Как сдать посев кала на флору

Людям, которые обращаются в клиники с жалобами на дискомфорт и боли в животе, трудности с дефекацией и постоянную тошноту, для постановки достоверного диагноза назначаются стандартные исследования, одним из которых является анализ кала на посев.

При помощи бактериологического исследования этого типа можно определить состав, типы и приблизительное количество микроорганизмов, обитающих в кишечнике. Данный метод обследования незаменим, поскольку он помогает выявить острые кишечные патологии и возбудителей различных опасных недугов.

В большинстве случаев бак анализ кала назначается, если у пациента наблюдается симптоматика, свойственная для кишечных заболеваний. Обратиться в клинику для проведения исследования нужно при таких признаках:

• беспричинное повышение температуры (чаще наблюдается ближе к вечеру);
• тошнота и рвота;
• метеоризм;
• дискомфорт и болезненность в брюшной полости;
• частая диарея;
• отсутствие аппетита.

Так как каждый из этих симптомов характерен для кишечных заболеваний, поставить достоверный диагноз, отталкиваясь только от жалоб пациента, невозможно. Чтобы подтвердить или опровергнуть предполагаемое заболевание, требуется провести полноценную диагностику, которая поможет выявить, что послужило возбудителем патологии и подобрать грамотную схему лечения.

И также периодически сдавать такой посев на микрофлору обязательно нужно людям, чья деятельность связано с:

• производство продуктов питания, их фасовка и транспортировка;
• разделка и фасовка мяса и рыбы;
• уборка кафе, ресторанов, столовых.

При помощи такого лабораторного исследования можно выявить следующие недуги:

• сальмонеллез. Заболевание, при котором вредоносные микроорганизмы поражают тонкий отдел кишечника. Пациенты, страдающие от сальмонеллеза, сталкиваются с такими же симптомами, которые характерны для выраженной интоксикации. Сальмонеллез особенно опасен для детей, поскольку он нередко приводит к развитию сепсиса, воспаления легких и менингоэнцефалита. Инфицирование заболеванием происходит при игнорировании правил личной гигиеной, потреблении немытых овощей и фруктов;
• дизентерия. Заболевание развивается под действием возбудителя шигелла и поражает преимущественно толстый отдел кишечника и желудок. Проникновение возбудителя также возможно только через немытые продукты;
• коли-инфекции. В эту группу входят заболевания, продуцируемые кишечными палочками. Чаще всего инфекциями этого типа страдают дети дошкольного возраста. Заражение возможно только при контактировании здорового человека с носителем. И также дети могут заразиться, если родители не соблюдают правила санитарно-гигиенических норм.

Чтобы бакпосев кала показал достоверный результат, к нему нужно правильно подготовиться. И также важнейшую роль в исследовании играет сбор биоматериала. Специалисты советуют готовиться к анализу, соблюдая следующие правила:

• за 5 дней до сбора биоматериала необходимо исключить из рациона мясные продукты и рыбные блюда. В этот период основу рациона должны составлять картофельные блюда, каши, кисломолочные продукты и макаронные изделия;
• за неделю до сдачи анализа запрещено потреблять алкогольную продукцию;
• за 3 дня до забора биоматериала пациенту необходимо отказаться от потребления любых лекарственных средств. Если человеку назначен прием каких-либо медикаментов на постоянной основе, об этом обязательно нужно оповестить лечащего врача.

Забор биоматериала чаще осуществляется в домашних условиях. Пациенту нужно предварительно приобрести в аптеке стерильный контейнер с плотно закрывающейся герметичной крышкой. При отсутствии возможности приобрести такую емкость можно использовать небольшую стеклянную баночку. Перед применением ее нужно тщательно промыть, простерилизовать и высушить.

Если человек хочет самостоятельно осуществить сбор биоматериала для анализа и отнести его в лабораторию, необходимо придерживаться следующих правил. В испражнения не должны присутствовать сторонние примеси, такие как слизь или моча. Если для хранения используется стеклянная баночка из дома, при ее стерилизации запрещено пользоваться дезинфицирующими средствами. Баночку нужно тщательно промыть и простерилизовать при помощи кипятка.

Если требуется провести сбор фекалий у малыша, горшок нужно предварительно обработать таким же образом, как и стеклянную баночку. Собранный материал нужно как можно быстрее доставить в лабораторию, желательно сделать это в течение 2–3 часов. Стоит понимать, чем позже биоматериал будет доставлен в медицинское учреждение, тем менее точными будут результаты исследования.

Чтобы выявить общую клиническую картину и патологию, с которой столкнулся пациент, лаборант помещает каловые массы в особую питательную среду. Через 5 дней в них должны вырасти колонии микроорганизмов, их которых специалистам удается приготовить мазок на кишечную группу.

Даже если количество бактерий будет незначительным, лаборанты все равно смогут сделать анализ. Биологический материал помещается под микроскоп, где лаборант по внешнему типу и подвижности сможет определить тип микроорганизмов, живущих в каловых массах. После этого проводится исследование возбудителя кишечной палочки.

Несомненным преимуществом такого исследования является то, что оно не только позволят выявить, какой тип микроорганизмов присутствует в организме человека, но и определить его восприимчивость к антибактериальным препаратам. Сколько делается расшифровка анализа, зависит от типа учреждения.

В большинстве случаев бланк с результатами выдается пациенту через 7–8 суток. И также в некоторых клиниках возможно проведение экспресс-тестов, которые позволяют получить результат в кратчайший срок. Стоит понимать, что результаты экспресс-методик не всегда являются достоверными, их точность не превышает 75%.

Постановка диагноза осуществляется только квалифицированным врачом. Медик дает оценку состоянию пациента, отталкиваясь от сведений, полученных в ходе исследований. Вне зависимости от типа учреждения, в котором проводилось исследование, в бланке с результатами будут подробно описаны значения нормы. С ними нужно сравнить полученные показатели.

