Как берут мокроту на пцр

• Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза
• Обследование на туберкулез: как собрать мокроту
• Различные методики обследования на туберкулез
• Диагностика с помощью ПЦР
• Подводим итоги

Заболевания дыхательной системы наверняка знакомы каждому. Врачи часто для постановки диагноза берут анализ мокроты на туберкулез.

У всех было такое состояние, когда появлялся сухой кашель, незначительно повышалась температура тела, имелась слабость во всем теле. Данные симптомы характерны для многих заболеваний, однако одним из тяжелых видов такой патологии является туберкулез.

Туберкулез легких широко распространен в таких странах, как:

Это заболевание зачастую имеется у лиц без определенного места жительства, заключенных, малообеспеченных людей. Оно характеризуется тяжелым поражением легких с образованием полостей распада (каверн), очагов уплотнения в легких. Они поражаются, в частности, из-за того, что легочная ткань обильно снабжена кровеносными и лимфатическими сосудами. А это обуславливает распространение туберкулеза на другие системы органов.

Заболевание передается воздушно-капельным путем, что существенно увеличивает риск заражения при контакте с больным человеком. Для того чтобы выявить наличие туберкулеза у пациента, создано множество методов, одним из которых является анализ мокроты.

Мокрота — секрет слизистой оболочки бронхов, при нормальном состоянии организма не образующийся. Во время заболевания наблюдается повышение секреции данной субстанции. Она начинает образовываться даже в самых мелких бронхах, что существенно увеличивает риск попадания микобактерий (основной возбудитель туберкулеза) в мокроту. Во время кашля частицы мокроты несколько рассеиваются в выдыхаемом воздухе. При вдыхании подобного воздуха происходит попадание микобактерий в незараженный организм , в котором, при соблюдении определенных условий, развивается инфекционный процесс, и туберкулез начинает прогрессировать.

При появлении вышеуказанных симптомов паниковать не стоит, так как вполне возможно, что место имеет банальная простуда. Однако туберкулез следует заподозрить , когда данные симптомы имеются уже довольно долгое время (не менее двух недель), пациент похудел за это время, а также если не делалась контрольная флюорография (нет данных минимум за полгода). Если же симптомы развились за несколько дней, есть стопроцентная уверенность в том, что это не туберкулез.

Если все же состояние здоровья ухудшилось, а кашель стал постоянным, следует обязательно сделать флюорографию. Без нее не всегда врачи согласятся провести анализ мокроты на микобактерии.

При подозрении на туберкулез (наличие на снимке очаговых уплотнений до 1 см в диаметре, затемнения доли или сегмента легкого, чаще всего, верхних его частей) немедленно стоит обратиться к фтизиатру за консультацией. Если же и у него возникнет подозрение на туберкулез, то сразу же будет назначен анализ мокроты.

В первую очередь следует взять чистую и стерильную баночку или плевательницу для слюны, чтобы избежать неправильной интерпретации анализа. Перед сплевыванием мокроты обязательно нужно почистить зубы, так как чаще всего неправильные результаты обусловлены попаданием микроорганизмов из ротовой полости.

Мокрота лучше всего отходит после длительного периода покоя (ночной сон). Она сплевывается в баночку. Лучше всего сразу же закрыть баночку. Хранить ее до исследования нужно в темном и прохладном месте. Оптимальное время для доставки мокроты на исследование — 2 часа. Каким же образом проводится само исследование мокроты?

Самыми примитивными методиками определения микобактерий являются бактериоскопический и бактериологический методы. Бактериоскопия основывается на выявлении под микроскопом специфических микробных тел, однако нельзя судить о наличии туберкулеза только по наличию данных микроорганизмов. Для более достоверного исследования обязательно проведение таких процедур, как ИФА, ПЦР.

Интерпретация анализа двояка. Без проведения специальных методик врач-лаборант вправе написать на бланке направления только “КУБ (кислотоустойчивые бактерии) положительны» или «КУБ отрицательны”. Если в мазке имеются похожие на микобактерию палочки, выставляется КУБ+. Если же их нет (КУБ-), то это исключает диагноз туберкулеза. В редких случаях анализ может быть ложноположительным или ложноотрицательным.

В первом случае имеет место перекрестная реакция антигенов. Ложноотрицательный результат возможен, когда в среду было внесено мало реагента и его просто не хватило для полноценной реакции между антигеном и вносимым компонентом.

Для лучшего выявления бактерий мазок окрашивают специфическими красителями (окраска по Цилю-Нельсену).

Если для бактериоскопии мокроты мало или больной ее не выделяет, лучше всего накануне перед сном прописать пациенту амброксол или бромгексин.

Если же все-таки имеется пометка КУБ+, то следует продолжить исследование.

В первую очередь необходимо провести иммуноферментный анализ (ИФА).

Суть его заключается в следующем:

1. К раствору, содержащему исследуемый антиген, добавляют специфические антитела. Их имеется две разновидности — меченые и немеченые.
2. Немеченые вносятся в среду на первом этапе, а на втором — меченные определенными ферментами.
3. При присоединении данных антител к антигенам образуется комплекс антиген-антитело. Концентрации вносимых компонентов известны.
4. После связывания компонентов определяют ферментативную активность среды, по которой судят о количестве антигена и возможном диагнозе.

ИФА методика позволяет довольно быстро определить наличие специфических антигенов и поспособствовать постановке диагноза.

Еще одним из часто использующихся методов исследования является определение микобактерий на ВАСТЕС.

Под ВАСТЕС понимают специализированные аппарат, в котором возможно определение многих видов микроорганизмов. Суть исследования такова:

1. Мокроту, полученную от пациента, разбавляют специальной средой, для каждого микроорганизма подбирают собственную.
2. Пробирку с полученным раствором помещают в аппарат, где в определенных условиях проводится выращивание штамма бактерий.
3. По мере их роста за счет содержащихся в среде веществ начинает вырабатываться углекислый газ, который соединяется со специальным красителем.
4. Он воспринимается определенными датчиками.
5. По тому, какой имеется индекс флюоресценции, судят о том, какие микроорганизмы находятся в исследуемом образце.

