Меню Рубрики

Микроскопия нативного мазка мокроты

Микроскопическое исследование мокроты включает изучение нативных (естественных, необработанных) и окрашенных препаратов. Для первых отбирают гнойные, кровянистые, крошковатые комочки, переносят их на предметное стекло в таком количестве, чтобы при накрывании покровным стеклом образовался тонкий полупрозрачный препарат. При малом увеличении микроскопа могут быть обнаружены спирали Куршманна в виде плотных тяжей слизи различной величины. Они состоят из центральной плотной блестящей извитой осевой нити и спиралеобразно окутывающей ее мантии (рис. 9), в которую бывают вкраплены лейкоциты. Спирали Куршманна появляются в мокроте при спазме бронхов. При большом увеличении в нативном препарате (рис. 11) можно обнаружить лейкоциты, эритроциты, альвеолярные макрофаги, клетки сердечных пороков, цилиндрический и плоский эпителий, клетки злокачественных опухолей, друзы актиномицетов, грибки, кристаллы Шарко—Лейдена, эозинофилы. Лейкоциты — серые зернистые круглые клетки. Большое количество лейкоцитов можно обнаружить при воспалительном процессе в органах дыхания. Эритроциты — небольшие гомогенные желтоватые диски, появляющиеся в мокроте при пневмонии, застое в малом круге кровообращения, инфаркте легкого и разрушении ткани. Альвеолярные макрофаги — клетки размером в 2—3 раза больше лейкоцитов с обильной крупной зернистостью в цитоплазме. Путем фагоцитоза они очищают легкие от попадающих в них частиц (пыли, распада клеток). Захватывая эритроциты, альвеолярные макрофаги превращаются в клетки сердечных пороков (рис. 12 и 13) с желто-бурыми зернами гемосидерина, дающими реакцию на берлинскую лазурь. Для этого к комочку мокроты на предметном стекле прибавляют 1—2 капли 5% раствора желтой кровяной соли и столько же 2% раствора соляной кислоты, смешивают, накрывают покровным стеклом. Через несколько минут микроскопируют. Зерна гемосидерина окрашиваются в синий цвет.

Цилиндрический эпителий дыхательных путей распознается по клиновидной или бокаловидной форме клеток, на тупом конце которых в свежей мокроте видны реснички; его много при остром бронхите и остром катаре верхних дыхательных путей. Плоский эпителий — большие многоугольные клетки из полости рта, диагностического значения не имеют. Клетки злокачественных опухолей — большие, различной неправильной формы с крупными ядрами (для распознавания их требуется очень большой опыт исследующего). Эластические волокна — тонкие, извитые, двухконтурные бесцветные волоконца одинаковой толщины на всем протяжении, разветвляющиеся надвое на концах. Они часто складываются кольцевидными пучками. Встречаются при распаде легочной ткани. Для более надежного их обнаружения несколько миллилитров мокроты кипятят с равным количеством 10% едкой щелочи до растворения слизи. После остывания жидкость центрифугируют, прибавив к ней 3—5 капель 1% спиртового раствора эозина. Осадок микроскопируют. Эластические волокна выглядят, как описано выше, но ярко-розового цвета (рис. 15). Друзы актиномицетов для микроскопирования раздавливают в капле глицерина или щелочи. Центральная часть друзы состоит из сплетения тонких нитей мицелия, его окружают лучисто расположенные колбовидные образования (рис. 14). При окраске раздавленной друзы по Граму мицелий окрашивается в фиолетовый, колбочки в розовый цвет. Грибок кандида альбиканс имеет характер почкующихся дрожжевых клеток или короткого ветвистого мицелия с небольшим числом спор (рис. 10). Кристаллы Шарко — Лейдена — бесцветные ромбические кристаллы разной величины (рис. 9), образующиеся из продуктов распада эозинофилов, встречаются в мокроте наряду с большим количеством эозинофилов при бронхиальной астме, эозинофильных инфильтратах и глистных инвазиях легкого. Эозинофилы в нативном препарате отличаются от других лейкоцитов крупной блестящей зернистостью, они лучше различимы в мазке, окрашенном последовательно 1% раствором эозина (2—3 мин.) и 0,2% раствором метиленового синего (0,5 мин.) или по Романовскому — Гимзе (рис. 16). При последней окраске, а также при окраске по Маю — Грюнвальду распознают опухолевые клетки (рис. 21).


Рис. 9. Спираль Куршмана (вверху) и кристаллы Шарко—Лейдена в мокроте (нативный препарат). Рис. 10. Candida albicans (в центре) — почкующиеся дрожжеподобные клетки и мицелий со спорами в мокроте (нативный препарат). Рис. 11. Клетки мокроты (нативный препарат): 1 — лейкоциты; 2 — эритроциты; 3 — альвеолярные макрофаги; 4 — клетки цилиндрического эпителия. Рис. 12. Клетки сердечных пороков в мокроте (реакция на берлинскую лазурь). Рис. 13. Клетки сердечных пороков в мокроте (нативный препарат). Рис. 14. Друза актиномицетов в мокроте (нативный препарат). Рис. 15. Эластические волокна в мокроте (окраска эозином). Рис. 16. Эозинофилы в мокроте (окраска по Романовскому — Гимзе): 1 — эозинофилы; 2 — нейтрофилы. Рис. 17. Пневмококки и в мокроте (окраска по Граму). Рис. 18. Диплобациллы Фридлендера в мокроте (окраска по Граму). Рис. 19. Палочка Пфейффера в мокроте (окраска фуксином). Рис. 20. Микобактерии туберкулеза (окраска по Цилю— Нельсену). Рис. 21. Конгломерат раковых клеток в мокроте (окраска по Маю — Грюнвальду).

