У взрослого человека можно получить методом электрофореза виды гемоглобина

Принцип метода одинаков с заложенным в основу электрофоретического отделения сывороточных белков. В данном электрическом поле частицы, несущие определенную электрическую зарядку, перемещаются более или менее в зависимости от силы электрического поля, электрической зарядки, величины и формы молекулы.

Что касается гемоглобина основным фактором электрофоретического отделения является электрическая зарядка, поскольку форма и величина молекулы одинаковы для различных видов гемоглобина.

Электрофорез гемоглобина практикуется во всех используемых вариантах в отношении белков, в том числе, электрофорез на бумаге, в агаровом геле, в геле и блоке крахмала, в геле полиакриламида, на уксуснокислом целлюлозе. Каждая из этих разновидностей представляет свое преимущество, которое следует учитывать при выборе соответствующего метода.

Необходимая аппаратура — электрический источник питания и бак (ванна) для буфера; используемые материалы в качестве миграционной питательной среды почти полностью соответствуют применяемым для электрофореза сывороточных белков.

Электрофорез гемоглобина в блоке крахмала отличается рядом преимуществ, в силу которых ему отдается предпочтение при исследовании гемоглобинопатии. На этой питательной среде можно отделить почти все виды физиологического и патологического гемоглобина, даже когда он находится в малом концентрации. Не требует окраски. Промывание и количественная оценка осуществляются легко, используемый крахмал не требует специальной обработки, дешевый и побывается без затруднений.

Материалы для электрофореза гемоглобина в блоке крахмала: картофельный крахмал; аппарат для электрофореза, слагающийся из выпрямителя, бака для буфера и пластинки из плексигласса, на которую наносится крахмал; буфер веронал-мединал — 8,8 показатель водорода и 0,5 ионная мощность; веронал 1,84; мединал 10,8; лактат кальция 0,384; дистилированная вода до 1000 мл; 2% раствор цианистого натрия.

В стекляную или эмалированную посуду насыпать 150—200г крахмала и залить 300—400 мл дистилированной воды. Помешать, после осаждения крахмала слить воду и налить буфер веронал-мединал; хорошо перемешать и оставить 30—40 минут, в случае надобности можно сохранить на ночь в холодильнике. После гомогенизации приготовленный таким образом крахмал наносится на пластинку плексигласса, при этом слой его должен иметь 5 мм толщины.

Поскольку по краям пластинки имеется ободочек соответствующей толщины, крахмал не стекает с пластинки. Слой оседаемого крахмала однородный. Лишнее количество буфера удалить фильтровальной бумагой.

На одну пластинку крахмала можно нанести одновременно несколько проб для миграции, причем их число зависит от величины пластинки. Наносить их (по 2—3 капли) на расстоянии 4—5 см от края пластинки, между образцами оставлять расстояние 3—4 см.

До начала миграции гемолизаты обработать цианистым натрием в целях преобразования гемоглобина в цианметгемоглобин — весьма устойчивый вид. На 5—6 капель раствора гемоглобина добавить каплю 2% раствора цианистого натрия.

Пластинку спустить в бак, при этом пятна направляются в сторону отрицательных электродов; связь с буферным раствором наладить с помощью фильтровальной бумаги. Миграция происходит при напряжении 200 вольт, ампераж в зависимости от размеров пластинки с крахмалом и толщины слоя последнего. Время миграции 18—20 часов.

В описанных условиях проба гемоглобина от человека в норме мигрирует от отрицательного к положительному полюсу и делится на две фракции: основную (97—98%) на первом плане, представляющую собой гемоглобин А1, а позади, на расстоянии 3—4 см, вторую (2—3%), составляющую гемоглобин А2.

При таких условиях из крови пуповины также отделяются две фракции: одна из них составляет 30—40% — гемоглобин А1, вторая — гемоглобин Ф, расположенная между гемоглобином А1 и гемоглобином А2, на очень близком расстоянии от первого.

Количественное определение отделенных, путем электрофореза, фракций осуществляется промыванием а затем фотометрированием.

Отделенные пятна вырезать и каждый из них вложить в пробирку. В другой пробирке промыть участок чистого крахмала, соответствующего по величине площади, занимаемой гемоглобином А2, в качестве контрольного препарата для фотометрирования.

В каждую пробирку влить одинаковое количество буфера. Взболтать, гемоглобин переходит в раствор, в то время как крахмал оседает на дно пробирки. После оседания надосадочную массу профильтровать, процентрифугировать и прочитать результат с помощью фотометра или спектрофотометра с фильтром, соответствующим длине волны 540 нм. Значение данной фракции в процентном отношении выводится из суммы экстинкий, составляющей 100% экстинкций каждой фракции, деленной на общую экстинкцию.

Нормальные физиологические значения гемоглобина, полученные в подобных условиях, составляют 2—3% гемоглобина А2 и 97—98% гемоглобина А1.

Если подвергнуть электрофорезу раствор гемоглобина из крови больного с аномальным гемоглобином, то последняя, в зависимости от имеющейся в ней электрической зарядки, мигрирует медленнее или быстрее нормального гемоглобина, тем самым способствуя ее отделению и количественному определению.

Вливаемый в ванну буфер можно исплоьзовать несколько раз, при условии изменения направления тока после каждой миграции.

источник

При серповидноклеточной анемии метод УЗИ может выявить:

• увеличение селезенки и печени;
• наличие инфарктов во внутренних органах (в селезенке, печени, почках и других);
• нарушение кровообращения во внутренних органах;
• нарушение кровотока в конечностях.

Рентгенологическое исследование позволяет выявить:

• деформацию и расширение тел позвонков ;
• деформацию и истончение костей скелета
• наличие остеомиелита

Основные методы лечения серповидно-клеточной анемии направлены на снятие симптоматики (то есть, лечение является симптоматичным) и лечение сопутствующих или фоновых заболеваний. Симптоматика при острых кризах блокируется с помощью антибиотиков и гидратации (вливания жидкости). В более запущенных состояниях применяются обезболивающие препараты, кислород.