Более простой разновидностью этой методики является бактериологический метод или, как его называют, культуральный. Проводится посев мокроты на специальную среду, и в течение месяца наблюдают за тем, какие колонии растут. Если они приобретают специфический вид для микобактериальной культуры, то диагноз туберкулеза можно считать подтвержденным и доказанным. Однако этот метод используется крайне редко, так как занимает довольно много времени.

К более сложным методам относят диагностику микобактерий при помощи ПЦР. Эта методика доступна не во всех учреждениях здравоохранения и проводится обычно как минимум на районном или областном уровнях.

Полимеразная цепная реакция основывается на образовании в исследуемой среде участков генетического материала, сходного с таковым у микобактерии. Мокрота подвергается термической и химической обработке, после чего в определенных условиях в нее вносят необходимые реагенты. На основании имеющегося генетического материала происходит достраивание цепей молекул, которые впоследствии исследуются. Если генетический материал соответствует таковому, как у микобактерии, то диагноз можно считать подтвержденным.

Если диагноз туберкулеза положительный, пациента необходимо сразу же изолировать от других людей с целью исключения риска заражения окружающих.

Согласно исследованию количества микобактерий в мокроте, больных туберкулезом можно подразделить на две группы — БК+ и БК- К группе БК+ относят активных выделителей микобактерий, у которых имеется прогрессирующий процесс в легких. Такой контингент и представляет наибольшую опасность для окружающих.

Если же было подтверждено, что мокрота не содержит микобактерий или они единичны, то такой человек относится к группе БК- Он не представляет опасности для окружающих, однако с целью профилактики прогрессирования заболевания и перехода его в открытую форму такого человека тоже необходимо изолировать.

При проведении соответствующего лечения и подтверждении, что человек не является бактериовыделителем, больные становятся на учет к фтизиатру. При наличии нескольких отрицательных результатов на КУБ и БК (т.е. при получении стерильной мокроты при повторных методиках обследования типа ИФА или ПЦР) пациента снимают с учета.

Как видно, туберкулез является довольно значимой проблемой современного общества. Никогда нельзя знать заранее, отчего кашляет человек и может ли контакт с ним привести к тяжелым последствиям. Именно из-за этого, методика выявления микобактерий туберкулеза совершенствуется. Создаются новые экспресс-методы, позволяющие по наличию мокроты и ее характеру сразу же определить наличие туберкулеза у пациента. Однако все они играют важную роль на ранних стадиях заболевания, когда процесс еще не стал активным.

источник

Полимеразная цепная реакция (далее ПЦР) — это высокоточный метод молекулярно-генетического исследования материла, который позволяет выявить у человека различные инфекционные заболевания и установить генотип возбудителя.

ПЦР для выявления различных заболеваний стала применяться в самом конце прошлого века. Первооткрывателем этого метода исследования является американский биохимик Кэри Муллис. Свое открытие он сделал в 1983 году. Но еще несколько лет понадобилось, чтобы доработать метод.

С помощью ПЦР-диагностики можно обнаружить фрагменты чужеродного ДНК в любой жидкой среде организма. На анализ могут быть взяты такие жидкости:

• Кровь.
• Слюна.
• Мокрота.
• Выделения из половых органов.
• Смывная жидкость бронхов.
• Желудочный сок.

Лечащий врач сам определяет, какую биологическую жидкость лучше взять на анализ при конкретном заболевании.

ПЦР-диагностика позволяет не только обнаружить микрофрагменты чужеродной ДНК, но и определить к какому конкретному виду она относится. То есть с помощью ПЦР можно не только точно установить возбудителя заболевания, но и выяснить к какому виду он принадлежит.

Процесс анализа ПЦР — очень сложный. Он состоит из нескольких этапов:

1. Сначала нужно обнаружить фрагменты вредоносной ДНК в предоставленном образце.
2. Копирование фрагмента ДНК. Маленького участка ДНК для анализа недостаточно, поэтому его копируют. Нуклеиновая кислота может копироваться в пробирке с помощью фермента полимеразы (вне живого организма). В пробирке образуется множество клонов, то есть происходит цепная реакция. Весь процесс происходит в три этапа под воздействием различных температур.
3. Когда генетического материала становится достаточно для исследования, тогда возбудитель определяется обычными методами.

Метод ПЦР очень точен и может выявить наличие любого возбудителя по небольшому фрагменту ДНК или РНК.

ПЦР-анализ на туберкулез является самым информативным методом диагностирования этого заболевания. Относительно туберкулеза этот метод позволяет не только установить наличие микобактерий в организме, но и определить к какому виду они принадлежат.

Результат ПЦР диагностики может быть простой и расширенный. В простом результате указывается только наличие/отсутствие микобактерии. Расширенный результат дает представление о дополнительных параметрах протекания заболевания. Правильно понять, что написано в результате анализа ПЦР может только фтизиатр.

ПЦР-диагностика туберкулеза не проводится всем без исключения. Это объясняется дороговизной реактивов и недоступностью проведения исследования в некоторых отдалённых районах (в таких местах пользуются другими методами диагностики).

Показаниями для проведения ПЦР-исследования являются:

• Длительный контакт с больным туберкулезом.
• Беременность. ПЦР крови на туберкулез является самым быстрым и безопасным методом для беременной женщины.
• Экстренная ситуация. Например, необходимость срочного оперативного вмешательства, при котором нужно точно установить наличие/отсутствие туберкулеза в организме.
• Аллергическая реакция на туберкулиновые пробы.
• ВИЧ-инфекция.
• Невозможность диагностирования заболевания другими способами, при наличии явных признаков туберкулеза.
• Неоднозначные симптомы, которые не позволяют создать четкую клиническую картину заболевания (болезни верхних дыхательных путей, сопровождающиеся большим количеством мокроты, кровохарканьем и пр.).