Референсные значения должны находиться в таких пределах:

• типичные e-coli – 10 7 –10 8 ;
• кишечная гемолитическая палочка – бактерии этого типа должны полностью отсутствовать в исследуемом биоматериале;
• лактозонегативная палочка – менее 10 5 ;
• микробы типа протея – менее 10 2 ;
• другие условно-патогенные энтеробактерии – менее 10 4 ;
• неферментирующие бактерии – менее 10 4 ;
• энтерококки – менее 10 8 ;
• гемолитический стафилококк – бактерии этого типа должны полностью отсутствовать;
• бифидобактерии – 10 10 ;
• лактобактерии – 10 7 ;
• бактерииды – 10 7 ;
• клостридии – менее 10 5 ;
• дрожжевые грибки – менее 10 3 .

Даже если результаты будут сильно отклоняться от нормы, паниковать не стоит, поскольку в некоторых случаях подобные отклонения могут быть спровоцированы внешними факторами. Расшифровкой анализа и постановкой диагноза должен заниматься только опытный специалист.

По степени роста изучаемый биоматериал классифицируется на 4 степени:

• 1 степень. Разрастание бактерий на жидкой среде выражено слабо, а на твердой полностью отсутствует;
• 2 степень. Разрастание одного типа доходит до 10 колоний на плотной среде;
• 3 степень. Рост бактерий достигает до количества от 10 до 100;
• 4 степень. Существенное разрастание колонии (больше 100).

Если пациенту диагностирована 1 или 2 степень, это свидетельствует о том, что заболевание вызвано не присутствующими микроорганизмами, а другими причинами. 3 и 4 указывает на то, что симптоматика вызвано именно присутствующими микроорганизмами.

Проведение посева кала на микрофлору не представляет сложностей. При должной подготовке и правильном сборе биоматериала его результаты будут достоверными. Важно помнить, что игнорирование правил сбора материала может исказить общую клиническую картину, что негативно отразиться на здоровье и может спровоцировать прогрессирование заболевания.

источник

Анализ кала относится к микробиологическим лабораторным исследованиям, по результатам которых оценивается функциональность и состояние здоровья пищеварительной системы. Существует несколько разновидностей изучения биологических особенностей экскрементов: общий анализ, иначе копрограмма, кал на гельминты, кал на УПФ, на скрытую кровь и другие. Аббревиатура УПФ обозначает условно-патогенную флору кишечника.

Микрофлора кишечника – это внутренняя микробиологическая среда, населенная микроскопическими организмами. Стабильный качественно-количественный состав бактерий обеспечивает здоровое состояние и функциональность кишечным отделам системы пищеварения (толстой и тонкой кишке).

Микрофлора принимает участие в обменных процессах, регуляции клеточного иммунитета, усвоении полезных веществ, синтезе аминокислот и витаминов группы В. При нарушении равновесия микросреды развиваются кишечные расстройства, патологии бактериальной природы, хронические заболевания ЖКТ (желудочно-кишечного тракта).

Представителями микросреды кишечника являются:

• Нормальные полезные анаэробы (живущие без кислорода микроорганизмы), составляющие более 90% от общего числа бактерий. В кишечную группу входят лакто-, бифидо-, энтеробактерии, энерококки и кишечные палочки.
• Условно-патогенные грамположительные и грамотрицательные факультативные (нестрогие) анаэробы, количество которых строго ограничено (при активном размножении провоцируют бактериологические расстройства). К данной категории относятся стрептококки, стафилококки, клебсиелла, грибки рода кандида, клостридии, хеликобактер и другие микроорганизмы.

Кроме этого, существуют патогенные микроорганизмы, присутствие которых в кишечнике не предусмотрено. Они проникают из внешней среды, и являются причиной инфекционных заболеваний (шигеллеза, сальмонеллеза, холеры и др.). Активность условно-патогенных возбудителей проявляется при негативном экзокринном (внешнем) воздействии, на фоне ослабленного иммунитета.

Размножение в кишечнике условно-патогенных и болезнетворных (патогенных) бактерий, редко, протекает бессимптомно. Смещение равновесия флоры сопровождается:

• расстройством стула (диареей);
• тяжестью в эпигастральной области и тошнотой;
• рефлекторным выбросом содержимого желудка (рвотой);
• субфебрильной (37–38 °С) и фебрильной (38–39 °С) температурой тела;
• острыми болями в животе.

Наличие подобной симптоматики является прямым показанием к проведению лабораторной диагностики состояния микрофлоры кишечника. И также анализ кала на УПФ назначается:

• после контакта с потенциальным источником заражения (человеком, у которого диагностирована кишечная инфекция);
• для дифференциации возбудителя, и подбора максимально эффективного лекарственного препарата;
• в качестве контроля проводимой терапии кишечных заболеваний;
• в рамках медицинской комиссии при трудоустройстве на предприятие общественного питания и в медицинские учреждения.

При поступлении в некоторые дошкольные и учебные заведения, анализ УПФ проводится наряду с обязательной копрограммой. Разбалансировка соотношения вредных и полезных бактерий в кишечнике, иначе дисбактериоз особенно часто выявляется у маленьких детей. Исследование кала на условно-патогенную флору является одним из самых популярных в педиатрической практике.

Анализ кала на условно-патогенную флору выявляет виды и количество факультативных анаэробных бактерий, как причину кишечного расстройства. Кроме этого, в ходе исследования определяется степень резистентности (устойчивости) микроорганизмов к антибиотикам. Такое детальное изучение помогает врачу выбрать максимально эффективные препараты и результативную тактику лечения.

Экспертиза экскрементов представляет собой бактериологический посев биоматериала в специальные емкости, каждая из которых содержит питательную среду для того, или иного вида микроорганизмов. Среда обеспечивает бактериям дыхание, питание и оптимальные условия для размножения. Если патогены присутствуют в исследуемом образце, они начинают активно увеличивать свою численность, образуя колонии.

Количество КОЕ (колониеобразующие единицы) подсчитывается, идентифицируется конкретный активный микроорганизм. На выращенной колонии бактерий проводится антибактериальная проба (оценка резистентности патогена к разным видам антибиотиков). Параллельно с учетом патогенных и условно-патогенных микробов, лаборанты оценивают состав и численность полезных микроорганизмов.

Краткий результат может быть «положительным», что означает превышение нормы условных патогенов или наличие болезнетворных бактерий, которых в кишечнике быть не должно. «Отрицательная» оценка указывает на стабильность микрофлоры. В таком случае для установления причины плохого самочувствия пациенту назначаются дополнительные лабораторные анализы.

