мл на расстоянии 5-6 см от края моста. Нанесение сыворотки производится со стороны катода.

Рисунок 1. Схема камеры для электрофореза белков на бумаге:

1-стабилизатор; 2-камера для электрофореза; 3-буферный раствор; 4-поддерживающий соединительный мост-электрод; 5-фильтровальная бумага для электрофореза.

После нанесения на бумажные полоски сыворотки камера герметично закрывается крышкой. На крышке камеры расположен прижим блокировки, служащий для включения камеры. Присоединенный выпрямитель подает к камере постоянный ток от 2 до 4 мА при постоянном напряжении 110-160В. Электрофорез проводят при градиенте потенциала от 3 до 8 В на 1 см полосы при комнатной температуре. Хорошее разделение происходит за 18-20 часов.

3. Выключение прибора и выявление белковых фракций. Выключают прибор. Снимают камеры и извлекают бумажные полоски из прибора. Затем каждую полоску помещают в сушильный шкаф на 20 минут при температуре 105 0 С. При этом происходит фиксация белковых фракций на бумаге. Окраску белков проводят раствором бромфенолового-синего в течение 30 минут, затем промывают электрофореграммы 2% раствором уксусной кислоты. Полученные электрофореграммы сушат на воздухе. Белковые фракции окрашиваются в сине-зеленый цвет.

4. Количественное определение белковых фракций. Окрашенные белковые пятна вырезают, краситель элюируют 0,01 н раствором щелочи. Интенсивность окраски каждой фракции определяют колориметрически на ФЭКе.

Количественное определение белковых фракций на электрофореграмме можно установить двумя способами: путем элюирования краски и фотоколориметрирования и денситометрическим методом.

Содержание белковых фракций сыворотки крови, полученное с помощью электрофореза на бумаге, в среднем составляет у взрослого человека:

Денситометрический метод. В специальном аппарате (денситометре) через электрофореграмму пропускают пучок света, поглощение которого зависит от оптической плотности окрашенных белковых пятен. Свет, прошедший через электрофореграмму, улавливается фотоэлементом и превращается в электрический ток, колебания которого фиксируют на бумажном листе в виде кривой, каждый пик кривой соответствует определенной белковой фракции.

Рисунок 2. Электрофореграмма сыворотки человека.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Сдача сессии и защита диплома — страшная бессонница, которая потом кажется страшным сном. 8771 — | 7143 — или читать все.

195.133.146.119 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)

очень нужно

источник

Предлагаем вашему вниманию устройство электрофореза сыворотки крови УЭФ-01-«Астра» (регистрационное удостоверение N ФСР 2009/04670 от 07.05.2018) и программу обработки данных электрофореза «Анализ ФСК», которая совместно с персональным компьютером и планшетным сканером выполняет функции денситометра.

Устройство УЭФ-01-«АСТРА» позволяет проводить:

  • электрофорез белков сыворотки крови,
  • электрофорез с иммунофиксацией,
  • электрофорез липопротеидов,
  • электрофорез белков в моче,
  • электрофорез гликозамингликанов (ГАГ)

Устройство УЭФ-01-«АСТРА» состоит из:

  • Источника питания
  • Камеры деления для белков сыворотки крови
  • Камеры деления для иммунофиксации
  • Комплекта аппликаторов для нанесения проб на АЦ мембраны
  • Комплекта планшетов для проб пациентов
  • Комплекта мостиков для закрепления мембран в камере
  • Комплекта емкостей для реагентов
  • Емкостей для дезинфекции

Источник питания представляет собой программируемый источник напряжения. Питается от сети 220 В ± 10 %, частота 50 Гц. Имеет возможность регулировки: — по напряжению U = 10 … 300 В (дискретность 2 В); — времени t = 1 … 99 мин. (дискретность 1 мин).

Источник питания не требует времени подготовки к работе.

В процессе электрофореза имеется возможность контролировать заданные и текущие параметры (напряжение, ток, время), которые отображаются на индикаторе. Существует, также, звуковая сигнализация режимов работы (таймер, обрыв цепи, короткое замыкание, окончание работы).

Источник питания имеет восемь режимов работы. Каждый режим можно запрограммировать на свой вид анализа. Имеются возможность изменения запрограммированных параметров. Габаритные размеры источника питания 200х202х113 мм.

Камера деления позволяет работать одновременно с тремя ацетатцеллюлозными пленками формата 57х95 мм. Конструкция камеры обеспечивает наиболее оптимальные параметры для электрофореза, а также электрическую безопасность персонала при работе. Габаритные размеры камеры деления 298х180х85 мм.

Камера для иммунофиксации позволяет производить электрофорез гемоглобина и электрофорез с иммунофиксацией.

Многоразовый аппликатор позволяет наносить на пленку одновременно 8 проб сыворотки крови. Объем наносимой пробы — не более 0,2 мкл. Аппликатор имеет конструкцию, защищающую рабочую поверхность от механических повреждений при падении и ударах.

Аппликаторы, мостики для закрепления пленки и планшеты для раскапывания сыворотки крови имеют цветовую маркировку, исключающую ошибку в нумерации проб.

Полученная в результате электрофореза пленка, обработанная специальным образом (окраска, закрепление), помещается в сканер. Считывание результатов электрофореза и их обработка производится с помощью специальной программы (С) “Анализ фракций сыворотки крови”, которая совместно с персональным компьютером и планшетным сканером выполняет функции денситометра.

Программа обработки данных электрофореза имеет банк образцов, позволяющий сохранить изображение необработанной пленки в течение необходимого времени. Это удобно при выполнении большой серии проб.

Обработка результатов анализа производится автоматически одновременно для всех нанесенных на пленку проб. При некачественном разделении или нестандартном распределении фракций возможно ручное редактирование. Программа рассчитывает процентное содержание белков, их содержание в грамм/литр, строит график распределения фракций.

Результаты анализа вместе с изображением исследуемой фореграммы можно поместить в архив и при необходимости извлечь и распечатать. Информация хранится в архиве сколь угодно долго.

Предусмотрена возможность сортировки информации в архиве по имени, дате, номеру анализа и др.

Информация на печать выводится в виде протокола, на котором кроме результатов анализа имеются, сведения о пациенте, лечебном учреждении, времени и дате анализа, необходимые комментарии и т.д.

В стандартный комплект поставки входит стартовый набор расходных материалов для электрофореза белков сыворотки крови. Для производства других типов анализов необходимо заказать соответствующие комплекты расходных материалов.

п/п

Наименование Устройство электрофореза белков сыворотки крови УЭФ-01-«АСТРА» в составе: Источник питания 1 Камера деления для белков 1 Камера для гемоглобина и иммунофиксации 1 Аппликатор на 8 позиций 3 Мостик для закрепления пленки 3 Планшет для образцов двойной 3 Планшет-фиксатор двойной 1 Емкость для реактивов вертикальная 4 Картридж для пленки 2 Планка прижимная 3 Поддон для ёмкостей 1 Емкость для дезинфекции 2 Шнур сетевой 1 Предохранитель 2А 2

Стартовый комплект реагентов на 800 анализов для проведения электрофореза белков в составе:

Мембрана из ацетата целлюлозы для электрофореза белков,57х95 мм, (50 шт./уп.)- 2 уп.

Клинитест- ЭФ 1 уп, РФ-18- 2 уп.

Компьютерный комплекс в составе: Системный блок OC Win10 Home

источник

Принцип работы основан на свойстве коллоидных частиц, несущих электрический заряд, и различных органических соединений (красителей белков), ионы которых имеют собственный заряд, передвигаться под действием электрического поля, возникающего между электродами, опущенными в раствор электролита.

Прибор состоит из: а) электронного блока питания; б) камеры для электрофореза.

Электронный блок питания предназначен для подачи стабилизированного напряжения на камеру для электрофореза.

Устройство и работа блока питания.

а) блок питания состоит из кожуха и шасси, жёстко скреплённых с лицевой панелью;

б) кожух и шасси крепятся четырьмя винтами;

в) на шасси расположены: силовой трансформатор, лампы и другие элементы блока питания;

г) на лицевой панели блока питания расположены: измерительный прибор, ручка переключателя рода работ: «Электрофорез-Выключено-Обесцвечивание», ручка переключателя «Измерение», ручка переключателя «Режим работы», ручка «Электрофорез», тумблер «Сеть», над тумблером расположена сигнальная лампочка, сигнализирующая о включении блока питания.

