Бактериоскопический метод исследования мокроты

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

1. Предметные и покровные стекла.
2. Шпатели и иглы.
3. Смесь Никифорова.
4. Газовая или спиртовая горелка.
5. Пастеровская пипетка с резиновым баллончиком.
6. Водяная баня с мостиком.
7. Иммерсионное масло.
8. Микроскоп.
9. Фильтровальная бумага.
10. Пинцеты Корне.
11. Бумажки Синева.
12. Основной фуксин.
13. 96° этиловый спирт.
14. Фенол.
15. Глицерин.
16. Концентрированная соляная кислота.
17. Метиленовая синька.
18. Дистиллированная вода.
19. Генцианвиолет.
20. Реактив Люголя.
21. Едкий натр (NaOH).
22. Бензин или ксилол.

Для бактериоскопического исследования готовят обычно два препарата: один для обнаружения микобактерий туберкулеза и другой для обнаружения прочих микроорганизмов. Для первого препарата отбирают те же частицы, которые были предназначены для микроскопии, для второго — гнойные частицы. Взятый материал распределяют по предметному стеклу до получения достаточно тонкой ажурной сеточки (материал на первом стекле распределяют на 2/3 его поверхности, на втором — в центре).

Оба препарата фиксируют троекратным проведением над пламенем горелки. Первый препарат окрашивают по Цилю — Нильсену, второй — по Граму.

Для окраски препаратов по Цилю-Нильсену необходимы следующие краски и реактивы:

1. Фуксин Циля: основного фуксина 1 г, глицерина 4 капли, этилового спирта 96° 10 мл, карболовой кислоты (5% раствор фенола) 5 мл, дистиллированной воды 90 мл. К фуксину, помещенному в фарфоровую ступку, прибавляют глицерин, хорошо растирают, постепенно приливают карболовую кислоту, спирт и воду. Фильтруют.
2. 3% раствор солянокислого спирта: 3 мл концентрированной соляной кислоты удельного веса 1,19 и 97 мл 96° этилового спирта.
3. 0,2 % водный раствор метиленовой синьки — 1 г метиленовой синьки растворяют в 500 мл дистиллирован- вой воды.

Техника окраски . На фиксированный препарат кладут полоску фильтровальной бумаги (уже и короче предметного стекла), на которую наливают в избытке фуксин Циля. Затем препарат нагревают до появления паров (достаточно троекратно медленно провести его над пламенем горелки), дают ему остыть в течение 3-5 минут, сбрасывают с помощью пинцета бумажку, промывают препарат водой и наливают на него 3% раствор солянокислого спирта для обесцвечивания на 20 секунд. После этого препарат промывают водой и вновь повторяют обесцвечивание. Материал должен быть серовато-розового цвета. Затем на препарат на 20-30 секунд наливают 1: 500 водный раствор метиленовой синьки, краску сливают, препарат промывают водой и высушивают, установив в вертикальном положении на полоску фильтровальной бумаги.

Высушенный препарат рассматривают под микроскопом с иммерсией, с поднятым конденсором.

В препарате микобактерии туберкулеза (рис. 60) красного цвета, нежные, тонкие, слегка изогнутые, иногда зернистые. Иногда обнаруживают микобактерип туберкулеза в виде так называемых осколков (в составе тетрады Эрлиха).

Рис. 60. Микобактерии туберкулеза в мокроте. 1 — окраска по Цилю-Нильсену, 2 — в люминесцентном микроскопе.

Все остальные элементы, в том числе и другие микроорганизмы, окрашены в синий цвет. С целью обнаружения мпкобактерий туберкулеза препарат тщательно исследуют, продвигая от одного продольного края к другому и поперек мазка. Во всех сомнительных случаях рекомендуют обработать препараты жавелевой водой
Результат исследования оформляют, используя следующую формулировку: «микобактерип туберкулеза не обнаружены» или «микобактерип туберкулеза обнаружены», и отмечают приблизительное их количество, например, «единичные в препарате», «единичные в поле зрения» и т. д.

В настоящее время находит все большее распространение люминесцентный способ обнаружения микобактерий туберкулеза в мокроте. Микобактерип туберкулеза имеют золотисто-желтое свечение на черном фоне препарата (рис. 60, 2).

В тех случаях, когда количество микобактерий туберкулеза в мокроте незначительно, для их обнаружения применяют метод обогащения (флотация), который состоит в следующем. В бутылку с нешироким горлышком (емкостью 250 мл) помещают 12-20 мл мокроты, добавляют равный объем 0,5% раствора КОН и встряхивают 5-10 минут. Затем приливают около 10 мл дистиллированной воды и 0,5-1 мл бензина или ксилола, взбалтывают 10-15 минут и доливают дистиллированную воду гак, чтобы горлышко бутылки было заполнено. Смесь оставляют на 1-2 часа до образования на поверхности жидкости сливкообразного слоя. На два предметных стекла, заранее расположенных на мостике над водяной баней, нагретой до 60-65°, каплями, с помощью пастеровской пипетки, 5-6 раз наносят сливкообразный слой, каждый раз после подсыхания предыдущей капли. Мазки окрашивают фуксином Циля на водяной бане (без дополнительной фиксации) в течение 10 минут, промывают водой, 3-4 минуты обесцвечивают 3% раствором солянокислого спирта, вновь обмывают водой, докрашивают 0,2% водным раствором метиленовой синьки, высушивают и исследуют под микроскопом.

Для окраски препаратов по Граму требуются следующие краски и реактивы:

1. Разведенный фуксин Циля (фуксин Пфейффера): 1 часть фуксина Циля + 9 частей дистиллированной воды.
2. Реактив Люголя.
3. 1 % спиртовой раствор генцианвиолета — 1 г генцианвиолета растворяют в 100 мл 96° этилового спирта. Этот раствор краски можно заменить бумажкой, приготовленной по методу Синева (белую фильтровальную бумажку пропитывают 1% спиртовым раствором генцианвиолета, затем высушивают и разрезают на мелкие квадратики соответственно размеру мазка).

Техника окраски . На фиксированный препарат накладывают бумажку Синева и смачивают ее водой (при отсутствии бумажки Синева ее заменяют белой фильтровальной бумажкой, на которую наносят несколько капель 1% спиртового раствора генцианвнолета). Через 1-2 минуты бумажку сбрасывают и на препарат наливают 1-2 капли реактива Люголя. Через 1-2 минуты препарат обесцвечивают 1-2 каплями 96° этилового спирта до появления бледно-серой окраски материала, смывают водой, на 10-15 секунд наносят сруксин Пфейффера, после чего вновь смывают водой и высушивают. В препаратах могут быть обнаружены (рис. 61) стафилококки, стрептококки, диплококки, палочки Пфейффера, спирохеты Плаута-Венсана, актиномицеты и другие микроорганизмы.

Рис. 61. Различные микроорганизмы в мокроте: диплококки (1), палочки Пфейффера (2), стрептококки (3), стафилококки (4), диплобациллы Фридлендера (5), симбиоз Венсана (6), мицелий актиномицет (7).