Принципами лечения серповидноклеточной анемии являются:

• правильный образ жизни;
• повышение количества эритроцитов и гемоглобина;
• кислородотерапия;
• устранение болевого синдрома;
• устранение избытка железа в организме;
• профилактика и лечение инфекционных заболеваний.

Образ жизни пациентов с серповидноклеточной анемией

Если у человека диагностирована серповидноклеточная анемия, ему следует соблюдать определенные рекомендации, которые позволят облегчить течение заболевания и минимизировать риск развития осложнений.

Пациентам с серповидноклеточной анемией рекомендуется:

• проживать на высоте не более 1500 метров над уровнем моря;
• проживать в зоне с умеренным климатом (исключающим воздействие экстремально низких или высоких температур);
• употреблять не менее 1,5 литров жидкости ежедневно;
• исключить прием алкогольных напитков и наркотиков;
• отказаться от курения (как самому больному человеку, так и членам его семьи);
• избегать тяжелых физических нагрузок;
• выбирать профессию, не связанную с тяжелой физической работой или воздействием высоких/низких температур.

Соблюдение перечисленных выше правил может предотвратить появление любых симптомов серповидноклеточной анемии у людей с гетерозиготной формой заболевания, однако пациентам с гомозиготной формой требуются и другие лечебные мероприятия.

Повышение количества эритроцитов и гемоглобина

Одним из основных факторов, определяющих тяжесть течения заболевания, является анемия (недостаток эритроцитов и гемоглобина в крови), развивающаяся на фоне усиленного разрушения красных клеток крови. Устранение анемии может предотвратить появление определенных симптомов заболевания и улучшить состояние пациента в целом.

Повышение количества эритроцитов и уровня гемоглобина

Кислородотерапия

Частота и выраженность гемолитических кризов определяет тяжесть клинического течения серповидноклеточной анемии. Как уже говорилось, развитию гемолитического криза предшествуют различные состояния, сопровождающиеся гипоксией. Применение кислорода в первые минуты или часы после начала гемолиза предотвращает образование и последующее разрушение серповидных эритроцитов. Это облегчает течение заболевания, уменьшает риск развития осложнений и улучшает качество жизни пациента.

Пациент с развивающимся гемолитическим кризом должен быть госпитализирован как можно скорее. Непосредственно в машине скорой помощи ему дается кислородная маска, которая обеспечивает подачу кислорода со скоростью 4 – 6 литров в минуту. После поступления в стационар кислородотерапия продолжается на протяжении нескольких часов или дней.

Устранение болевого синдрома

Как говорилось ранее, закупорка кровеносных сосудов приводит к развитию ишемии пораженного органа, что сопровождается сильнейшей болью. С целью устранения болевого синдрома применяются наркотические анальгетики (обезболивающие средства), так как ишемические боли не купируются другими медикаментами. Вначале препараты вводятся внутривенно (быстрее наступает обезболивающий эффект). После купирования острого приступа боли переходят на таблетированные формы препаратов.

Дата добавления: 2018-04-15 ; просмотров: 787 ; ЗАКАЗАТЬ РАБОТУ

источник

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет определить процентное содержание основных изоформ гемоглобина и провести скрининг гемоглобинопатий. В норме в крови взрослого человека не менее 96,5 % гемоглобина представлено изоформой HbA, которая состоит из двух пар полипептидных цепей (глобинов): 2α и 2β, каждая из которых связана с гемом. Гемоглобинопатии связаны с наличием аномального варианта гемоглобина. Посредством электрофореза гемоглобина можно проводить скрининг состояний, связанных со структурными аномалиями гемоглобина. При этом метод не позволяет установить тип и характер гемоглобинопатии.

Синонимы английские

Serum Hemoglobin Electrophoresis.

Электрофорез и денситометрия.

Мг/дл (миллиграмм на децилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет определить процентное содержание основных изоформ гемоглобина и провести скрининг гемоглобинопатий. В норме в крови взрослого человека не менее 96,5 % гемоглобина представлено изоформой HbA, которая состоит из двух пар полипептидных цепей (глобинов) — 2α и 2β, — каждая из которых связана с гемом. HbA обеспечивает адекватный газообмен и тканевую оксигенацию. Фракция HbA2 — второстепенная форма гемоглобина, имеет формулу 2α2δ. Также у взрослого допустимо наличие следовых количеств фетального гемоглобина HbF (2α2γ), который является преобладающей фракцией в течение внутриутробного периода. В течение первых 6 месяцев жизни HbF замещается HbA.

Нарушения структуры гемоглобина обычно разделяют на две группы: гемоглобинопатии и талассемии, хотя талассемии являются формой гемоглобинопатии. Талассемии представляют собой нарушения синтеза α-, β- или обеих цепей гемоглобина. Также могут отмечаться нарушения синтеза δ-, γ- цепей. Большинство вариантов α- и β-талассемий сопровождается изменением уровня HbF и HbA₂, поэтому определение этих изоформ может быть использовано для скрининга этих состояний.

Остальные гемоглобинопатии связаны с наличием аномального варианта гемоглобина. Наиболее распространённые и клинически значимые аномальные варианты гемоглобина: S, D, E, C. Варианты HbS и HbD — патологические формы гемоглобина, которые обладают идентичной миграцией в щелочном геле и являются результатом точечных мутаций гена, кодирующего β-глобин. Варианты Е и С при данном методе мигрируют в составе фракции HbA₂, при их наличии фракция HbA2 достигает более 25 %. Наибольшее клиническое значение представляет HbS-вариант, который приводит к серповидноклеточной анемии.

Электрофорез гемоглобина в щелочном геле позволяет проводить скрининг состояний, связанных со структурными аномалиями гемоглобина. При этом метод не позволяет установить тип и характер гемоглобинопатии.