На задней стенке блока питания расположены: переключатель напряжения сети, предохранитель входной сети, предохранитель выходной сети, розетка и сетевой шнур питания.

Камера для электрофореза состоит из крышки, выполненной из органического стекла, и ванны. Камера изготовлена из кислотощелочностойкого материала. Ванна для электрофореза разделена на два отсека перегородкой. В ванне находятся электроды, служащие для получения электрического поля в отсеках. Электроды соединены с контактами ванны.

Полоски фильтровальной бумаги помещают между отсеками под электроды. Натяжение бумажных полосок между отсеками должно быть равномерным. В одну камеру помещают 6-8 бумажных полосок.

Камера закрывается крышкой. Конструкция камеры обеспечивает безопасность работы, т.к. предусматривает отключение напряжения при снятии крышки.

1. Установить тумблер «сеть» в верхнее положение (при этом должна загореться сигнальная лампочка) и дать прибору прогреться в течение 15 минут.

2. Установить ручку переключателя «Режим работы» на необходимый диапазон стабилизированного напряжения.

3. Установить ручку переключателя «Измерение» в положение, соответствующее переключателю «Режим работы».

4. Ручку переключателя «Электрофорез-Выключено-Обесцвечивание» установить в положение «Электрофорез».

5. Плавно поворачивая ручку «Электрофорез» по часовой стрелке установить на измерительном приборе необходимую величину стабилизированного напряжения.

В конической колбе приготовить 450 мл раствора хлорида бария С( 1 /z) = 0,003 моль/л. Приготовленный раствор электролита наливают в электрофоретическую ячейку так, чтобы уровень раствора был выше электродов.

На полоску фильтровальной бумаги размером 20 ´ 230 с помощью капилляра нанести по капле раствора метиленового синего и эозина диаметром 2 мм. Капли размещают в середине бумажки:

Затем полоску фильтровальной бумаги закрепляют в электрофоретической камере таким образом, чтобы концы этой бумаги находились под электродами, а капли – на уровне перегородки между отсеками. Фильтровальная бумага должна быть полностью смочена электролитом. В камеру помещают 6-8 бумажек.

Камеру закрывают плексиглазовой крышкой, присоединяют контакты от источника питания и включают прибор в соответствии с инструкцией.

Электрофорез проводят в течение 45-60 минут при рабочем напряжении 320В. После окончания опыта прибор выключают, перед снятием плексиглазовой крышки отмечают положение полюсов источника питания и определяют знаки зарядов ионов метиленового синего и эозина по направлению их движения к соответствующим полюсам. Затем измеряют расстояние между электродами и величину смещения капель – отрезок от центра первоначального положения до передней границы смещения.

На основании опытных данных рассчитывают величину x-потенциала по формуле Гельмгольца-Смолуховского. Необходимые для расчёта постоянные величины взять из справочника.

Экспериментальные и расчётные данные вносятся в таблицу:

Название красителя Элект- ролит Конц. электро-лита, (моль/л) Напря-жение на электро- дах Е, (В) Расстояние между электрода- ми L,(см) Градиент внешн. поля Н=Е/L, (В/см) Смеще-ние капли 1, (см) Время переме- щения капли t, (с) Скорость электро- фореза U=1/t, (см/с)
Метилено-вый синий
Эозин
Читайте также:  Техника проведения электрофореза при кривошее

Окрашенные ионы метиленового синего заряжены —————————

Окрашенные ионы эозина заряжены ————————-

x-потенциал ионов метиленового синего равен ————————(мВ)

x-потенциал ионов эозина равен ———————(мВ)

Вопросы:1. Какое явление лежит в основе данного метода определения знака заряда и величины электрокинетического потенциала коллоидной частицы?

2. У какого иона (метиленового синего или эозина) выше электрофоретическая подвижность?

3. К какому классу (кислотным или основным красителям) относятся используемые в эксперименте объекты анализа?

Контрольные вопросы.

  1. Чем объясняется наличие заряда у коллоидной частицы?
  2. В каких пределах изменяется величина электрокинетического потенциала?
  3. Какие факторы влияют на величину x-потенциала?
  4. Какими методами можно определить величину x-потенциала?
  5. Чем отличается явление электрофореза от электролиза?
  6. Как влияет на величину x-потенциала добавка индифферентного электролита?
  7. В каком случае коллоидная частица может поменять знак заряда?
  8. Как используется величина электрофоретической подвижности в анализе фармпрепаратов?

ЗАНЯТИЕ 2.2.3.

ТЕМА:Устойчивость и коагуляция золей.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:изучив теоретические основы устойчивости золей, научиться определять порог коагуляции золей и проводить коллоидную защиту золей.

ЗНАЧЕНИЕ ИЗУЧАЕМОЙ ТЕМЫ:

Изучение процессов коагуляции и пептизации представляет большой интерес для будущих провизоров. При изготовлении лекарственных форм, представляющих собой коллоидные растворы, их необходимо защищать от возможной коагуляции. При определении фармацевтических анализов гравиметрическим методом образование коллоидных растворов является отрицательным моментом, в связи, с чем необходимо их коагулировать.

Пептизация осадков в процессе гравиметрического анализа может привести к существенной ошибки. Коагуляция и пептизация лежат в основе многих процессов, протекающих в живых системах в норме и в патологии.

Коагуляция коллоидных растворов фосфата кальция и холестерина в крови приводит к образованию и отложению осадков на внутренней поверхности кровеносных сосудов (склеротические изменения сосудов). Свертывание крови, слипание эритроцитов в так называемые “монетные столбики”, также представляет собой процессы, аналогичные коагуляции. В основе процесса “растворения” тромбов лежит явление пептизации.

В гигиене и санитарии коагуляцию применяют для очистки питьевых и сточных вод.

Теоретические вопросы.

1. Кинетическая и агрегативная устойчивость коллоидных систем. Факторы устойчивости коллоидных систем.

2. Коагуляция и факторы её вызывающие.

3. Порог коагуляции. Правило Шульце-Гарди.

4. Чередование зон коагуляции. Коагуляция золей смесями электролитов. Явление привыкания. Взаимная коагуляция золей.

5. Физическая теория коагуляции ДЛФО.

6. Гелеобразование. Коллоидная защита. Пептизация.

7. Значение явления коагуляции в фармации.

Лабораторная работа

«Определение порога коагуляции. Коллоидная защита».

Программированный контроль по теме: «Устойчивость и коагуляция золей».

Обучающие задачи.

Задача 1. Пороги коагуляции золя гидроксида алюминия (III) (полученного в слабокислой среде) для электролитов КJО3 и К2Сr2О7 соответственно равны: 10,0 и 0,195 ммоль/л. Во сколько раз коагулирующая способность бихромата калия больше, чем иодата калия?

Решение: коагулирующая способность электролитов является величиной обратной их порогам коагуляции. 1/g КJО3 = 1/10 = 0,1; 1/g К2Сr2О7 = 1/0,195 = 5,1; 5,1 / 0,1 = 51 (раз).

Для золя гидроксида алюминия (111) коагулирующая способность бихромата калия больше, чем иодата калия в 51 раз.

Задача 2. В две колбы налито по 100 мл золя Fe(OH)3. Чтобы вызвать коагуляцию золя, потребовалось добавить в первую колбу 10,5 мл раствора КС1, С( 1 /z КС1) = 1,0 моль/л , во вторую – 37,0 мл раствора фосфата натрия С( 1 /z Nа3РО4) = 0,001 моль/л. Вычислить порог коагуляции для каждого электролита и определить знак заряда частиц золя.

Решение: а) определяем количество ммоль КС1 содержащихся в 10,5 мл его раствора:

n (КС1) = C( 1 /z КС1) . Vр-ра = 1,0 моль/л . 10,5 . 10 –3 л = 10,5 ммоль КС1.

б) определяем общий объём раствора (золь + раствор электролита): Vр-ра = 100 мл + 10,5 мл = 110,5 мл.

в) рассчитаем порог коагуляции для хлорида калия: g КС1= 10,5 . 1000/110,5мл = 95 ммоль/л

г) рассчитаем порог коагуляции для фосфата натрия:n(Nа3РО4) = 37,0 . 10 -3 л . 0,001моль/л = 0,037 ммоль.

g Na3РО4 = 0,037 . 1000 / 137 мл = 0,27 ммоль/л.

Электролиты КС1 и Nа3РО4 имеют катионы одинакового заряда, а анионы – разного заряда. Чем больше заряд иона, тем меньше порог коагуляции. Меньший порог коагуляции, а, следовательно, большая коагулирующая способность у ионов РО4 -3 . Вывод: частицы золя заряжены положительно.