После проведенного исследования мокроту сжигают или обеззараживают. Последнее достигается следующими способами: а) автоклавированием в течение одного часа при 1,5 атм.; б) кипячением в течение одного часа в 1-2% растворе соды; в) обработкой 5% раствором лизола, карболовой кислоты или смесью, состоящей из равных объемов 5% раствора хлорамина и 5% раствора сернокислого аммония, в течение 12-24 часов. После обеззараживания посуду тщательно моют водой и высушивают.

Металлические предметы (шпатели, иглы) обеззараживают прокаливанием над огнем. Во избежание переноса микроорганизмов из одной порции мокроты в другую шпатель и иглу немедленно прокаливают после отбора соответствующих частиц.

Покровные стекла опускают в небольшую плоскую чашечку с 40% раствором серной кислоты на 12-24 часа. Затем кислоту сливают, а стекла неоднократно промывают водопроводной и дистиллированной водой. Вымытые стекла высушивают и используют для последующих исследований.

источник

Как следует из названия, бактериоскопический метод исследования заключается в том, что материал осматривают через микроскоп на предмет наличия патогенных бактерий. Этот метод довольно прост и не требует большого количества времени, сложного оборудования или больших затрат.

Особенности бактериоскопического метода

Сначала берут материал для исследования. Это может быть ткань или жидкость, любой материал, в котором, как полагается, находится наибольшее количество микробов. Часто этот анализ проводят при воспалительных заболеваниях или подозрениях на них. Например, делают бактериоскопию мочи, крови, кала, мокроты, мазка из уретры или влагалища, а также берут пробу гноя из ран или глаз при конъюнктивите, из уха при гнойном отите и т.д.

После того, как материал осмотрели внимательно в микроскоп, наступает следующий этап – идентификация микробов.

К сожалению, не всегда можно верно определить вид и род бактерии при таком обследовании. Часто они схожи или же меняются под действием антибиотиков, а также концентрация может быть недостаточной. Поэтому в таком случае на смену бактериоскопии приходит бакпосев. Материал помещается в специальную питательную среду, которую подготавливают на основе сведений, полученных при бактериоскопическом исследовании. Там микробы прорастают, их изучают и проверяют на реакцию к антибиотикам. Такой метод куда более длительный, но более информативный.

Несомненным преимуществом бактериоскопии является быстрота и доступность.

Это очень важно при таких серьезных заболеваниях, как малярия, когда необходимо как можно быстрее обнаружить возбудителя. Сейчас возможности этого метода значительно расширены. Прогресс не стоит на месте, появились новые препараты и сыворотки, которые позволяют выявить и опознать большое количество бактерий. Он позволяет определить бактерию, вызывающую туберкулез или пневмонию, в мокроте, различные кишечные инфекции, такие как дизентерия, в кале. Иногда другими методами поставить диагноз просто невозможно. Однако чаще всего это предварительный или ориентировочный метод, который лишь позволяет подготовить бакпосев. При некоторых воспалительных заболеваниях бактериоскопия не используется вовсе.

Исследование в гинекологии

Всем женщинам хоть раз в жизни приходилось сдавать мазок на анализ. Это делается для уточнения диагноза, если подозревают какое-то воспалительное заболевание, или для профилактики. Беременные сдают его в обязательном порядке. Подобный анализ позволяет выявить наличие патогенных бактерий.

Мазок из влагалища рассматривается под микроскопом, в нем выявляются различные бактерии и грибы, способные вызвать заболевание.

Мазок может браться не только из влагалища, возможны иные варианты:

• Из уретры. Мазок берут при помощи стерильного тампона, который вводится неглубоко и затем немедленно помещается в стерильный закрытый сосуд.
• Из влагалища. Эта процедура знакома многим. Мазок берется при помощи шпателя и сразу же наносится на стекло.
• Из цервикального канала. Это процесс немного более сложный, поскольку мазок берется из более глубокой области. Это делается при помощи гинекологических зеркал и тампона.

Не всегда можно точно выявить микробы при такой методе исследования, иногда без бакпосева не обойтись. Этот метод позволяется выявить даже те бактерии, которые находятся в малом количестве.

В мазке могут находиться микроорганизмы, которые не причиняют вреда, они создают естественную микрофлору влагалища.

Поэтому бациллярная среда является нормой, а вот при обнаружении кокков можно говорить о наличии воспаления. Учитывается также количество лейкоцитов в мазке. Если их количество повышено, велика вероятность, что есть воспалительное заболевание типа вагинита, половой инфекции.

В мазке здоровой женщины могут обнаружиться дрожжи. В небольшом количестве это абсолютно нормально. Но если бактериоскопический анализ показал их повышенное содержание, при этом есть такие симптомы, как зуд, жжение, выделения, ставится диагноз «молочница».

При несоблюдении правил личной гигиены, в мазке обнаруживается повышенное количество кишечной палочки, которая вызывает бактериальный вагиноз.

О наличии инфекции говорят различные стафилококки, стрептококки и прочие кокки. Гонококки вообще в мазке быть не должны. Даже их небольшое количество вызовет подозрения у врача. Это является признаком гонореи. Даже небольшое количество трихомонад также указывает на наличие заболевания трихомониаза.

Бактериоскопический метод исследования мочи

Подобный метод исследования не всегда позволяет выявить воспалительные заболевания мочевыводящих путей. Но в некоторых случаях подобный анализ незаменим.

Например, для маленьких детей. В грудном возрасте бактериоскопический анализ способен обнаружить многие заболевания, например цистопиелит. Брать мочу у грудных детей на анализ не так просто. Ставится катетер или специальный мочесборник. Перед этим ребенка нужно обязательно обмыть. Моча собирается в стерильный сосуд и оправлять на обследование немедленно, иначе она начнет бродить и обнаружить что-то будет невозможно.

Моча здорового ребенка вообще не должна содержать бактерий.

Мочу на бактериоскопический анализ, а также на бакпосев часто сдают беременные, люди, жалующиеся на боль в животе, резь при мочеиспускании. При этом мочу нужно собирать не в любую банку.

Чтобы результаты были достоверными, необходимо:

• Приобрести в аптеке стерильный контейнер для сбора мочи.
• Перед тем, как его наполнить, необходимо тщательно подмыться, женщинам рекомендуется вставить тампон во влагалище, чтобы выделения не попали в баночку.
• Нежелательно сдавать мочу во время менструации.
• Оптимальный объем – 50-100 мл мочи. Этого достаточно для проведения анализа.

Кишечная палочка, обнаруженная в моче, может вызывать пиелонефрит. Это связано с тем, что бактерии, попадая в мочевыводящие каналы, продвигаются дальше, к мочевому пузырю и почкам, вызывая их воспаление. Хроническая форма этой болезни наиболее опасна. Она обнаруживается в раннем детстве, протекает медленно и в результате может привести к почечной недостаточности.

