Что такое исследование кала ифа

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность — отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Цель исследования — выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

К особенностям микроорганизма относятся:

• сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
• длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
• возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

• вздутие живота;
• отрыжка;
• изжога;
• болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
• запоры или поносы;
• чувство тяжести в эпигастрии;
• снижение аппетита;
• резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

• необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
• признаки железодефицитной анемии;
• неясная тромбоцитопения;
• возможность заражения членов семьи;
• контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
• выяснение связи с генетической предрасположенностью.

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Выделение культуры возбудителя — микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

• посев должен проходить без доступа кислорода;
• можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
• результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
• анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

Суть иммунологического анализа — выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования — сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант — первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

• при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
• желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
• атрофическом поражении слизистой желудка;
• полипах;
• опухолях желудка;
• выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
• контроле за результатами терапии антибиотиками.

Преимуществами ПЦР кала можно считать:

• высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
• простоту проведения;
• безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
• возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
• выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.

• не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
• нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
• чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
• сравнительно высокая стоимость;
• необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
• положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).

Расшифровка результатов исследования — дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

• отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
• положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

• выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
• если количество микроорганизмов больше нуля — подтверждается хелибактериоз;
• знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
• R — указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
• I — чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

• 1 степень — наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах — роста нет;
• 2 степень — вырастает до 10 колоний;
• 3 степень — число выросших колоний достигает 100;
• 4 степень — распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный — при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

• прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
• контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
• некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
• запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
• собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
• непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
• доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

источник

Хеликобактер пилори ─ это бактерия больших размеров, которая локализуется и паразитирует под слизистой оболочкой желудка. В таких условиях она размножается и образует обширные колонии. При избыточной колонизации бактерии заселяют желчные протоки и отделы тонкого кишечника.

Анализ кала на хеликобактер ─ это один из видов диагностики, который подтверждает или опровергает наличие бактерий в организме. Его также проводят для контроля лечения. Тест кала на хеликобактер пилори ─ это неинвазивный (не требующий использования эндоскопии) метод, анализирующий биоматериал.

С диагностикой хеликобактер пилори связано два термина ─ «чувствительность» и «специфичность», на их основании делается заключение анализа.

Чувствительность ─ это способность методики давать положительный результат. Так определяется процент выявления инфекции из общего количества проведенных тестов. Этот параметр посчитать довольно просто.

Специфичность ─ это способность диагностики не давать ложноположительных результатов при отсутствии бактерий. Этот параметр определяет процент отрицательных ответов в группе здоровых людей.

Важно! Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки ─ абсолютный показатель для диагностики.

В каких случаях назначают делать этот анализ:

1. Заболевания, относящиеся к онкологическим или предопухолевым. Важное значение анализ имеет при лимфоме желудка, так как на ранних стадиях проводят только антибактериальное лечение без применения химиотерапии.
2. Атрофический гастрит.
3. Хронический хеликобактерный гастрит с развитием кишечной метаплазии (замещением желудочного эпителия кишечным).
4. Дисплазия желудка ─ нарушение анатомических и функциональных свойств эпителия органа.
5. Наличие семейного анамнеза рака желудка, особенно при онкологическом заболевании у родственников первой линии (родители — дети), у которых этот диагноз был доказан.
6. Болезнь Менетрие ─ хронический гастрит, для которого характерна значительная гипертрофия слизистой оболочки с последующим образованием кист и аденом. Она является предраковой патологией, поэтому возникает потребность дополнительно исследовать кал на инфекцию хеликобактер пилори.
7. Устойчивая функциональная диспепсия более шести месяцев, особенно при болях в эпигастральной области.
8. Подготовка к длительному применению нестероидных противовоспалительных препаратов, ацетилсалициловой кислоты.
9. У пациентов, которые вынуждены длительно употреблять ингибитор протонной помпы (при болезнях пищевода, для профилактики гастропатии).
10. Заболевания крови ─ тромбоцитопеническая пурпура, идиопатическая железодефицитная анемия.