По необходимости их дополняют процедурами аппаратной и инструментальной диагностики. В развернутом результате фиксируются данные о конкретном возбудителе, то есть название микроорганизма и концентрация – количество КОЕ на миллилитр жидкой среды (КОЕ/мл).

Для получения объективных результатов анализа кала на УПФ, пациенту необходимо придерживаться специально разработанных правил. Подготовку организма рекомендуется начать за 2–3 дня до сбора биоматериала:

• устранить из рациона жареные блюда, тяжелую жирную пищу, сладости и сладкие газированные напитки, продукты, вызывающие интенсивное газообразование (бобовые культуры, капусту, молоко и кефир, сдобную выпечку, черный хлеб).
• исключить алкоголь;
• отказаться от приема лекарственных препаратов: антибиотиков, медикаментов, усиливающих моторику кишечника, слабительных таблеток, БАДов и лекарств, содержащих железо, сорбентов (Энтеросгель, Полисорб, Алкоклин и др.).

Применение сорбентов и препаратов антибактериальной терапии может уничтожить часть микробиоты кишечника, что приведет к искажению результатов исследования. Грудным детям перед анализом запрещается вводить новый прикорм. Непривычный для организма продукт может спровоцировать аллергическую реакцию, диспепсию (затруднительное пищеварение).

В этом случае итоговые данные о состоянии кишечной флоры будут неточными, и анализ придется повторить. Нельзя использовать ректальные суппозитории, микроклизмы, масла, способные изменить микрофлору. Непосредственно перед сбором биоматериала рекомендуется провести процедуру гигиены аноректальной области (без применения мыла и геля). Большое значение имеет предварительная подготовка емкости для экскрементов.

Необходимо приобрести в аптеке стерильный контейнер, снабженный специальной ложечкой. Для жидкого стула следует воспользоваться пипеткой. Собирать кал в нестерильную емкость запрещается. При попадании в исследуемый материал сторонних примесей, результат будет неточный. По этой же причине, не рекомендуется производить сбор биоматериала из унитаза.

Правильным будет использовать судно, листы бумаги, полиэтиленовую пленку. При сборе образца анализа с подгузника грудничка нужно следить, чтобы в контейнер не попали частички гигиенического материала. Женщинам не рекомендуется сдавать анализ в первые семь дней фолликулярной фазы менструального цикла (период кровяных выделений). Контейнер заполняется на 1/3 часть и плотно закрывается крышкой.

Достоверные результаты обеспечивает незамедлительная транспортировка образца анализа в лабораторию. Воздействие высоких температур или заморозка делают экскременты непригодными для исследования. Срок хранения собранного материала не должен превышать трех часов при комнатной температуре, и восьми часов в холодильнике.

Расшифровка анализа кала на условно-патогенную флору проводится посредством сравнения полученных результатов с референсными значениями, принятыми в лабораторной микроскопии. Нормы содержания различных микроорганизмов в кишечнике разработаны с учетом возрастных особенностей – отдельно для младенцев до двенадцатимесячного возраста и отдельно для взрослых и детей старше одного года.

На микрофлору младенцев оказывает влияние вид вскармливания. У малышей на грудном вскармливании количество бифидобактерий может достигать 10^11. При смешанном виде кормления значения уменьшаются от 10 в 6 степени до 10 в 9 степени. У искусственников показатель 10^8, считается нормальным. Значение бактероидов у детей и взрослых колеблется от 10 в 7 степени до 10 в 8 степени.

Если количество условно-патогенных микроорганизмов не превышает допустимые значения, оснований для постановки диагноза дисбактериоз нет. Чтобы уточнить причину недомоганий, необходимо пройти дополнительное обследование. Отрицательный контрольный результат, полученный после курсового лечения, означает выздоровление пациента.

Сниженные показатели полезных бактерий, указывают на дисбаланс флоры кишечника. Причинами могут быть:

• неправильное питание, увлечение диетами, голодание;
• хронические заболевания желудочно-кишечного тракта;
• патологии, связанные с врожденными (приобретенным) нарушениями выработки ферментов;
• дистресс (постоянное нервно-психологическое напряжение).

На сокращение численности полезных бактерий оказывает влияние прием некоторых лекарств. В бланке нормального (отрицательного) анализа на патогенную кишечную флору напротив всех бактерий патогенной группы (сальмонеллы, холерный вибрион, шигеллы, иерсинии, энтеровирусы) стоит прочерк либо «не обнаружено», «отсутствует», «не выявлено».

При обнаружении микроорганизмов, вызывающих инфекции, в бланке указывается: «+», «положительно» либо приводится конкретное значение выявленных микробов. Если при исследовании кала обнаружены патогены, не соответствующие нормальной микрофлоре, но при этом симптомы заболевания отсутствуют, человек является носителем возбудителя.

Непосредственный контакт с носителем представляет опасность контагиозности (заражения). Исказить итоговые данные анализа на УПФ может курсовое химиотерапевтическое лечение, прием антибиотиков, несвоевременная доставка биоматериала в медицинскую лабораторию. При неясных результатах, исследование необходимо провести повторно.

В задачу анализа кала на условно-патогенную флору (УПФ) входит определение качественно-количественного содержания бактерий, составляющих микросреду кишечника. Исследуемые микроорганизмы подразделяются на три группы:

• полезные аэробные бактерии;
• условно-патогенные микробы (допускаются в ограниченном количестве)
• патогены (в здоровой микрофлоре содержаться не должны).

Кроме численности бактериальных колоний, в ходе анализа оценивается их чувствительность к антибиотикам различных групп. Полученные результаты анализа сравнивают с нормативными значениями. Нормы детских и взрослых показателей незначительно отличаются. У грудных детей до года количество полезных микроорганизмов зависит от вида вскармливания (грудное, смешанное, искусственное).

Терапевтическую тактику и лекарственные препараты определят доктор. Самолечение может привести к осложнениям, особенно опасным для грудных детей. Анализ кала на УПФ назначает терапевт (детям – педиатр), гастроэнтеролог, врач-инфекционист. Точность результатов обеспечивает соблюдение рекомендаций по подготовке и сбору биоматериала.

источник

Лабораторная диагностика дисбактериоза кишечника – это микробиологическое исследование кала (бактериологическое или биохимическое), которое выявляет изменения нормального количества и качества микроорганизмов в составе ЖКТ.