Цистит довольно часто встречается у женщин. Это воспаление мочевого пузыря, связанное обычно с половыми инфекциями. То есть в моче при этом обнаружатся трихомонады, гонококки, хламидии, микоплазмы и т.д.

Гонококк, хламидия и прочие возбудители половых инфекций могут спровоцировать уретрит, то есть воспалительный процесс мочеиспускательного канала, сопровождающийся болевыми ощущения по время мочеиспускания.

Болезнь прогрессирует и помимо боли появляются еще и выделения из уретры. Наиболее частый путь заражения – половой или же в результате переохлаждения. Уретрит развивается быстро и может привести в таким осложнениям, как простатит у мужчин и цистит у женщин.

Бактериоскопический метод исследования мокроты

Как правило, берут два мазка мокроты для проведения бактериоскопии. Один – для выявления микобактерий туберкулеза, а второй – для прочих микробов. Однако нужно помнить, что обнаружение бактерий при бактериоскопии не является абсолютной гарантией заболевания. Необходимо дальнейшее бактериологическое исследование, чтобы поставить точный диагноз.

Микробы, вызывающие туберкулез, имеют вид изогнутых палочек, поэтому их так и называют «туберкулезная палочка». У здорового человека их не должно быть совсем.

Бактериоскопическое исследование мокроты для выявления туберкулезной палочки проводится следующим образом:

• Собирают мокроту, лучше с нескольких мест, растирают и наносят на стекло.
• Сверху прижимают вторым стеклом.
• К мокроте прикладывают специальную бумагу и промакивают особым веществом, называемым фуксин Циля. Оно позволяет выявить бактерии.
• Конечно, на этом исследование не заканчивается, есть и дальнейшие шаги – нагревание, опускание в раствор серной кислоты и т.д.

Прочие микробы выявляют с помощью теста Грама. Те бактерии, что чувствительны к нему, называются грамположительными. В результате такой проверки болезнетворные бактерии окрашиваются в синий цвет.

Если в мокроте обнаруживает пневмококк, это может быть признаком различных заболеваний.

Эта бактерия способна вызывать пневмонию, отит, менингит, плеврит и другие инфекционные заболевания. Опасность этой инфекции в том, что она легко распространяется через кашель и чиханье. При этом непонятно, болен человек или нет, у него может не быть никаких внешних признаков болезни. Особенно опасен пневмококк для маленьких детей дошкольного возраста, среди которых пневмония не редкость.

Полезное видео об исследовании кала на дисбактериоз.

Сбор мокроты.

Мокрота(sputum) — это патологическое отделяемое из дыхательных путей — легких, бронхов, трахеи, гортани, выделяется при кашле или отхаркивании. В состав мокроты могут входить слизь, серозная жидкость, клетки крови и дыхательных путей.

Сбор мокроты желательно осуществлять утром (так как она накапливается ночью) и до еды. Анализ мокроты будет достоверней, если пациент предварительно почистил зубы щёткой и прополоскал рот кипячёной водой, что позволяет уменьшить бактериальную обсеменённость полости рта.

Анализ мокроты следует проводить подготовленному и обученному пациенту:

Мокрота лучше отходит и её образуется больше, если накануне исследования пациент употреблял больше жидкости;

Сбор мокроты проходит эффективней, если пациент предварительно выполняет три глубоких вдоха с последующим энергичным откашливанием. Необходимо подчеркнуть, что важно получить именно мокроту, а не слюну.

Сбор мокроты выполняют в стерильный разовый герметичный флакон (контейнер) из ударостойкого материала с навинчивающимся колпачком или плотно закрывающейся крышкой. Флакон должен иметь ёмкость 20-50 мл и широкое отверстие (не менее 35 мм в диаметре), чтобы пациент мог легко сплёвывать мокроту внутрь флакона. Для возможности оценки количества и качества собранной пробы флакон должен быть изготовлен из прозрачного материала.

Если сбор мокроты проходит в присутствии медицинского работника, то последнему необходимо одеть перчатки (взятие материала и его отправку следует осуществлять в перчатках). Учитывая, что при энергичном кашле мокрота в виде капель может разбрызгиваться, с профилактической целью следует одеть маску, а при необходимости закрыть глаза очками или сразу всё лицо защитным щитком. Лучше вообще находиться за спиной пациента, выбирая свое положение таким образом, чтобы направление движения воздуха было от медработника к пациенту.

Для провокации кашля, а так-же если мокрота отделяется плохо пациенту проводят в течение 10-15 минут ингаляцию 30-60 мл подогретого до 42-45 градусов Цельсия раствора (в 1 л стерильной дистиллированной воды растворяют 150 г хлорида натрия и 10 г бикарбоната натрия). У большинства пациентов после подобной ингаляции ещё в течение нескольких часов наблюдается остаточная гиперсекреция бронхиального содержимого. Для исследования достаточно 3-5 мл мокроты, но анализ можно проводить и при меньших объёмов. Анализ мокроты необходимо проводить не позднее, чем через 2 часа после сбора. Если собранная мокрота подлежит транспортировке в другое учреждение, то до момента отправки в лабораторию герметично закрытые флаконы с материалом хранятся в холодильнике не более 2-3 суток. При более длительном хранении необходимо применить консервирующие средства. Во время транспортировки мокрота должна быть защищена от воздействия прямых солнечных лучей и тепла.

Факторы, влияющие на результат исследования:

1. Неправильный сбор мокроты.

2. Мокрота несвоевременно отправлена в лабораторию. В несвежей мокроте размножается сапрофитная флора, разрушаются форменные элементы.

3. Анализ мокроты проведён уже после назначения антибактериальных, противогельминтных средств.

Анализ мокроты.

Если мокрота отделяется в виде небольших плевков, то — это защитная реакция. Если много — это патология. При хроническом бронхите выделяется слизистая или гнойная мокрота до 250 мл в сутки. При бронхоэктазах (расширение бронхов или их отделов), абсцессе лёгкого — мокрота обильная, гнойная, с запахом, до 500 мл/сут.

Утренний кашель с мокротой характерен в первую очередь для курильщиков с хроническим бронхитом. Ночью мокрота скапливается в бронхах, а утром после подъёма с постели вследствие перемены положения тела перемещается, раздражая рефлексогенные зоны и вызывая кашель. Кашель с мокротой в течение дня у подростков, скорей всего будет обусловлен гайморитом, а не хроническим бронхитом.

По положению больного, при котором мокрота отделяется лучше всего, можно получить условное представление о локализации полости или бронхоэктазов в лёгком. При расположении бронхоэктазов в левом лёгком выделение мокроты с кашлем будет облегчаться при нахождении на правом боку, и наоборот. При бронхоэктазах в передних отделах лёгких, мокрота лучше отходит в положении лёжа на спине, в задних отделах — на животе. Данное обстоятельство используется для постурального дренажа лёгких (пациент 3-4 раза в день занимает определённое положение на 10-20 минут для облегчения отхождения мокроты под влиянием силы тяжести).

В исследования физических свойств входят: характер, цвет и консистенция.