Задачи для самостоятельного решения.

Задача 1. Запишите реакцию, с помощью которой можно получить золь гидроксида железа (111) методом гидролиза FеС13. Запишите формулу мицеллы этого гидрозоля. Объясните, как расположатся пороги коагуляции в ряду следующих электролитов: NаС1, А1С13, Na24, NаН2РО4 для данного золя.

Задача 2. Пороги коагуляции электролитов при разрушении исследуемого золя оказались равными (ммоль/л): для NaNO3 — 300; Na2SO4 – 290; MgC12 – 25; А1С13 – 0,5. Какие ионы электролитов являются для исследуемого золя коагулирующими? Каков знак заряда коллоидных частиц?

Задача 3. Запишите формулу мицеллы золя кремниевой кислоты, стабилизированного ионами SiO3 2- . Раствор Na2SO4 или FеС13 будет лучшим коагулятором золя?

Задача 4. Запишите структуру мицеллы золя, полученного добавлением к раствору серной кислоты избыточного количества раствора хлорида бария. Укажите, какой из электролитов: КС1, Fе2(SO4)3, СиС12, А1С13 будет иметь наименьший порог коагуляции для полученного золя?

«Определение порога коагуляции. Коллоидная защита»

Цель работы: Ознакомиться с методом определения порога коагуляции и влиянием высокомолекулярных веществ на порог коагуляции коллоидных систем.

Методика проведения эксперимента.

Опыт №1. Определение порога коагуляции золя гидроксида железа (111).

В шести пробирках приготовить указанные смеси:

Растворы О б ъ ё м ы ( мл. )
Золь 2,5 2,5 2,5 2,5 2.5 2,5
Вода 2,5 2,0 1,5 1,0 0,5
Электролит: р-р Nа2SO4, 0,0004 моль/л 0,5 1,0 1,5 2.0 2,5
Результаты наблюдения

Содержимое пробирок перемешивают и через 15 минут отмечают, в каких пробирках произошла коагуляция.

Запишите формулу для расчёта порога коагуляции и рассчитайте его значение для данного электролита.

Вопросы: 1. По какому признаку Вы определили коагуляцию?

2. Дайте определение порога коагуляции.

3.Какой наименьший объём раствора сульфата натрия вызывает коагуляцию?

Опыт №2. Определение порога коагуляции для защищённого и незащищённого золя.

Налейте в три пробирки по 4,5 мл золя гидроксида железа (111) и по 0,5 мл в первую – раствор желатина, во вторую – раствор крахмала, в третью – воды. Тщательно перемешайте растворы и добавляйте по каплям с помощью калиброванной пипетки при взбалтывании раствор сульфата натрия С(Nа24) = 0,2моль/л до первых признаков помутнения. Запишите объёмы электролита, вызвавшие коагуляцию защищённых и незащищённого золей.

Рассчитайте пороги коагуляции золя гидроксида железа а) защищённого желатином;

Сравните защитное действие желатина и крахмала.

Вопросы: 1. Можно ли защитить золь добавлением воды?

2. Каков механизм защитного действия ВМВ?

1. В чём основное отличие быстрой и медленной коагуляции?

2. Сформулируйте правило Шульце-Гарди.

3. Назовите два типа коагуляции по теории ДЛФО.

4. Почему большинство коллоидных систем термодинамически неустойчивы?

5. В чём состоит сущность коллоидной защиты?

6. Дайте определение антагонизму ионов.

7. Почему при разбавлении водой гидрозоль может коагулировать?

ТЕМА: Коллоидные поверхностно-активные вещества (ПАВ).

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: изучить свойства коллоидных ПАВ и научиться определять критическую концентрацию мицеллообразования в растворах коллоидных поверхностно-активных веществ.

ЗНАЧЕНИЕ ИЗУЧАЕМОЙ ТЕМЫ: Практически нет ни одной отрасли народного хозяйства, где бы не использовали мыла или мылоподобные вещества. Ценные технические свойства ПАВ обусловлены либо образованием в растворах мицелл, либо высокой поверхностной активностью, т.е. способностью их молекул образовывать поверхностные адсорбционные слои.

Свойства коллоидных ПАВ проявляют почти все дубящие вещества, являющиеся производными многоатомных фенолов, в которых полярными и ионогенными группами являются фенольные и карбоксильные группы.

Ряд синтетических красителей, например, бензопурпурин, ночной голубой проявляют в растворах все особенности, свойственные растворам коллоидных ПАВ. Ионогенными группами у коллоидных красителей служат карбоксильные группы, фенольные группы, сульфо-группы, амино-группы и т.д. Как и мыла, многие красители и танниды, дающие коллоидные растворы в воде, в спирте образуют молекулярные растворы.

Теоретические вопросы.

1. Коллоидные поверхностно-активные вещества: мыла, детергенты, танниды, некоторые красители.

2. Мицеллообразование в растворах коллоидных ПАВ.

3. Критическая концентрация в растворах коллоидных ПАВ и её определение.

4. Солюбилизация и её значение в фармации.

5. Коллоидные ПАВ в фармации.

Лабораторная работа

«Определение критической концентрации мицеллообразования».

Задача 1. При определении критической концентрации мицеллообразования (ККМ) олеата натрия по изменению поверхностного натяжения растворов в зависимости от концентрации раствора по методу Ребиндера получены следующие результаты:

С1 (моль/л) DР ( мм рт. ст.) s (н/м)
0 (вода) 5,2 74,22 ´ 10 -3
1,0 ´ 10 -4 3,1
2,0 ´ 10 -4 2,7
4,0 ´ 10 -4 2,0
8,0 ´ 10 -4 1,5
1,6 ´ 10 -3 1,3
3,2 ´ 10 -3 1,2

Определим постоянную прибора:

К = s воды / D р = 74,22 ´ 10 -3 / 5,2 = 14,27 ´ 10 -3

Определим s для растворов различных концентраций: Определим 1g С:
s1 = К ´ Р1 = 14,27 ´ 10 -3 ´3,1 = 44,24 ´ 10 -3 (н/м) 1g 1,0 ´ 10 -4 = -4,0
s2 = К ´ Р2 = 14,27 ´ 10 -3 ´ 2,7 = 38,53 ´ 10 -3 (н/м) 1g 2,0 ´ 10 -4 = -3,7
s 3 = К ´ Р3 = 14,27 ´ 10 -3 ´ 2,0 = 28,54 ´ 10 -3 (н/м) 1g 4,0 ´ 10 -4 = -3,4
s 4 = К ´ Р4 = 14,27 ´ 10 -3 ´ 1,5 = 21,41 ´ 10 -3 (н/м) 1g 8,0 ´ 10 -4 = -3,1
s 5 = К ´ Р5 = 14,27 ´ 10 -3 ´1,3 = 18,55 ´ 10 -3 (н/м) 1g 1,6 ´ 10 -3 = -2,8
s6 = К ´ Р6 = 14,27 ´ 10 -3 ´1,2 = 17,12 ´ 10 -3 (н/м) 1g 3,2 ´ 10 -3 = -2,5

Построим график зависимости s от 1gС

Задачи для самостоятельного решения.

Задача 1. Определить графически величину ККМ водного раствора некаля (алкилпроизводное нафталинсульфоновой кислоты) по изменению мутности растворов следующих концентраций:

w´10 2 (%) 0,25 0,50 0,75 1,0 1,5 2,0 3,0 3.5
Мутность раствора 0,029 0,030 0,035 0,08 0,50 0,85 1,35 1,60

Задача 2. Число ГЛБ лаурилсульфата калия равно 40. Можно ли его использовать для стабилизации эмульсии типа в/м?

Задача 3. Какой пенообразователь С4Н9ОН или С17Н33СОО — даёт более устойчивую пену?

«Определение критической концентрации мицеллообразования».

Цель работы: определить ККМ в растворах олеата натрия по значениям поверхностного натяжения.

Методика проведения эксперимента.

Приготовить из раствора олеата натрия С17Н33СООNа, молярная концентрация которого С = 0,01 моль/л, растворы следующих молярных концентраций: 5 . 10 -3 ; 2,5 . 10 -3 ; 1 . 10 -3 моль/л.

Из раствора с концентрацией равной 0,001моль/л приготовить растворы: 5 . 10 -4 ; 2,5 . 10 -4 и 1,25 . 10 -4 моль/л. Растворы нужно готовить в склянках с закрытыми пробками для уменьшения взаимодействия с СО2 воздуха. Посуду и пипетки предварительно необходимо тщательно промыть хромовой смесью, сполоснуть водой – сначала водопроводной, а затем – дистиллированной.