Метод ПЦР, при всей своей сложности и дороговизне, проводится и расшифровывается в течение нескольких часов. Что делает этот метод золотым стандартом при диагностике туберкулезной инфекции.

Забор материала — это первый этап при выполнении ПЦР-исследования. Для того, чтобы выполнить качественный анализ, нужно соблюдать определенные правила по сбору материла:

• Для ПЦР мокроты на туберкулез нужно тщательно провести туалет полости рта. Делать это нужно вечером и утром перед анализом. Все это время не есть. Вечером выпить муколитическое средство для лучшего отхождения мокроты.
• Перед сдачей крови на ПЦР нужно не употреблять пищу в течение 8 часов. Лучше всего производить забор крови утором натощак. Курить перед забором крови также нельзя. Кровь берется из вены на локтевом сгибе руки в стерильную пробирку. В эту же емкость добавляется антикоагулянт, чтобы кровь оставалась жидкой. Смешивать антикоагулянт с кровью нужно очень аккуратно, не делая резких движений. Если кровь была взята не в лабораторных условиях, то она должна быть предоставлена лаборанту до истечения пятичасового срока. Иначе результат может быть не точным.
• Моча собирается в стерильную емкость утром, до приема пищи. Перед сбором мочи необходим тщательный туалет промежности.
• Остальные виды жидкостей (смывы с бронхов, спинномозговая жидкость) может собрать только специалист в условиях стационара.
• Перед забором жидкостей на ПЦР-исследование запрещено принимать некоторые препараты (например, прием некоторых антибиотиков нужно прекратить за две недели до забора материала).
• Требования к лаборатории, в которой проводится забор анализов на ПЦР очень строгие. Лаборатория должна быть стерильна, чтобы не произошло перекрестное загрязнение материала. В этом случае результаты могут быть ложноположительными.

ПЦР-тест на туберкулез — высокоточный информативный анализ. И требования к его проведению крайне строгие. Чтобы анализ получился, нужно соблюдать регламент.

Для работы в ПЦР-лаборатории приглашаются специально обученные врачи: бактериологи, вирусологи, микробиологи. Все они прошли дополнительное обучение для работы на сложном оборудовании.

Лаборатория должна иметь лицензию на выполнение работ связанных с бактериологически-опасными вирусами и бактериями.

В самой лаборатории должны быть выделены такие рабочие зоны:

• Зона приемки и сортировки проб.
• Зона подготовки проб. В этом помещении выделяются нуклеиновые кислоты из образцов материала.
• Зона проведения реакционных проб.
• Зона для учета результатов и расшифровки анализов.

Все помещения располагают последовательно. Допуск в эти зоны разрешен только работающим там сотрудникам, которые при входе соблюдают правила личной защиты от бактерий и вирусов.

Лучше, если есть возможность расположить лабораторию в отдельно стоящем здании с собственной системой вентиляции.

В лаборатории соблюдаются стерильные условия работы, чтобы избежать перекрестного загрязнения проб. Даже если один фрагмент чужеродной ДНК попадет в исследуемый материал, ПЦР его размножит, и анализ получится ложноположительным.

В каждой зоне лаборатории имеется свой набор оборудования и посуды для проведения исследований. Также имеются свои холодильники, которые не могут быть использованы в других целях, кроме хранения материала конкретной зоны исследований.

Использованные расходные материалы и остатки биологического материала уничтожаются специальными способами, в соответствии с инструкциями.

ПЦР-тест на туберкулез имеет множество плюсов, которые делают этот метод диагностики все более востребованным:

• Срок проведения. Несмотря на сложность проведения анализа, он готовится намного быстрее других лабораторных методов диагностики туберкулеза (около пяти часов). Это свойство анализа ПЦР становится особенно важным, когда анализ необходимо провести экстренно.
• Анализ ПЦР абсолютно безопасен и может проводиться беременным женщинам и детям.
• ПЦР-исследование можно сделать, когда по каким-то причинам нельзя выполнить другие методы диагностики.
• С помощью ПЦР-диагностики можно провести исследование любой биологической жидкости на выбор. В некоторых случаях это имеет большое значение.
• Позволяет обнаружить возбудителя на любой фазе заболевания. Даже после проведенного лечения, сохранившиеся остатки ДНК мертвых микобактерий будут обнаружены.
• Высочайшая чувствительность этого метода позволяет обнаруживать в биологическом материале даже единичные фрагменты ДНК микроорганизмов.
• Метод ПЦР позволяет не только обнаружить присутствие заболевания, но и может определить генотип возбудителя, отличив его от похожих микроорганизмов.
• ПЦР-исследование очень эффективно при рецидивирующем течении заболевания.
• Благодаря высочайшей чувствительности, анализ ПЦР может распознать микобактерии в организме человека, когда он только недавно инфицировался туберкулезом, задолго до появления клинических симптомов.

Казалось бы, метод ПЦР-диагностики содержит в себе только плюсы, но это не так.

Минусы этого метода исследования тоже существенны. При выборе метода исследования туберкулеза это также стоит учитывать:

• Это дорогостоящий метод исследования. Для проведения ПЦР-диагностики нужна специально-оборудованная лаборатория. Оборудование для таких исследований стоит очень дорого, и не во всякой лаборатории оно имеется. В крайнем случае, можно обратиться в платную лабораторию.
• Сразу же после проведенного лечения метод ПЦР применять не рекомендуется. В крови пациента некоторое время сохраняется небольшое количество живых и мертвых микобактерий. Если провести анализ в этот период, он покажет ложноположительный результат.
• При мутациях микобактерий, анализ будет недостоверным, так как нормальная ДНК не сможет синтезироваться.
• Для ПЦР-исследования имеет значение правильный выбор биологической жидкости на анализ.
• Сверхчувствительность. Это тот случай, когда достоинство метода становится его недостатком. Если при проведении анализа в биологический материал каким-то образом попадет даже единичный фрагмент чужеродного ДНК, то ПЦР его размножит, и будет получен ложный результат.