Анализ мокроты начинают с её внешнего осмотра в чашке Петри, которую ставят попеременно на чёрный и белый фон.

Общее правило: прозрачная слизь — это обычная защитная мокрота; мутная мокрота — идёт воспалительный процесс.

Слизистая мокрота — бесцветная (прозрачная), вязкая, практически не содержит клеточных элементов. Встречается при многих острых и хронических заболеваниях верхних и нижних дыхательных путей.

Серозная мокрота — бесцветная, жидкая, пенистая. Выделяется при отёке лёгких.

Гнойная (или гнилостная) мокрота содержит гной. Цвет мокроты — жёлтый или зелёный. Чисто гнойная мокрота встречается, например, при прорыве абсцесса лёгкого в бронх; чаще наблюдается смешенная — слизисто-гнойная мокрота. Гнойная (или гнилостная) мокрота содержит гной. Цвет мокроты — жёлтый или зелёный. Чисто гнойная мокрота встречается, например, при прорыве абсцесса лёгкого в бронх; чаще наблюдается смешенная — слизисто-гнойная мокрота.

Зелёный цвет мокроты — это вообще любая патология, связанная с задержкой оттока (гаймориты, бронхоэктазы, посттуберкулёзные нарушения и пр) У подростков при зелёной мокроте в первую очередь надо исключать лор-патологию, а не предполагать хронический бронхит.

Мокрота янтарно-оранжевого цвета отражает эозинофильную реакцию и свидетельствует об аллергии.

Кровянистая — мокрота с примесью крови. Может быть чисто кровяной на фоне легочных кровотечений, так и смешанной, например, слизисто-гнойной с прожилками крови при бронхоэктазах. Если кровь задерживается в дыхательных путях, то гемоглобин превращается в гемосидерин, и цвет мокроты приобретает оттенок ржавчины (ржавая мокрота). Кровь в мокроте (даже единичные прожилки) — всегда настораживающий признак, требующий тщательного обследования (см. файл Кровохарканье).

Жемчужная мокрота содержит округлые опалесцирующие включения, состоящие из атипичных клеток и детрита. Жемчужная мокрота наблюдается при плоскоклеточном раке бронхов.

При отстаивании мокрота может расслаиваться. Трёхслойная мокрота — это обильная, гнойная мокрота, которая при отстаивании разделяется на три слоя: верхний — серозный, пенистый; средний — слизистый, бесцветный, прозрачный; нижний — грязного серо-зелёного цвета, содержащий гной и остатки некротизированных тканей. Наблюдается при гангрене лёгкого.

Из отдельных элементов, различимых простым глазом можно обнаружить:

Спирали Куршмана в виде небольших плотных извитых беловатых нитей.

«Чечевицы» — небольшие зеленовато-жёлтые плотные комочки, состояние из обызвествлённых эластических волокон, кристаллов холестерина. Встречаются при туберкулёзе.

Пробки Дитриха. Макроскопически имеют вид мелких желтовато-серых зернышек с неприятным запахом, содержатся в гнойной мокроте. Микроскопически представляют собой детрит, бактерии, кристаллы жирных кислот в виде игл и капелек жира. Образуются при застое мокроты в полостях, главным образом при абсцессе легкого, бронхоэктазах.

Друзы актиномицетов в виде мелких желтоватых зёрнышек, напоминающих манную крупу.

Мокрота чаще не имеет запаха. Зловонный запах мокроты зависит либо от распада ткани (гангрена, раковая опухоль) либо от разложения белков самой мокроты при задержке её в полостях (абсцесс, бронхоэктазы).

Реакция мокроты, как правило, имеет щелочной характер. Кислой она становится при разложении мокроты (длительное стояние) и от примеси желудочного сока (что помогает дифференцировать кровохарканье от кровавой рвоты).

Бактериоскопия и посев мокроты

Для бактериоскопического исследования предварительно готовят препарат. Вначале растирают комок мокроты между двумя предметными стёклами; затем высохший мазок фиксируют над пламенем горелки и окрашивают: для поисков микобактерий туберкулёза по Цилю-Нильсену, в других случаях — по Грамму.

Чувствительность бактериоскопического метода напрямую зависит от кратности обследования пациента. Например, согласно исследованиям, однократный анализ мокроты на микобактерии туберкулёза имеет чувствительность 80-83%, двукратный анализ мокроты (в течение двух дней) — на 90-93% больше и при исследовании трёх проб мокроты (в течение трёх дней) — 95-98%. Таким образом, при подозрении на туберкулез органов дыхания необходимо исследовать не менее трёх проб мокроты.

Отрицательный результат микроскопического исследования не исключает диагноз той или иной инфекции, так как мокрота пациента может содержать меньше микробов, чем может выявить микроскопическое исследование.

Когда бактериоскопическое исследование не обнаруживает предполагаемого возбудителя, прибегают к посеву мокроты на питательные среды. Посев мокроты производят не позднее 2-х часов после сбора. Если подозревается туберкулёз, то сбор мокроты осуществляют в течение 3-х последовательных дней.

Бактериологическое исследование позволяет идентифицировать вид микробов и определять их антибиотикочувствительность.

Обычно у здоровых лиц в мокроте при посеве выявляются альфа-гемолитический стрептококк, Neisseria spp., дифтероиды. Обнаружение лишь нормальной микрофлоры ещё не означает отсутствие инфекции. Результат посева следует интерпретировать с учётом клинической картины и общего состояния пациента.

Критерием этиологической значимости возбудителя будет выявления микроба в концентрации 106в 1 мл и выше. Но к выявлению микобактерий туберкулёза в любом количестве следует отнестись со всей серьёзностью.

СБОР МОКРОТЫ НА МИКОБАКТЕРИИ ТУБЕРКУЛЕЗА

Цель: обеспечить качественный сбор мокроты, содержащей достаточное количество микобактерии туберкулеза, если они выделяются.

Оснащение: карманная плевательница для сбора мокроты или чистая, стеклянная широкогорлая банка из темного стекла с крышкой, направление в лабораторию.

Список использованной литературы

1. Лабораторные и инструментальные исследования в диагностике: Справочник / Пер. с англ. В.Ю. Халатова; под. ред. В.Н. Титова. — М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. — 960 с.

2. Kincaid-Smith P., Larkins R., Whelan G. Problems in clinical medicine. — Sydney: MacLennan and Petty, 1990, 105-108.

3. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник. Под ред. проф. Меньшикова В.В. — М.: «Медицина», 1987. — 368 с.

4. Пропедевтика внутренних болезней. Под ред. В.Х. Василенко, А.Л. Гребнёва. — М.: «Медицина», 1982. — 640 с.

5. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е.А. Кост. — «Медицина», 1975 — 383 с.

источник

1. Направление: название метода исследования,

адрес или № истории болезни,

дата направления на исследование.

2. Стерильная, широкогорлая банка с крышкой из крафт- бумаги, берется в

Методика взятия мокроты.

