Микроскопия мокроты как делать

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

1. Предметные и покровные стекла.
2. Чашки Петри.
3. Зубоврачебные шпатель и игла.
4. Черная и белая бумага.
5. Микроскоп.
6. Газовая или спиртовая горелка.
7. Смесь Никифорова.
8. Краска Романовского.
9. Едкий натр.
10. Эозин.
11. Желтая кровяная соль.
12. Концентрированная соляная кислота.
13. Метиленовая синька.
14. Вода.
15. Спички.

Мокроту, помещенную в чашку Петри, распластывают с помощью шпателя и иглы до получения полупрозрачного слоя (шпатель и иглу захватывают правой и левой рукой в виде писчего пера); это делают очень осторожно, чтобы не разрушить имеющиеся в мокроте образования. Полупрозрачный слой мокроты изучают с целью выявления в нем линейных и округлых частиц и образований, клочков, отличающихся по цвету и консистенции. Для этого чашку Петри с мокротой располагают попеременно на белом и черном фоне. Найденные образования выделяют из основной массы (слизи, гноя, крови) режущими движениями инструментов, стараясь не повредить выделенные частицы. Полноценным приготовленный препарат будет лишь в том случае, если будут последовательно отобраны все интересующие исследователя частицы и образования. Отобранный материал помещают на предметное стекло. При этом более плотные по консистенции частицы помещают ближе к центру намечаемого препарата, а менее плотные, так же как и слизисто-гнойные, гнойно-слизистые, кровянисто окрашенные образования, — по периферии. Материал покрывают стеклом. Обычно на одном предметом стекле готовят два препарата, что обеспечивает максимальный просмотр отобранного материала. В правильно приготовленных препаратах мокрота не выходит за пределы покровного стекла.

Если мокрота вязкой или тягучей консистенции, то на покровное стекло слегка надавливают, чтобы равномернее распределить материал. Препараты, предназначенные для микроскопического исследования, изучают вначале под малым, а затем под большим увеличением микроскопа при опущенном конденсоре.

Важно уметь находить различные элементы мокроты не только при большом, но и при малом увеличении.

1. Слизь — волокнистая или сетевидная, вместе с форменными эле¬ментами (лейкоцитами, эритроцитами), сероватого цвета.

2. Эпителий — плоский, круглый (альвеолярные макрофаги), цилиндрический (мерцательный).

Плоский эпителий имеет форму полигональных бесцветных клеток с обильной цитоплазмой и одним ядром.
Эпителий цилиндрический, мерцательный (бронхов) (рис. 51, 3) представляет собой продолговатой формы клетки, один из концов которых сужен, а на другом — тупом — нередко видны реснички; ядро, круглой или овальной формы, расположено эксцентрично в широкой части клетки; цитоплазма содержит мелкую зернистость. Иногда (при бронхиальной астме) эпителий бронхов выявляется в виде железистоподобных образований, которые в свежевыделенной мокроте имеют движущиеся реснички.

Рис. 51. Клеточные элементы в мокроте и эластические волокна: лейкоциты (1), альвеолярные макрофаги (2), эпителий бронхов (3), миелин (4), эластические волокна простые (5), коралловидные (6), обызвествленные (7).

Альвеолярные макрофаги — это круглой формы клетки по размерам в несколько раз больше лейкоцитов, с выраженной зернистостью в цитоплазме, из-за которой в большинстве случаев не видно ядра. Зернистость обычно сероватого цвета. Подвергаясь, жировому перерождению, альвеолярные макрофаги становятся более темными, так как капли жира, накапливающиеся в клетке, сильнее преломляют лучи проходящего через них света.

При наличии угольного пигмента часть зернистости приобретает черный цвет. У курильщиков альвеолярные макрофаги содержат буровато-желтую зернистость. Золотисто-желтая зернистость обусловлена наличием в альвеолярных макрофагах кровяного пигмента, содержащего железо (гемосидерин). С целью обнаружения гемосидерина в мокроте используют химическую реакцию.

С препарата, в котором были обнаружены альвеолярные макрофаги с лимонно-желтой или золотисто-желтой зернистостью, снимают покровное стекло. Мокроту подсушивают на воздухе. На 8-10 минут на препарат наливают реактив (смесь равных объемов 3% раствора соляной кислоты и 5% раствора желтой кровяной соли). Через 8-10 минут реактив сливают. Препарат накрывают покровным стеклом и изучают под большим увеличением.
При наличии гемосидерина альвеолярные макрофаги окрашиваются в синий (голубой) цвет (рис. 52).

Рис. 52. Реакция на гемосидерин в мокроте. 1 — до окраски, 2 — после окраски.

3. Миелин (рис. 51, 4) — различной формы матово-серые образования, которые могут находиться в мокроте внеклеточно, а также внутри альвеолярных макрофагов.

Для отличия миелина от капелек жира используют микрореакцию: к материалу, в котором был обнаружен миелин, осторожно прибавляют одну каплю концентрированной H2SO4; при этом миелин окрашивается в оттенки от фиолетового до красного цвета.

4. Нейтрофилы . Морфологически нейтрофилы напоминают лейкоциты, встречающиеся в моче. В гнойной мокроте происходит разрушение лейкоцитов, поэтому в некоторых местах препарата находят зернистую бесструктурную массу (детрит).

5. Эозинофилы . Имеют ряд отличительных от нейтрофилов признаков. Они несколько больше их по размеру, содержат крупную зернистость, благодаря чему выглядят более темными. Их скопления при малом увеличении имеют желтоватый оттенок. Особенно много эозинофилов содержится в желтоватых рассыпчатых клочках мокроты больных бронхиальной астмой. Иногда среди эозинофилов находят кристаллы Шарко-Лейдена. Для более точного распознавания эозинофилов препарат окрашивают.