С помощью прибора Ребиндера измеряют разность давлений в обоих концах манометра (см. лабораторную работу №1), начиная измерения с наиболее разбавленного раствора и заканчивая наиболее концентрированным. Перед каждым измерением прибор промывают соответствующим раствором. Ввиду медленного установления равновесия в поверхностном слое скорость образования пузырька должна составлять 1 – 1,5 мин.

Концентрация раствора С, моль/л Давление р, мм.рт.ст. Поверхностное натяжение s, н/м 1g С
1,25 . 10 -4
2,5 . 10 -4
и т.д.

Построить график зависимости s от –1g С. По полученной кривой находят –1g ККМ и определяют ККМ (см. рис. в обучающей задаче 1).

s´10 3 (н/м)

-1g С

Точность метода, вычисленная по определению средней квадратичной ошибки, составляет 2-3%.

Вопросы: 1. Каково значение ККМ олеата натрия?

2. Почему строится график зависимости s от 1g С, а не от концентрации С?

1. Какие существуют методы определения ККМ?

2. Каковы особенности строения коллоидных поверхностно-активных веществ?

3. Как изменяется s при мицеллообразовании в растворах коллоидных ПАВ?

4. Является ли коллоидный раствор ПАВ равновесной системой?

5. Какую форму имеют мицеллы ПАВ в разбавленных растворах?

6. Что такое солюбилизация?

7. Каково применение солюбилизации в фармации?

ТЕМА: Суспензии и эмульсии

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: изучив свойства суспензий, провести седиментационный анализ и построить кривую распределения для суспензии сульфата бария или талька ( по заданию преподавателя).

ЗНАЧЕНИЕ ИЗУЧАЕМОЙ ТЕМЫ: На основе суспензий готовятся некоторые лекарственные формы, а также косметические препараты. Основным требованием к суспензиям, применяемым с этой целью, является определённый размер частиц дисперсной фазы и однородность (как можно меньшая полидисперсность). Основным методом анализа суспензий, применяемым в технологии лекарств, является седиментационный анализ. Суспензии также применяются в медицинской диагностике, например, суспензия ВаSО4.

Многие лекарственные формы представляют собой эмульсии, применяемые как для наружного (линименты, алоэ, тезана, спедиан, октимин), так и для внутреннего употребления (эмульсии касторового и вазелинового масла и др.) Некоторые эмульсии применяются для парентерального питания (липофундин). Эмульсионная лекарственная форма даёт возможность маскировать неприятный вкус масел, смягчать раздражающее действие лекарственных веществ на слизистую оболочку. Эта тема имеет большое значение и для изучения процессов, протекающих в живых системах. В крови и лимфе человека жиры находятся в эмульгированном состоянии. В процессе усвоения жиров происходит их эмульгирование в кишечнике солями желчных кислот, что облегчает всасывание жиров в кровь через стенки кишечника и их ферментативный гидролиз.

Природными эмульсиями являются молоко, яичный желток, млечный сок растений каучуконосов и др.

1. Получение и общие свойства суспензий.

2. Устойчивость суспензий и её нарушение.

4. Седиментационный анализ суспензий.

6. Применение суспензий и паст в фармации.

8. Методы получения эмульсий.

9. Эмульгаторы и механизм их действия.

10. Устойчивость эмульсий и её нарушение.

11. Свойства высококонцентрированных эмульсий.

12. Структурно-механический фактор устойчивости концентрированных эмульсий. Работы П.А.Ребиндера.

13. Применение эмульсий в фармации.

14. Аэрозоли. Классификация. Свойства и получение.

«Седиментометрический анализ суспензий».

Задача 1. При седиментационом анализе суспензии сульфата бария, применяемого в качестве контрастного вещества при рентгеноскопии, были получены следующие результаты:

Время оседания, с:
Количество осевшей суспензии в %

Построить дифференциальную кривую распределения по радиусам.

Плотность сульфата бария: 3,8 . 10 3 кг/м 3 , плотность воды: 1 . 10 3 кг/м 3 ,

вязкость воды: 1 . 10 -3 Н . с/м 2 ; высота: Н = 12 . 10 -2 м.

Решение: для построения дифференциальной кривой нужно найти радиусы отдельных фракций суспензии. Радиус частиц определяется по уравнению:

, где , откуда:

Рассчитаем Р/Dr для каждой фракции:
r1 = 3,62´10 -5 м; D r1— r2 = 1,06´10 -5 37 / 1,06 . 10 -5 = 3,49 . 10 6 ;
r2 = 2,56´10 -5 м; D r2— r3 = 0,47´10 -5 49 / 0,47 . 10 -5 = 10,42 . 10 6 ;
r3 = 2,09´10 -5 м; D r3— r4 = 0,29´10 -5 52 / 0,29 . 10 -5 = 17,93 . 10 6 ;
r4 = 1,80´10 -5 м; D r4— r5 = 0,18´10 -5 60 / 0,18 . 10 -5 = 33,33 . 10 6 ;
r5 = 1,62´10 -5 м; D r5— r6 = 0,14´10 -5 71 / 0,14 . 10 -5 = 50,71 . 10 6 ;
r6 = 1,48´10 -5 м; D r6— r7 = 0,20´10 -5 84 / 0,20 . 10 -5 = 42,00 . 10 6 ;
r7 = 1,28´10 -5 м; D r7— r8 =0,29´10 -5 92 / 0,29 . 10 -6 = 31,72 . 10 6 ;
r8 = 0,99´10 -5 м; D r8— r9 = 0,42´10 -5 98 / 0,42 . 10 -6 = 23,33 .10 6 .
r9 = 0,57´10 -5 м; D r9— r10 = 0,48´10 -5
r10 = 0,09´10 -5 м; Построим кривую распределения:
Читайте также:  Электрофорез на яичники как делают

Вывод: В суспензии преимущественно содер-

жатся частицы с радиусом (1,1-1,9)´10 -5 м.

Задача 1. Выберете стабилизаторы эмульсий типа «м/в» среди следующих веществ: желатин, тальк, гипс, мел, пальмиат натрия, олеат кальция.

Решение: стабилизировать эмульсии могут ПАВ и порошки. Из предложенных ПАВ стабилизатором эмульсии типа м/в будет растворимый в воде пальмиат натрия. Олеат кальция – нерастворимое в воде соединение подойдёт для стабилизации обратных эмульсий типа в/м. Из других предложенных веществ стабилизировать прямые эмульсии будут вещества имеющие некоторое сродство к воде, а именно: желатин, гипс и мел.

Задача 2. Как изменяется способность ионов вызывать обращение фаз эмульсии «м/в» в ряду: А1 +3 , Сr +3 , Ni +2 , Рb +2 , Ва +2 , Sr +2 ?

Решение: способность ионов вызывать обращение фаз эмульсий зависит в первую очередь от заряда иона и от его радиуса. В предложенном ряду уменьшается заряд ионов и их радиус, следовательно, будет уменьшаться и их способность вызывать обращение фаз эмульсии типа м/в.

Задачи для самостоятельного решения.

Задача 1. По данным седиментационного анализа суспензии серы в воде построить дифференциальную кривую распределения по радиусам:

Время оседания, с:
Количество осевшей суспензии в %

Плотность серы: 2,1 . 10 3 кг/м 3 ; плотность воды: 1 . 10 3 кг/м 3 ; h воды = 1 . 10 -3 н . с/м 2 ;

Задача 2. Определите типы эмульсий, если они стабилизированы: а) олеатом натрия;

Задача 3. Какой эмульгатор, порошок талька или диоксида кремния стабилизирует эмульсию типа «вода в масле»?

Задача 4. Какой фактор устойчивости наблюдается в разбавленной эмульсии, если она в соответствии с правилом Шульце-Гарди разрушается при добавлении А1С13?

«Седиментометрический анализ суспензий».

Цель работы: научиться проводить седиментационный анализ суспензий и определять размер частиц полидисперсной суспензии.

Методика проведения эксперимента.

Установить горизонтально торсионные весы по уровню с помощью опорных винтов 1 и 2 (см. рис.№1). Переместив вправо арретир 3, освободить коромысло весов. Рычагом 4 установить стрелку весов 5 на нуль. Стрелка 10 (указатель равновесия) должна совпадать с нулевой риской 8. Если совпадения с нулём нет, то указатель перевести в это положение винтом 7 (на задней стенке прибора). Установленные весы арретировать.