1. Собирают мокроту утром до еды.
2. Вечером и за 1,5 – 2 часа до исследования почистить зубы.
3. Непосредственно перед исследованием прополоскать рот и глотку кипяченой водой.
4. Объяснить больному, что во время сбора мокроты он не должен касаться краев стерильной посуды руками, ртом. Не касаться внутренней поверхности крышки. А после откашливания сразу закрыть банку крышкой.
5. Откашлять и собрать мокроту. Не менее 5 мл.
6. Доставить в лабораторию не позднее 1 – 1,5 часов после сбора.

Диагностическое значение.

Выявляют возбудителя патологического процесса ( делают посев на питательные среды), а так же можно произвести подбор антибиотика эффективного при данном возбудителе (то есть определить чувствительность возбудителя к тому или иному антибиотику).

Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза методом флотации.

1. Направление: название метода исследования,

адрес или № истории болезни,

дата направления на исследование

2. Чистая стеклянная широкогорлая банка из темного стекла с завинчивающейся крышкой

( так как на свету микобактерии туберкулеза гибнут)

Методика сбора мокроты.

1. Мокрота собирается в течение суток.
2. Если мокрота отходит в малом количестве, то сбор происходит в течение 3 суток. Плевательница в этом случае хранится в прохладном, темном, сухом месте.
3. Для достоверного анализа необходимо 15 – 20 мл мокроты.
4. Предупредить, что мокрота собирается только при откашливании, а не при отхаркивании.
5. Необходимо соблюдать правила личной гигиены до и после сбора мокроты.

Диагностическое значение.

Выявление в мокроте возбудителя туберкулеза – микобактерия туберкулеза.

Сбор мокроты на атипичные клетки.

Подготовка пациента и правила сбора такие же, как для общего клинического анализа.

Н О ! Исследуется свежевыделенная мокрота, так как атипичные клетки быстро разрушаются.

Иногда применяют предварительные ингаляции с протеолитическим ферментом трипсином, способствующим выхождению мокроты из наиболее глубоких отделов бронхиального дерева.

Бронхоскопия.

Бронхоскопия– метод осмотра бронхов с помощью специального прибора бронхофиброскопа.

Цели процедуры:

Визуально осмотрев слизистую бронхов крупного и среднего калибра, можно обнаружить эрозии, язвы, воспалительные изменения, новообразования.

С помощью специальных щипчиков можно взять кусочек тканей из подозрительного места

для цитологического и гистологического исследования

Можно извлечь инородное тело, удалить полипы. Можно извлечь гнойную, вязкую мокроту, а так же ввести в полость бронха антибиотики и другие лекарственные вещества.

Цели подготовки:

1. Информировать пациента о предстоящей процедуре и получить его согласие.
2. Подготовить необходимое оснащение для обеспечения четкого выполнения исследования.

1. Бронхоскоп
2. Резиновые перчатки
3. Шприцы 10 и 20 мл
4. Раствор анестетика (новокаин 1%, тримекаин 5%, лидокаин 2%)
5. Раствор атропина 0,1%
6. Раствор димедрола 1%
7. Направление на исследование
8. Набор для помощи при анафилактическом шоке

Информация для пациента по подготовке к исследованию.

1. В доступной форме предоставить пациенту или его родственникам информацию о сути и целях предстоящего исследования. Получить согласие.
2. Предупредить пациента, что в день исследования нельзя есть, пить, курить.
3. Накануне вечером по назначению врача провести премедикацию транквилизаторами.
4. Непосредственно перед исследованием предложить пациенту опорожнить мочевой пузырь.
5. Придти в эндоскопический кабинет с полотенцем и направлением в назначенное время.

Методика проведения исследования:

1. Непосредственно перед исследованием, за 15 мин, по назначению врача ввести пациенту подкожно 0,1% 1 мл аптропина, 1% 1 мл димедрола.
2. Надеть стерильные перчатки.
3. Попросить пациента сесть на стул, слегка запрокинув голову.
4. Провести анестезию верхних дыхательных путей.
5. Ассистировать врачу при проведении бронхоскопии.
6. После окончания процедуры сбросить перчатки и отработанные инструменты в дезраствор.
7. Проводить пациента в палату, предупредить о необходимости не принимать пищу и не курить в течение 2 часов после исследования.

Постуральный дренаж.

Это использование определенного положения тела – специальные «дренажные» позы и упражнения с форсированным удлиненным выдохом для улучшения отхождения мокроты.

Противопоказания:

1. Кровохарканье.
2. Возникновение во время процедуры значительной одышки или приступа удушья.
3. Повышение артериального давления.
4. Головокружение.
5. Аритмии.

Алгоритм действия:

1. Объяснить пациенту смысл и цели процедуры.
2. Получить его согласие.
3. Приготовить плевательницу.
4. Придать одно из дренажных положений.
5. Наблюдать за состоянием пациента и правильностью выполнения процедуры.
6. Повторить процедуру 3 – 5 раз с перерывами в 10 – 15 минут.
7. Придать пациенту обычное положение в постели.
8. Провести дезинфекцию мокроты и плевательницы.
9. Протоколирование о выполненной процедуре в сестринской карте.

Методика выполнения процедуры:

1. Упражнения выполняются 2 раза в день – утром и вечером.
2. Предварительно принимают отхаркивающие средства – настой термопсиса, багульника, мать-и-мачехи.
3. Через 20 – 30 минут после этого больной поочередно занимает дренажные положения (смотри ниже).
4. В каждом положении больной выполняет вначале 4 – 5 глубоких медленных дыхательных движений, вдыхая воздух через нос, а выдыхая через сжатые губы. Затем после медленного глубокого вдоха производится форсированный выдох с настойчивым покашливанием 3 – 5 раз.

Хороший результат достигается при сочетании дренажных положений с различными методами вибрации грудной клетки.

А. Лежа в кровати больной поворачивается вокруг продольной оси своего тела и в промежуточных положениях (45˚) делает форсированные выдохи. Необходимо совершить полный оборот на 360˚.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Как то на паре, один преподаватель сказал, когда лекция заканчивалась — это был конец пары: «Что-то тут концом пахнет». 8333 — | 7954 — или читать все.

193.124.117.139 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)
очень нужно

источник

Мокрота является секретом, выделяющимся при воспалении трахеи, бронхов и легких. Ее появление отмечается не только при поражении дыхательных органов, но и при нарушениях сердца и сосудов. Методы исследования мокроты подразумевают макроскопическое, химическое и микроскопическое определение ее характеристик.

Исследование мокроты дает возможность обнаружить микроорганизмы, вызывающие патологический процесс, обозначить наличие микобактерии при туберкулезе, выявить раковые клетки, кровяные и гнойные примеси, а также определить резистентность бактерий к антибиотикам.

Исследование мокроты на общий анализ проводится при следующих состояниях:

• кашель;
• воспаление легких;
• воспаление бронхов;
• нагноение легкого;
• туберкулез;
• бронхоэктатическая болезнь;
• легочная гангрена;
• опухоль в легких;
• бронхит в острой форме;
• бронхит в хронической форме;
• тонзиллит в хронической форме;
• туберкулез;
• коклюш;
• силикоз;
• острая форма обструктивного бронхита;
• воспаление легких;
• сибирская язва.