Все методики диагностирования хеликобактер инфекции делятся на прямые и косвенные.

Прямые направлены на выявление самой инфекции или антигенов в кале. Косвенные исследования определяют иммунную реакцию и метаболиты ─ вещества, выделяемые бактериями (уреаза).

Анализ каловых масс относится к прямым методам.

Это исследование является инновационным и самым востребованным в мировой медицине. Оно определяет h. pylori методом моноклональных антител.

Преимущества ─ низкая стоимость, высокая чувствительность и специфичность более 95%. Недостатки ─ ограниченная доступность в некоторых странах мира.

ИФА h. pylori в стуле более предпочтителен в лабораторной практике, чем ПЦР. Существует большое количество научных данных, на основании которых формируется этот вывод. В анализах высокие показатели чувствительности и специфичности как для первичной диагностики, так и для контроля эрадикации (режим стандартной терапии, направленный на уничтожение хеликобактер). Поэтому анализ на антиген хеликобактер пилори в кале является одним из ведущих, и его игнорировать нельзя.

Иммуноферментный анализ ─ лабораторный метод, определяющий количественное и качественное содержание бактерий в биоматериале. Он основан на специфической реакции антиген — антитело. Для него характерны:

• высокая чувствительность;
• надежность;
• быстрота.

Определение h. pylori происходит за счет того, что бактерии обладают свойствами антигена и способны вызывать в организме синтез антител.

Принцип анализа заключается в специфическом связывании антитела с антигеном. При этом один из элементов соединен с ферментом. В результате реакции с высокоспецифическим реагентом (хромогенным субстратом) образуется окрашенный продукт, количество которого определяют с помощью спектрофотометрии.

Основные стадии ИФА и определение pylori антигена:

1. Процесс идентификации тестируемых бактерий специфическим антителом. Так получают иммунный комплекс.
2. Формирование устойчивой связи бактерий с иммунным комплексом.
3. Преобразование ферментной метки в специальный регистрируемый сигнал.

Всего три стадии сделали возможным автоматизировать анализ кала на антиген хеликобактера. Недостатками такой системы является сложность синтеза ферментных соединений и влияние хеликобактер на активность ферментов.

ИФА кала ─ это основа верификации инфекции h. pylori.

При этой диагностике проводится работа с ДНК и РНК бактерий. Это метод молекулярной биологии, суть которого заключается в многократном увеличении малых концентраций некоторых фрагментов ДНК.

Для проведения исследования используют несколько компонентов:

• праймеры ─ занимаются поиском и обозначением нужного фрагмента ДНК;
• полимераза ─ фермент, копирующий найденный участок цепи ДНК;
• DNTP ─ строительный материал для создания новой цепи;
• анализируемый образец, выделенный из биоматериала пациента;
• буферный раствор, который создает максимальные условия для реакции.

При проведении реакции специфические фрагменты ДНК накапливаются в геометрической прогрессии. Из одной молекулы получаются более 100 миллионов идентичных молекул.

Таким образом, идентифицируют генетический материал бактерий, который обнаружен даже в самых малых количествах. Если в кале есть фрагменты хеликобактер пилори, то цепочка ДНК выстроится. Если цепь не образовалась, то это значит, что результат будет отрицательным.

1. Метод автоматизирован, и участие человека в процессе исследования минимальное.
2. Диагностическая ценность метода достаточно высока (до 98%).
3. В условиях современной лаборатории не дает ложноположительных результатов.

1. Отрицательный результат анализа не исключает наличия возбудителя в организме.
2. Универсальность тест-системы бывает ограничена в связи с разновидностью штаммов бактерий.
3. Результаты исследования биоматериала сложно стандартизировать. Практически невозможно выровнять количество исследуемого материала для сравнения разных образцов между собой.
4. Результаты ПЦР не могут быть окончательными и основополагающими при постановке диагноза.

Анализ на бакпосев h. pylori представляет собой сложный, трудоемкий процесс. Для выращивания живой культуры требуются специальные условия. Как правило, подобные исследования проводят в научно-исследовательских центрах или учебных заведениях, имеющих клиническую лабораторию.