Электрофорез является чувствительным методом, с помощью которого можно исключить гемоглобинопатии либо определить тактику дальнейшего обследования для установления точного диагноза заболевания. Метод характеризуется высокой внутрипостановочной (SD Когда назначается исследование?

• Скрининг гемоглобинопатий;
• наличие семейного анамнеза гемоглобинопатий, планирование семьи;
• микроцитарная анемия, не связанная с дефицитом железа;
• гемолитическая анемия неустановленной этиологии;
• обнаружение изменённых эритроцитов (серповидная деформация) при микроскопическом исследовании крови.

• Тест обладает высокой достоверностью при скрининге β-талассемий, вариантов, приводящих к серповидноклеточной анемии, и синдромов персистенции фетального гемоглобина.
• При использовании данного метода может быть затруднена индентификация α+-талассемии (талассемия с одной мутацией).

источник

Б. иммунных тромбоцитопениях

Д. всех перечисленных заболеваниях

3.151. Резкое снижение количества миелокариоцитов в костном мозге наблюдается при:

Б. цитостатической болезни

В. миелотоксическом агранулоцитозе

Г. всех перечисленных болезнях

Д. ни при одном из перечисленных

3.152. Признаками мегалобластического кроветворения могут наблюдаться при:

А. аутоиммунной гемолитической анемии

Г. раке желудка

Д. всех перечисленных заболеваниях

3.153. Мегалобластический тип кроветворения при гемолитических анемиях обусловлен:

А. дефицитом витамина В12

Б. нарушением кишечной абсорбции витамина В12 и фолиевой кислоты

В. В12 – ахрестическим состоянием

Г. повышенной потребностью в фолиевой кислоте или витамине В-12 из-за с интенсивного эритропоэза

Д. всеми перечисленными причинами

3.154. В мазке костного мозга индекс Л/Э 1:2, индекс созревания эритрокариоцитов 0,4.Это характерно для:

Б. железодефицитной анемии

Г. гипопластической анемии

Д. всех перечисленных состояний

3.155. Гемоглобин выполняет функцию:

В. транспорта кислорода и углекислоты

Д. транспорта микроэлементов

3.156. Гемоглобин является:

3.157. В состав гемоглобина входят:

3.158. Белковой частью гемоглобина является:

3.159. У взрослого человека можно получить методом электрофореза виды гемоглобинов:

3.160. Основным типом гемоглобина взрослого человека является:

3.161. Патологическим типом гемоглобина не является:

3.162. Разделение гемоглобинов можно провести:

3.163. К производным гемоглобина относятся все перечисленные вещества, кроме:

3.164. Белковая часть гемоглобина «А» состоит из пептидных цепей:

3.165. Аномальным гемоглобином называется:

А. гемоглобин с измененной структурой гема

Б. гемоглобин с включением липидов

В. гемоглобин с измененной структурой глобина

Г. гемоглобин со снижением сродства к кислороду

Д. гемоглобин с увеличением сродства к кислороду

3.166. Синтез в эритроцитах гемоглобина «S» сопровождается развитием:

Г. серповидно-клеточной анемии

3.167. Для эритроцитов с аномальным гемоглобином характерно:

А. изменение сродства к кислороду

Б. изменение резистентности эритроцитов

В. изменение растворимости гемоглобина

Г. снижение устойчивости на внешние факторы

3.168. Талассемия – это:

А. качественная гемоглобинопатия

Б. наличие аномального гемоглобина

В. количественная гемоглобинопатия

Г. структурная гемоглобинопатия

3.169. При бета-талассемии наблюдается:

А. увеличение синтеза бета-цепей глобина

Б. снижение синтеза бета-цепей глобина

В. увеличение синтеза гамма-цепей глобина

Г. снижение синтеза альфа-цепей глобина

Д. снижение синтеза гемоглобина

3.170. При альфа-талассемии наблюдается:

А. снижение синтеза альфа-цепей глобина

Б. увеличение синтеза альфа-цепей глобина

Г. снижение синтеза бета-цепей глобина

Д. снижение синтеза гемоглобина

3.171. Талассемии могут протекать по типу:

Б. гипопластической анемии

Д. все перечисленное верно

3.172. Эритроцитарные энзимопатии характеризуется:

А. измененной структурой глобина

Б. измененной структурой гема

В. нарушением синтеза глобина

Г. дефицитами ферментных систем

Д. все перечисленное верно

3.173. Основным энергетическим субстратом в эритроцитах является:

3.174. Среди эритроцитарных энзимопатий наиболее часто встречается:

Б. гексокиназы

3.175. Недостаточность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы протекает по типу:

Г. железодефицитной анемии

3.176. Костный мозг гиперклеточный, индекс Л/Э = 1/6. Среди эритрокариоцитов преобладают клетки гигантских размеров (более 25 мкм) с нежной хроматиновой структурой ядер, базофильной цитоплазмой. Созревание нейтрофилов замедленно, среди последних много гигантских миелоцитов и метамиелоцитов, гиперсегментированных нейтрофилов, мегакариоциты больших размеров, с гиперсегментированными ядрами, содержащие тромбоциты. Указанная картина костного мозга характерна:

Б. эритроцитарной энзимопатии

В. железодефицитной анемии

Д. всех перечисленных заболеваний

3.177. В костномозговом пунктате найдено: миелокариоцитов 15тыс/мкл, лимфоцитов 65% единичные гранулоциты и эритробласты, повышенный процент плазматических клеток, липофагов, содержащих бурый пигмент. Мегакариоциты не обнаружены. Указанная картина костного мозга характерна для:

А. апластической фазы острого лейкоза

В. парциальной красноклеточной аплазии

Г. хронического миелолейкоза

3.178. В костномозговом пунктате: количество клеточных элементов умеренно снижено, созревание гранулоцитов не нарушено, мегакариоцитопоэз сохранен. Л/Э индекс равен 4:1. Указанная картина костного мозга характерна для:

Г. всех перечисленных анемий

Д. ни одной из перечисленных анемий

3.179. Мужчина 52 лет, жалобы на боли в костях, в крови моноцитоз (20%), СОЭ-80 мм/ч, на рентгенограмме костей черепа мелкие множественные дефекты. В пунктате грудины количество плазматических клеток увеличено до 50%. Предположительный диагноз:

3.180. Мальчик10 лет, поступил с подозрением на острый лейкоз. Состояние тяжелое, кожа бледно-желтушная, склеры иктеричные, башенный череп, высокое стояние твердого неба, печень и селезенка увеличены. Анализ крови: выраженная нормохромная анемия, тромбоциты в норме. В миелограмме эритробластоз. Наиболее вероятный диагноз:

В. микросфероцитарная гемолитическая анемия

Г. инфекционный мононуклеоз

Костный мозг беден клеточными элементами, миелокариоциты почти полностью

отсутствуют, обнаруживаются ретикулярные клетки, лимфоциты, плазматические клетки, единичные базофилы. Указанная картина характерна для:

А. инфекционного мононуклеоза

Б. острого перитонита

Д. всех перечисленных заболеваний

3.182. Больной 22 года, клиника острого живота. Анализ крови: гемоглобин немного снижен, СОЭ в пределах нормы, лейкоциты 25 тыс/л, в лейкоцитарной формуле бластные клетки составляют 87%. Это характерно для:

А. инфекционного мононуклеоза

Г. острого лейкоза

Д. всех перечисленных заболеваний

3.183. Увеличение значений МСНС (более 390 г/л) указывает на:

А. нарушение синтеза гемоглобина в эритроцитах

Б. повышенное содержание гемоглобина в эритроцитах

В. ошибку в работе анализатора

Г. все перечисленное верно

Д. все перечисленное неверно

3.184. Железодефицитная анемия характеризуется:

А. MCV-¯, MCH-¯, MCHC – N, RBC- гистограмма располагается в зоне нормальных значений

Б. MCV- N, MCH- N, MCHC –N, RBC – гистограмма располагается в зоне нормальных значений

В. MCV- ­, MCH- ­, MCHC-N, RBC – гистограмма смещена вправо

Г. MCV- ¯, MCH- ¯, MCHC- ¯, RBC – гистограмма смещена влево

3.185. Мегалобластная анемия характеризуется:

А. MCV — ­,МСН — ­, МСНС – ­, RBC – гистограмма смещена вправо

Б. MCV – N, МСН – N, МСНС – N, RBC – гистограмма располагается в зоне нормальных значений

В. MCV — ¯, МСН — ¯, МСНС — ¯, RBC – гистограмма смещена влево

Г. MCV — ­, МСН — ­, МСНС – N, RBC – гистограмма уплощена и смещена вправо

3.186. Для анемии при хронической почечной недостаточности характерно:

А. MCV – N, МСН – N, МСНС – N, RBC – гистограмма располагается в зоне нормальных значений

Б. MCV — ¯, МСН — ¯, МСНС — ¯, RBC – гистограмма смещена влево

В. MCV — ­, МСН — ­, МСНС – N, RBC – гистограмма смещена вправо

Г. показатели меняются неоднозначно

3.187. Снижение индексов МСН и МСНС указывает на:

Последнее изменение этой страницы: 2016-04-23; Нарушение авторского права страницы

источник

А. увеличение незрелых гранулоцитов В. относительная лимфоцитопения

Б. базофильно-эозинофильный комплекс Г. нейтрофилез

3.119. Для миелограммы при хроническом миелолейкозе характерно:А.гиперклеточность

3.120. Для гемограммы при хроническом лимфолейкозе свойственны:Г. все перечисленное

А. абсолютный лимфоцитоз В. клетки цитолиза Д. ничего из перчисленного

Б. относительная нейтропения

3.121. Возможный исход хронического миелолейкоза:Д. все перечисленное

А. бластный криз В. аплазия

Б. гематосаркомаГ. остеомиелосклероз

3.122. Гемограмме при эритремии свойственно: В. эритроцитоз

3.123. Эритремии не свойственно: Г. высокая СОЭ

3.124. Возможные исходы эритремии:Д. все перечисленное

А. бластный криз Б. гематосаркома В. миелофиброз Г. тромбоз

3.125. Возможный исход хронического лимфолейкоза:А. гематосаркома

3.126. Возможный исход миелофиброза:Д. все перечисленное

А. бластный криз Б. гематосаркома В. аплазия Г. остеосклероз

3.127. Для гемограммы при миелофиброзе характерны:Д. анемия, умеренный нейтрофилез, тромбоцитоз

3.128. Для миелограммы при миелофиброзе характерны:В. увеличение числа мегакариоцитов

3.129. Обострение хронического миелолейкоза характеризуетсяД. всеми перечисленными признаками

А. миелемией В. тромбоцитопенией

Б. анемией Г. гиперлейкоцитоз

3.130. Под определением «кленовое» происхождение лейкозов понимают:В. потомство мутированной клетки

3.131. Клеточным субстратом синдрома Сезари являются:А. Т-лимфоциты

3.132. Цитохимические исследования бластных клеток позволяют установить:А. принадлежность их к определенным клеточным линиям гемопоэза

3.133. Иммунофенотипирование бластных клеток позволяет определить:Д. верны пункты А и Б

А. принадлежность их к определенным клеточным линиям гемопоэза
Б. степень дифференцировки бластных клеток

3.134. Анизоцитоз — это изменение: Г. размера эритроцита

3.135. Пойкилоцитоз — это изменение:А. формы эритроцитов

3.136. К развитию микросфероцитоза могут привести:А. наследственный дефект белков мембраны эритроцитов

3.137. Подсчет эритроцитов рекомендуется проводить сразу после взятия крови при:Д. всех перечисленных анемиях