Слизь будет лучше выделяться, если накануне перед сдачей анализа принять средство для отхаркивания или же употребить большое количество теплого питья. Перед сбором рекомендуется почистить зубы и ротовую полость, прополоскав ее теплой вскипяченной водой.

Сбор мокроты на бактериологическое исследование желательно производить в утренние часы (она скапливается за ночь до приема пищи) в стерильный контейнер, который выдается лабораторией. Для анализа достаточно количества 5 мл. Анализ секрета производится не позднее, чем через 2 часа после его сбора. До момента отправки на исследование контейнер с содержимым должен храниться закрытым в холодильнике.

Количество выделяемого секрета разнится в зависимости от характера патологического процесса. Обычно оно варьируется от нескольких плевков до 1 л за сутки. Малое количество выделяется при воспалении бронхов, застойных процессах легких и при начале приступа бронхиальной астмы. В конце приступа объем возрастает. Он может составлять до 0,5 л, а также выделяться в большом количестве, если имеется отек легких.

Много слизи выделяется при гнойном процессе в легких при сообщении с бронхами, при нагноении, бронхоэктазе и гангрене.

Исследование мокроты на туберкулез показывает распад тканей легких. В особенности такой процесс провоцирует каверна, которая сообщается с бронхами.

Увеличение количества выделяемого секрета может быть сопряжено с ухудшением состояния пациента и наблюдаться в период обострения. Увеличение может относиться и к положительной динамике развития болезни.

Уменьшение количества выделяемой слизи может свидетельствовать о регрессе воспаления или же нарушении в области дренирования полости, наполненной гноем. При этом отмечается ухудшение самочувствия больного.

Слизистый секрет выделяется при бронхитах в острой или хронической форме, бронхиальной астме, пневмонии, онкологической опухоли легкого, бронхоэктатической болезни, эхинококкозе легкого, сопровождающемся нагноением, актиномикозе.

Мокрота с примесью гноя наблюдается при абсцессе легкого, эхинококкозе и бронхоэктатической болезни.

Слизь с примесью крови или же состоящая полностью из крови присуща туберкулезу. Появление крови может свидетельствовать о наличии онкологии, бронхоэктатической болезни, нагноении легкого. Также такое явление наблюдается при синдроме средней доли, инфаркте в легком, травме, актиномикозе и сифилитическом поражении. Кровь может выделяться и при крупозном и очаговом воспалении легких, застойных процессах, сердечной астме и отечности легких.

Серозная мокрота отмечается при отечности легких.

Исследование мокроты выявляет ее различную окрашенность. Слизистые и серозные выделения не обладают цветом или же имеют беловатый оттенок.

Присоединение гноя придает секрету зеленоватый оттенок, что характеризует такие патологические процессы, как абсцесс легкого, гангрена, бронхоэктатическая болезнь, актиномикоз легкого.

Выделения с оттенком ржавчины или коричневого цвета указывают на то, что в них содержится не свежая кровь, а продукт ее распада — гематин. Такой секрет может выделяться при крупозном воспалении легких, сибирской язве, инфаркте легкого.

Зеленоватый цвет с примесью грязи или же желтый секрет свидетельствует о патологии органов дыхания в сочетании с желтухой.

В ярко-желтый цвет мокрота окрашивается при эозинофильной пневмонии.

Слизь цвета охры встречается при сидерозе легкого.

Черноватый или сероватый секрет отмечается при наличии примеси пыли от угля. При отеке легких серозная мокрота наблюдается в большом количестве. Как правило, она окрашена равномерно в розоватый цвет, что объясняется наличием эритроцитов. Такие выделения похожи на жидкий клюквенный морс.

Окрашиваться секрет может и от некоторых лекарственных препаратов. К примеру, антибиотик «Рифампицин» может придать ему красный цвет.

О характере патологического процесса в органах дыхания может свидетельствовать и запах секрета. Мокрота отдает запахом гнили при гангрене легкого или гнилостном поражении бронхов, онкологических новообразованиях, осложнившемся некрозе бронхоэктатической болезни.

Зачастую исследование выделений выявляет наличие слоев. При застойном характере мокрота с примесью гноя наблюдается при нагноении легкого и бронхоэктатической болезни.

Секрет с примесью гнили содержит в себе три слоя. Верхний слой похож на пену, средний серозный, а нижний с примесью гноя. Такой состав характеризует гангрену легкого.

Примесь пищи может отмечаться при наличии злокачественной опухоли в пищеводе при сообщении его с бронхами и трахеей. При попадании эхинококка в бронхи в мокроте могут быть обнаружены крючья или сколекс паразита. Очень редко обнаруживаются взрослые особи аскарид, которые проникают в органы дыхания у ослабленных людей.

Яйца легочной двуустки появляются при разрыве кисты, которая образуется в легких при наличии паразитов.

Гангрена и нагноение легких вызывают появление кусочков некрозов легких. При опухоли в выделениях могут присутствовать их фрагменты.

Свертки, содержащие фибрин, встречаются у пациентов с фибринозным бронхитом, туберкулезом и пневмонией.

Рисовые тельца, или линзы Коха, присущи туберкулезу.

Пробки Дитриха, включающие в себя продукты распада бактерий и ткани легких клеток жирных кислот, встречаются при гнилостном бронхите или же гангрене легкого.

Хроническая форма тонзиллита предполагает выделение из миндалин пробок, схожих с пробками Дитриха.

Исследование мокроты химическим способом предполагает определение:

• Показателя белка, который может помочь в дифференциальной диагностике хронической формы бронхита и туберкулеза. При бронхите хронической формы в секрете отмечаются следы белка, а при туберкулезном поражении количество белка в мокроте будет намного выше, и оно может быть обозначено цифрами (до 100—120 г/л).
• Пигментов желчи. Они обнаруживаются в мокроте при поражении органов дыхания в сочетании с гепатитом. В этом случае печень сообщается с легкими. Желчные пигменты присущи пневмонии, что обусловлено распадом внутри легких эритроцитов и последующим изменением гемоглобина.

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и многих других поражений легких широко применяется цитологический способ, который включает два этапа: клиническое и микроскопическое исследование мокроты.

Клиническое исследование помогает определить, каким методом должен быть собран материал для получения правильного результата анализа.

Существует два основных вида материала, которых требует микроскопическое исследование мокроты: спонтанный и редуцированный. Второй вид секрета получают воздействием разнообразных раздражителей (средства для отхаркивания, ингаляции и т. д.).

Цитологическое исследование мокроты предполагает изучение макроскопического и микроскопического анализа ее клеток.

Больше всего информации для цитологического анализа несет мокрота, взятая утром на голодный желудок. До исследования она должна храниться не больше 4 часов.