Техника окраски эозинофилов. Мокроту распределяют по предметному стеклу. Препарат высушивают на воздухе и фиксируют над пламенем горелки. Теплое стекло помещают на 3 минуты в 0,5% спиртовой раствор эозина, а затем промывают водой и красят в течение нескольких секунд 0,5-1% водным раствором метиленовой синьки. Вновь промывают водой, высушивают и изучают под микроскопом с иммерсией. В эозинофилах выявляют красную зернистость (рис. 53). Окрасить эозинофилы можно также способом Романовского. С этой целью препарат окрашивают точно так же, как мазки крови, но только меньше времени (8-10 минут).

Рис. 53. Эозинофильные лейкоциты в мокроте (масляная иммерсия).

6. Эритроциты — неизмененные выглядят так же, как и в моче. В бурых кровянистых частицах они обычно не обнаруживаются.

7. Жирно-зернистые клетки (рис. 54, 1) — округлой формы, в несколько раз больше лейкоцитов, содержат жировые капельки, сильно преломляющие свет.

8. Клетки злокачественных новообразований (рис. 54, 2) — разных размеров, жиро- и вакуольно-перерожденные. Встречаются отдельно и в виде тесных округлых групп или стержневидных образований, луковиц и пр.

Рис. 54. 1 — жирно-зернистые клетки; 2 — железистоподобная группа из атипического эпителия при железистом раке легкого. Нативный препарат. Увеличение 300х. Микрофотография.

9. Эластические волокна (см. рис. 51, 5, 6, 7):

а) простые эластические волокна — блестящие, тонкие, нежные двуконтурные образования, толщина которых равномерна на всем протяжении. Встречаются скоплениями среди гнойных частиц и в мелких плотноватых клочках, в виде обрывков и единичных волокон среди казеозного распада;

б) коралловидные эластические волокна. Представляют собой простые эластические волокна, покрытые мылами. В связи с этим они лишены блеска, грубее и толще простых эластических волокон;

в) обызвествленные эластические волокна. Они грубее и толще простых эластических волокон, часто фрагментированы, некоторые из них напоминают палочковидные образования. Наиболее часто этот вид волокон располагается среди аморфной массы солей извести и капелек жира, что называют обызвествляющим жировым казеозным распадом. Обызвествляющий жировой казеозный распад, обызвествленные эластические волокна, кристаллы холестерина и микобактерии туберкулеза называют тетрадой Эрлиха.

Элементы тетрады Эрлиха легче обнаружить, если при тщательном макроскопическом исследовании мокроты отобрать беловатые рассыпчатые клочки.

В некоторых случаях для отличия коралловидных волокон от обызвествленных используют микрохимическую реакцию. К исследуемому материалу добавляют 1-2 капли 10-20% раствора NaOH; мыла, покрывающие коралловидные волокна, растворяются, и из-под их покрова освобождаются простые эластические волокна; обызвествленные эластические волокна под влиянием воздействия щелочи не изменяются. При обнаружении в нативном препарате эластических волокон препарат обязательно окрашивают по Цилю-Нильсену. В некоторых случаях прибегают к обработке мокроты с целью обнаружения простых эластических волокон.

Техника обработки мокроты с целью выявления эластических волокон . К небольшому количеству мокроты прибавляют равный объем 10% раствора щелочи; смесь нагревают до растворения, а затем разливают в две центрифужные пробирки и центрифугируют, предварительно добавив по 5-8 капель 1% спиртового раствора эозина. Из осадка готовят препарат и рассматривают под микроскопом. Эластические волокна окрашиваются в оранжево-красный цвет (рис. 55).

Рис. 55. Эластические волокна в мокроте.

10. Фибрин — имеет форму тонких волоконец, расположенных параллельными пучками пли сетевидно.

11. Кристаллы гематоидина — ромбовидные или игольчатые, красновато-оранжевого цвета.

12. Холестерин — бесцветные таблички со ступенчатообразными уступами.

13. Кристаллы Шарко-Лейдена (рис. 56) — ромбовидные, бесцветные кристаллы, напоминающие стрелку магнитного компаса.

Рис. 56. Эозинофилы, кристаллы Шарко-Лейдена, спираль Куршмана.

14. Кристаллы жирных кислот (рис. 57) — имеют вид длинных слегка изогнутых серых игольчатых образований.

15. Спираль Куршмана (см. рис. 56) — слизистое, спиралевидное закругленное образование, имеющее центральную нить и мантию. В некоторых случаях спираль имеет либо центральную нить, либо мантию. Наряду со спиралью часто в одном и том же препарате обнаруживают эозинофилы и кристаллы Шарко-Лейдена.

16. Пробка Дитриха (см. рис. 57) — беловатого или желтовато-сероватого цвета комочки творожистой копсистенции, иногда со зловонным запахом, сходные по форме с зернами чечевицы. Состоят из кристаллов жирных кислот, нейтрального жира, детрита и скоплений бактерий.

Рис. 57. Пробка Дитриха. Иглы жирных кислот; жир нейтральный; детрит. Нативный препарат. Увеличение 280х.

17. Рисовидные тельца — округлые, плотные образования. Содержат скопления коралловидных волокон, продуктов жирового распада, мыла, кристаллы холестерина и большое количество микобактерий туберкулеза.