Посев не является 100%-но специфичным методом. Хеликобактер часто невозможно высеять, так как сдать биологический материал правильно не всегда удается. Он может не содержать колонии культивируемого микроорганизма. Также бактерии погибают при нарушении правил сбора материала или его транспортировки.

Поэтому данный метод применять для диагностики нецелесообразно. Его используют для научных экспериментов.

Это иммунохимический метод, основанный на распределении исследуемого образца между неподвижной и подвижной фазой и на свойстве антител связываться с антигеном избирательным образом.

Подвижная фаза, содержащая анализируемый материал, перемещается через неподвижную. При этом многократно повторяются акты сорбции (поглощения) и десорбции (выделения). Так происходит идентификация вещества (бактерий).

• простота и удобство, метод не требует дорогостоящего оборудования;
• достоверность тестов — 99%;
• доступность (более экономичный метод в сравнении с ИФА).

К недостаткам методики можно отнести тот факт, что результат анализа зависит от качества моноклональных антител, которые используют при производстве тест-систем, а также от концентрации бактерий в биоматериале, которые не всегда могут обнаруживаться.

Чтобы итоговые показатели анализа были достоверными, нужно знать, как правильно сдавать пробу.

Биоматериал собирают в чистую сухую емкость. В нем не должно содержаться примесей мочи или крови. Оптимальный вариант, если кал собран утром, перед доставкой в лабораторию. Если такой возможности нет, то можно взять и вечернюю пробу. При этом ее нужно хранить не более 10 часов в холодильнике при температуре, не превышающей 8 °C.

Перед тем как сдавать кал, за 72 часа до исследования следует отменить прием лекарственных препаратов. При нарушении перистальтики, наличии запоров пациенту назначается мягкое слабительное (лактулозу) для предупреждения ложного результата.

Для контроля лечения инфекции h. pylori анализ кала проводят не раньше чем через месяц после окончания антибактериальной терапии.

источник

С прогрессом современной медицины удается проводить более углубленную диагностику при подозрении на те или иные патологии у пациента. Одним из информативных методов лабораторного исследования стал ИФА анализ, который проводят методом забора венозной крови. То есть для пациента ничего в целом не меняется. А вот лаборант-анализатор ИФА проводит сложную технику исследования забранного биоматериала. В том, что такое анализы ИФА и, каковы тонкости применения ИФА метода в качестве диагностического, разбираемся в материале ниже.

Иммуноферментный анализ крови — это один из способов лабораторной диагностики, который основан исключительно на реакции под названием «антиген-антитело». Здесь стоит уяснить, что антиген — это чужеродное белковое соединение (молекула), попавшее в организм человека с паразитарной, вирусной или другой инфекцией. То есть, попросту вредитель. В свою очередь антитело — это иммунная клетка (иммуноглобулин), встающая на защиту организма человека при обнаружении в нем чужеродных молекул.

Выработку антител провоцируют сами же антигены, проникшие в организм человека. При вступлении в «битву» за здоровье организма антитела как бы помечают собой антигены, что при исследовании крови и видит лаборант. То есть в забранном биоматериале можно отследить не только наличие инфекции, но и ее следы уже после того, как организм полностью выздоровел.

При проведении анализа на ИФА лаборант может видеть такие иммуноглобулины к антигенам:

• Иммуноглобулины М (в результатах значатся как IgM). Свидетельствуют о том, что инфекционный процесс в организме только набирает свою силу. То есть инфицирование произошло совсем недавно;
• Иммуноглобулины G (значатся как IgG). Способствуют уничтожению антигенов через несколько дней после внедрения инфекции в организм человека. Иммуноглобулины G могут находиться в организме пациента достаточно долго, формируя иммунитет к определенному вирусу;
• Иммуноглобулины Е (значатся как IgЕ). Свидетельствуют о паразитарных инфекциях в организме. Он же говорит и об атопических реакциях при аллергии. При этом стоит знать, что проведение анализа ИФА дает результат с точностью 90% на паразитарные инфекции;
• Иммуноглобулины А (значатся как IgА). Максимально выступают на защиту слизистых оболочек пациента.