ПЦР-лаборатория имеется только в крупных противотуберкулезных диспансерах и диагностических центрах.

Объясняется это высокой стоимостью оборудования и высокими требованиями к содержанию лаборатории (реактивы, обработка).

Медицинские чиновники не сильно переживают из-за отсутствия ПЦР-лаборатории в каком-то конкретном населенном пункте, поскольку анализы на туберкулёз можно провести другими методами (культивирование микобактерий, микроскопическое исследование).

Если в населённом пункте нет бесплатной ПЦР-лаборатории, пациент по желанию может обратиться в платное учреждение.

В последнее время ПЦР-диагностика занимает все более прочные позиции в диагностике туберкулеза и других заболеваний, отодвигая на задний план другие методы диагностики.

источник

Большинство людей, скорее всего, не сталкивались с таким видом исследования, как анализ на мокроту. В нашей статье мы детально расскажем про него. Также затронем тему сдачи анализа, правила сбора материала для исследования.

Мокротой называют выделения, которые образуются в дыхательных путях организма. Если у человека все в порядке со здоровьем, то таких выделений у него нет. В основном данный анализ необходим для диагностирования туберкулеза. Также по мере лечения данного заболевания необходимо сдавать данный анализ. Это нужно для того, чтобы определить динамику выздоровления. А также то, возможно ли больному контактировать с людьми, или он представляет риск для окружающих.

Помимо больных туберкулёзом, при других заболеваниях, таких как пневмония, рак лёгких и абсцесс, назначают анализ на мокроту. Как сдавать его? Об этом мы расскажем дальше. Отметим, что основанием для сдачи этого анализа может являться длительный кашель.

Следует знать, прежде чем сдавать анализ на мокроту, как сдавать его правильно. Так как мокрота обладает свойством скапливаться в ночное время, то рекомендуется собирать ее утром. Данный процесс нужно осуществлять до завтрака. Важным моментом в сборе мокроты является ее откашливание. При этом действии секрет выйдет из лёгких. А если человек будет отхаркивать мокроту, то получится смесь из носоглотки. Тогда она не подойдёт для исследования.

Количество секрета, которое необходимо для анализа, составляет 5 или 6 откашливаний. Так как процесс сбора материала носит специфический характер, лучше делать это одному. Анализ на мокроту (как сдавать его, мы сейчас выясняем) лучше не видеть близким родственникам. К тому же существует риск, что человек заражён каким-либо серьезным заболеванием. Поэтому в целях осторожности необходимо проводить данную процедуру в одиночку.

Следует использовать специальный контейнер для мокроты. Данный сосуд должен быть стерильным. Поэтому его вскрытие производится непосредственно перед заполнением.

Для того чтобы правильно сдать мокроту, необходимо тщательно подготовиться. Во-первых, следует прополоскать рот кипяченой водой с содой. Во-вторых, необходимо почистить зубы. После ротовую полость также следует хорошо прополоскать. Далее нужно открыть окно, поставить около него стул и присесть. Потом приготовить контейнер. Затем необходимо сделать два вдоха и выдоха. Их нужно делать глубокими. На третьем вдохе встать со стула и произвести быстрый выдох. После этой процедуры должен возникнуть кашель. Так как для анализа необходимо 5 или 6 откашливаний, то процедуру следует повторить несколько раз.

Бывают случаи, что у человека не получается собрать мокроту. Это связано с перенапряжением, тогда необходимо расслабиться. Для того чтобы это сделать, нужно встать и походить по комнате, хорошим вариантом для расслабления станут физические упражнения или массаж груди. Еще перед сном рекомендуется выпить отхаркивающие травяные настои. Также поспособствует положительному сбору мокроты большое количество тёплой воды.

После того как материал собран в контейнер, его необходимо закрыть крышкой. Ни в коем случае не рекомендуется глотать мокроту.

Данный анализ следует незамедлительно отвезти в лабораторию. Контейнер с мокротой должен попасть в медицинское учреждение не позднее чем через 2 часа после ее сбора. До того момента, как анализ будет транспортироваться в лабораторию, его следует поместить в холодильник. Нужно обеспечить, чтобы контейнер с анализом стоял отдельно от всех продуктов.

Как сдавать общий анализ мокроты детям и лежачим больным? Что касается детей, то объяснить им, как сдать мокроту, невозможно. Они ее заглатывают. Поэтому, чтобы осуществить сбор данного анализа, берут ватный тампон и посредством него раздражают корень языка. Данное действие вызывает кашель, вследствие которого мокрота попадает на тампон. Далее им проводят по специальным стеклам, сушат их и направляют в лабораторию для исследования. Аналогичным способом мокрота собирается у людей, которые физически сильно ослаблены.

Следует сказать, что у здорового человека мокроты нет. Если она присутствует, то значит, в организме имеется какое-либо заболевание. При анализе мокроты оценивается ее цвет и консистенция. Если она прозрачная, имеет вязкую структуру, то это является признаком вирусного поражения верхних дыхательных путей и наличия таких заболеваний, как ОРВИ и острый бронхит.

Если мокрота желтая или зеленая, то это свидетельствует о наличии в ней гноя. Данный признак свидетельствует о том, что человек болен пневмонией или абсцессом лёгких. Если мокрота имеет оттенок янтарного цвета, то это является признаком аллергии. Если в организме присутствуют такие заболевания, как рак и туберкулёз, то в мокроте есть кровь. Для исследования клеточного состава необходимо изучить ее состав под микроскопом.