18. Друзы актином ицетов (рис. 58) — при малом увеличении представляют собой округлые образования с резко очерченными контурами, желтоватого цвета, с аморфной серединой и с более темной окраской по краям; при большом увеличении центр друзы представляет собой скопление лучистого грибка, нити которого на периферии заканчиваются колбовидными вздутиями. При окраске по Граму нити мицелия грибка грамположительны, а колбовидные вздутия грамотрицательны.

Рис. 58. Друзы актиномицетов.

19. Элементы эхинококка (рис. 59) — хитиновая оболочка эхинококкового пузыря (в тонких местах прозрачна и имеет нежную параллельную исчерченность), крючья и сколексы эхинококка.

Рис. 59. Элементы эхинококка. 1 — пленка эхинококкового пузыря, 2 — крючья эхинококка, 3 — сколексы

источник

Мокрота – патологические выделения из дыхательных путей, появляющиеся после кашля. Отхаркивание свидетельствует о нарушении функции внутренней оболочки респираторного тракта. Анализ мокроты – исследование, широко применяемое для диагностики заболеваний легких и бронхов. Процедура позволяет дифференцировать патологии, протекающие на фоне кашля и другой типичной клинической симптоматики. Получить мокроту для анализа можно самостоятельно во время кашля или при использовании медицинской манипуляции (бронхоскопии).

Основная цель проведения описываемого исследования – уточнение диагноза. При обычных обстоятельствах мокрота не выделяется. Бокаловидные клетки реснитчатого эпителия секретируют от 10 до 100 мл жидкости, которая проглатывается человеком.

Прогрессирование патологического процесса в бронхах или легких ведет к изменению активности работы соответствующих структур с нарастанием кашля, одышки, боли в груди. Увеличивается количество жидкой фракции слизи, может присоединяться бактериальная микрофлора. Результат – выделение мокроты с кашлем.

Исходя из предполагаемого диагноза и результатов визуальной оценки секрета бронхиальных желез, врач назначает соответствующий тип исследования. Применение разных вариантов анализа мокроты позволяет оценить физико-химические свойства жидкости, цитологические изменения (присутствие раковых клеток), наличие бактериальной инвазии.

Исследование мокроты может проводиться как невооруженным глазом, так и с помощью специализируемого оборудования.

В зависимости от заболевания, которое подозревает врач, могут использоваться следующие типы диагностики:

• Общий анализ мокроты. Врач оценивает физические характеристики слизи, которая появляется после кашля;
• Цитологическое (микроскопическое) исследование. Для проведения соответствующей диагностики доктору требуется микроскоп. С помощью увеличения изображения осуществляется анализ жидкости. Методика позволяет увидеть наличие патологических клеток, которые появляются при определенных заболеваниях;
• Химическое исследование. Оцениваются изменения, происходящие в метаболизме альвеолоцитов и реснитчатого эпителия бронхов;
• Бактериологический метод или бакпосев мокроты. Суть исследования базируется на высевании бактерий, полученных из содержимого дыхательных путей на питательной среде. Рост колоний подтверждает наличие возбудителя в респираторном тракте. Важным преимуществом посева остается возможность проверки чувствительности бактерий к конкретным противомикробным препаратам в лабораторных условиях.

В тяжелых случаях для своевременной диагностики патологии респираторной системы пациента одновременно назначаются все три варианта исследования. На основе полученных результатов проводится подбор соответствующей терапии.

Факт! Общий или макроскопический анализ позволяет оценить мокроту сразу же после ее получения. Указанный вариант исследования используется врачами сотни лет. Еще до изобретения микроскопа и современных анализаторов врачи ставили диагнозы по внешнему виду отхаркиваемой жидкости.

Ниже будут описаны ключевые аспекты, на которые врач обращает внимание во время диагностики.

Суточное количество выделяемой слизи колеблется от 50-100 мл до 1,5 л в зависимости от базовой патологии, которая нарушает нормальный процесс секреции бокаловидных клеток. Респираторные заболевания по типу бронхита или пневмонии сопровождаются выделением до 200 мл жидкости (суточное количество).

Резкое возрастание указанного показателя происходит при скоплении гноя или крови с дальнейшим выходом через природные пути. Бронхоэктатическая болезнь, дренированный абсцесс, гангрена легкого протекают с выделением до 1,5 л жидкости.

В зависимости от характера жидкости, которая отхаркивается во время кашля, пульмонологи выделяют следующие типы мокроты:

• Слизистая. Благоприятный вариант развития событий. Болезни, при которых встречается – бронхиальная астма, хронический бронхит, трахеит;
• Слизисто-гнойная. Дополнительно присоединяется бактериальная инфекция. Кроме кашля и слизи, выделяется жидкость, которая является собой продукты жизнедеятельности микроорганизмов и «переваренные» иммунными клетками бактерии. Болезни – абсцесс легкого, бактериальные пневмонии, гангрена;
• Гнойная. Причины возникновения те же, что и в предыдущем случае. Отличие – больший процент гноя и продуктов распада тканей. Состояние пациента ухудшается;
• Кровянистая. При попадании отдельных эритроцитов или порций крови в жидкость, отхаркиваемой во время кашля, она приобретает характерный цвет. Симптом свидетельствует о повреждении сосудов. Возможные причины – рак, травма, инфаркт легкого, актиномикоз.

Оценка характера жидких выделений при кашле способствует пониманию патологического процесса, который развивается в дыхательной системе пациента и подбору адекватного лечения.

Цветовая палитра мокроты, выделяемой во время кашля, зависит от ее характера.