Микрофлора организма в целом, и в частности микробиота кишечника, является сложнейшей экологической системой. Одним из определяющих факторов поддержания динамичного равновесия между организмом человека и микробами, которые его заселяют, то есть эубиоза, является сопротивляемость кишечника к колонизации бактериями. Вместе с этим, флора ЖКТ представляет высокочувствительную систему индикации, которая начинает остро реагировать на любые сдвиги в балансе своей экосистемы.

Нижний отдел ЖКТ человека заселяют около 500 представителей микрофлоры кишечника. Все они связаны между собой сложными взаимоотношениями. Их состав качественно и количественно сбалансирован. Эубиоз является важнейшей составляющей как нормального функционирования желудочно-кишечного тракта, так и здоровья в целом, поскольку выполняет определяющую задачу в иммунной системе организма.

Главные представители микробиоты кишечника:

• Молочнокислые бактерии (лактобациллы, бифидобактерии), бактероиды, относящиеся к классу анаэробов.
• Факультативные, способные жить как в кислородной, так и в бескислородной среде, и индигенные, то есть постоянно встречающиеся (кишечная палочка).
• Добавочная микробиота (клетки грибов и бактерии семейства стафилококковых).
• Аллохтонная, то есть случайная микробиота – или, как еще называет ее, условно-патогенная (к ней относятся неферментирующие бактерии и много видов энтеробактерий).

Все эти микробы выполняют очень важные функции. Известно, что кишечные палочки – это главные защитники организма, которые предотвращают размножение патогенных бактерий и некоторых штаммов вирусов. Кислая среда и антибиотические вещества, которые продуцирует нормальная микрофлора, содействуют хорошей перистальтике, а также препятствуют образованию колоний условно-патогенных микроорганизмов.

Индигенные микроорганизмы способствуют выработке большого количества ферментов, участвующих в водно-электролитном обмене, а также в усвоении жиров, углеводов и многих белков. К тому же они выполняют важную функцию в синтезе многих витаминов, фолиевой и никотиновой кислоты, незаменимых аминокислот.

Особо важную роль нормальная флора играет в формировании иммунной системы и выработке неспецифических защитных реакций. Также она оказывает противоаллергическое воздействие, участвует в выведении токсических веществ.

Основа нормальной микроэкологии кишечника – это бактероиды и молочнокислые бактерии. Остальных видов в норме должно быть гораздо меньше.

Увеличение колоний условно-патогенных бактерий и добавочной флоры, вследствие чего происходит нарушение баланса микробиоты кишечника, называется дисбактериозом.

Обычно посев кала на микрофлору (анализ кала на микропейзаж) рекомендует провести гастроэнтеролог, инфекционист или терапевт, реже – другие узконаправленные специалисты. Бактериологическое исследование кала назначают для постановки диагноза дисбиоза, дифференциации других диагнозов в комплексном обследовании ЖКТ, общей оценки состояния микроэкологии кишечника.

В случае неэффективного лечения при дисбактериозе, энтероколите или антибактериальной терапии, а также при антибиотик-ассоциированной диарее рекомендуют сдать кал на дисбактериоз с определением чувствительности к антибиотикам и к бактериофагам. Потому что при обычном исследовании не всегда делают акцент на чувствительность к антибиотикам.

Когда рекомендуется сдача кала на бакпосев:

• при наличии кишечной инфекции неопределённого происхождения,
• при кожных высыпаниях и различных аллергических реакциях неясной этиологии,
• при длительных запорах, диарее и других функциональных нарушениях стула,
• в случае долгой медикаментозной терапии антибиотиками, гормонами, иммуномодуляторами, а также при химической и лучевой терапии.

На информативность анализа кала на дисбактериоз могут повлиять следующие факторы:

• Облигатные анаэробы (например, клостридии, относящиеся к классу условно патогенной флоры) могут жить только в условиях бескислородной среды. Когда проводится забор кала при дисбактериозе, значительная часть анаэробов гибнет, соприкасаясь с воздухом. Поэтому результаты анализа могут показать наличие этих организмов в значительно меньшем количестве, чем есть на самом деле.
• Нарушен правильный алгоритм проведения анализа на дисбактериоз (допущенные погрешности в лаборатории).
• Нарушена техника взятия анализа (забор испражнений в нестерильную емкость, замораживание каловой массы, использование слабительных для дефекации, неправильное хранение и т. д.).
• Прием антибиотиков, пробиотиков и других лекарственных средств.
• Время доставки кала для анализа (чем больше пройдет времени от забора испражнений до начала исследования, тем менее точными окажутся показатели сданного анализа).

Поэтому расшифровка исследования анализа кала на дисбактериоз (баканализ кала или биохимия) проводится только специалистом с учетом других анализов и общего обследования состояния организма.

К тому же нормы лактобактерий и других микроорганизмов являются условными, и что для одного человека может быть индивидуальной особенностью и нормой, для другого – патологией. Микрофлора кишечника не является постоянной величиной, в ней регулярно происходят изменения, в том числе связанные с возрастом. К тому же количество тех или иных бактерий может варьироваться в зависимости от пищевых привычек, наличия стрессовых и мн. др. факторов.

В современной медицине используются три методики исследования микропейзажа кала (анализа на дисбиоз) – два главных и один вспомогательный. Это бактериологическое исследование (бак посев кала), биохимический анализ кала на дисбактериоз (экспресс-анализ) и копрология.

Копрологические исследования фекалий являются базовыми, первичными. Это дополнительный способ, который дает общие диагностические данные о состоянии и функционировании кишечника.
Копрологический анализ проводится двумя способами. Это:

• Макроскопический – оценивают остатки непереваренной еды, цвет кала, его запах, форму, консистенцию, смотрят, присутствуют ли в фекалиях слизь, жир (мыла) и пр. компоненты.
• Микробиологический (микроскопия) – оценивают переваренную еду, клетки мышечных волокон, перевариваемой и неперевариваемой растительной клетчатки, остатки различных тканей.

Если копрология в кале у взрослого показывает девиацию от нужных значений, специалист может назначить сдать анализ кала на дисбактериоз. Бак анализ кала выполняется в бактериологической или широкого медицинского спектра лаборатории, где проводят посев кала на дисбактериоз.