Таким образом, назначая иммуноферментный анализ крови пациенту, лечащий врач может отследить давность инфекции, степень ее прогрессирования или выявить наличие иммунитета к той или иной инфекции.

Процесс ИФА диагностики выглядит таким образом:

• Забранная венозная кровь приводится в лаборатории в состояние сыворотки крови;
• Затем лаборант использует специальный лоток с ячейками, в каждой из которых уже имеются все необходимые антигены. Достаточно просто капнуть в каждую ячейку сыворотку крови и отследить реакцию иммуноглобулинов (антител) на антигены. О наличии «нужной» реакции свидетельствует изменение цвета исследуемого материала. В дальнейшем лаборант изучает оптическую плотность исследуемой среды.

В целом иммуноферментный анализ на паразитов помогает выявить такие паразитарные патологии:

• Аскаридоз и энтеробиоз (аскариды и острицы);
• Трихинеллез;
• Описторхоз в острой и хронической формах;
• Лямблиоз;
• Амебиоз;
• Токсоплазмоз;
• Лейшманиоз в любой форме.

Важно: иммуноферментный анализ бывает как качественным, так и количественным. В первом случае лаборант лишь подтверждает или опровергает наличие искомого вещества в крови. Во втором случае в результате анализа указывают его концентрацию в организме пациента.

При всех достоинствах такого способа диагностики стоит понимать, что иммуноферментный анализ крови — не способ нахождения причины болезни пациента, а лишь метод подтверждения предполагаемого лечащим врачом диагноза. А ввиду того, что исследование является достаточно недешевым, использовать его нужно с умом. При этом результаты исследования должен трактовать только квалифицированный специалист.

Важно понимать, что выявление паразитов через анализ крови требует определенной подготовки от пациента. Так, перед сдачей крови необходимо сделать следующее:

• За сутки до забора биоматериала нужно исключить из рациона жирную пищу, алкоголь и копчености;
• Кровь на иммуноферментный анализ крови на паразитов и другие инфекции следует сдавать с утра натощак;
• Перед сдачей крови запрещено курить минимум за 3-4 часа;
• В день забора крови желательно не нервничать и не прибегать к усиленным физическим нагрузкам.

Соблюдение этих правил позволит избежать ложноположительного результата на антитела к паразитам.

После того как мы разобрали аббревиатуру ИФА и что это такое ─ выяснили, стоит перейти к трактовке результатов. Здесь важно понимать, что если анализ проводили качественный, то результат будет лишь положительным или отрицательным. То есть диагностика либо подтверждает подозрения доктора относительно определенного диагноза, либо опровергает их. В этом случае в бланке будут стоять символы «+» или «-» соответственно.

Важно: отрицательный результат анализа не всегда свидетельствует об отсутствии инфекции. Дело в том, что антитела к антигенам могут формироваться в течение 14 дней после инфицирования и вполне вероятно, что они еще не сформированы.

В случае же если проводится количественный анализ, то здесь определяется вид антител, их количество и стадия активности. В частности при такой диагностике определяют антитела (иммуноглобулины) IgG и IgM, которые формируются в разные периоды прогрессирования инфекции. Самыми распространенными вариантами результатов в этом случае являются:

• Повышенный IgМ и полное отсутствие IgG. Такая картина свидетельствует о недавнем инфицировании и острой фазе течения патологии.
• Повышенная активность иммуноглобулинов обоих видов (IgМ и IgG). Говорит о давнем и хроническом протекании инфекционного процесса.
• Активность IgG и полное отсутствие IgМ. Инфицирование было не менее полугода назад и сейчас вирус пребывает в затяжной хронической стадии.
• Отсутствие антител IgG и IgA. Результат не определен.
• Отсутствие антител IgM, IgA и IgG. Свидетельствует об отсутствии иммунитета к определенной инфекции.
• Активность антител IgG, IgM и IgA говорит об обострении хронического процесса.