Где сдать мокроту на анализ? Практически в любой лаборатории, причем как государственной, так и частной. Анализ на мокроту можно собрать как в домашних условиях, так и амбулаторно.

Теперь вы знаете, зачем делается анализ на мокроту, как сдавать его, мы детально описали. Надеемся, что информация в статье была вам полезна.

источник

Анализ мокроты — показание, как правильно собрать и сдавать, расшифровка результатов и показатели нормы

При бронхите и других воспалительных заболеваниях необходимо сдавать общий анализ мокроты, проанализировав результаты которого, врач сможет определить характер и причину развития патологического процесса. При поражениях дыхательных органов выделяется слизистый секрет, который несет в себе информацию о возбудителях, ставших катализаторами ухудшения состояния организма. Это могут быть микробактерии туберкулеза, клетки злокачественных опухолей, примеси гноя или крови. Все они влияют на количество и состав выделяемой пациентом мокроты.

Исследование мокроты является одним из самых эффективных методов, позволяющих определить характер заболевания дыхательных путей. Многие недуги представляют серьезную угрозу для жизни человека, например, такие болезни как актиномикоз, гнилостный бронхит, гангрена легкого, пневмония, бронхиальная астма, абсцесс легкого и т.д. Попадая в организм человека, вредоносные микроорганизмы способствуют развитию патологического процесса, который стимулирует выделение секрета из органов дыхания.

Чтобы диагностировать болезнь, врачи проводят общий анализ, который включает несколько этапов: бактериологический, макроскопический, химический и микроскопический. Каждое исследование содержит важную информацию о секрете, на основе чего происходит итоговое составление медицинского заключения. Анализы подготавливают около трех рабочих дней, в некоторых случаях возможны задержки на более длительный срок.

Микроскопия мокроты проводится среди пациентов, страдающих заболеваниями легких или других органов дыхания, с целью выявления причины недуга. Слизистый секрет выделяется только при наличии патологических отклонений в работе организма, поэтому при появлении выделений из дыхательных путей следует как можно скорее обратиться к врачу. Отхождение мокроты происходит во время кашля, микроскопический анализ слизи помогает получить всю необходимую информацию о локализации и стадии воспалительного процесса.

Цвет и консистенция мокроты могут быть разными в зависимости от болезни. Исходя из полученных данных, врачи определяют возбудителя патологии и подбирают рациональный курс лечения. Присутствие в секрете патогенных микроорганизмов способствует подтверждению или опровержению наличия злокачественных опухолей, что немаловажно при постановке окончательного диагноза.

Сдавать посев мокроты для проведения общего анализа необходимо тем пациентам, у которых присутствует подозрение на хронические или острые заболевания дыхательной системы. Например, бронхит, рак легкого, туберкулез, пневмония. Данная группа людей находится в категории риска, поэтому регулярные исследования секрета являются неотъемлемой частью комплексной терапии заболеваний. Собирать слизь приходится даже после прохождения курса лечения, поскольку некоторые недуги имеют тенденцию к временному прекращению активности.

Данная процедура требует от пациентов соблюдения определенных правил, которые гарантируют «чистоту» проведения исследования. Ротовая полость человека содержит особую флору, которая может смешиваться с патогенным секретом. Чтобы предоставить корректные данные медицинской комиссии, пациент должен придерживаться следующих рекомендаций:

1. Пить много теплой воды.
2. Принимать отхаркивающие средства.
3. Почистить зубы и прополоскать рот перед процедурой.

Перед тем, как сдавать мокроту на анализ, ее необходимо собрать в домашних или амбулаторных условиях. Пациенту выдают стерильную баночку, которую следует открывать непосредственно перед процедурой. Лучше всего собирать секрет с утра, поскольку в это время суток он является самым свежим. Мокроту для исследования нужно постепенно выкашливать, но, ни в коем случае, не отхаркивать. Чтобы улучшить выделение слизи, врачи рекомендуют:

1. Сделать 3 медленных вдоха и выдоха, задерживая дыхание между ними на 5 секунд.
2. Откашляться и сплюнуть накопившуюся мокроту в баночку для анализов.
3. Убедиться, что слюна из ротовой полости не попала в емкость.
4. Повторять вышеуказанные действия до тех пор, пока уровень секрета не достигнет отметки 5 мл.
5. В случае неудачи, можно подышать паром над кастрюлей с горячей водой для ускорения процесса отхаркивания.

Как только сбор мокроты завершен, баночку следует отвезти в лабораторию для проведения анализа. Важно, чтобы секрет был свежим (не более 2 часов), поскольку в человеческой слизи очень быстро начинают размножаться сапрофиты. Данные микроорганизмы мешают правильной постановке диагноза, поэтому все время от сбора до транспортировки емкость со слизью необходимо хранить в холодильнике.

Длительный кашель, который не прекращается на протяжении трех недель, считается показанием для исследования мокроты. Подозрение на туберкулез – серьезный диагноз, поэтому патогенную слизь собирают только под присмотром врача. Данный процесс может происходить в стационарных или амбулаторных условиях. Сдавать мокроту при подозрении на туберкулез приходится 3 раза.

Первый сбор проходит рано утром, второй – по прошествии 4 часов, а последний – на следующий день. Если пациент по какой-то причине не может самостоятельно прийти в больницу для сдачи анализов, к нему домой наведывается медсестра и доставляет полученный секрет в лабораторию. При обнаружении бактерий Коха (микробактерий туберкулеза) врачи ставят диагноз – открытая форма туберкулеза.

Расшифровка анализа мокроты состоит из трех этапов. Сначала лечащий врач проводит визуальный осмотр пациента, оценивает характер, цвет, слоистость и другие показатели патогенного секрета. Полученные образцы изучают под микроскопом, после чего наступает черед бактериоскопии. Завершающим исследованием является посев на питательные среды. Бланк с результатами выдается в течение трех дней по завершению сдачи анализов, исходя из полученных данных, специалист делает вывод о характере заболевания.