Сколько делается анализ на дисбактериоз? Это довольно длительное по времени исследование. Готовиться анализ может не меньше шести дней и даже больше.

Сначала производится «засевание» исследуемого материала в питательной для бактерий среде. Микроорганизмы растут как минимум четверо суток, затем лаборант их подсчитывает.

При сдаче кала на бактериологическое исследование данные подсчитываются в колониеобразующих единицах на один грамм материала – КОЕ/г. Все полученные значения записываются в специальный бланк.

Биохимический или газожидкостный хроматографический анализ кала на дисбиоз – это довольно новая методика, которая получила свое распространение в начале двухтысячных годов. Считается более передовым и информативным, чем взятие кала на бак посев. К тому же результаты этого исследования будут готовы уже через несколько часов.

При биохимии на дисбиоз кишечника определяют спектр жирных кислот, которые являются продуктами жизненной деятельности бактерий. Если обследовать кал на микропейзаж по данной методике, это позволит не только выявить количественные изменения микробиоты, но и определить, в каких именно частях кишечника нарушен баланс.

К тому же, сдать анализы на дисбактериоз кишечника биохимическим способом гораздо проще. Собранную каловую массу не обязательно сразу же привезти и исследовать, как при бактериологической диагностике. Ее можно заморозить и хранить сутки в морозильной камере.

Интерпретация данных проводится соответственно возрастной норме. И если изучались испражнения на дисбактериоз у взрослых, то показатели в КОЕ/г будут следующими:

• Молочнокислые бактерии – 106 -1010.
• Бактероиды – 107-108.
• Эшерихии – 106-108.
• Пептострептококки – 105-106.
• Болезнетворные стафилококки и энтеробактерии – должны отсутствовать.
• Энтерококки – 104.
• Клостридии – не больше 105.
• Условно-патогенные стафилококки – не больше 103.
• Кандида – отсутствует или в малом количестве.

Изменение численности тех или иных микроорганизмов может говорить о том, что снижен иммунитет. Вследствие чего молочнокислых микроорганизмов становится меньше, а колонизация условно-патогенных возрастает. Также дисбактериоз могут вызывать патогенные штаммы микробов, попавших в организм при несоблюдении норм гигиены. Третья и самая широко распространенная причина нарушения баланса – прием антибиотиков.

Подготовка к анализу включает в себя соблюдение диетического режима в течение нескольких суток, отказ от мясных продуктов, а также фруктов и овощей в сыром виде. Также перед тем, как сдавать анализ, необходимо перестать принимать пробиотики и пребиотики, антигистаминные и прочие лекарства. Сдавать бак анализ рекомендуется после антибактериальной терапии не раньше, чем через 10 дней после ее окончания.

От того, как подготовиться и как сдавать анализ, и насколько верно были соблюдены все правила, напрямую зависит точность и достоверность результатов.

Как собрать и как правильно сдать кал на дисбиоз:

• Перед тем, как провести сбор кала, требуется подготовить емкость. Она должна плотно закрываться и быть в запечатанном виде. Анализ сдается обязательно в стерильном контейнере.
• Перед актом дефекации необходимо тщательно провести гигиену промежности и анального отверстия.
• Стул для исследования должен быть результатом акта самопроизвольной дефекации. Никаких клизм и других вспомогательных средств использовать нельзя.
• Перед дефекацией необходимо опорожнить мочевой пузырь. Попадание в анализ мочи и других жидкостей не допускается.
• Как правильно собрать кал? Чистыми руками нужно отрыть емкость, достать ложку и непосредственно после дефекации собираем из разных мест, желательно не касающихся унитаза, 5–6 ложек кала. Если в экскрементах видна кровь, слизь и пр. подозрительные компоненты, их тоже необходимо поместить в контейнер, и плотно его закрыть.
• После забора желательно сразу же сдавать кал в лабораторию. Хранить исследуемую массу можно в холодильнике, но хранить не дольше 3–4 часов (для бак анализа кала на дисбактериоз с определением чувствительности). Для хроматографического допускается замораживание и хранение материала до 24 часов.

В том, как правильно сдавать анализ, нет ничего сложного. И при соблюдении этих простых рекомендаций, показанный анализ можно будет провести достоверно. Ведь именно от техники выполнения алгоритма зависит точность результатов, а значит точность постановки диагноза и эффективное лечение.

источник

Анализ на кишечную группу — популярное исследование. Его назначают как для диагностики острых заболеваний, так и с целью выявления скрытого течения у носителей болезни. Когда у взрослого человека или ребенка появляется понос, температура, боли в животе, рвота, то поставить диагноз только на основании клиники невозможно, поскольку многие кишечные инфекции протекают с похожими симптомами.

Кроме того, для назначения оптимального противобактериального лечения необходимо знать конкретный возбудитель заболевания. Согласно существующим инструкциям санитарной службы и Министерства здравоохранения, все люди, работающие на производстве пищевых продуктов или контактирующие с ними при транспортировке, продаже, упаковке, приготовлении пищи, уборке помещения, регулярно проходят анализ на кишечную группу.

Результат отмечается у них в «Санитарной книжке» вместе с заключением врачей. Зачем уделять столько внимания анализу кала, мы постараемся рассказать в статье.

В кишечнике здорового человека спокойно проживают около 500 видов микроорганизмов. Они вполне успешно соседствуют с макроорганизмом, помогают ему выполнять ряд важных функций, сами питаются из кишечного содержимого. Принято разделять по принципу опасности всю флору на 3 вида.

Полезные — в любых условиях поддерживают пищеварение, вырабатывают витамины, обеспечивают иммунитет. Среди них основные:

• бифидобактерии;
• бактероиды;
• лактобактерии;
• эшерихии;
• грибы.

Всего таких микроорганизмов 15. Условно патогенные микроорганизмы безвредны, если человек силен и здоров, но в случае падения защитных сил становятся дополнительным агрессивным фактором и способны нанести существенный вред.

• стафилококки;
• энтерококки;
• кишечная палочка;
• клостридии;
• грибы рода Кандида.