Возможные комбинации:

1. Слизистая – сероватая или прозрачная;
2. Слизисто-гнойная – серая с желтыми или гнойными вкраплениями;
3. Гнойная – жидкость может быть темно-желтой, зеленой или коричневой;
4. Кровянистая – различные оттенки красного. Важно помнить, что «ржавый» цвет указывает на наличие видоизмененных эритроцитов. При повреждении сосуда кровь алая или розовая (в зависимости от интенсивности кровопотери).

Мокрота в 75% случаев не имеет характерного запаха. Исключением остается выделение гнойного содержимого. Отмершие частички тканей обуславливают гнилостный запах. При прорыве кисты легкого, в которой развивался эхинококк (гельминт) возникает фруктовый аромат.

Слизь, выделяемая при кашле преимущественно гомогенна.

Разделение мокроты на слои характерно для следующих патологий:

• Абсцесс легкого. В указанном случае формируется 2 слоя – серозный и гнилостный;
• Гангрена легкого. В данном случае дополнительно образуется третий (верхний) пенистый слой, который обусловлен жизнедеятельностью соответствующих микроорганизмов, продуцирующих пузырьки газа.

Визуальная оценка слизи позволяет быстро установить диагноз без проведения вспомогательных анализов.

Примеси в мокроте представлены эритроцитами, гноем или серозной жидкостью. Присутствие описанных включений позволяет врачу оценить степень поражения легочной ткани и понять, какой патологический процесс является первичным для конкретного клинического случая.

Химический анализ жидкости, выделяемой во время кашля, позволяет определить выраженность патологического процесса. В зависимости от результатов исследования врач подбирает соответствующие лекарства, направленные на стабилизацию функции реснитчатого эпителия.

В норме рН мокроты составляет от 7 до 11. Прогрессирование процессов распада легочной ткани ведет к окислению соответствующей реакции (показатель ниже 6). Причина изменения значения рН базируется на нарушениях процессов обмена солей и минералов.

Белок всегда присутствует в выделяемой при кашле жидкости. Норма – до 0,3%. Незначительное повышение соответствующей цифры до 1-2% может указывать на прогрессирование туберкулеза. Существенное возрастание показателя (10-20%) – признак развития крупозной пневмонии. Лабораторное исследование слизи с определением белка позволяет дифференцировать указанные патологии на фоне анализа клинической картины (кашель, одышка, боль в груди) и результатов других диагностических процедур.

Желчные пигменты

Желчные пигменты, а точнее, микрочастички холестерина выделяются со слизью во время кашля при следующих патологиях:

1. абсцесс;
2. образование эхинококковой кисты;
3. злокачественные опухоли респираторного тракта.

Микроскопический анализ мокроты позволяет с помощью соответствующего оптического аппарата выявить наличие клеток или микроорганизмов, которые в норме не должны присутствовать в выделяемой с кашлем слизи.

Эпителиальные клетки

Эпителий в мокроте – вариант нормы. При микроскопическом исследовании внимание обращается на резкое увеличение концентрации клеток или образование эпителиальных цилиндров. Указанная картина свидетельствует о повреждении дыхательных путей и внутренней оболочки.

Альвеолярные макрофаги

Функция альвеолярных макрофагов – обеспечение локальной иммунной защиты. Небольшое количество клеток может присутствовать в слизи. Резкое возрастание концентрации макрофагов свидетельствует о хроническом воспалительном процессе (бронхит, бронхоэктатическая болезнь, астма, трахеит).

Появление лейкоцитов свидетельствует о наличии острого воспаления, которое может возникать на фоне бактериальной инфекции. Возможные патологии – абсцесс, пневмония, бронхоэктатическая болезнь.

Кровяные тельца появляются в мокроте при разрыве мелких или больших сосудов. О характере кровотечения врач судит по количеству эритроцитов. Отдельно стоит выделить появление видоизмененных клеток, которые проникают сквозь расширенные стенки сосудов без разрыва последних. Типичный пример заболевания – крупозная пневмония.

Опухолевые клетки

Атипичные клетки в мокроте – признак развивающегося онкологического процесса. Для уточнения локализации и типа патологии требуется проведение дополнительных анализов.

Эластические волокна

Появление эластичных волокон в выделяемой при кашле слизи – признак серьезного поражения легких с распадом тканей. Примеры заболеваний – гангрена, поздняя стадия бронхоэктатической болезни, туберкулез и рак, сопровождающийся деструкцией паренхимы органа.

Микробиологический анализ мокроты – один из важных методов верификации наличия туберкулеза. Возбудитель болезни – микобактерия (палочка Коха).

Определение наличия микроорганизма возможно с помощью бактериоскопического метода при использовании микроскопа. Для визуализации возбудителя нужно окрасить исследуемый материал по Цилю-Нильсену. Если в мокроте после кашля обнаруживается палочка Коха, фтизиатр должен в документации указать БК (+), что свидетельствует о выделении возбудителя. Такие больные требуют изоляции. БК (-) – пациент не распространяет бактерию.

Факт! Анализ мокроты на туберкулез проводится также посредством посева исследуемой жидкости на питательную среду. Плюсом методики остается 100% точность. Если бактерия присутствует в организме, она вырастет и в лабораторных условиях. Основной минус описанной диагностики – длительность получения результатов анализа (иногда больше месяца).

Бактериологическое исследование при воспалительном поражении респираторного тракта, как правило, используется для верификации внебольничных форм инфекции (пневмония, актиномикоз и тому подобное).

Анализ проводится в три этапа:

1. забор мокроты для исследования;
2. посев жидкости на предварительно подготовленную питательную среду;
3. пересев необходимой колонии с изучением химических и физических характеристик возбудителя.