А. железодефицитных анемиях В. апластических анемиях

Б. гемолитических анемиях Г. В12- дефицитных анемиях

3.138. Наибольшее значение в дифференциальной диагностике иммунного и наследственного
микросфероцитоза имеет: В. проба Кумбса

3.139. Низкий цветовой показатель наблюдается при:Б. талассемии

3.140. Низкий цветовой показатель характерен для:Г. всех перечисленных заболеваниях

А. свинцовой интоксикации В. пароксизмальной ночной гемоглобинурии

Б. железо дефицитной анемии

3.141. Цветовой показатель 1,0 или близкий к 1,0 отмечается при:

Г. во всех перечисленных заболеваниях

А.апластической анемии

В. острой постгеморрагической анемии

3.142. Высокий цветовой показатель отмечается при:Г. всех перечисленных заболеваний

Б. фолиеводефицитной анемии

В. наследственном отсутствии транскобаламина

3.143. Среднее содержание гемоглобина в эритроците повышено при:А.мегалобластной анамии

3.144. Средний объем эритроцита увеличен:. В12-дефицитная анемия

3.145. Анизоцитоз эритроцитов отмечается при:Д. все перечисленное верно

А.макроцитарной анемии Г. метастазах новообразований в костный мозг

Б. миелодиспластическом синдроме

В. железодефицитной анемии

3.146. Для дефицита фолиевой кислоты и витамина В12 характерны:Д. все перечисленное

А. пойкилоцитоз В. базофильная пунктация эритроцитов

Б. мегалоцитоз Г. эритроциты с тельцами Жолли и кольцами Кебота

3.147. При наследственном микросфероцитозе эритроциты характеризуются:

А.уменьшением среднего диаметра В. МСН в пределах нормы Д. всем перечисленным

Б. МСV в пределах нормы Г. увеличением толщины

3.148. Для В12-дефицитных анемий характерны:Г. лейкопения с нейтропенией и относительным лимфоцитозом

3.149. Причиной гиперсегментации нейтрофилов не может быть:Г. дефицит железа

3.150. Увеличение количества миелокариоцитов наблюдается при:А. хронических миелопролиферативных заболеваниях

3.151. Резкое снижение количества миелокариоцитов в костном мозге наблюдается при: Г. всех перечисленных болезнях

А.анемии Фанкони

В. миелотоксическом агранулоцитозе

Б. цитостатической болезни

3.152. Признаки мегалобластического кроветворения могут наблюдаться при:

А.аутоиммунной гемолитической анемии В. дифиллоботриозе Д. всех перечисленных

Б. эритромиелозе Г. раке желудка заболеваниях

3.153. Мегалобластический тип кроветворения при гемолитических анемиях обусловлен:

Г. повышенной потребностью в фолиевой кислоте и/или витамине В-12 из-за с интенсивного эритропоэза

3.154. В мазке костного мозга индекс Л/Э 1:2 , индекс созревания эритрокариоцитов 0,4.
Это характерно для:Б. железодефицитной анемии

3.155. Гемоглобин выполняет функцию:В. транспорта кислорода и углекислоты

3.156. Гемоглобин является: В. хромопротеидом

3.157. В состав гемоглобина входят:Б. порфирины и белки

3.158. Белковой частью гемоглобина является: Г. глобин

3.159. У взрослого человека можно получить методом электрофореза виды гемоглобинов :Б. Нb А, Нb А-2, Нb F

3.160.Основным типом гемоглобина взрослого человека является : В. Нb А

3.161. Патологическим типом гемоглобина не является:А. Нb F

3.162. Разделение гемоглобинов можно провести: Б. электрофорезом

3.163. К производным гемоглобина относят все перечисленные вещества, кроме:Б. оксимиоглобина

3.164. Белковая часть гемоглобина «А» состоит из пептидных цепей:А. альфа и бета

3.165. Аномальным гемоглобином называется:В. гемоглобин с измененной структурой глобина

3.166. Синтез в эритроцитах гемоглобина «S» сопровождается развитием:Г. серповидно-клеточной анемии

3.167. Для эритроцитов с аномальным гемоглобином характерно: Д. все перечисленное

А. изменение сродства к кислороду Г. снижение устойчивости на внешние факторы

Б. изменение резистентности эритроцитов

В. изменение растворимости гемоглобина

3.168. Талассемия— это:В. количественная гемоглобинопатия

3.169. При бета-талассемии наблюдается:Б. снижение синтеза бета-цепей глобина

3.170. При альфа-талассемии наблюдается:А. снижение синтеза альфа-цепей глобина

3.171. Талассемии могут протекать по типу: Д. гемолитической анемии

3.172. Эритроцитарные энзимопатии характеризуются Г. дефицитами ферментных систем

3.173. Основным энергетическим субстратом в эритроцитах является: А.глюкоза

3.174. Среди эритроцитарных энзимопатии наиболее часто встречается дефицит: В. глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы

3.175. Недостаточность глюкозо-6-фосфат дегидрогеназы протекает по типу:А.гемолитической анемии

3.176. Костный мозг гиперклеточный, индекс Л/Э = 1/6. Среди эритрокариоцитов преобладают
клетки гигантских размеров (более 25 мкм) с нежной хроматиновой структурой ядер,
базофильной цитоплазмой. Созревание нейтрофилов замедленно, среди последних много
гигантских миелоцитов и метамиелоцитов, гиперсегментированных нейтрофилов,
мегакариоциты больших размеров, с гиперсегментированными ядрами, содержащие
тромбоциты. Указанная картина костного мозга характерна для:А. В12-дефицитной анемии

3.177. В костномозговом пунктате найдено: миелокариоцитов 15тыс/мкл, лимфоцитов 65%
единичные гранулоциты и эритробласты, повышенный процент плазматических клеток,
липофагов, содержащих бурый пигмент. Мегакариоциты не обнаружены. Указанная картина
костного мозга характерна для:Б. апластической анемии