Помимо выявления типов антител лаборант в специальной графе бланка указывает и их количество на объем крови. Помните, разобравшись в том, что такое метод ИФА, не трактуйте результаты самостоятельно. Полученные результаты с точностью может интерпретировать только лечащий врач в зависимости от предполагаемого диагноза, выстраиваемого на основании клинической картины у пациента.

источник

Анализ ИФА – что это такое? Полное наименование этого метода диагностики называется иммуноферментный анализ крови, и он основан на определении в периферической крови антител различных классов, или иммуноглобулинов, которые вырабатывает человеческий организм.

В практике врача ИФА – анализ занимает очень важное место, когда нужно диагностировать какую – либо инфекционную патологию. Этот анализ показывает не только факт наличия инфекционного заболевания, но так же и стадии патологического процесса. Также не только в отношении возбудителя метод ИФА показан к применению: он используется для диагностики аллергических состояний. Этот тест позволяет выявить проблемы в системе иммунитета, при многих заболеваниях кроветворной системы, аутоиммунных и других расстройствах.

Все исследователи склоняются к тому, что название «антитело» выбрано слишком неудачно. Но все-таки оно отражает одну важную особенность иммуноглобулинов: они способны связывать и нейтрализовывать вредные вещества, подходя к ним как «ключик» к «замочку». Количество антител в крови отражает не только общую способность организма к защите от инфекций, но так же и способность к образованию циркулирующих иммунных комплексов, которые могут возникнуть при различных аутоиммунных болезнях, например, при ревматоидном артрите или болезни Бехтерева.

Комплексы антител с антигеном (вредным фактором инфекционной природы) – это результат ответной реакции организма на внедрение «чужаков». Поэтому иммунитет учится распознавать их, с помощью лимфоцитов обучает иммунокомпетентные клетки, и они способны продуцировать высокоспецифичные антитела. Так, антитела к вирусу Эпштейна устроены иначе, чем антитела к вирусному гепатиту С, или к кишечной палочке, а anti-HAV, или антитела к вирусу гепатита А – иначе, чем аутоантитела к хрящевой ткани. Именно высокая специфичность, и соответствие иммуноглобулинов инфекционному возбудителю и делает высокую ценность такому лабораторному исследованию, как иммуноферментный анализ крови.

После прочной связи антител и антигенов в единый комплекс (антиген-антитело) вредные факторы утрачивают свою способность к повреждению тканей организма, и затем эти комплексы или нейтрализуются, или лизируются с помощью фагоцитоза нейтрофилами, и, «перевариваясь», покидают организм.

Анализ крови ИФА может показать, с каким определенным болезнетворным фактором сталкивается наш организм, на какой стадии находится процесс взаимодействия организма с инфекцией. После проведенного исследования врач может с высокой степенью уверенности сделать прогноз, назначить определенные виды лечения, а в некоторых случаях даже может определить продолжительность жизни пациента, особенно при хронических вирусных инфекциях, например, при вирусном гепатите С.

Но в некотором случае, в организме вообще нет никаких инфекционных агентов, и антитела по «ошибке» набрасываются на собственные органы и ткани, поскольку иммунокомпетентные клетки получили ложную информацию. Такие заболевания называют аутоиммунными, и иммуноферментный анализ крови также помогает распознать эту хроническую патологию, и помочь в диагностике.

Всего человеческий организм вырабатывает 5 известных классов антител, которые обозначаются Ig (что расшифровывается как иммуноглобулины), которые принадлежат классам A, M, G, E, и D. Все они имеют большое значение в интерпретации результатов ИФА – анализа. Конечно, комплексов значительно больше, и далеко не все они еще открыты. Но в диагностике разных болезней наиболее ценны первые три типа антител. Анализ крови на ИФА использует максимум информации: момент появления антител в крови, изменение их концентрации в зависимости от времени, срок исчезновения, а также тип специфических антител.