• В мокроте встречаются клетки плоского эпителия, которые исследуются микроскопически. Но для постановки диагноза они не имеют никакого значения. Клетки цилиндрического эпителия — как единичные, так и в группе — могут отмечаться при таких заболеваниях, как бронхиальная астма, бронхит и рак легких. Следует отметить, что цилиндрический эпителий может появиться и по причине проникновения слизи из носоглотки.
• Альвеолярные макрофаги представляют собой клетки ретикулоэндотелия. Макрофаги, которые содержатся в протоплазме (фагоцитирующие частицы или пылевые клетки), можно встретить у пациентов, которые длительное время вдыхали пыль.
• Макрофаги протоплазмы (образуются при распаде гемоглобина) называют клетками сердечного порока. Они могут встречаться во время застойных процессов в легких, стенозе митрального клапана, инфаркте легких.

• Небольшое количество лейкоцитов содержится в любой мокроте. Их повышенное содержание отмечается в секрете с примесью гноя.
• Эозинофилы. Такими клетками богата мокрота у астматиков. Клетки могут отмечаться при эозинофильной форме воспаления легких, поражении организма гельминтами, туберкулезе и инфаркте легкого.
• Эритроциты. Единичные эритроциты не отображают картины заболевания. Появление повышенного количества свидетельствует о наличии кровотечения в легких. В свежей крови определяются неизменные эритроциты. Если же есть примесь крови, которая застоялась в легких в течение долгого времени, то обнаруживаются выщелоченные эритроциты.
• Раковые клетки. Их можно обнаружить в секрете группами. Они свидетельствуют о наличии опухоли. При нахождении единичных клеток часто возникает трудность при диагностике. В таких случаях проводится повторный анализ мокроты.
• Эластические волокна, появление которых вызвано распадом легочной ткани, спровоцированным туберкулезом, абсцессом, гангреной, опухолью. Гангрену такие клетки характеризуют не всегда, так как из-за действия ферментов, находящихся в секрете, они могут быть растворены.
• Спирали Куршмана. Это особые тела, похожие на трубки. Они обнаруживаются при исследовании под микроскопом. Иногда заметны и глазом. Обычно спирали присущи таким заболеваниям, как бронхиальная астма, туберкулез легких и пневмония.
• Кристаллы Шарко-Лейдена обнаруживаются в мокроте с повышенным содержанием эозинофилов при таких поражениях, как бронхиальная астма, эозинофильная пневмония. Вскрытие очага туберкулеза в просвете бронхов может характеризоваться наличием в секрете эластических волокон-кристаллов ХС, МБТ и аморфной извести (так называемая тетрада Эрлиха) — 100%.

Сбор мокроты для исследования бактериоскопическим методом подразумевает анализ секрета на предмет обнаружения в нем микобактерий, характерных для туберкулеза. Они похожи на тонкие, утолщенные по бокам или же посередине кривые палочки разной длины, которые располагаются как поодиночке, так и группами.

Обнаружение микобактерии туберкулеза не является доминантным признаком для диагностики и требует подтверждения бактериологическим способом. Туберкулезные микобактерии при норме в секрете не обнаруживаются.

Основой для анализа служат гнойные частицы, которые берутся из сорока шести различных областей и тщательно растираются до однородной массы двумя стеклами. Далее они сушатся на воздухе и фиксируются пламенем горелки.

Бактериологическое исследование мокроты методом Циля-Нильсена предполагает ее окрашивание в красный цвет. При этом все частицы секрета, за исключением микобактерии, приобретают синий оттенок, а микобактерии приобретают красный цвет.

При подозрении на поражение организма туберкулезом после трехкратного исследования на наличие микобактерий с отрицательным ответом прибегают к применению метода флотации (анализ Поттенджера).

Обычный способ исследования окрашенного мазка на МТБ дает положительный результат только при количестве МТБ не менее 50 000 единиц в 1 мл мокроты. По числу микобактерий судить о наличии туберкулеза нельзя.

Лабораторные исследования мокроты при наличии неспецифических заболеваний легких при бактериоскопии могут выявить следующие бактерии:

• При воспалении легких — пневмококки, диплококки Френкеля, бактерии Фридлендера, стрептококки, стафилококки (100%).
• При гангрене легких можно обнаружить веретенообразную палочку в сочетании со спирохетой Венсана (80%).
• Дрожжеподобные грибы (70%), для выяснения вида которых требуется посев секрета.
• Друзы актиномицета (100%) при актиномикозе.

Объем слизи, выделяемой трахеей и бронхами у человека, не страдающего никакими патологиями, колеблется от 10 до 100 мл/сут.

В норме уровень лейкоцитов невысок, а исследование окрашенного мазка на микобактерии дает отрицательный результат.

источник

Для исследования анализов на предмет наличия в них тех или иных бактерий используются различные способы диагностики, в том числе и бактериоскопический метод. Особенности подобного метода, а также бактериологического метода исследования, будут рассмотрены в этой статье.

Бактериоскопический метод исследования образца предназначен для выявления микроорганизмов в исследуемом веществе, а также для подробного изучения свойств этих микроорганизмов, уточнении их количества и поведения в рассматриваемой среде. Достоинствами этого способа изучения анализов являются простота, быстрота проведения и доступность. Он может быть проведен практически в любой лаборатории с использованием минимального количества инструментов и химических реактивов. К его недостаткам можно отнести невозможность получения полной картины поведения микробов.

Для изучения анализов по бактериоскопическому методу необходимы следующие инструменты:

1. Металлическая петля.
2. Предметное стекло. Этот предмет обязательно должен быть чист, так как любое его загрязнение может повлиять на состояние образца.
3. Пинцет.
4. Фильтровальная бумага.

Очистка новых предметных стекол производится с помощью 1%-ного раствора соды. После кипячения в таком растворе стекло промывается дистиллированной водой, слабым раствором соляной кислоты, а затем снова дистиллированной водой. Бывшие в употреблении стекла очищаются в несколько этапов: сначала их помещают в раствор серной кислоты на 60-120 минут, затем кипятят в растворе соды, после чего производится промывка стекла водой. После этого стекло опускают в медицинский спирт.

Хранить приборные стекла нужно либо в спирте, либо в плотно закрытых емкостях. Причем в последнем случае стекла должны быть сухими.

Для данного исследования также понадобятся следующие химические реактивы:

Наиболее часто используемыми красителями являются фуксин Циля, метиленовый синий и карболовый генцианвиолет. Последний краситель представляет из себя раствор обычного фуксина в пятипроцентной карболовой воде

Исследовать культуру можно как в первозданном, так и в окрашенном виде. В последнем случае как колонии микроорганизмов, так и одиночные бактерии будут мертвы, что позволяет лучше ознакомиться со строением этих простейших организмов. При исследовании препарата в его первозданном виде, в свою очередь, лаборант получает больше информации об активности микробов. В обоих случаях препарат рассматривается при помощи микроскопа.