3.178. В костномозговом пунктате: количество клеточных элементов умеренно снижено,
созревание гранулоцитов не нарушено, мегакариоцитопоэз сохранен. Л/Э индекс равен 4:1.
Указанная картина костного мозга характерна для: Г. всех перечисленных анемий

Б. анемии Даймонда-Блекфана

3.179. Мужчина 52 лет, жалобы на боли в костях, в крови моноцитоз (20%), СОЭ — 80 мм/ч, на
рентгенограмме костей черепа мелкие множественные дефекты. В пунктате грудины
количество плазматических клеток увеличено до 50%. Предположительный диагноз:

3.180. Мальчик 10 лет, поступил с подозрением на острый лейкоз. Состояние тяжелое, кожа
бледно-желтушная, склеры иктеричные, башенный череп, высокое стояние твердого неба,
печень и селезенка увеличены. Анализ крови: выраженная нормохромная анемия,
микросфероцнтоз, ретикулоцитоз (8%), лейкоциты до 19 тыс/мкл, сдвиг до миелоцитов (3%),
тромбоциты в норме. В миелограмме эритробластоз. Наиболее вероятный диагноз:

3.181. Костный мозг беден клеточными элементами, миелокариоциты почти полностью
отсутствуют, обнаруживаются ретикулярные клетки, лимфоциты, плазматические клетки,
единичные базофилы. Указанная картина характерна для:

3.182. Больной 22 года, клиника острого живота. Анализ крови: гемоглобин немного снижен, СОЭ
в пределах нормы, лейкоциты 25х10 9 /л, в лейкоцитарной формуле бластные клетки
составляют 87%. Это характерно для: Г. острого лейкоза

3.183. Увеличение значений МСНС (более 390 г/л) указывает на:В. ошибку в работе анализатора

3.184. Железодефицитная анемия характеризуется:

Г. МСV — ↓, МСН — ↓, МСНС — ↓, RВС — гистограмма смещена влево

3.185. Мегалобластная анемия характеризуется:

Г. МСV — ↑, МСН — ↑, МСНС — N, RВС — гистограмма уплощена и смещена вправо

3.186. Для анемии при хронической почечной недостаточности характерно:

А. МСV — N, МСН — N, МСНС — N, RВС -гистограмма располагается в зоне нормальных значений

3.187. Снижение индексов МСН и МСНС указывает на:Б. нарушение синтеза гемоглобина в эритроцитах

3.188. Анемии при хронических заболеваниях характеризуются: Д. всеми перечисленными признаками

А. развитием анемии, преимущественно нормохромного типа

В. активацией системы мононуклеарных фагоцитов

Г. перераспределением железа в организме

Б. снижением выработки эритропоэтина

3.189. Для дифференциальной диагностики железодефицитной анемии и анемии хронических
заболеваний важное значение имеет определение:В. концентрации ферритина в крови

3.190. Агранулоцитоз может развиваться при: Д. все перечисленное верно

А. инфекционных заболеваниях

Г. алиментарно-токсической алейкии

3.191. Наиболее частые осложнения агранулоцитоза:А. бактериальные инфекции

3.192. В дифференциальной диагностике агранулоцитоза и острого лейкоза по периферической
крови имеет значениеД. все перечисленное

В. наличие токсической зернистости нейтрофилах

3.193. Агранулоцитоз может развиваться при: Д. всех перечисленныхсостояниях

А.коллагенозах В. медикаментозной терапии

Б. сепсисе Г. метастазах в костный мозг

3.194. В гемограмме при агранулоцитозе отмечаются: Д. все перечисленное

А нейтропения В. редко моноцитоз

Б. относительный лимфоцитоз Г. отсутствие незрелых гранулоцитов

3.195. Нормализация кроветворения при агранулоцитозе характеризуется увеличением: Д. всеми перечисленными признаками

А.нейтрофилов В. плазматических клеток

Б. моноцитов Г. появлением миелоцитов

3.196. При тяжелых формах агранулоцитоза возможно: Д. все перечисленное

А.уменьшение количества миелоцитов костного мозга

Б. миелоцитарно-промиелоцитарный костный мозг

источник

Электрофорез гемоглобина — это диагностический метод, который направлен на определение различных типов гемоглобина, которые могут быть обнаружены в крови. Гемоглобин или Hb представляет собой белок, присутствующий в красных кровяных клетках, ответственных за связывание с кислородом, что позволяет переносить их в ткани. Узнайте больше о гемоглобине.

Из идентификации типа гемоглобина можно проверить, имеет ли человек какое-либо заболевание, связанное с синтезом гемоглобина, например, талассемию или серповидноклеточную анемию. Однако для подтверждения диагноза требуются другие гематологические и биохимические тесты.

Электрофорез гемоглобина необходим для выявления структурных и функциональных изменений, связанных с синтезом гемоглобина. Таким образом, врач может рекомендовать диагностировать серповидноклеточную анемию, заболевание гемоглобином С и дифференцировать талассемию, например.

Кроме того, может быть предложено генетически посоветовать пары, которые хотели иметь детей, например, сообщая, есть ли вероятность того, что у ребенка есть какой-то тип расстройства крови, связанный с синтезом гемоглобина. Электрофорез гемоглобина также может быть запрошен как обычное последующее обследование для пациентов, уже диагностированных с различными типами гемоглобина.

В случае новорожденных детей тип гемоглобина идентифицируется с помощью теста на ногу, что важно, например, для диагностики анемии серповидноклеточных клеток. Посмотрите, какие заболевания обнаруживаются при проверке стопы.

Электрофорез гемоглобина осуществляется путем сбора образца крови обученным специалистом в специализированной лаборатории, поскольку неправильный сбор может привести к гемолизу, то есть уничтожению красных кровяных телец, что может повлиять на результат. Поймите, как производится сбор крови.