Чтобы правильно поставить диагноз пациенту, мокроту оценивают по трем разным показателям. Проводится макроскопический, бактериоскопический и микроскопический анализ, результаты по каждому исследованию дают четкое представление о состоянии человека. Цвет, консистенция, запах, деление на слои и наличие включений – это основные показатели макроскопического анализа секрета. Например, прозрачная слизь встречается у людей с хроническими заболеваниями дыхательных путей.

Ржавый оттенок секрета обусловлен кровянистыми примесями (распад эритроцитов), что часто свидетельствует о наличии туберкулеза, крупозной пневмонии, рака. Гнойная мокрота, которая образуется при скоплении лейкоцитов, характерна для абсцесса, гангрены или бронхита. Желтый или зеленый цвет выделений является показателем патологического процесса в легких. Вязкая консистенция секрета может быть следствием воспаления или приема антибиотиков.

Спирали Куршмана в мокроте, которые представляют собой белые извитые трубочки, свидетельствуют о наличии бронхиальной астмы. Результаты микроскопического и бактериоскопического анализа предоставляют информацию о содержании в слизи болезнетворных микроорганизмов или бактерий. К ним относятся: диплобациллы, атипичные клетки, стафилококки, эозинофилы, гельминты, стрептококки. Серозная мокрота выделяется при отеке легких, пробки Дитриха встречаются у пациентов, страдающих гангреной или бронхоэктазами.

У здорового человека железы крупных бронхов образуют секрет, который проглатывается при выделении. Данная слизь обладает бактерицидным эффектом и служит для очищения дыхательных путей. Однако появление даже незначительного количества мокроты свидетельствует о том, что в организме развивается патологический процесс. Это может быть застой в легких, острый бронхит или пневмония. Единственным исключением являются курильщики, поскольку у них слизь выделяется постоянно.

Наличие единичных эритроцитов при анализе секрета является нормой и не оказывает влияния на диагностические результаты. Объем ежедневно вырабатываемой трахеобронхиальной слизи у человека должен находиться в переделах от 10 до 100 мл. Превышение указанной нормы свидетельствует о необходимости проведения дополнительных анализов. При отсутствии отклонений мазок на МТБ должен показать отрицательный результат.

В норме у человека не должно происходить отхождение мокроты, поэтому при появлении слизи подозрительного характера необходимо сразу же обратиться за помощью к специалисту. С помощью бактериоскопического исследования определяется тип возбудителя, мазок с грамположительными бактериями окрашивается в синий цвет, а с грамотрицательными – в розовый. Микроскопический анализ помогает обнаружить опасные патологии, к которым относятся опухолевые клетки, эластичные волокна, альвеолярные макрофаги и т.д. Исходя из полученных результатов слизи, врач назначает терапию.

При микроскопическом исследовании мокроты часто встречаются клетки плоского эпителия, однако это никак не влияет результаты анализа. Обнаружение клеток цилиндрического эпителия может свидетельствовать о наличии таких недугов, как астма, бронхит или рак легкого. В большинстве случаев вышеупомянутые образования являются примесями слизи из носоглотки и не имеют диагностического значения.

Клетки ретикулоэндотелия можно обнаружить у людей, которые длительное время находились в контакте с пылью. Протоплазма альвеолярных макрофагов содержит фагоцитированные частицы, которые называют «пылевыми» клетками. Некоторые из вышеуказанных микроорганизмов включают продукт распада гемоглобина – гемосидерин, поэтому им было присвоено название «клетки сердечных пороков». Такие образования возникают у пациентов с диагнозами инфаркт легкого, митральный стеноз, застой легкого.

Любой секрет содержит небольшое количество лейкоцитов, однако скопление нейтрофилов свидетельствует о том, что имеются гнойные выделения. При бронхиальной астме у пациента можно обнаружить эозинофилы, что также характерно и для следующих заболеваний: рак, туберкулез, инфаркт, пневмония, гельминтоз. Большое число лимфоцитов встречаются у тех людей, которые болеют коклюшем. Иногда причиной повышения их количества выступает туберкулез легких.

Слизь человека может содержать единичное количество эритроцитов, что никак не влияет на состояние его здоровья. При развитии таких патологических процессов, как легочное кровотечение, количество эритроцитов сильно возрастает, что приводит к кровохарканью. Наличие свежей крови в слизистых выделениях говорит о наличии неизменных эритроцитов, но если кровь задерживалась в дыхательных путях, то по ней определяют выщелоченные клетки.

При распаде легочной ткани образуются так называемые эластичные волокна. Их появление в секрете свидетельствует о наличии абсцесса, туберкулеза, рака или гангрены легких. Последнее заболевание может протекать без присутствия эластичных волокон, поскольку они иногда растворяются под действием ферментов слизи. Отличительной особенностью бесцветных кристаллов Шарко-Лейдена является высокое содержание эозинофилов, что характерно для таких заболеваний как бронхиальная астма и эозинофильная пневмония.

Кристаллы Шарко-Лейдена – не единственный представитель эластичных волокон. В мокроте многих пациентов, страдающих заболеваниями дыхательных путей, часто встречаются спирали Куршмана. Они представляют собой трубчатые тела, которые иногда заметны даже невооруженным глазом. В остальных случаях кристаллы обнаруживают с помощью микроскопического исследования слизи. Трубчатые тела могут предвещать развитие пневмонии, бронхиальной астмы, туберкулеза легких.

Эозинофилы считаются признаками астмы, но данное утверждение верно лишь для некоторых случаев. Микроорганизмы этого типа содержат специфический белок, который способен не только защищать организм от паразитов, но и разрушать эпителий дыхательных путей. Эозинофилы считаются одной из главных причин развития патологии органов дыхания, однако исследования по данному вопросу все еще не завершены. Эти клетки невозможно полностью удалить из дыхательных путей, однако можно существенно снизить их количество при соответствующем лечении антителами.