При необходимости установления восприимчивости к противомикробным средствам дополнительно выполняется проба на чувствительность. В чашку Петри, где выросла колония микроорганизмов, помещаются бумажные кружки, обработанные антибиотиками. Те препараты, вокруг которых зона разрушения колонии максимальная, рекомендуются к применению конкретному пациенту.

Сбор мокроты на общий анализ может назначаться практически при любом заболевании, которое сопровождается отхаркиванием после кашля. Однако соответствующая диагностика редко применяется при сезонных вирусных инфекциях из-за ненадобности. В указанных случаях кашель и другие симптомы регрессирует при обильном питье и соблюдении постельного режима.

Патологии, требующие проведения анализа мокроты:

• туберкулез;
• абсцесс легкого;
• злокачественные новообразования;
• гангрена легкого;
• бронхиальная астма;
• хронический бронхит;
• пневмокониозы – профессиональные заболевания бронхолегочной системы.

Подтверждение диагноза осуществляется с помощью лабораторных, физикальных, а также инструментальных методов.

Подготовка пациента к сбору мокроты для анализа – ответственный процесс, от которого может зависеть качество диагностики. При игнорировании простых правил в слизи появляются дополнительные примеси, мешающие лаборанту установить первопричину кашля и респираторной патологии в целом.

Рекомендации:

• Подготовка емкости. Оптимальными остаются контейнеры, продаваемые в аптеках. В случае отсутствия такого флакона подойдет даже полулитровая банка или небольшой пластиковый бак (не больше 1 л). Однако нужно учесть, что такие емкости крайне неудобны и могут использоваться только в нетипичных обстоятельствах, когда нет доступа к нормальным контейнерам;
• За два часа до исследования необходимо почистить зубы и прополоскать ротовую полость. Удаление частичек пищи и слюны способствует повышению точности диагностики;
• Проконсультироваться с врачом. Доктор подробно объяснит, как правильно собрать мокроту на анализ.

Если человек впервые сдает бронхиальную слизь, тогда ему часто требуется несколько попыток для правильного выполнения процедуры.

Кроме описанных выше нюансов подготовки, правила сбора мокроты предусматривают использование утренней порции слизи. Причина – скопление секрета с ночи, что существенно облегчает отхаркивание после кашля. Можно брать бронхиальную слизь и в другое время дня, однако, количество и качество исследуемого материала снижается.

Алгоритм сбора мокроты на общий анализ:

1. глубокий вдох с задержкой воздуха на 10 секунд;
2. плавный выдох;
3. повторные 2 вдоха;
4. на третьем выдохе воздух необходимо с силой выталкивать из груди, после чего нужно откашляться;
5. поднести контейнер к нижней губе и сплюнуть слизь.

Указанный алгоритм позволяет собрать необходимое количество исследуемого материала (2-5 мл). При возникновении трудностей рекомендуется наклониться вперед, лечь на бок. Для ускорения отхождения слизи дополнительно можно сделать увлажняющую ингаляцию паром или с применением отхаркивающего средства.

Сбор мокроты описанным способом не исключает попадания слюны в исследуемый образец во время кашля. Альтернативой указанному алгоритму действия остается забор секрета дыхательных путей во время бронхоскопии. Врач с помощью эндоскопа исследует состояние реснитчатого эпителия и может взять необходимое количество жидкости для соответствующего анализа.

Домашний сбор мокроты проводится аналогично описанной выше методике. Важно после попадания слизи в контейнер после кашля плотно закрыть емкость и быстро доставить в лабораторию. В противном случае информативность исследования снижается.

В норме расшифровкой анализа мокроты занимается пульмонолог или фтизиатр. Ниже представлена таблица, в которой указаны характеристики выделяемой после кашля слизи при отсутствии патологии.

После изучения мокроты лаборант заполняет соответствующую форму (нажми, чтобы увеличить).

Указанный документ может выглядеть немного по-другому. Все зависит от конкретной лаборатории. Ниже представлены варианты бланков исследования с предполагаемыми диагнозами.

Расшифровка: розовый цвет слизистой мокроты в сочетании с присутствием микобактерий туберкулеза (МТ+) указывает на наличие соответствующей патологии.

Расшифровка: учитывая наличие лейкоцитов, слизисто-гнойную консистенцию и большое количество кокковой флоры, наиболее вероятным диагнозом остается хронический бактериальный бронхит.

Расшифровка: в первую очередь внимание нужно обратить на большое количество мокроты (50 мл). В сочетании с изобилием лейкоцитов, которые покрывают все поле зрения микроскопа, и присутствием эластичных волокон можно судить о наличии абсцесса, который прорвался в бронх.

Для того чтобы расшифровывать анализ мокроты и подобрать адекватную терапию от кашля рекомендуется консультация пульмонолога или фтизиатра. Участковый терапевт и семейный врач также могут справиться с простыми вариантами респираторной патологии.

Кашель – проблема, которая часто протекает на фоне отхаркивания слизи. Анализ мокроты – простой и эффективный метод уточнения предполагаемого диагноза. Самостоятельно соответствующее исследование не гарантирует полноценной оценки функционирования респираторной системы пациента, но в сочетании с базовыми процедурами упрощает выбор адекватного лечения для конкретного больного.

источник

Как правильно сдать мокроту на общий или бактериологический анализ и что показывают эти исследования?

Мокрота – патологическое производное бронхолегочной системы, продуцируемое во время воспалительных инфекционных заболеваний. Анализ мокроты дает возможность определить возбудителя, характер заболевания, этап воспалительного процесса и прогноз.