Суспензию талька или сульфата бария (по заданию преподавателя) с массовой долей равной 0,5% внести в стакан для седиментации и перемешать. Стакан выбрать такой, чтобы расстояние от его дна до дна чашечки было 2-3 см, от дна чашечки до поверхности жидкости 10-12 см и от бортов чашечки до стенок стакана 2-3см.

В другой стакан налить столько воды, чтобы уровень в нём был таким же, как в стакане с суспензией. Опустить в него чашечку, подвешенную на крючок 6 и взвесить её. Для этого освободить коромысло, переместив вправо арретир 3 и рычагом передвинуть стрелку 5 настолько, чтобы указатель 9 совпал с риской 8. Арретировать весы.

Массу чашечки Р отсчитать по шкале против стрелки 5. Одновременно измерить расстояние Н (см) от дна чашечки до поверхности жидкости.

Перед опытом суспензию в стакане перемешать 3-5 минут поступательным движением по вертикали стеклянной палочкой с резиновым диском на конце для равномерного распределения частиц в суспензии по всему объёму, затем быстро погрузить в стакан чашечку, подвешенную на крючок коромысла. Одновременно с погружением чашечки включить секундомер. Первый отсчёт сделать через 15 секунд, освободив коромысло передвижением арретира вправо. Дальнейшие отсчёты производить сначала через каждые 30 сек., а затем в связи с замедлением оседания с течением времени, увеличить интервалы времени между отсчётами до 1 – 2 мин, и, наконец, до 5 минут. Для каждого интервала сделать 2-3 замера и взять среднее значение. Если два отсч1та с интервалами 5 минут совпадают, опыт закончить. Полученные данные занести в таблицу и построить кривую оседания в координатах Р – t, мин.

Масса чашечки: ________ мг. Таблица.

Интервал времени, мин. Время оседания от начала опыта, мин. Масса чашечки с осадком Р1, мг Масса осевших частиц Р, мг Относительная масса осадка, %
0,25
и т.д.

Для построения кривой распределения необходимо:

1. Рассчитать r по формуле:

2. Наметить число фракций (обычно 5-6) и определить t мах и tмin для каждой фракции;

3. Рассчитать rmax и rmin для tmax и tmin для каждой фракции.

4. Построить кривую распределения.

5. В намеченных точках провести касательные и определить относительную массу каждой фракции. Для этой цели удобно пользоваться зеркальцем или лезвием бритвы. Зеркальце ставят перпендикулярно плоскости бумаги в выбранной точке, и поворачивают вокруг этой точки так, чтобы кривая на чертеже плавно переходила в своё отражение в зеркальце. По ребру зеркальца проводят радиус кривизны, перпендикуляр к которому соответствует касательной к данной точке.

6. Рассчитать Dr и Р/Dr для каждой фракции и занести все результаты в таблицу по форме:

Номер фракции tmax., мин. tmin., мин. rmin. . 10 6 , м rmax. . 10 6 , м Dr . 10 6 , м rср. . 10 6 , м Содержание фракции Р, %
и т.д.

По данным таблицы построить дифференциальную кривую распределения. Определить размеры частиц наиболее вероятной фракции в суспензии.

Охарактеризуйте устойчивость исследуемой суспензии.

Дайте классификацию данной системе по степени дисперсности.

Какие Вы знаете лекарственные препараты, применяющиеся в виде суспензий?

«Получение и свойства эмульсий».

Цель работы: Познакомиться с методами получения эмульсий, влиянием природы эмульгатора на тип эмульсии.

Методика проведения эксперимента.

Опыт 1. Получение эмульсий:

а) к 5 мл раствора масла в ацетоне прибавить по каплям при интенсивном перемешивании равный объём дистиллированной воды. Эмульсию оставить для последующего анализа.

б) смешать несколько капель растительного масла с 1 мл дистиллированной воды, тщательно встряхнуть. Эмульсию оставить для последующего анализа.

Вопросы:1. Назовите метод получения эмульсий.

2. Укажите тип образовавшихся эмульсий.

3.Являются ли полученные эмульсии устойчивыми?

Опыт 2. Получение эмульсии в присутствии олеата натрия.

К 1 мл раствора олеиновой кислоты с массовой долей 2% прибавить несколько капель растительного масла и 5 мл дистиллированной воды. Тщательно встряхнуть. К полученной эмульсии добавить 1 мл раствора щёлочи с массовой долей 10%. Эмульсию оставить для последующего анализа.

Вопросы: 1. Укажите тип полученной эмульсии.

2. Запишите уравнение химической реакции получения стабилизатора данной эмульсии.

3. Какова устойчивость полученной эмульсии?

Опыт 3. Методы определения типа эмульсии:

а) каплю эмульсии (опыт 1б) и каплю воды поместите рядом на предметное стекло. Наклоните стекло так, чтобы капли соприкоснулись.

Вопросы: 1. Происходит ли слияние капель?

3. Назовите метод определения типа эмульсии.

б) в полученные эмульсии введите водорастворимый краситель, тщательно перемешайте.

Каплю окрашенной эмульсии нанесите на предметное стекло и посмотрите под микроскопом.

Вопросы: 1. Как окрашена дисперсная фаза и дисперсионная среда в этих эмульсиях?

2. Как называется этот метод определения типа эмульсии.

Опыт 4. Обращение фаз эмульсий. (Опыт проводить под тягой).

а) В пробирку налить 1,5 мл раствора олеата натрия с массовой долей 2% и 1,5 мл окрашенного толуола. Полученную эмульсию разлить в две пробирки. В одну из пробирок добавить 1-2 капли судана, тщательно встряхнуть и через некоторое время каплю окрашенной эмульсии поместить на предметное стекло и рассмотреть под микроскопом.

Вопросы: 1. Назовите тип образовавшейся эмульсии.

2. Является ли данная эмульсия устойчивой?

б) К эмульсии, полученной в опыте 4а, прилить несколько капель раствора хлорида кальция и тщательно перемешать. Если произошло неполное обращение фаз, то добавьте ещё несколько капель раствора хлорида кальция.

Вопросы: 1. Укажите тип образовавшейся эмульсии.

2. Запишите уравнение химической реакции получения нового эмульгатора.

3. Объясните причину наблюдаемого явления.

1. Каково основное отличие эмульсий от суспензий?

2. Какие эмульсии относятся к разбавленным, концентрированным и высококонцентрированным?

3. Какое явление получило название обращение фаз эмульсии?

4. Что такое гидрофильно-липофильный баланс (ГЛБ)?

5. Укажите применение эмульсий в фармацевтической практике.

6. Почему эмульсии являются агрегативно неустойчивыми системами?

ТЕМА: «Физико-химические свойства дисперсных систем» (контрольная работа №2).

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Закрепление теоретического материала и решения задач. Рубежный контроль знаний студентов.

1. Основные этапы в развитии коллоидной химии. Т.Грэм и И.Г.Борщов – основатели коллоидной химии. Роль отечественных и зарубежных учёных в развитии коллоидной химии.

2. Дисперсные системы. Понятия дисперсной фазы и дисперсионной среды.

3. Диспергационные и конденсационные методы получения коллоидных систем.

4. Классификация дисперсных систем.

Последнее изменение этой страницы: 2016-12-30; Нарушение авторского права страницы

источник

* — при использовании 1-2 гребенок на гель.

  • литая ячейка из прозрачного пластика;
  • защитная крышка с проводами;
  • 2 заслонки для заливки геля;
  • 2 гребенки толщиной 1,5 мм (на 15 и на 20 лунок);
  • подложка;
  • заливочный столик.

Аксессуары и опции: заливочный столик, гребенки фиксированные,
регулируемые, препаративные, для многоканальных пипеток, держатели для гребенок.

  • Для разделения до 120 образцов;
  • УФ-прозрачная подложка для геля снабжена флуоресцентной линейкой;
  • гель можно заливать как непосредственно на подложке с использованием наклонных заслонок, так и с помощью заливочного столика;
  • возможно использование подложек различной длины;
  • широкий выбор подложек и других аксессуаров, включая препаративные гребенки, гребенки под многоканальные дозаторы, с фиксированной или регулируемой высотой;
  • размер геля, см — 15×10 / 15×15 / 15×20 / 15×25;
  • число гелей — 1;
  • заливочный столик включен в комплект поставки;
  • число образцов — 1-120**;
  • объем буфера, мл — 1000;
  • нет рециркуляции буфера;
  • миграция бромфенолового синего см/ч при 75 В — 3,0;
  • габариты, ШхДхВ, см — 18×40,5×9,4.