Патогенные — это возбудители инфекционного заболевания, которых в норме не должно быть, но они могут принимать настолько хорошо защищенные формы, что длительно живут в кишечнике носителя в виде цист. А человек даже не подозревает, что является разносчиком инфекции. К ним относятся:

• сальмонелла;
• шигелла;
• дизентерийная амеба;
• кишечная трихомонада;
• балантидий;
• холерный вибрион и другие.

Если врач назначает анализ кала на кишечную группу, то его в первую очередь интересуют вероятные возбудители болезни. Ведь зная их особенности и поражающие свойства можно:

• выяснить источник заражения;
• ограничить распространение очага заболевания;
• обследовать контактных лиц;
• назначить курс оптимальной терапии.

Пациент с острым расстройством пищеварения и подозрением на заражение направляется в инфекционное отделение стационарного типа. Дети госпитализируются вместе с мамами. В условиях больницы удается изолировать больного, провести максимально полное обследование и лечение.

Наиболее часто кишечная группа возбудителей проявляется следующими заболеваниями:

1. Дизентерией — вызывается шигеллой, основной «удар» наносится желудку и толстому кишечнику. Возбудитель отличается хорошей приспособляемостью к условиям внешней среды. Живут в отбросах и фекалиях до двух месяцев. Человек получает инфекцию через грязные руки или зараженные продукты.
2. Сальмонеллезом — излюбленным местом поражения служит тонкий кишечник. Болезнь сопровождается выраженной интоксикацией. Для маленьких детей — особенно опасна, поскольку вызывает тяжелые осложнения (пневмонию, менингоэнцефалит, общий сепсис). Возбудители делятся на виды, кроме сальмонеллеза, вызывает брюшной тиф заражение фекально-оральным путем, через недостаточно обработанные продукты, грязную воду.
3. Коли-инфекциями — заболевания, вызываемые разными по серотипу кишечными палочками. Чаще возникают у грудничков. Поражают толстый кишечник. Передаются от носителей или больных взрослых людей при несоблюдении основных правил гигиены и ухода за младенцем.

Эти примеры показывают насколько важно своевременно проводить анализ не только кала, но и продуктов питания, питьевой воды, смывов с рук персонала. Особенно если болезнь выявлена в детских учреждениях.

Для получения достоверных результатов пациента предварительно следует подготовить:

• рекомендуется 4–5 дней не есть мясных блюд, не принимать алкоголь, питаться только молочными продуктами, кашами, картошкой, белым хлебом;
• за три дня до сбора кала прекратить прием антибиотиков, слабительных средств, препаратов железа (заранее можно предположить отрицательный результат у пациентов, которые самостоятельно начали лечение антибиотиками), введение ректальных свечей.

К правилам сбора относятся:

• предупреждение попадания в исследуемый материал посторонних примесей (мочи, крови при менструации у женщин), ребенку нужно дать возможность предварительно помочиться, женщинам применять чистый влагалищный тампон, если нельзя перенести срок анализа;
• посуду для исследуемого материала нельзя обрабатывать дезинфицирующими средствами (хлоркой), баночку нужно хорошо промыть с мылом и облить кипятком;
• таким же образом обрабатывается горшок малыша;
• на доставку в лабораторию отводится не более двух часов, хранение в холодильнике допускает 4 часа отсрочки, чем дольше задержка срока транспортировки, тем менее результативными будут полученные данные, поскольку часть возбудителей погибает.

• в домашних условиях — в стерильную посуду, по объему следует ориентироваться приблизительно на полную чайную ложку;
• в инфекционном кабинете или в стационаре берут ректальный мазок тампоном, в положении пациента на боку лаборант вводит стерильный тампон на палочке в прямую кишку на небольшую глубину и проворачивает его, затем сразу помещает в пробирку со специальной средой;
• у маленького ребенка можно взять материал непосредственно с памперса.

Для более вероятного результата на исследование берут три пробы кала. Все применяемые методики относятся к виду «инвитро», что означает «на стекле». Другая возможность «in vivo», проводимая с помощью заражения животных, в данном случае не нужна.

Собранный материал в небольшом количестве помещают на 4–5 дней на питательную среду. Здесь вырастают колонии, из которых можно приготовить мазок на кишечную группу даже при очень малом количестве микроорганизмов.

Квалифицированные бактериологи способны выявить патологические возбудители, ориентируясь на внешний вид, подвижность под микроскопом. Метод называется бактериоскопией.

источник

Бактериологический посев кала (бак посев) – это биологическое исследование испражнений, которое определяет состав и примерное количество микроорганизмов, обитающих в кишечнике человека. Для этого используется внесение частиц кала на разные питательные среды, на которых растут 3 группы микроорганизмов: нормальные (необходимы для переваривания пищи), условно-патогенные (изменяют свои свойства нормальных) и патогенные (болезнетворные). Одновременно можно установить чувствительность болезнетворных бактерий и к антибиотикам и бактериофагам.

Группы микроорганизмов кишечника:

• Нормальные бактерии – бифидобактерии, молочнокислые (лактобактерии) и кишечная палочка, имеющая типичные свойства, бактероиды;
• Условно патогенные бактерии – энтеробактерии, клостридии, анаэробные и неферментирующие бактерии;
• Патогенные бактерии – атипичная кишечная палочка, имеющая гемолитические или ферментативные свойства, стафилококки, грибки рода кандида (дрожжевые), шигеллы, патогенные сальмонеллы, протей, синегнойная палочка.

Бакпосев кала устанавливает состав и количество кишечной микрофлоры. Другое название исследования – кал на дисбиоз или кал на кишечную группу.

Анализ состоит из двух этапов. На первом специально приготовленный мазок рассматривают в микроскоп, при этом обнаруживаются бактерии. Их помещают в питательные среды, которые стандартизованы (проще говоря, давно известно, какие микроорганизмы в каких средах развиваются лучше всего).

Лабораторную посуду со средами и посевом помещают в термостат, имитирующий температуру и влажность человеческого тела. В термостате среды находятся до 7 дней. Время необходимо для того, чтобы все внесенные бактерии успели размножиться и образовать колонии (колония – потомки одной бактерии). По истечении этого срока подсчитывают количество выросших бактерий и колоний.