Так, участниками первичного, острого инфекционного процесса являются иммуноглобулины класса М, которые всегда свидетельствуют об острой фазе, даже в том случае, когда клинически болезнь протекает стерто. Характерный пример – безжелтушная форма острого вирусного гепатита В или С. Иммуноферментный анализ крови на гепатиты покажет, что у человека есть острый гепатит, и такие симптомы, как боли в подреберье, сухость во рту, ломота в суставах и другие неспецифические симптомы становятся легко понятными.

Спустя несколько недель эти антитела обнаруживаются во все более исчезающей концентрации, уступая иммуноглобулинам класса G. Они определяются в крови долгие месяцы, и даже годы, и свидетельствуют или о выздоровлении, и тогда могут оставаться пожизненно, формируя прочный иммунитет. Это свидетельствует о мощной защите от антигенов возбудителей. Так, именно антитела этого класса делают человека невосприимчивым к повторным случаям заболевания сибирской язвой и чумой. Но бывают случаи, когда эти антитела не препятствуют при наличии антигенов их вредному влиянию. В таком случае речь может идти о повышении активности хронического процесса.

Что касается IgE, то он имеет применение в диагностике различных паразитарных инвазий и аллергических состояний, а IgD выполняет вспомогательную функцию: метод иммуноферментного анализа позволяет использовать его в комплексной диагностике бронхиальной астмы и аутоиммунных состояний. Конечно, расшифровка ИФА-анализа значительно более сложная, и специалисты – иммунологи могут рассказать гораздо больше. По каким же показаниям пациент может самостоятельно обратиться в лабораторию, чтобы выполнить исследования?

Прежде всего, нужно понять, что нет такого анализа – «просто кровь на ИФА». Бывает анализ на гепатиты, бывает – на уреаплазму, или на сифилис. Таким образом, сдавать кровь на ИФА можно только прицельно, «заказав» поиск нужной инфекции. Просто так непонятно, зачем сдавать кровь из вены, не зная, что нужно искать. Вот почему метод иммуноферментного анализа – это мощный инструмент, который важен в диагностическом поиске. Только врач может назначить этот анализ, поскольку он целенаправленно ищет инфекцию, для которой характерны данные симптомы. Обычный человек, конечно, может заказать 150 анализов крови методом ИФА на «все инфекции», но это будет неразумным и затратным подходом к диагностике, сдавая анализы на все подряд.

Наиболее востребовано назначение этих анализов при следующих заболеваниях и состояниях:

Различные микробные и вирусные инфекции, симптомы инфекционных заболеваний – сыпь, лихорадка, желтуха, увеличение лимфоузлов, синдром диареи, подозрения на заболевания, передающиеся половым путем.

Помогает методика ИФА при определении уреаплазмы и микоплазмы, сифилиса и хламидиоза, туберкулеза и цитомегаловирусной инфекции, герпеса, вирусных гепатитов и вируса Эпштейн-Барра. В настоящее время около 500 различных инфекций можно верифицировать с помощью метода иммуноферментного анализа,

При подозрении на глистные инвазии, и наличии таких симптомов, как аллергия, эозинофилия в крови, кожный зуд, диспепсия и похудение,

Подробнее о данном виде исследования читайте в статье «Анализ крови на глисты и паразиты: методы исследований, ИФА, кому и как сдавать?».

При выявлении аллергенов, которые вызывают отек Квинке, крапивницу, одышку и приступы астматического удушья.

В этом случае выявляются конкретные Ig E, и существуют целые аллергопанели, которые помогут точно определить аллерген – кальмары или креветки, сухой корм для рыбок, содержащий дафнии, домашнюю пыль. При поллинозе этот метод позволяет найти точно тот злак, кустарник или дерево, который вызывает весеннее чихание и слезотечение,

• Показан этот метод при подозрении на аутоиммунные заболевания, которые лечат врачи-ревматологи,
• При подозрении на опухолевый рост и активность,
• В комплексной диагностике иммунодефицитных состояний и ВИЧ – инфекции,
• При заболеваниях крови и в трансплантологии, для комплексной оценки иммунитета, например, перед пересадкой печени или почек.