Окрашивание среды проводится в два этапа, сначала препарат подготавливают к процедуре и только затем его окрашивают. Подготовка образца проходит следующим образом:

1. Образец, предназначенный для исследования, равномерно распределяется по приборному стеклу в форме круга или овала. При наличии в материале посторонних примесей (к примеру, гноя) перед добавлением исследуемого образца на стекло наносится 1-2 капли воды.
2. После этого получившийся мазок следует высушить.
3. Как только мазок высохнет, его необходимо зафиксировать с помощью пламени из горелки.

Для фиксации таким образом приборное стекло трижды проводится над пламенем. Если мазок зафиксирован достаточно прочно, то лаборант, проводящий эксперимент, почувствует жжение в пальцах.

По окончании данной процедуры проводится окрашивание образца.

Окрашивание может быть простым, с использованием одного красителя. И сложным, при котором с целью точной дифференциации клеток бактерий по тем или иным их характерным признакам последовательно наносятся на образец несколько различных окрашивающих химических реагентов. Примером сложного окрашивания может служить методы Грама и Циля-Нильсена.

Метод Грама позволяет определить химический состав клеточной мембраны. Благодаря этому методу была введена классификация бактерий по Граму: грамположительные бактерии (к которым относятся возбудители многих болезней) после окраски приобретают темно-фиолетовый цвет, а грамотрицательные – характерный красный оттенок. Метод Грама состоит из следующих этапов:

1. Сначала препарат обрабатывают раствором Люголя на протяжении одной минуты.
2. После обработки люголем образец обесцвечивают с помощью спирта.
3. Затем препарат промывают дистиллированной водой и дополнительно окрашивают фуксином.

Метод Циля-Нильсена применяется для определения кислоточувствительных бактерий, в клеточных мембранах которых содержится большое количество липидов, к примеру, возбудителей туберкулеза. Работа по данному методу проводится в пять этапов:

1. На предметное стекло накладывают фильтровальную бумагу, на которую затем наносят небольшое количество фуксина Циля.
2. Затем предметное стекло нагревают до появления характерного пара. После появления пара стеклу дают остыть. Данную процедуру повторяют еще два раза, после чего снова дают остыть стеклу.
3. После этого дистиллированной водой смывают фуксин с приборного стекла, предварительно убрав бумагу.
4. Затем стекло помещают в раствор соляной или серной кислоты до полной утраты образцом цвета.
5. Наконец, на обесцвеченный препарат наносят раствор метиленового синего, стекло промывают дистиллированной водой и дают ему высохнуть для дальнейшего рассмотрения получившегося препарата под микроскопом.

В число простых методов окрашивания входит метод Леффлера. При нем все бактерии приобретают синий цвет. Работа по данному методу проводится в два шага:

1. На мазок кладется фильтровальная бумага, на которую наносится раствор метиленового синего Леффлера. В таком состоянии препарат оставляется на 3-5 минут.
2. По прошествии данного промежутка времени препарат промывается водой и высушивается, после чего его можно исследовать под микроскопом.

При бактериоскопическом методе окрашиваются как минимум два препарата, причем один из них окрашивается простым методом, а один – сложным.

Зачастую при исследовании анализов возникает необходимость определить чувствительность патогена к тому или иному препарату. В этом случае проводится исследование образца по бактериологическому методу. Данный способ состоит из следующих этапов:

• Сперва необходимо очистить культуру с целью выявить конкретные виды микробов. Для этого образец нужно поместить в среду, в которой развитие бактерий, которые нужно выявить, наиболее вероятно. Также возможно механическое разделение биоматериала при его посеве.
• После получения чистой культуры, взятые из нее образцы исследуются с помощью бактериоскопического метода.

Ниже приведены примеры сред, используемые для выявления микроорганизмов:

• Среда Эльшнига, состоящая из одной трети лошадиной сыворотки и двух третей бульона.
• Сыворотка Леффлера, которая используется для выявления возбудителей дифтерии. Такая среда состоит из трех четвертых сыворотки лошадиной или бычьей крови и одной четвертой бульона с содержанием 1% глюкозы.
• Кровяной агар, используемый для выявления стрептококков и проверки их чувствительности к воздействию антибактериальных препаратов. Данная среда состоит из 5-10% сыворотки крови животных и агара.

Для бактериоскопического исследования анализа кала необходим образец анализа пациента. Если необходимо провести анализ микрофлоры кишечника, нарушения в составе которой свидетельствуют о наличии дисбактериоза или инфекционных заболеваний пищеварительной системы, забор образца проводится с помощью петли, которая вводится в анальное отверстие примерно на 10 сантиметров вглубь.

При исследовании образца кала могут быть обнаружены следующие опасные микроорганизмы:

• Стафилококки.
• Клебсиелла, наличие которой свидетельствует о поражении толстой кишки.
• Синегнойная палочка, выделяющая крайне опасные для человека токсины.

Наличие синегнойной палочки в организме человека может привести к заражению крови и менингиту – заболеваниям, которые могут иметь летальный исход.

Анализ мочи для бактериоскопического исследования сдается при подозрении на воспаление мочевыделительной системы и наличие таких болезней, как пиелонефрит и цистит, возбудителями которых являются кишечная палочка и некоторыми возбудителями заболеваний, передающихся половым путем, соответственно. Для такого исследования необходимо от 50 до 100 мл мочи, причем моча должна храниться в стерильном контейнере. Перед сдачей анализа необходимо хорошо подмыться, чтобы в моче было меньше сторонних примесей. Не рекомендуется сдавать мочу во время менструации.

Бактериоскопический анализ мочи незаменим для обнаружения заболеваний мочевыделительной системы у грудных детей. В этом случае моча собирается через катетер в стерильную емкость. Исследование образца мочи необходимо провести в кратчайшие сроки, иначе обнаружение возбудителей заболеваний будет затруднено.

При анализе мокроты исследуются два мазка. Один из них изучается на предмет наличия палочек Коха – возбудителей туберкулеза. По результатам исследования второго делаются выводы о наличии в мокроте других микробов.

Для анализа мокроты на туберкулез проводится окрашивание образца по методу Циля-Нильсена.

Для анализа на предмет наличия других микробов образец окрашивают по методу Грама. С помощью бактериоскопического метода с применением окрашивания по методу Грама возможно выявление пневмококка – бактерии, являющейся причиной пневмонии. Также при работе с образцом по такой схеме можно выявить наличие в мокроте стрептококков – возбудителей ангины, а также золотистого стафилококка. Последний микроорганизм представляет особую опасность для здоровья человека. Он провоцирует гнойные процессы и образование абсцессов, в том числе и на внутренних органах.

Бактериоскопический метод диагностики является одним из основных методов исследования в микробиологии. Несмотря на его недостатки, данный метод широко применяется в современной медицине для диагностики самых разных заболеваний, некоторые из которых, к примеру, туберкулез, представляют особую опасность для человека.

Если вас заинтересовала тема этой статьи или у вас есть чем ее дополнить, оставьте свой комментарий. Если вам понравилась данная статья или вы просто интересуетесь микробиологией, вы можете поделиться ей в социальных сетях.

источник