** — при использовании 1-4 гребенок на гель.

  • литая ячейка из прозрачного пластика;
  • защитная крышка с проводами;
  • 2 заслонки для заливки геля;
  • 2 гребенки толщиной 1,5 мм (на 15 и на 20 лунок);
  • подложка;
  • заливочный столик.

Аксессуары и опции: заливочный столик, гребенки фиксированные,
регулируемые, препаративные, для многоканальных пипеток, держатели для гребенок.

  • Для разделения до 120 образцов;
  • УФ-прозрачная подложка для геля снабжена флуоресцентной линейкой;
  • гель можно заливать как непосредственно на подложке с использованием наклонных заслонок, так и с помощью заливочного столика;
  • возможно использование подложек различной длины;
  • широкий выбор подложек и других аксессуаров, включая препаративные гребенки, гребенки под многоканальные дозаторы, с фиксированной или регулируемой высотой;
  • размер геля, см — 15×10 / 15×15 / 15×20 / 15×25;
  • число гелей — 1;
  • заливочный столик включен в комплект поставки;
  • число образцов — 1-120*;
  • объем буфера, мл — 1000;
  • нет рециркуляции буфера;
  • миграция бромфенолового синего см/ч при 75 В — 3,0;
  • габариты, ШхДхВ, см — 18×40,5×9,4.

* — при использовании 1-4 гребенок на гель.

  • литая ячейка из прозрачного пластика;
  • защитная крышка с проводами;
  • 2 заслонки для заливки геля;
  • 2 гребенки толщиной 1,5 мм (на 15 и на 20 лунок);
  • подложка;
  • заливочный столик.

Аксессуары и опции: заливочный столик, гребенки фиксированные,
регулируемые, препаративные, для многоканальных пипеток, держатели для гребенок.

  • Для разделения до 120 образцов;
  • УФ-прозрачная подложка для геля снабжена флуоресцентной линейкой;
  • гель можно заливать как непосредственно на подложке с использованием наклонных заслонок, так и с помощью заливочного столика;
  • возможно использование подложек различной длины;
  • широкий выбор подложек и других аксессуаров, включая препаративные гребенки, гребенки под многоканальные дозаторы, с фиксированной или регулируемой высотой;
  • размер геля, см — 15×10 / 15×15 / 15×20 / 15×25;
  • число гелей — 1;
  • заливочный столик включен в комплект поставки;
  • число образцов — 1-120*;
  • объем буфера, мл — 1000;
  • нет рециркуляции буфера;
  • миграция бромфенолового синего см/ч при 75 В — 3,0;
  • габариты, ШхДхВ, см — 18×40,5×9,4.

* — при использовании 1-4 гребенок на гель.

  • литая ячейка из прозрачного пластика;
  • защитная крышка с проводами;
  • 2 заслонки для заливки геля;
  • 2 гребенки толщиной 1,5 мм (на 15 и на 20 лунок);
  • подложка;
  • заливочный столик.

Аксессуары и опции: заливочный столик, гребенки фиксированные,
регулируемые, препаративные, для многоканальных пипеток, держатели для гребенок.

  • Для разделения до 120 образцов;
  • УФ-прозрачная подложка для геля снабжена флуоресцентной линейкой;
  • гель можно заливать как непосредственно на подложке с использованием наклонных заслонок, так и с помощью заливочного столика;
  • возможно использование подложек различной длины;
  • широкий выбор подложек и других аксессуаров, включая препаративные гребенки, гребенки под многоканальные дозаторы, с фиксированной или регулируемой высотой;
  • размер геля, см — 15×10 / 15×15 / 15×20 / 15×25;
  • число гелей — 1;
  • заливочный столик включен в комплект поставки;
  • число образцов — 1-120*;
  • объем буфера, мл — 1000;
  • нет рециркуляции буфера;
  • миграция бромфенолового синего см/ч при 75 В — 3,0;
  • габариты, ШхДхВ, см — 18×40,5×9,4.

* — при использовании 1-4 гребенок на гель.

  • литая ячейка из прозрачного пластика;
  • защитная крышка с проводами;
  • 2 заслонки для заливки геля;
  • 2 гребенки толщиной 1,5 мм (на 15 и на 20 лунок);
  • подложка;
  • заливочный столик.

Аксессуары и опции: заливочный столик, гребенки фиксированные,
регулируемые, препаративные, для многоканальных пипеток, держатели для гребенок.

  • Для разделения до 60 образцов;
  • УФ-прозрачная подложка для геля снабжена флуоресцентной линейкой;
  • гель можно заливать как непосредственно на подложке с использованием наклонных заслонок, так и с помощью заливочного столика;
  • возможно использование подложек различной длины;
  • широкий выбор подложек и других аксессуаров, включая препаративные гребенки, гребенки под многоканальные дозаторы, с фиксированной или регулируемой высотой;
  • взаимозаменяемые подложки для геля 15х10 см и держатели гребенок камер Wide Mini-Sub Cell GT и Sub-Cell GT;
  • размер геля, см — 15×7 / 15×10;
  • число гелей — 1;
  • можно использовать готовые гели;
  • заливочный столик включен в комплект поставки;
  • число образцов — 10-60*;
  • объем буфера, мл — 650;
  • нет рециркуляции буфера;
  • миграция бромфенолового синего см/ч при 75 В — 4,5;
  • габариты, ШхДхВ, см — 17,8×25,5×6,8.

* — при использовании 1-2 гребенок на гель.

  • литая ячейка из прозрачного пластика;
  • защитная крышка с проводами;
  • 2 заслонки для заливки геля;
  • 2 гребенки толщиной 1,5 мм (на 15 и на 20 лунок);
  • подложка;
  • заливочный столик.

Аксессуары и опции: заливочный столик, гребенки фиксированные,
регулируемые, препаративные, для многоканальных пипеток, держатели для гребенок.

  • Размер геля 12,5×7,6 мм;
  • ударопрочный литой корпус из прозрачного полистирола;
  • УФ-прозрачная гелевая рамка, визуализация результатов анализа на трансиллюминаторе без снятия геля с подложки;
  • заливочное устройство, с резьбовым зажимом, предотвращает утечку геля;
  • рабочий объем буфера, мл размер геля, см — 250;
  • рабочие условия, В / мА / Вт — 250 / 150 /
  • Для быстрого анализа небольшого количества образцов, небольшие фрагменты ДНК могут быть разделены за 15 минут при напряжении 150 В;
  • УФ-прозрачная подложка для геля снабжена флуоресцентной линейкой;
  • гель можно заливать как непосредственно на подложке с использованием наклонных заслонок, так и с помощью заливочного столика;
  • возможно использование подложек различной длины;
  • широкий выбор подложек и других аксессуаров, включая препаративные гребенки, гребенки под многоканальные дозаторы, с фиксированной или регулируемой высотой;
  • возможность разделения одновременно до 30-ти образцов;
  • длина геля 7 или 10 см;
  • размер геля, см — 7×7 / 7×10;
  • число гелей — 1;
  • можно использовать готовые гели;
  • заливочный столик включен в комплект поставки;
  • число образцов — 8-30*;
  • объем буфера, мл — 270;
  • нет рециркуляции буфера;
  • миграция бромфенолового синего см/ч при 75 В — 4,5;
  • габариты, ШхДхВ, см — 9,2х25,5х5,6.
Читайте также:  Противопоказания к электрофорезу зубов

* — при использовании 1-2 гребенок на гель.

  • литая ячейка из прозрачного пластика;
  • защитная крышка с проводами;
  • 2 заслонки для заливки геля;
  • 2 гребенки толщиной 1,5 мм (на 8 и на 15 лунок);
  • подложка;
  • заливочный столик.

Аксессуары и опции: заливочный столик, гребенки фиксированные,
регулируемые, препаративные, для многоканальных пипеток, держатели для гребенок.