В клинике чаще всего проводят культуральное исследование мокроты на подтверждение туберкулеза, микроскопию на определение бронхиальной астмы и опухолевого распада тканей.

Исследование мокроты под микроскопом проводят для дифференцировки заболеваний аллергического и инфекционного характера. Анализ начинают с оценки внешнего вида, количества, наличия включений (кровь, гной), запаха и цвета. Далее приготавливают препарат для дальнейшего исследования с помощью микроскопа. Только после микроскопии мазка можно делать выводы о том или ином заболевании. Чаще всего в мокроте можно увидеть:

• неизмененные эритроциты;
• лейкоциты и его виды (эозинофилы, лимфоциты);
• клетки эпителия бронхов и трахеи;
• атипичные клетки;
• различные волокна;
• мицелий грибов;
• бактериальные агенты.

Микроскопический анализ мокроты является качественным методом диагностики заболеваний легочной системы. Но результат во многом зависит от профессионализма лаборанта и его навыков.

Изучение качественного состава легочного отделяемого – основная причина, зачем сдают анализ на мокроту для исследования через микроскоп. Видя заключение лаборанта, врач может соотнести эти данные с клиникой и безошибочно выставить диагноз. Для каждого заболевания существуют критерии диагностики, в том числе и лабораторные. Микроскопическое исследование помогает более точно определить стадию процесса, что облегчает выбор корректной схемы лечения.

Для микроскопического исследования образец окрашивают либо смотрят в неокрашенном состоянии. Мокроту помещают на предметное стекло, сверху накрывают покровным и образуется готовый препарат. Микроскопия мазка показывает специфические форменные элементы или воспалительные агенты, иногда частички возбудителя, что позволяет уточнить диагноз.

Бронхит у взрослых имеет смешанное происхождение, причиной могут быть как вирусы, так и бактерии. Отсюда и характеристики мокроты разные. Часто заболевание вызывает смешанная флора, поэтому мокрота представляет собой слизисто-гнойное, обильное отделяемое. Под микроскопом выявляются увеличенное количество лейкоцитов, клетки цилиндрического и плоского эпителия.

С целью диагностики при бронхите анализ мокроты используют редко, но он помогает дифференцировать стертые формы пневмонии или астмы на начальных этапах.

Бронхиальная астма дает выраженные изменения в мокроте, присущие только ей. Здесь врач обнаружит большое количество лейкоцитов и эозинофилов, как показателей аллергического воспаления.

В дополнение к ним всегда присутствуют в мазке кристаллы Лейдена-Шарко и спирали. Это специфичные продукты распада воспалительных клеток, образующиеся только при спазме мускулатуры.

Сама мокрота отхаркивается в скудном объёме, слизистого характера, бесцветная, плотной консистенции. Такая мокрота имеет название «стекловидная». Некоторые пациенты могут откашлять небольшие плотные куски мокроты, которые закупоривают бронхи.

Мокрота у здорового человека в норме не выделяется. Существует лишь слизистый секрет бронхиального дерева, который проглатывается. Мокрота же продуцируется в увеличенном объёме во время воспаления слизистой. В таблице ниже приведены данные нормы, допустимые отклонения в общем анализе мокроты (для взрослых), а также более подробная расшифровка.

Цвет и запах мокроты может говорить об острой или хронической фазе воспаления. Если мокрота имеет зеленоватый оттенок, это говорит о присоединении бактериальной инфекции.

Оттенок красного цвета разграничивает уровень поражения и давность. Если мокрота имеет красные прожилки, это свежие эритроциты, возможно из поврежденных сосудов верхнего отдела дыхательного тракта. Бурый же цвет говорит о застойных явлениях и распаде эритроцитов. В норме мокрота обычно не имеет запаха, поэтому констатация гнилостного запаха при проведении общего анализа сразу сигнализирует о гнойном процессе.

Характер мокроты зависит от возбудителя заболевания. Если это вирус, мокрота будет слизистая или серозная. Присоединение бактерии дает гнойный характер и увеличение ее количества. Такая мокрота будет при абсцессе легкого, пневмонии, бронхоэктатическом поражении, хронической обструктивной болезни.

Перед тем, как сдать мокроту, никакая подготовка не требуется, сбор образца на общий анализ проводят утром, сразу после пробуждения, в соответствии со следующим алгоритмом:

1. Почистить зубы.
2. Прополоскать рот и горло.
3. Откашлять мокроту и сплюнуть ее в контейнер.

Если мокроты слишком мало, врачом назначается обильное питье и отхаркивающие препараты накануне. Для исключения попадания лишних микроорганизмов в мокроту, емкость для сбора лучше приобрести в аптеке. Она помещена в стерильную упаковку и имеет плотно закручивающуюся крышку.

Бактериологическое исследование проводят для определения точного возбудителя того или иного заболевания. Чаще всего, это пневмония или туберкулез. Полученный образец мокроты подсаживают на питательные среды и создают оптимальные условия для роста. Патогенные организмы начинают делиться и активно расти. Спустя несколько дней лаборант исследует полученный результат, выявляет возбудителя и дает заключение. Лечащий врач, опираясь на эти данные, может либо назначить лечение, либо направить на дополнительные методы диагностики. В мокроте обычно обнаруживают:

• стафилококки и стрептококки;
• палочку Коха;
• синегнойную палочку и клебсиеллу;
• различные виды грибов;
• хламидии и другие простейшие.

Поскольку бактериологическое исследование является довольно сложным и долгим в исполнении, его назначают лишь при неясных результатах инструментальных исследований легких. Однако в ряде случаев необходимо выявить возбудителя пневмонии, особенно при атипичном течении заболевания.