Сбор должен проводиться с пациентом, голодающим в течение не менее 4 часов, и образец, указанный для лабораторного анализа, в котором идентифицируются типы гемоглобина, присутствующие в пациенте. В некоторых лабораториях нет необходимости поститься для сбора. Поэтому важно получить рекомендации от лаборатории и врача относительно поста для теста.

Тип гемоглобина идентифицируется электрофорезом при щелочном рН (около 8, 0 — 9, 0), что является методом, основанным на скорости миграции молекулы при подаче электрического тока, с визуализацией полос в зависимости от размера и веса молекулы. Согласно образцу полученных полос, проводится сравнение с нормальным стандартом и, таким образом, производится идентификация аномальных гемоглобинов.

В соответствии с моделью представленных полос можно идентифицировать тип гемоглобина пациента. Гемоглобин A1 (HbA1) имеет более высокую молекулярную массу, при этом отмечается меньшая миграция, тогда как HbA2 легче, глубже в геле. Этот образец полос интерпретируется в лаборатории и высвобождается в виде отчета для врача и пациента, информирующего о найденном типе гемоглобина.

Фетальный гемоглобин (HbF) присутствует при более высоких концентрациях у ребенка, однако, по мере развития, концентрации HbF снижаются, а HbA1 увеличивается. Таким образом, концентрации каждого типа гемоглобина изменяются в зависимости от возраста и обычно:

Тем не менее, некоторые люди имеют структурные или функциональные изменения, связанные с синтезом гемоглобина, что приводит к аномальным гемоглобинам или вариантам, таким как HbS, HbC, HbH и Bbs Hb.

Таким образом, из электрофореза гемоглобинов можно идентифицировать наличие аномальных гемоглобинов, и с помощью другого диагностического метода, называемого ВЭЖХ, можно проверить концентрацию нормальных и аномальных гемоглобинов, что может быть показателем:

В случае диагноза анемии с серповидно-клеточной анестезией с помощью теста на ногу нормальный результат — HbFA (т.е. у ребенка есть как HbA, так и HbF, что является нормальным), тогда как результаты HbFAS и HbFS указывают на характер клеток серпа и серповидноклеточная анемия соответственно.

Дифференциальный диагноз талассемии также может быть сделан с помощью ВЭЖХ-связанного гемоглобинового электрофореза, где они проверяются в концентрациях альфа-, бета-, дельта-и гамма-цепей, проверяя отсутствие или частичное присутствие этих глобиновых цепей и, согласно определить тип талассемии. Узнайте, как определить талассемию.

Чтобы подтвердить диагноз любого заболевания, связанного с гемоглобином, необходимо заказать другие тесты, такие как дозировка железа, ферритин, трансферрин и полный анализ крови. Вот как интерпретировать счет крови.

источник

Электрофорез гемоглобина (в щелочном растворе)

С ПОМОЩЬЮ РУЧНОЙ МЕТОДИКИ

Наборы Hellabio гемоглобин (в щелочи) используются для идентификации различных форм молекул гемоглобина (выделение гемоглобина в отдельные полосы HbA, HbF, HBS (HBG, HBD, Лепор) HbA2 (HBC, HBE и HBO)) и позволяют проводить лабораторную диагностику нормальных и патологических гемоглобинов, определяя состояния, обозначаемые как гемоглобинозы, или гемоглобинопатии.

Каждый из основных типов гемоглобина имеет электрический заряд разной степени, поэтому наиболее эффективным методом разделения и измерения нормального и аномального гемоглобина является электрофорез.

В норме у взрослого человека 96.5-98.5% от общего гемоглобина приходится на HbA. Незначительную долю около 1.5-3,5% занимает HbA2. В период внутриутробного развития основным гемоглобином является HbF.

КЛИНИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ, ХРАНЕНИЕ.

· Венозную кровь человека (забор производится натощак) поместить в пробирку с сахаром без антикоагулянта (оксалат, гепарин или ЭДТА, обработанная кровь);

Добавить около 100-200 мкл цельной крови в пробирку с 10 мл физиологического раствора, центрифугировать (5 минут при 3g) и удалить супернатант;

· Взять 30 мкл осадка и добавить в пробирку с 130 мкл гемолизирующего раствора, смешать (Гемолизат);

· Гемолизат стабилен в течении 5-7 дней. Хранить в холодильнике, соблюдать условия асептики, избегать попадания прямых солнечных лучей.

• Работать только в одноразовых перчатках — буфер токсичен.

• Все реагенты должны быть использованы в соответствии с инструкциями, и до истечения даты, указанной на наборе;

• Работа с уксусной кислотой требует наличия вытяжных шкафов;

• Не использовать агарозный гель, если он недостаточно просушен;

• Агарозный гель не замораживать;

• Хранить набор в горизонтальном положении;

• Не использовать гемолизированную сыворотку или плазму (фибриноген).

1. Источник питания 25-250B «Hellabio».

2. Камера для электрофореза «Hellabio».

3. Держатель геля «Hellabio».

4. Набор контейнеров для окрашивания /отмывки «Hellabio».

5. Сушительная камера геля «Hellabio».

6. Вортекс «Micro-Spin», «Minigen.

7. Компьютер, сканер, принтер.

8. Программное обеспечение HELLABIOSCAN GEL ANALYZER или денситометр (520 – 600нм).

9. Набор автоматических пипеток переменного объема.

10. Халат и одноразовые перчатки.

11. Одноразовые микропробирки на 1,5мл.

12. Штатив для микропробирок.

13. Одноразовые наконечники для пипеток переменного объема 5-40 мкм.

14. Емкость для хранения буфера объемом 1000мл.

15. Емкость для хранения окрашивающего раствора объемом 500 мл.

16. Мерный цилиндр объемом 1000 мл.

18. Емкость с дезинфицирующим раствором.

2. НЕОБХОДИМЫЕ реагенты и оборудование – содержаться в каждом наборе Hellabio.

Внимание! Для получения наилучших результатов реагенты, входящие в комплект, должны быть использованы вместе.