  • Для быстрого анализа небольшого количества образцов, небольшие фрагменты ДНК могут быть разделены за 15 минут при напряжении 150 В;
  • УФ-прозрачная подложка для геля снабжена флуоресцентной линейкой;
  • гель можно заливать как непосредственно на подложке с использованием наклонных заслонок, так и с помощью заливочного столика;
  • возможно использование подложек различной длины;
  • широкий выбор подложек и других аксессуаров, включая препаративные гребенки, гребенки под многоканальные дозаторы, с фиксированной или регулируемой высотой;
  • возможность разделения одновременно до 30-ти образцов;
  • длина геля 7 или 10 см;
  • размер геля, см — 7×7 / 7×10;
  • число гелей — 1;
  • можно использовать готовые гели;
  • заливочный столик включен в комплект поставки;
  • число образцов — 8-30*;
  • объем буфера, мл — 270;
  • нет рециркуляции буфера;
  • миграция бромфенолового синего см/ч при 75 В — 4,5;
  • габариты, ШхДхВ, см — 9,2×25,5×5,6.

* — при использовании 1-2 гребенок на гель.

  • литая ячейка из прозрачного пластика;
  • защитная крышка с проводами;
  • 2 заслонки для заливки геля;
  • 2 гребенки толщиной 1,5 мм (на 8 и на 15 лунок);
  • подложка;
  • заливочный столик.

Аксессуары и опции: заливочный столик, гребенки фиксированные,
регулируемые, препаративные, для многоканальных пипеток, держатели для гребенок.

Электрофорезная горизонтальная камера Mini-Sub Cell GT System, 7х10 см, 8 и 15 лунок, 1,5 мм, заливочный столик, Bio-Rad.

  • Для быстрого анализа небольшого количества образцов, небольшие фрагменты ДНК могут быть разделены за 15 минут при напряжении 150 В;
  • УФ-прозрачная подложка для геля снабжена флуоресцентной линейкой;
  • гель можно заливать как непосредственно на подложке с использованием наклонных заслонок, так и с помощью заливочного столика;
  • возможно использование подложек различной длины;
  • широкий выбор подложек и других аксессуаров, включая препаративные гребенки, гребенки под многоканальные дозаторы, с фиксированной или регулируемой высотой;
  • возможность разделения одновременно до 30-ти образцов;
  • длина геля 7 или 10 см;
  • размер геля, см — 7×7 / 7×10;
  • число гелей — 1;
  • можно использовать готовые гели;
  • заливочный столик включен в комплект поставки;
  • число образцов — 8-30*;
  • объем буфера, мл — 270;
  • нет рециркуляции буфера;
  • миграция бромфенолового синего см/ч при 75 В — 4,5;
  • габариты, Ш × Д × В, см — 9,2 × 25,5 × 5,6.

* — при использовании 1-2 гребенок на гель.

Источник питания 10-300 В, 4-400 мА, 75 Вт, 4 выхода, PowerPac Basic, Bio-Rad

  • Выходное напряжение, В — 10-300;
  • выходной ток, мА — 4-400;
  • выходная мощность, Вт — 75;
  • выход на 4 э/ф камеры;
  • таймер, мин — 1-999;
  • режимы работы — постоянное напряжение, постоянный ток, таймер, пауза;
  • безопасность — защита от перегрузки, короткого замыкания, выявление отсутствия нагрузки и внезапного изменения нагрузки, автоматическое восстановление в случае отказа электропитания;
  • габариты, мм — 210 × 245 × 65;
  • вес, кг — 1,1.

Стартовый комплект системы электрофореза Power Snap Snap Invitrogen E-Gel, EX 1%, предоставляет все необходимое для быстрого начала работы с предварительно приготовленными агарозными гелями E-Gel EX 1% в системе для упрощенного процесса гель-электрофореза и визуализации геля.

  • система электрофореза E-Gel Power Snap (кат. № G8300);
  • 10 агарозных гелей E-Gel EX, 1% (кат. № G401001);
  • E-Gel 1 Kb Plus Express ДНК-лестница с буфером для загрузки образцов электронного геля (1X) (Кат. № 10488091);
  • нож для открывания геля (кат. № EI9010).

Mupid-Exu –электрофорезная горизонтальная камера в комплекте с отсоединяемым источником питания и 7 различными выходными напряжениями, подложка и камера прозрачны для Уф. Просматривать гель можно установив камеру прямо на трансиллюминатор.

  • Объем буфера, мл – 270-320;
  • УФ-прозрачная электрофоретическая ячейка и подложка для геля — пропускание 50% при 254 нм, 80% — при 312 нм;
  • размер гелей/число лунок — 125мм х 60мм, 125мм х 122мм / 26 лунок шириной 2 мм, интервалом 4,5 мм, 13 лунок шириной 6 мм, интервалом 9 мм;
  • совместимость с многоканальными пипетками;
  • подложки для геля, гребенки и заливочный столик выполнены из термоустойчивого пластика для использования в горячей воде до 100 °C;
  • размер заливочного столика, ШхДхВ, мм – 149х125х20;
  • размер подложки для гелей размером 125 х 60 мм, ШхДхВ, мм – 130х59,5х13;
  • размер подложки для гелей размером 125 х 122 мм, ШхДхВ, мм – 130х122х13;
  • мультифункциональный источник питания:
    таймер 0-99 мин, функциями паузы; автоматическое запоминание последних использованных значений напряжения и таймера;
    7 возможных выходных напряжения — 135, 100, 50, 25, 70, 35, 18 В;
  • автоматическое отключение питания при удалении крышки;
  • габариты ячейки, ШхДхВ, см — 18,3×16,4×5,6;
  • габариты источника питания, ШхДхВ, см – 7,5х17х6,2;
  • вес источника питания, г – 410.

  • ячейка из УФ-прозрачного пластика;
  • защитная крышка;
  • источник питания;
  • комплект для заливки гелей X-MS (2 подложки для гелей размером 125 х 60 мм;1 подложка для гелей размером 125 х 122 мм; 4 двусторонних гребенки на 13 и 26 лунок (13 лунок шириной 6 мм, интервалом 9 мм, толщиной 1 мм; 26 лунок шириной 2 мм, интервалом 4,5 мм, толщиной 1 мм); заливочный столик).

  • электрофоретическая ячейка с крышкой;
  • защитная крышка;
  • источник питания;
  • комплект для заливки гелей X-MS в составе из подложки для геля X-GL, 2 подложки для геля X-GS, 4 стандартных гребенки, заливочный столик;
  • подложка для геля X-GL (2 шт./уп.);
  • подложка для геля X-GS (4 шт./уп.);
  • заливочный столик;
  • гребенка стандартная X-C1 (2 шт./уп.);
  • комплект для заливки гелей стандарт GML;
  • комплект для заливки гелей термоустойчивый GM-HR.

Mupid-One – электрофорезная горизонтальная камера в комплекте с отсоединяемым источником питания и 7 различными выходными напряжениями, набором для заливки гелей из термоустойчивого пластика.

  • Объем буфера, мл – 270-320;
  • размер гелей/число лунок — 125мм х 60мм, 125мм х 122мм / 26 лунок шириной 2 мм, интервалом 4,5 мм, 13 лунок шириной 6 мм, интервалом 9 мм;
  • совместимость с многоканальными пипетками;
  • подложки для геля, гребенки и заливочный столик выполнены из термоустойчивого пластика для использования в горячей воде до 100 °C;
  • размер заливочного столика, ШхДхВ, мм – 149х125х20;
  • размер подложки для гелей размером 125 х 60 мм, ШхДхВ, мм – 130х59,5х13;
  • размер подложки для гелей размером 125 х 122 мм, ШхДхВ, мм – 130х122х13;
  • мультифункциональный источник питания:
    таймер 0-99 мин, функциями паузы; автоматическое запоминание последних использованных значений напряжения и таймера;
    7 возможных выходных напряжения — 135, 100, 50, 25, 70, 35, 18 В;
  • автоматическое отключение питания при удалении крышки;
  • габариты ячейки, ШхДхВ, см — 18,3×16,4×5,6;
  • габариты источника питания, ШхДхВ, см – 7,5х17х6,2;
  • вес источника питания, г – 410.

  • ячейка электрофоретическая;
  • защитная крышка;
  • источник питания;
  • комплект для заливки гелей HR (2 шт. подложки S-HR, подложка L-HR, 4 шт. гребенки HR, заливочный столик HR, центральный разделитель HR).

  • комплект для заливки гелей стандарт GML;
  • комплект для заливки гелей термоустойчивый GM-HR;
  • электрофоретическая ячейка с крышкой;
  • защитная крышка;
  • источник питания;
  • комплект для заливки гелей HR — из подложка для геля S-HR, 2 подложки для геля L-HR, 4 гребенки HR, заливочный столик;
  • подложка для геля L-HR, 2 шт./уп.;
  • подложка для геля S-HR, 4 шт./уп.;
  • заливочный столик;
  • гребенка HR, 2 шт./уп.