Теперь мы знаем, зачем нужно сдавать кровь на ИФА. Выясним, как проводится это исследование.

Классический материал – это венозная кровь пациента. Но при необходимости, можно исследовать самую разную жидкость и ткань: слизь, слюну, цервикальный секрет, цереброспинальную жидкость, стекловидное тело глаза, содержимое пупочного канатика и околоплодные воды. Важно помнить, что прием различных лекарств, избыточная физическая активность, злоупотребление алкоголем, может сильно исказить результаты анализов.

Существуют несколько методов, которые позволяют проводить этот анализ. Чаще всего в клинических лабораториях используют фотометрический способ. При этом используют меченые краской вещества, после реакции которых, и маркировки комплекса антиген-антитело изменяется их окраска. В результате изменяется и оптическая плотность раствора, и это изменение прямо пропорционально концентрации обнаруженных антител. Лабораторные спектрофотометры успешно используются для измерения этих отклонений.

Также для проведения ИФА используется флуориметрический метод, основой которого является флуоресценция. Здесь тоже высчитывается интенсивность флуоресцирующих веществ, которые осели на исследуемых образцах.

Наконец, в иммунологическом анализе используют электрохимические способы определения активности ферментов, которые являются особыми метками для антигенов и антител. Сам иммуноферментный метод чаще всего подразумевает использование таких ферментов, как щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена и галактозидаза. Эти ферменты способны связываться с антителами или антигенами и маркировать их вследствие своей активности.

К очевидным «плюсам» можно отнести демократичную себестоимость анализа, возможность его скринингового использования у широких групп населения, например, при обследовании беременных на ВИЧ. Метод иммуноферментного анализа достаточно спецефичен, и может применяться для контроля качества лечения многих заболеваний. Немаловажно, что анализ готовится быстро, и является простым и безопасным для пациента.

Существует, однако, много «подводных камней». Так, если иммуноглобулины не выявлены, то это еще не говорит о 100% отсутствии заболевания. Ведь на фоне иммунодефицита у организма просто может не «быть сил» на синтез антител. Если у пациента тяжелая печеночная недостаточность, то печень просто не в силах синтезировать белок – строительный материал для антител. В таком случае результат называют серонегативным, и требуется подтверждение инфекции уже прямым и самым совершенным методом исследования – ПЦР, или полимеразной цепной реакцией. В отличие от иммуноферментного анализа, при этом методе выявляется не реакция организма на инфекционный процесс (которая может быть дефектной, или отсутствовать вовсе), при ПЦР определяется непосредственно наследственный материал, или находится сам возбудитель.

Метод иммуноферментного анализа может дать ошибку на фоне многих хронических болезней, на фоне иммуносупрессивной терапии. В гельминтологии же и паразитологии существует закон: только обнаружение паразита, или его яиц, является абсолютно надежным способом постановки диагноза. ИФА может давать перекрестные и ложноположительные методы, реагируя на многие нормальные события в жизни пациента.

В заключение нужно сказать, что метод иммуноферментного анализа является мощным, но вспомогательным способом лабораторной диагностики многих заболеваний. Но в любом случае, диагноз должен выставляться на основании многих факторов: жалоб и анамнеза пациента, данных осмотра, других вспомогательных и инструментальных методов диагностики.

источник

Когда назначают анализ сдавать анализ ИФА на сифилис. Методы лабораторной диагностики. Результаты анализа — как определить норму и отклонения. Стоимость иммуноферментного анализа.

Как правило, постоянно при обращении в поликлинику, доктора назначают сдавать разные анализы. Это позволяет им определить инфекции и заболевания, которыми страдает человек. ИФА или так называемый иммуноферментный анализ, это прекрасный способ оценить иммунную систему организма, и выявить по наличию антител инфицирование и стадию болезни.

Учитывая, что большое количество паразитов проникают в человеческий организм, сдавать анализы и проверять свой его желательно каждому человеку, чтобы в один прекрасный день не получить положительный результат на инфекцию.