Содержимое наборов (необходимые реагенты):

Агарозные гели (Agarose Gels)

Электрофорезный буфер (Electrophoresis Bufffer)

Окрашивающий раствор (Staining Solution)

Фильтровальные полосы для геля (Gel Blotter Strips)

Гемолизирующий раствор (Hemolyzing Solution)

Шаблоны для образцов (Sample Templates)

Инструкция (Instruction) на русском и английском языках

Подготовка реактивов для проведения электрофореза:

Все реактивы фирмы Hellabio должны храниться при температуре 4-25°C до истечения даты, указанной на комплекте. Внимание: буфер токсичен, работать в перчатках.

1. Приготовление рабочего буфера: взять мерный цилиндр на 1000 мл.

2. Развести 40 мл концентрированного буфера(Protein Electrophoresis Buffer) в 960 мл дистиллированной воды.

3. Перелить рабочий буфер в подготовленную емкость и пометить дату, рабочий буфер хранится 3 месяца, с даты изготовления, при комнатной температуре в темном прохладном месте, в закрытой колбе.

4. Приготовление рабочего окрашивающего раствора: хорошо взболтать окрашивающий раствор (Protein Staining Solution).

5. Взять мерный цилиндр на 250 мл и смешать 210 мл 10% уксусной кислоты с 40 мл окрашивающего раствора (Protein Staining Solution).

6. Перелить рабочий раствор окрашивающего раствора в емкость для хранения. Расход окрашивающего раствора обеспечивает возможность постановки соответственно комплектации набора (10 пластинок).

7. В качестве отмывочного раствора будет использоваться 10% уксусная кислота.

· Венозную кровь человека (забор производится натощак) поместить в пробирку с сахаром без антикоагулянта (оксалат, гепарин или ЭДТА, обработанная кровь);

Добавить около 100-200 мкл цельной крови в пробирку с 10 мл физиологического раствора, центрифугировать (5 минут при 3g) и удалить супернатант;

· Взять 30 мкл осадка и добавить в пробирку с 130 мкл гемолизирующего раствора, смешать (Гемолизат);

· Гемолизат стабилен в течении 5-7 дней. Хранить в холодильнике, соблюдать условия асептики, избегать попадания прямых солнечных лучей.

1. Отобрать необходимое количество микропробирок, включая контроль. Приготовить гемолизат.

2. Заполнить электрофорезные камеры необходимым количеством рабочего буфера в зависимости от объема камеры;

3. Раскрыть упаковку агарозного геля. Используя одноразовый наконечник приподнять пластину агарозного геля (место обозначено стрелкой) и извлечь гель из упаковки. Положить в горизонтальном положении на крышку упаковки.

4. Извлечь фильтровальную полосу (Gel Blotter Strips) из упаковки. Промокнуть гель фильтровальной полосой в зоне нанесения образца (отмечено двумя точками на краях геля). Удалить фильтровальную полосу с агарозного геля.

5. Извлечь шаблон образцов из упаковки (Sample Tamplates). Установить шаблон для образцов в зоне нанесения. Провести указательным пальцем по шаблону, для усиления контакта шаблона с гелем и предотвращения попадания пузырьков воздуха в лунку для образца.

6. В каждую лунку шаблона образцов внести по 5мкл гемолизата и оставить на 20-30сек (не более!).

7. Взять фильтровальную полосу. Промокнуть шаблон образцов фильтровальной полосой. Удалить шаблон образцов и фильтровальную полосу с поверхности геля.

8. Установить гель в гелевый держатель. Опустить гелевый держатель в элекрофорезную камеру. Образцы находятся на катодной стороне.

9. Подключить камеру к источнику тока, соблюдая полярность. При использывании камеры и источника питания «Hellabio» параметры следущие : напряжение напряжение 200 В, время электрофореза 20 минут (в случае использования мини гелей, на 3 лунки — 18 мин/200 В).

10. Отключить источник питания от электрофорезной камеры. Извлечь гель из гелевого держателя.

11. Поместить гель в сушильную камеру (температура 60°С). Высушить гель полностью (отсутствуют пятна на пластине геля).

12. Заполнить один контейнер рабочим окрашивающим раствором, три контейнера 10% уксусной кислотой.

13. Поместить высушенную гелевую пленку в контейнер для окрашивания на 5 минут.

14. Извлечь окрашенную гелевую пленку. Промыть пленку по 5 минут в 3-х контейнерах для промывки.

15. Поместить гель в сушильную камеру (температура 60°С). Просушить гелевую пластину.

16. Перенести гель в сканер. Получить изображение геля и оценить результаты в программе HellabioScan или используя фильтр денситометра 580 нм.

Предполагаемые показатели нормы: HbA: 96.5-98.5%, HbA2 1.5-3.5%

Коэффициент отклонения значений не превышает 5%.

Гемолизат известного гемоглобина или коммерчески доступный гемолизат контроля качества должен быть включен в каждую процедуру электрофореза.

Качественная интерпретация результатов может быть произведена визуально путем сравнения образца с шаблоном. Для количественной интерпретации результатов используют программу HellabioScan или денситометр (580нм)

Оценку электрофореграмм при гемоглобинопатиях можно легко сделать визуально. Для количественного анализа должен быть использован денситометр (580нм).

МОДЕЛИ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА НА АГАРОЗНЫХ ГЕЛЯХ HELLABIO

Электрофорез гемоглобина в щелочи:

___

Электрофорез гемоглобина в кислоте:

(Дифференциация HbS от HbG, D,Lep.) 1= HbS

___

Электрофорез гемоглобина в щелочи:

Примечание: чтобы определить вид нетипичного гемоглобина (HbC, HbS, HbD, HbE, Lepore), нужно использовать электрофорез гемоглобина в кислой среде.

источник

Контрольная работа для студентов заочной формы обучения специальности фармация кафедра клинической лабораторной диагностики