Некоторые среды изначально содержат антибиотики или бактериофаги. Сравнивая количество колоний, выросших на обычной питательной среде и содержащей антибиотики, можно узнать, какие лекарства способны существенно уменьшить рост бактерий. Так определяется чувствительность к антибиотикам.

По результату можно судить о том, бактерии какой группы преобладают в кишечнике конкретного человека и насколько изменена нормальная микрофлора.

От качества сбора материала зависит достоверность анализа, поэтому все пункты нужно тщательно выполнять. Смысл всех действий – стерильность, чтобы в материал не попали бактерии, всегда находящиеся во внешней среде и не имеющие отношения к человеку.

При подготовке требуется соблюдать такие условия:

• За 2-е суток прекратить прием препаратов, содержащих висмут (Де-нол, Викаир, Викалин, Вентрисол, Бисмофальк и подобных) и железо (Тардиферон, Ферроплект, Феррум-лек);
• дождаться естественного акта дефекации, при необходимости перенеся дату сдачи материала;
• если какие-то лекарства нужно принимать ежедневно, сообщить об этом врачу и лаборанту.

Чего делать ни в коем случае нельзя:

• использовать слабительные, их применение искажает результат;
• использовать свечи, даже глицериновые;
• ставить клизму, микроклизмы (Микролакс, Норгалакс) в том числе.

Для сбора кала в аптеках имеются разовые стерильные контейнеры с ложечкой. Самый дорогой стоит до 10 рублей, есть и намного дешевле. Контейнер не должен содержать ни жидкости, ни консерванта (провизору просто сказать, что для анализа на дисбиоз). Хорошие лаборатории выдают такие контейнеры при обращении, внося стоимость в цену анализа.

Использовать другую посуду – баночки из-под детского питания и прочее – нежелательно, так как даже кипячение не обеспечивает стерильность. В домашних условиях добиться стерильности, необходимой для лабораторной посуды, невозможно.

1. Для сбора материала использовать чистое сухое судно – для лежачих. Для ходячих – поместить в унитаз новый полиэтиленовый пакет так, чтобы пакет закрывал всю поверхность. Для детей – подстелить чистую пеленку, с подгузника брать нельзя (подгузник и тем более памперс впитывает жидкость).
2. После дефекации открыть контейнер, достать ложечку (прикреплена к крышке), ничего не касаясь внутри контейнера.
3. Собрать ложечкой материал из середины, не касаясь краев.
4. Заполнить контейнер не больше чем на одну треть.
5. Завинтить крышку.
6. Нанести на контейнер четкую надпись: фамилия и инициалы, год рождения, дата и время сбора материала (некоторые лаборатории требуют номер направления).

Контейнер с материалом должен быть доставлен в лабораторию в течение 3-х часов. Если привезти позже, лаборатория просто не примет, поскольку анализ не может быть достоверным.

В пути желательно избегать попадания прямого солнечного света и перегревания. Лучше всего поместить контейнер, обернутый полиэтиленовым пакетом, в сумку или портфель. Нельзя ставить его на переднюю панель автомобиля, держать у печки или носить под шубой. Зимой достаточно той температуры, что есть в сумке или портфеле, укутывать не надо.

Некоторые лаборатории допускают прием материала через 8 часов, если он хранился в холодильнике. Это нужно уточнить в лаборатории.

Полную оценку дает врач, приведенные ниже данные – ориентировочные.

Бланк каждой лаборатории содержит нормальные средние или референсные значения, с ними сравнивают полученные показатели.

Референсные значения находятся в пределах:

• типичная кишечная палочка – от 10 7 до 10 8 ;
• палочки лактозонегативные – менее 10 5 ;
• кишечная палочка гемолитическая – отсутствует;
• протей – менее 10 2 ;
• энтеробактерии условно-патогенные – менее 10 4 ;
• бактерии неферментирующие – до 10 4 ;
• энтерококки – до 10 8 ;
• гемолитический стафилококк – отсутствует;
• стафилококки прочие (сапрофитные) – до 10 4 ;
• бифидобактерии – до 10 10 ;
• лактобактерии – до 10 7 ;
• бактероиды (нормальные обитатели) – до 10 7 ;
• клостридии – не более 10 5 ;
• дрожжевые грибки – менее 10 3 .

Гастроэнтерологи выделяют 3 степени тяжести дисбиоза:

• Первая степень. Снижение количества лакто- и бифидобактерий на 1-2 порядка в сочетании с появлением кишечной палочки измененных форм (гемолитические, лактозонегативные);
• Вторая степень. Значительное повышение количества условно-патогенных бактерий (до 10 5 колониеобразующих на грамм);
• Третья степень. Высокое содержание условно-патогенных и болезнетворных бактерий.

Конкретное лечение назначает врач в зависимости от клинической картины и результатов обследования. Общие принципы такие:

• удаление причины, вызывавшей дисбиоз – отмена антибиотиков или уничтожение инфекционного агента;
• дробное питание отварной протертой пищей;
• исключение алкоголя, жирного и жареного, копченостей и маринадов;
• ежедневное употребление кисломолочных продуктов;
• назначение лекарств для восстановления нормальной микрофлоры: пробиотиков (сухие или сорбированные штаммы бактерий), пребиотиков (питательные вещества для нормальной микрофлоры) и синбиотиков (содержат оба компонента).

Бакпосев кала быстро дает ответ на вопрос, почему нарушено пищеварение и как это исправить.

источник

Чтобы обезопасить себя, а также сохранить свое здоровье, следует периодически сдавать тест на наличие полезных организмов в кишечнике. Об особенностях такого тестирования будет рассказано в данной статье

Анализ посева на микрофлору кишечника производится для того, чтобы выявить нарушения в работе органа. Если такой анализ проведен правильно, то доктор сможет установить нарушения дисбаланса микрофлоры, а также отсутствие или наличие нужных для нормальной жизнедеятельности человека бактерий. Как только полезные организмы в теле человека уменьшаются, то в то же самое время их место занимают болезнетворные микробы. О том, что происходит в кишечнике человека, может рассказать анализ посева на микрофлору.

Известно, что если человек здоров, то у него в кишечнике есть микроорганизмы, которые являются основной частью и составляющей микрофлоры. Обычно представлены они кишечными палочками, которые имеют нормальные свойства ферментации. Благодаря таким организмам в кишечнике обеспечивается приемлемая микрофлора, что также предотвращает возможность заселения туда других бактерий, которые негативно сказываются на здоровье в целом.