Анализ позволяет выявлять вещества и паразитов, которые чужды человеческому организму – антигенны, и выявление иммуноглобинов. Это не только позволяет определить заболевание, но диагностировать стадию. Результаты анализа ИФА выдаются как количественно, так и качественно.

Итак, кому назначают сдавать данный анализ и что такое иммуноферментный анализ? Доктора выписывают этот анализ, если у человека проявляются следующие заболевания:

• Сыпь на теле – аллергические реакции.
• Вирусы – герпес, цитомегалавирус.
• Болезни, передаваемые половым путем – сифилис, трихомонада.
• Патология, связанная с онкологическим заболеванием.
• Нейросифилис.

Кроме перечисленных заболеваний, анализ назначается для определения уровня гормона в крови. По результатам проводится оценка качества терапии. Что такое сифилис знает наверно каждый человек, но не представляет его масштабы, и сколько человек инфицированных ходят рядом с нами.

В настоящее время сифилис – это самое распространенное заболевание. Это трепонома, которая поражает организм человека. И в результате затрагиваются все внутренние органы заболевшего.

Проникновение паразитов в организм, вызывает инфицирование человека. Этим венерическим заболеванием можно заразиться не только половым путем, но и бытовым методом, стоит это помнить, и соблюдать простые правила профилактики.

Это очень опасная инфекция, и частенько бывает, что она может долгое время себя не проявлять. Поэтому человек может быть носителем и распространителем большое время, не зная, что он болен.

Медицина не стоит на месте, современные анализы, стали существенно отличаться от старых методов исследования организма. Хотя они прекрасно выполняли свою роль, но порой приходилось ждать результаты неделями и месяцами. Это естественно не было благоприятно для инфицированного человека. Что такое ожидание результата, прошел на себе больной человек.

Классические анализы – выявления сифилиса методом Вассермана, методом Кана стали сдавать свои позиции и на смену пришли такие тесты как ИФА.

Это самый современный метод обнаружения инфицирования у человека. Результат расшифровывается с помощью компьютера. Это позволяет более точно определять положительный результат или отрицательный анализ.

Во время проведения расшифровки производится поиск антител к конкретным заболеваниям. И в результате проведения анализа, можно было выявить заражение, когда результат был положительным. Используя ИФА для выявления сифилиса подразумевается трёхклассное применение иммуноглобулинов:

• G, M, A – для диагностики имеют самое важное значение.
• Они вырабатываются в инфицированном человека строго в определенной последовательности.
• Быстро определяют стадию инфицирования.

Если говорит об анализе ИФА на сифилис, то в этом случае сложно сказать, что есть норма или отклонение. Результат, как правило бывают или отрицательный, или положительный. Кроме этого существуют титры, определяющие количество антител в крови.

Существует много тонкостей при расшифровке анализа, если он показал положительный результат, анализ все равно придется пересдавать несколько раз, чтобы исключить метод ложноположительной реакции.

Как уж писалось тонкостей при расшифровке анализа очень много, и определить результат сможет только лечащий врач. Приведём примеры в таблице, какие могут быть показаны результаты на иммуноферментный анализ:

Не стоит отчаиваться, если анализ показал положительный результат. Как правило, проводят дополнительные анализы и тесты, различными способами, для более точного установления диагноза.

Как правило, стоимость данного анализа напрямую зависит от самого анализа и выявление конкретной инфкекции. Определение маркеров на инфицирование различных видов стоит от 200 до 350 рублей. И проводится такой анализ в течение двух суток.

ИФА наиболее популярный и современный метод диагностирования организма. Метод показал свою эффективность в выявлении инфицирования, и определения точного срока заражения.

Учитывая ценовую политику можно сказать, что анализ доступен каждому человеку с любым бюджетом. Он позволяет лечащему врачу получить полную картину инфицирования человека. Он показал себя в деле и не разочаровал докторов. В то же время получив анализ, лечащий врач мог реагировать оперативно, назначая своевременно лечение.

источник

Классификация методов выявления инфекции Нelicobacter pylori представлена в таблице.