источник

• О методе ПЦР
• Цены на ПЦР диагностику

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – на сегодняшний день самый быстрый и достоверный метод диагностики инфекционных заболеваний.

Принцип метода полимеразной цепной реакции был разработан Кэри Мюлисом (Kary Mullis) в 1983 г. За свое открытие К. Мюллис в 1993 г получил Нобелевскую премию по химии.

Метод ПЦР позволяет добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). Метод основан на многократном избирательном копировании (амплификации) определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях.

Многие традиционные методы диагностики, например иммуноферментный анализ, выявляют белки-маркеры, являющиеся продуктами жизнедеятельности инфекционных агентов, что дает лишь опосредованное свидетельство наличия инфекции. Выявление специфического участка ДНК возбудителя методом ПЦР дает прямое указание на присутствие возбудителя инфекции.

Высокая специфичность метода ПЦР обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется уникальный, характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК. Специфичность задается нуклеотидной последовательностью праймеров, что исключает возможность получения ложных результатов, в отличие от иммунологических методов анализа, где нередки ошибки в связи с перекрестно-реагирующими антигенами.

Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР анализ обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Чувствительность ПЦР анализа составляет 10-100 клеток в пробе (чувствительность иммунологических и микроскопических тестов — 103-105 клеток).

Материалом для исследования методом ПЦР служит ДНК возбудителя. Метод основан на выявлении фрагмента ДНК или РНК, являющегося специфичным для конкретного организма. Сходство химического состава всех нуклеиновых кислот позволяет применять унифицированные методы проведения лабораторных исследований. Это дает возможность диагностировать несколько возбудителей из одной биопробы.

Для проведения ПЦР анализа не требуется выделение и выращивание культуры возбудителя, что занимает большое количество времени. Унифицированный метод обработки биоматериала и детекции продуктов реакции и автоматизация процесса амплификации дают возможность провести полный анализ за 4-5 часов.

Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и персистирующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях. Применение ПЦР диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов.

• Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. Обычно используются для диагностики заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), таких как гонорея, хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез, герпетическая и другие инфекции, поражающие слизистые оболочки.
• Моча. Моча может использоваться при инфекционном поражении мочеполового тракта у мужчин и мочевыделительных органов у женщин (у мужчин использование в качестве материала мочи заменяет эпителиальный соскоб).
• Мокрота. Мокрота используется для диагностики туберкулеза и реже для диагностики респираторных форм хламидиоза и микоплазмоза. Мокроту в количестве 15-20 мл собирают в стерильный (одноразовый) флакон.
• Кровь, плазма, сыворотка. Используются для ПЦР анализа вирусов гепатитов B, C, D, G, герпеса, ЦМВ, ВИЧ, исследования генов человека.
• Биологические жидкости. Сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, слюна забираются по показаниям.
• Биоптаты. Чаще всего используют биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки для выявления хеликобактерной инфекции.

р.д. — рабочий день, кол. — количественный, кач. — качественный, ген. — генотипирование, АЖ — амниотическая жидкость, БАЛ — бронхо-альвеолярный лаваж, СМЖ — спинно-мозговая жидкость, ПЖ — плевральная жидкость

источник

Для выявления палочки Коха в организме человека, используют разные диагностические методы. Благодаря ним патологию можно обнаружить даже на начальном этапе, что увеличивает шансы больного на выздоровление. Анализ мокроты на туберкулез – это методика, которая наиболее ценится, так является достаточно эффективной. Что она собой представляет и сколько стоит такой анализ?

ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Данный способ эффективен по отношению к инфекционным болезням. Чтобы установить четкий диагноз не нужно собирать большое количество биоматериала и ждать много времени, как при бак-посеве мокроты.

В основе методики лежит получение ДНК частиц микроорганизма. Далее молекулярно-генетическое исследование определит, к какому типу микроорганизмов стоит отнести имеющийся материал. В пробирочных условиях за несколько часов специалист синтезирует молекулы бактерий и делает соответствующие выводы.

Анализ мокроты на микобактерии туберкулеза эффективен тогда, когда палочка Коха поразила органы дыхания. В таком случае без труда можно выявить болезнь, даже в первые часы инфицирования.

Но, анализ мокроты не покажет достоверного результата, если присутствует туберкулез:

• костей;
• головного, спинного мозга;
• нервной системы;
• суставов и пр.

Определить вид заболевания сможет фтизиатр, учитывая присутствующую симптоматику и опираясь на полученные результаты общих и иных анализов.

Также нецелесообразен такой метод исследования в том случае, когда нужно провести контрольный анализ после терапевтического лечения заболевания. Результат будет положительным, так как в организме в любом случае еще имеются живые или мертвые МБК. Тут лучше отдать предпочтение другой диагностической процедуре.

Как таковых противопоказаний для исследования мокроты на туберкулез при помощи ПЦР нет. Есть ограничения. Как уже говорилось выше, нет надобности в его проведении после лечения туберкулеза. Полученные результаты не принесут пользы. Тут желательно прибегнуть к иной диагностике.

Кроме этого, нет никаких иных препятствия для проведения этой диагностики. Исследовать мокроту можно в любой возрастной категории и при любых сопутствующих заболеваниях. Даже если нет обильного выхода мокроты, анализ можно сделать путем забора слизи с помощью бронхоскопии.