Благодаря кишечной палочке в кишечнике обеспечивается нормальное переваривание принятой пищи, а потому в организм в достаточном количестве попадают все микроэлементы, что дает возможность противостоять инфекциям и обеспечивать стабильную и нормальную работу иммунной системы.

Все такие бактерии, которые не очень полезны для организма, нуждаются внутри тела в притоке кислорода. Если они находятся в кишечнике в небольшом количестве, то это для человека не страшно, так как они не могут в небольшом количестве негативно повлиять на работу кишечника. Но когда их количество начинает расти, то это может стать причиной нарушений в работе пищеварительного тракта.

В результате этого человек может испытывать неприятные симптомы, например, частый стул, запоры или боли в животе. Также может в его испражнениях находиться и не переваренная пища. Кроме того при дисбактериозе может наблюдаться ломкость ногтей и волос, ухудшение аппетита, налет на зубах и прочее. В целом такое заболевание может спровоцировать то, что защита организма будет значительно уменьшена, от чего может пострадать и иммунитет. Такой организм будет подвержен разным заболеваниям.

Особенно опасен дисбактериоз для детей, так как у них не такая развитая иммунная система, как у взрослых. Чтобы определить количество полезных бактерий в кишечнике, специалисты и проводят анализ посева на микрофлору. При помощи анализа посева на микрофлору специалист определяет, какое соотношение в организме полезных и вредных для него бактерий.

Также анализ посева на микрофлору позволит определить чувствительность таких микроорганизмов к различным медицинским препаратам, при помощи которых и проводится лечение. Это поможет врачу составить правильную схему лечения и приписать пациенту требуемые препараты.

Для проведения анализа посева на микрофлору стоит собрать кал в указанное врачом время. Чтобы определить чувствительность бактерий в кишечнике к антибиотикам, следует сдать определенное количество кала. Для взрослого это составит порядка 6-10 миллиграмм материала. Перед сдачей анализа на чувствительность паразитов в кишечнике к антибиотикам стоит придерживаться всех советов лечащего врача и его рекомендаций. Это поможет более точно определить наличие микробов в организме, а также определить их тип.

источник

Микробиологическое исследование, позволяющее качественно и количественно охарактеризовать условно-патогенную флору кишечника, а также определить чувствительность к антибиотикам отдельных ее представителей.

Условно-патогенные микроорганизмы, условно-патогенные бактерии, условно-патогенные микробы, условно-патогенные возбудители, анализ на дисбактериоз, анализ на УПФ.

Синонимы английские

Opportunistic pathogens, opportunistic flora, opportunistic organisms, antibiotic susceptibility.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
• Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.

Общая информация об исследовании

Условно-патогенная флора – это микроорганизмы, которые присутствуют у человека в умеренных количествах. Однако при определенных условиях их количество увеличивается и превышает допустимую норму, что приводит к соответствующим заболеваниям. К наиболее распространенным представителям условно-патогенной флоры кишечника относятся: золотистый стафилококк (S. aureus), клебсиеллы (Klebsiella), эшерихии (Escherichia), энтеробактер (Enterobacter), цитробактер (Citrobacter) и ацинетобактер (Acinetobacter), протей (Proteus), клостридии (Clostridia), серрации (Serratia), псевдомонады (Pseudomonas), дрожжеподобные грибы (Candida и др.) и другие возбудители. Эти микроорганизмы могут вызывать инфекционное поражение желудочно-кишечного тракта с развитием гастроэнтерита, энтерита и энтероколита.

Посев кала на условно-патогенную флору с определением чувствительности к антибиотикам используется для диагностики кишечных инфекций, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, а также для определения чувствительности этих возбудителей к антибиотикам.

Для чего используется исследование?

• Для установления возбудителя кишечной инфекции.
• Для дифференциальной диагностики (наряду с другими исследованиями) заболеваний, протекающих со сходными симптомами (диарея, воспалительные заболевания кишечника, колоректальный рак, болезни, сопровождающиеся нарушением всасывания).
• Для того чтобы оценить эффективность проводимой антибактериальной терапии.

Когда назначается исследование?

• При симптомах кишечной инфекции.

Если в посеве наблюдается умеренный рост условно-патогенных микроорганизмов (не превышающий норму), то утверждать, что они вызвали кишечную инфекцию, нельзя. Обильный рост условно-патогенных микроорганизмов (превышающий норму) свидетельствует о том, что они явились причиной развития инфекции.

Что может влиять на результат?

Предшествующая антибактериальная терапия или химиотерапия ведет к ложноотрицательному результату.

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, педиатр, гастроэнтеролог, инфекционист.

• Энциклопедия клинических лабораторных тестов / под ред. Н. У. Тица. – М. : «Лабинформ», 1997. – 942 с.
• Руководство по инфекционным болезням / под ред. Ю. В. Лобзина, С. С. Козлова, А. Н. Ускова. – CПб. : Феникс, 2001. – 932 с.

источник

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразная цепная реакция (ПЦР) и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, уреа- микоплазмы медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

• Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают бактериальный вагиноз (гарднереллез);
• Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
• Наличием патогенных микробов, которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями сифилиса – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов, которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

1. Первым пунктом заключения, как правило, стоит название возбудителя на латинском языке, например, Escherichiacoli. Это – кишечная палочка, она является естественным обитателем кишечника и в допустимых количествах никакого вреда не приносит;
2. Следующий пункт – концентрация микроорганизма. Е.coli– обильный рост (1х10^ 6 и более) норма – менее 1x10^ 4 ;
3. Далее – патогенность: флора условно-патогенная.

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

• Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
• Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
• Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или мазок из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

• У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
• У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
  1. дифтероидами;
  2. стафилококками;
  3. некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала, перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку, окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14, поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный грибок рода Candida (обычно это Candida albicans), трихомонады и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой гонореей и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает хламидийная инфекция, приносящая большой вред не только при беременности. Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

• Бактериальной петлей;
• Пастеровской пипеткой;
• Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

1. Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
2. Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
3. Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1 : 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

• Размер и форму бактериальной клетки;
• Наличие капсул, жгутиков, спор;
• Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном. Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

источник