Бактериологическое исследование мокроты является высококачественным анализом, с точностью выставления диагноза в 100%. Вот для чего берут мокроту и выращивают бактерии на питательных средах:

• для исследования на видовую специфичность;
• для определения принадлежности к классу;
• для выявления чувствительности к антибиотикам.

Если врач ведёт тяжелого больного, у которого минимальные обследования не выявляют причину заболевания легких, мокрота помогает верифицировать диагноз. Важным моментом является грамотный сбор мокроты. От этого зависит качество анализа и корректный результат всей процедуры.

Если у врача возникают подозрения на туберкулезный процесс, первичным этапом является анализ мокроты на палочки Коха. Их можно определить несколькими способами, в том числе и бактериологическим (культуральным). Образец мокроты перед посевом обрабатывают специальными растворами, чтобы остановить рост условно-патогенных бактерий. Рост флоры происходит довольно длительное время – от 14 до 90 дней. Опытный лаборант уже через 2-3 недели сможет дифференцировать колонию палочек Коха. Она имеет серо-серебристый цвет и легко крошится при дотрагивании. Скорость роста зависит от количества бактерий в мокроте. Чем их больше, тем быстрее темп выращивания.

При пневмонии бактериологическое исследование мокроты проводят довольно редко, обычно показан общий анализ. Чаще всего возбудителем заболевания является Streptococcus pneumoniae. Он вызывает до 80% внебольничных пневмоний, поэтому лечение строится на применении антибиотиков широкого спектра действия.

В некоторых случаях возбудитель может иметь другую природу, например, грибковую. Тогда мокроту необходимо исследовать посевом на питательную среду.

Грибы, хламидии, листерии, кишечная палочка, стафилококк зеленящий и многие другие могут вызвать атипичную форму пневмонии, с развитием осложнений (абсцесс, плеврит).

Собрать мокроту для анализа можно как дома, так и в поликлинике. Для того, чтобы правильно сдать мокроту на анализ, рекомендуют следовать несложному алгоритму действий:

1. Процедуру проводят натощак, после чистки зубов, полоскания рта и горла (для удаления остатков пищи и лишней слюны).
2. Дождаться хорошего кашлевого приступа.
3. Контейнер держать как можно ближе к губам.
4. При глубоком кашлевом толчке откашлять содержимое бронхов, избегая сильного отхаркивания.
5. Закрыть контейнер плотной крышкой и транспортировать в лабораторию в течение 2 часов.

Более точные результаты получатся, если сбор проводят непосредственно в поликлинике. Для этого существуют комнаты сбора мокроты с обученным персоналом. Медсестры помогут правильно собрать образец для исследований и в кратчайшие сроки доставят в лабораторию.

Медсестра всегда подскажет, сколько нужно мокроты для бактериологического или микроскопического исследования в конкретном случае.

Обычно достаточно откашлять 3-5 мл, что соответствует полному заполнению воронки на дне контейнера. Если отхождение секрета затрудненно, следует за день до сбора увеличить количество потребляемой жидкости, принять отхаркивающие препараты. В случае, если объем слишком большой (например, при бронхоэктазах), рекомендуют откашлять первую порцию в контейнер, остальное выплюнуть.

Культуральный посев мокроты занимает длительный срок, так как бактериям нужно время для роста. Спустя несколько недель можно точно определить их принадлежность и чувствительность к препаратам. Таким образом, то, сколько делается анализ, зависит от цели и метода исследования: процедура занимает от 1,5 до 3 месяцев.

Микроскопия мокроты – более быстрый анализ. Скорость исследования зависит от порядка очереди и количества образцов. В среднем ожидание результата занимает от 1 до 2 дней.

Кашель как симптом встречается почти у всех заболеваний легких и бронхов. Обильное отделение мокроты сопровождает бактериальные бронхиты, абсцессы с прорывом в бронх, бронхоэктазы, пневмонии. В период разрешения заболевания мокрота становится более жидкой и отходит легко. Даже после выздоровления в течение недели она еще может периодически откашливаться в небольших количествах.

Полезную информацию о сборе мокроты можно узнать из следующего видео:

источник

Микроскопическое исследование нативных и фиксированных окрашенных препаратов мокроты позволяет подробно изучить ее клеточный состав, и известной степени отражающий характер патологического процесса в легких и бронхах, его активность, выявить различные волокнистые и кристаллические образования, также имеющие важное диагностическое значение, и, наконец, ориентировочно оценить состояние микробной флоры дыхательных путей (бактериоскопия).

При микроскопии используют нативные и окрашенные препараты мокроты. Для изучения микробной флоры (бактериоскопии) мазки мокроты обычно окрашивают по Романовскому-Гимзе, по Граму, а для выявления микобактерий туберкулеза но Цилю-Нильсену.

Из клеточных элементов, которые можно обнаружить в мокроте больных пневмонией, диагностическое значение имеют эпителиальные клетки, альвеолярные макрофаги, лейкоциты и эритроциты.

Эпителиальные клетки. Плоский эпителий из полости рта, носоглотки, голосовых складок и надгортанника диагностического значения не имеет, хотя обнаружение большого количества клеток плоского эпителия, как правило, свидетельствует о низком качестве образца мокроты, доставленного в лабораторию и содержащего значительную примесь слюны.

У больных пневмониями мокрота считается пригодной к исследованию, если при микроскопии с малым увеличением количество эпителиальных клеток не превышает 10 в поле зрения. Большее количество эпителиальных клеток указывает на недопустимое преобладание в биологическом образце содержимого ротоглотки.