У рассматриваемого метода масса плюсов, к ним относится:

1. Высокая специфичность и чувствительность. Выявляется только возбудитель туберкулеза. Ложного ответа быть не может, если учтены все нюансы проведения процедуры. Микобактерии обнаруживаются даже тогда, когда их минимальное количество. Даже если в собранном материале 10 патологических клеток, инфекция будет выявлена.
2. Быстрота получения ответа. Сколько делается анализ? Уже через 3-5 часов можно получить результат. Тут не нужно делать посев мокроты на туберкулез, и это сужает сроки.
3. Выявить можно как скрытую инфекцию, так и ту, которая находится в острой форме.
4. Нет абсолютных противопоказаний. Это дает возможность проводить процедуру всем без исключения (даже маленьким детям) и особенно тогда, когда другие методы неразрешены.
5. При помощи ПЦР-диагностики изучается различный биоматериал (урина, кал, кровь, слюна, спинномозговая жидкость и др.).
6. Метод выявляет туберкулез и на ранних стадиях, в первые часы после заражения.

к содержанию ↑

Помимо положительных сторон, есть и отрицательные. Это:

1. Анализ на ПЦР – дорогое «удовольствие». Кроме этого, оборудование, необходимое для его проведения имеется не в каждом медицинском центре. В поликлиниках оно присутствует редко, так как его стоимость также велика. Если говорить о частных клиниках, то да, найти такой вид диагностики можно. Позволить его себе, к сожалению, может не каждый.
2. Показывает ложноположительный результат у тех людей, которые недавно прошли курс противотуберкулезного лечения.
3. Если МБК мутировали, то метод может также дать ложные результаты.
4. Если материал собран неправильно, или специалист, который проводит исследование, имеет недостаточный квалификационный уровень, то также возможен сбой. В некоторых случаях повторять процедуру придется несколько раз и каждый раз оплата повторяется.

к содержанию ↑

Чтобы материал был качественным, его нужно собрать правильно и подготовиться к этому как следует.

Существуют определенные правила сбора мокроты на туберкулез. Алгоритм действий заключается в следующем:

1. Еще накануне, вечером человеку нужно выпить отхаркивающее средство (если мокрота плохо отходит). Если даже это не помогло, следует провести ингаляцию на основе лекарственного разжижающего и отхаркивающего препарата. При отсутствии мокроты пациента нацеливают на то, что будет производиться бронхоскопия. Именно во время этой процедуры и берется материал для исследования.
2. Заранее приобрести специальную емкость. Она стерильная и герметичная, поэтому ничего лишнего туда помещать нельзя, также как и открывать заранее.
3. Помещение, где будет собираться мокрота должно хорошо вентилироваться. Нужно открыть окна, двери, включить вытяжку. Еще один неплохой вариант – выйти на свежий воздух (например, на балкон или во двор).
4. Непосредственно перед процедурой нужно всех предупредить, чтобы никто не входил в комнату, где будет все происходить. Никаких лишних микрочастиц в биоматериале быть не должно – это важно.
5. Принимать пищу до сбора не рекомендуется.
6. Рот и глотка полощутся.
7. Слюна выплевывается. Ее в емкость должно попасть минимальное количество.
8. Путем откашливания человек выводит мокроту наружу и сплевывает ее в подготовленный контейнер. После окончания процедуры нужно плотно закрыть крышку и отвести образец в лабораторию.

Как правильно собрать мокроту должен рассказать врач. Если больной не решается сделать это самостоятельно, то на помощь приходят медработники. Во время манипуляции они надевают специальную защитную маску. Собирать мокроту будут в специальном кабинете, куда нет хода посторонним. Если прийти в клинику больной не может, то специалист приезжает к нему на дом и помогает осуществить сбор слизи.

Если делается бронхоскопия, то больному вводят в трахею прибор – бронхоскоп. Именно с его помощью и производится забор материала.

Для достоверности целесообразно сдать анализ трижды, а именно:

• в утренние часы натощак;
• после первого раза через 4-5 часов;
• через 24 часа после первого исследования и тоже до приема пищи.

к содержанию ↑

Сдать анализ мокроты на туберкулез – это только часть работы. Основное впереди. Многое зависит от того, как подготовлен специалист.

Ход исследования следующий:

1. Специалист приступает к разрушению первичной структуры ДНК (денатурации). Тут имеется две цепочки. При высокой температуре они разъединяются.
2. На следующем этапе производится снижение температуры (отжиг). Это необходимо для связи нити ДНК с праймером.
3. Третий этап – элонгация. Тут синтезируются нужные молекулы.

к содержанию ↑

Микобактерии туберкулеза в мокроте методом ПЦР могут быть обнаружены или же нет. Положительный результат основан тем, что в биоматериале имеется ДНК палочки Коха. Это говорит о том, что человек заражен. При отрицательном – 98% того, что обследуемый не является инфицированным.

По показателям можно судить о том:

• в какой фазе патология (латентной или активной);
• насколько организм поражен;
• эффективно ли выбранное лечение в конкретном случае.

Имейте в виду, что ничто не досконально. Поэтому и тут может быть ложноположительный или ложноотрицательный результат. Чтобы убедиться в его правильности, рекомендованы иные диагностические процедуры или же прохождение ПЦР дважды (трижды).

Сдать мокроту на ПЦР можно в разных клиниках. Приведем примеры нескольких популярных московских центров с ценовой политикой.

Кроме вышеуказанных адресов имеются и другие. Узнать о месторасположении всех лабораторий можно на их сайте. Из приведенных примеров видно, что стоимость анализа велика, но если учитывать его результативность, то это того стоит.

ПЦР-диагностика – это один из эффективных диагностических методов, активно используемых в современной медицине. Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза может осуществляться как самостоятельно в домашних условиях, так и при помощи специалиста. Если мокрота не отходит, то делают бронхоскопию. Важна предварительная подготовка. Правильно сдать биоматериал – это уже полдела. Мокрота при туберкулезе будет иметь в себе микобактерии, обнаружить которые при ПЦР не составит труда, даже если их там небольшое количество. Огромный плюс данного способа – это выявление заболевания в первые часы после заражения. Использовать в диагностических целях можно как у взрослых, так и у детей.

Даже внушительная сумма не может остановить человека получить достоверную информацию касательно здоровья близкого человека или его собственного.

источник