Система препаративного электрофореза для разделения и выделения только фрагментов ДНК размером от 50 до 8000 п.о.; детекция фракций осуществляется без использования УФ, что гарантирует отсутствие повреждения фрагментов.

  • напряжение при электрофорезе, В — 100 или 150;
  • ток (на каждую дорожку), мА — 2 или 3;
  • длина волны возбуждения, нм – 535;
  • длина детекции, нм – 640;
  • максимальное количество ДНК:
    10 мкг фрагментированной геномной ДНК;
    4 мкг ДНК определённого размера;
  • точность и воспроизводимость выделения, % — 5-10, в зависимости от геля;
  • выход образца, % — 50-80;
  • габариты, ШхГхВ, см — 18x28x53;
  • вес, кг — 7.

В системе используются готовые кассеты на пять изолированных капилляров, заполненных агарозным гелем. В конце каждого капилляра есть Y-образное разветвление. Оба выходящих капилляра имеют независимое подключение к катодам. Движение фрагментов ДНК в капилляре как и в «классической» методике происходит под действием тока, но при приближении фрагментов ДНК требуемого размера к месту разветвления, происходит переключение катодов, и искомый фрагмент попадает в боковое ответвление капилляра и собирается в канале для сборки.

  • за один сеанс система может работать параллельно с 4 образцами + 1 внешний стандарт или с 5 образцами при использовании внутреннего стандарта; время подготовки — 3 минуты, время проведения самой процедуры – 50-100 мин в зависимости от размеров фрагментов;
  • благодаря готовым гелевым чипам достигается максимальная воспроизводимость экстракции и, как следствие, более точный результат секвенирования;
  • каналы, в которых идёт разгонка, полностью изолированы друг от друга, что снижает риск перекрёстной контаминации;
  • отбор осуществляется, автоматически в соответствии с заданным через ПО диапазоном длин фрагментов, что может использоваться для секвенирования спаренных концов.

  • приготовление библиотек при проведении NGS;
  • подготовка образцов для парноконцевого секвенирования, ChIP-секвенирования;
  • улучшение библиотек при проведении эмульсионной ПЦР;
  • выделение белков и НК.

0,75%агарозныекартриджи BluePippin

± 5 (с интеркалирующим красителем)

± 5 (с интеркалирующим красителем)

± 5 (с интеркалирующим красителем)

± 5 (с интеркалирующим красителем)

  • Максимальная нагрузка ДНК на дорожку:
    • 10 мкг фрагментированной геномной ДНК;
    • 2 мкг ДНК определённого размера;
  • минимальная нагрузка ДНК:
    • от нескольких нг фрагментированной геномной ДНК;
    • 50 нг ДНК определённого размера;
  • максимальная нагрузка белка — 3,5 мкг;
  • максимально возможное количество получаемого образца на выходе — 40 мкл;
  • длина волны возбуждения, нм — 470;
  • длина детекции, нм — 525;
  • источник света — светодиоды LED;
  • напряжение при электрофорезе, В — 25, 100 и 150 (постоянный ток), или 100 в режиме пульс-электрофореза;
  • ток (на каждую дорожку), мА — 2 или 3;
  • точность и воспроизводимость выделения, % — 5-10, в зависимости от геля;
  • точность (режим постоянного тока), % — >93;
  • воспроизводимость (режим постоянного тока), % — >92;
  • минимальное распределение по размерам, % — 8;
  • выход образца, % — 50-80;
  • габариты, ШхГхВ, см — 28х53х18;
  • вес, кг — 7.

Принцип работы: в системе используются готовые картриджи на пять изолированных капилляров, заполненных агарозным гелем разной процентной концентрации, которая выбирается пользователем в зависимости от величины фрагмента образца. В конце каждого капилляра имеется Y-образное разветвление. Оба выходящих капилляра имеют независимое подключение к катодам. Движение фрагментов ДНК в капилляре как и в «классической» методике происходит под действием тока, но при приближении фрагментов ДНК требуемого размера к месту разветвления, происходит переключение катодов, и искомый фрагмент попадает в боковое ответвление капилляра и собирается в канале для сборки. Для проведения электрофореза нуклеиновых кислот используется Tris-TAPS (или Трис-ТАПС) буфер, для белков — SDS-буфер. Программное обеспечение определяет время элюирования на основе миграции ДНК-маркера.

4 режима программирования:

  1. Tight (узкий) – сбор коротких фрагментов образца, выбирается в основном для работы с молекулами небольших размеров.
  2. Range (диапазон) – пользователь может сам выбрать диапазон размера фракций который ему необходим. Подход используется, когда не важна высокая точность исследования.
  3. Time (время) – коллекционирование образцов происходит в зависимости от заданного времени. Подход используется, когда не важна высокая точность исследования.
  4. Peak (пик) – сбор пиков (нескольких фрагментов разного размера).

3 стратегии детектирования фракций:

  • Для ДНК малых размеров (90 п.н. -1,5 тыс.п.н.):
    Стратегия без окрашивания с внутренними флуоресцентно-мечеными маркерами. В качестве внутренних стандартов используются флуоресцентно-меченые маркеры ДНК, определенной молекулярной массы. Добавляются в лунку совместно с исследуемым образцом. Одновременно возможен анализ 5 образцов.
  • Для ДНК больших размеров (> 2 тыс. п.н.):
    Стратегия без окрашивания с внешним флуоресцентно-меченым маркером. В качестве внешнего стандарта используется флуоресцентно-меченый маркер ДНК определённой молекулярной массы, добавляется в отдельную лунку. Одновременно возможен анализ 4 образцов + 1 внешний стандарт.
  • Для выделения ДНК с дорожки (band capture) (> 2 тыс. п.н.):
    Окрашивание образцов флуоресцентным красителем Midori Green. Образцы окрашиваются флуоресцентным красителем Midori Green. Одновременно возможен анализ 4 образцов + 1 внешний стандарт.
  • Время подготовки — 3 минуты, время проведения самой процедуры — 50-100 мин в зависимости от размеров фрагментов.
  • Благодаря готовым гелевым чипам достигается максимальная воспроизводимость экстракции и, как следствие, более точный результат секвенирования.
  • Каналы, в которых идёт разгонка, полностью изолированы друг от друга, что снижает риск перекрёстной контаминации.
  • Отбор осуществляется, автоматически в соответствии с заданным через ПО диапазоном длин фрагментов, что может использоваться для секвенирования спаренных концов.
  • Отбор образцов из пробоотборной камеры производится вручную с помощью стандартного дозатора.
  1. Пробоподготовка:
    • Подготовка материала, если используются внутренние стандарты: образец ДНК довести до 30 мкл ТЕ буфером, добавить 10 мкл флуоресцентно — меченного маркера.
    • Подготовка материала, если используется внешний стандарт: образец ДНК довести до 30 мкл ТЕ буфером, добавить 10 мкл загрузочного раствора. 40 мкл готового стандарта помещается в отдельную дорожку.
    • В случае с красителем Midori Green, 40 мкл красителя помещается в каждую из пяти + буферную камеру и при включении тока будет двигаться на встречу образцам.
  2. Эксперимент:
    • Выбираем картридж в соответствии со стратегией, с помощью которой будет производиться детектирование НК;
    • помещаем картридж в прибор и выбираем её в ПО из списка предложенных программой (ПО само установит все необходимые параметры для проведения электрофореза под выбранный картридж);
    • По истечении времени, заданного программой, образец аккуратно собираем из коллектора фракций пипеточным дозатором.

Информация о свежих статьях:

1. Nature Methods. Assembly and diploid architecture of an individual human genome via single-molecule technologies (июнь, 2015); Authors: Matthew Pendleton, Robert Sebra, Andy Wing Chun Pang, Ajay Ummat et al.
2. BioTechniques. Optimization and cost-saving in tagmentation-based mate-pair library preparation and sequencing. (май, 2015) DOI:10.1038/nmeth.3454; Authors: Kaori Tatsumi, Osamu Nishimura, Kazu Itomi, Chiharu Tanegashima, and Shigehiro Kuraku.

Для проведения пульс-электрофореза применяется специальный источник питания Pippin Pulse.

источник

0,75% агарозные картриджи PippinPrep 1,5% агарозные картриджи 2% агарозные картриджи 3% агарозные картриджи
Количество образцов 4 4 4 4 4
Диапазон размеров НК 1000-50000 п.о. 2000-8000 п.о. 180-1500 п.о. 100 – 600 п.о. 50 – 200 п.о.
Точность детекции, %