Альвеолярные макрофаги, которые в незначительном количестве также можно обнаружить в любой мокроте, представляют собой крупные клетки ретикулогистиоцитарного происхождения с эксцентрически расположенным крупным ядром и обильными включениями в цитоплазме. Эти включения могут состоять из поглощенных макрофагами мельчайших частиц пыли (пылевые клетки), лейкоцитов и т.п. Количество альвеолярных макрофагов увеличивается при воспалительных процессах в легочной паренхиме и дыхательных путях, в том числе при пневмониях.

Клетки цилиндрического мерцательного эпителия выстилают слизистую оболочку гортани, трахеи и бронхов. Они имеют вид удлиненных клеток, расширенных с одного конца, где расположено ядро и реснички. Клетки цилиндрического мерцательного эпителия обнаруживаются в любой мокроте, однако их увеличение свидетельствует о повреждении слизистой бронхов и трахеи (острый и хронический бронхит, бронхоэктазы, трахеит, ларингит).

Лейкоциты в небольшом количестве (2-5 в поле зрения) обнаруживаются в любой мокроте. При воспалении ткани легкого или слизистой бронхов и трахеи, особенно при нагноительных процессах (гангрена, абсцесс легкого, бронхоэктазы) их количество значительно увеличивается.

При окраске препаратов мокроты по Романовскому-Гимзе удается дифференцировать отдельные лейкоциты, что имеет иногда важное диагностическое значение. Так, при выраженном воспалении легочной ткани или слизистой бронхов увеличивается как общее число нейтрофильных лейкоцитов, так и количество их дегенеративных форм с фрагментацией ядер и разрушением цитоплазмы.

Увеличение числа дегенеративных форм лейкоцитов является важнейшим признаком активности воспалительного процесса и более тяжелого течения заболевания.

Эритроциты. Единичные эритроциты можно обнаружить практически и любой мокроте. Значительное их увеличение наблюдается при нарушении сосудистой проницаемости у больных пневмониями, при разрушении ткани легкого или бронхов, застое в малом круге кровообращения, инфаркте легкого и т.д. В большом количестве эритроциты в мокроте обнаруживаются при кровохарканье любого генеза.

Эластические волокна. Следует упомянуть также еще об одном элементе мокроты пластических волокнах, которые появляются в мокроте при деструкции легочной ткани (абсцесс легкого, туберкулез, распадающийся рак легкого и др.). Эластические волокна представлены в мокроте в виде тонких двухконтурных, извитых нитей с дихотомическим делением на концах. Появление эластических волокон в мокроте у больных с тяжелым течением пневмонии свидетельствует о возникновении одного из осложнений заболевания — абсцедировании ткани легкого. В ряде случаев при формировании абсцесса легкого эластические волокна в мокроте можно обнаружить даже несколько раньше, чем соответствующие рентгенологические изменения.

Нередко при крупозной пневмонии, туберкулезе, актиномикозе, фибринозном бронхите в препаратах мокроты можно обнаружить тонкие волокна фибрина.

Признаками активного воспалительного процесса в легких являются:

1. характер мокроты (слизисто-гнойная или гнойная);
2. увеличение количества нейтрофилов в мокроте, в том числе их дегенеративных форм;
3. увеличение количества альвеолярных макрофагов (от единичных скоплений из нескольких клеток в поле зрения и больше);

Появление в мокроте эластических волокон свидетельствует о деструкции легочной ткани и формировании абсцесса легкого.

Окончательные выводы о наличии и степени активности воспаления и деструкции легочной ткани формируются только при их сопоставлении с клинической картиной заболевания и результатами других лабораторных и инструментальных методов исследования.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

Микроскопия мазков мокроты, окрашенных по Граму, и изучение микробной флоры (бактериоскопия) у части больных пневмонией позволяет ориентировочно установить наиболее вероятного возбудителя легочной инфекции. Этот простой метод экспресс-диагностики возбудителя недостаточно точен и должен использоваться только в комплексе с другими (микробиологическими, иммунологическими) методами исследования мокроты. Иммерсионная микроскопия окрашенных мазков мокроты иногда бывает весьма полезной для экстренного подбора и назначения адекватной антибактериальной терапии. Правда, следует иметь в виду возможность обсеменения бронхиального содержимого микрофлорой верхних дыхательных путей и ротовой полости, особенно при неправильном сборе мокроты.

Поэтому мокроту считают пригодной для дальнейшего исследования (бактериоскопии и микробиологического исследования) только в том случае, если она удовлетворяет следующим условиям:

• при окраске по Грамму в мокроте выявляется большое количество нейтрофилов (более 25 в поле зрения при малом увеличении микроскопа);
• количество эпителиальных клеток, больше характерных для содержимого ротоглотки, не превышает 10;
• в препарате имеется преобладание микроорганизмов одного морфологического типа.

При окраске по Граму в мазке мокроты иногда можно достаточно хорошо идентифицировать грамположительные пневмококки, стрептококки, стафилококки и группу грамотрицательных бактерий — клебсиеллу, палочку Пфейффера, кишечную палочку и др. При этом грамположительные бактерии приобретают синий цвет, а грамотрицательные — красный.

Бактериальные возбудители пневмоний

1. Пневмококки Streptococcus pneumoniae.
2. Стрептококки Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans.
3. Стафилококки: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.

1. Клебсиеллы (Klebsiella pneumoniae)
2. Гемофильная палочка (Пфейфера) Haemophilius influenzae
3. Синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa)
4. Легионелпа
5. Кишечная палочка (Escherichia coli)