Микроскопическое исследование включает изучение нативных и окрашенных препаратов. Для приготовления нативного препарата мокроту наливают тонким слоем в чашки Петри и на темном фоне отбирают гнойные, кровянистые, крошковатые комочки извитые белые нити, переносят их на предметное стекло и накрывают покровным. При исследовании нативного препарата можно обнаружить клеточные элементы, эластические волокна, спирали Куршмана, кристаллические образования, животных и растительных паразитов.

При малом увеличении обнаруживают спирали Куршмана в виде тяжей слизи различной величины, состоящих из центральной осевой нити и спиралеобразно окутывающей ее мантии (цветн. рис. 9). В последнюю нередко вкраплены лейкоциты, клетки цилиндрического эпителия, кристаллы Шарко—Лейдена. Осевая нить при поворотах микровинта то ярко блестит, то становится темной, может быть незаметна, а часто видна только она одна. Спирали Куршмана появляются при спазме бронхов, чаще всего при бронхиальной астме, реже при пневмониях, раке.

При большом увеличении обнаруживают следующее. Лейкоциты присутствуют всегда в мокроте, их много при воспалительных и нагноительных процессах; среди них встречаются эозинофилы (при бронхиальной астме, астмоидном бронхите, глистных инвазиях легких), отличающиеся крупной блестящей зернистостью (цветн. рис. 7). Эритроциты единичные могут быть в любой мокроте, их может быть много при разрушении ткани легкого, при пневмонии и застое крови в малом круге кровообращения. Эпителий плоский — крупные полигональные клетки с малым ядром, попадающие в мокроту из глотки и полости рта, диагностического значения не имеют. Эпителий цилиндрический мерцательный появляется в мокроте в значительном количестве при поражениях дыхательных путей. Единичные клетки могут быть в любой мокроте, они удлиненной формы, один конец заострен, другой — тупой, несет реснички, обнаруживаемые только в свежей мокроте; при бронхиальной астме встречаются округлые группы этих клеток, окруженные подвижными ресничками, придающими им сходство с реснитчатыми инфузориями.

Альвеолярные макрофаги — округлые клетки в 2—4 раза больше лейкоцита с 1—2 ядрами, часто прикрытыми обильными цитоплазматическими включениями, которые могут быть бесцветными, черными от частиц угля (пылевые клетки), желто-коричневыми от гемосидерина («клетки сердечных пороков», сидерофаги). Клетки злокачественных опухолей могут быть определены в нативном препарате при резко выраженной их атипии (большие клетки уродливой формы с крупным ядром, иногда 2—3 ядрами разной величины и формы); более убедительны для диагностики рака легкого комплексы полиморфных клеток либо описанного выше характера, либо мелких, с четко очерченными ядрами и иным, чем у других клеток мокроты, коэффициентом преломления света. Еще достовернее определение клеток злокачественных опухолей в окрашенных препаратах. Эластические волокна появляются в мокроте при распаде легочной ткани. Это тонкие двуконтурные волоконца, изогнутые, дихотомически ветвящиеся, располагающиеся пучками, нередко кольцевидными. В нативном препарате встречаются редко, для обнаружения их концентрируют: к нескольким миллилитрам мокроты прибавляют равное количество 10% раствора едкой щелочи, нагревают до растворения слизи, остужают и наливают в центрифужную пробирку, в которую налито 5—7 капель 1% спиртового раствора эозина, центрифугируют. Осадок микроскопируют. Эластические волокна выделяются яркой красной окраской (цветн. рис. 11). Гельминты в мокроте обнаруживаются редко, несколько чаще встречаются их яйца, а при прорыве эхинококкового пузыря — сколексы, крючья, обрывки оболочки; иногда с мокротой выделяются мигрирующие личинки аскарид. Из простейших изредка встречаются амебы (Entamoeba gingivalis), трихомонады и токсоплазмы. Из растительных паразитов наибольшее значение имеют лучистые, дрожжевые и плесневые грибки. Для обнаружения лучистого грибка (актиномицета) в мокроте отыскивают мелкие желтоватые плотные крупинки (друзы), переносят их на предметное стекло в каплю глицерина или щелочи и раздавливают под покровным стеклом. Характерным для друзы является состоящая из сплетения мицелия центральная часть, окруженная зоной лучисто расположенных колбовидных образований (цветн. рис. 12). При окрашивании раздавленной друзы по Граму мицелий приобретает фиолетовый, колбочки — розовый цвет. Из дрожжевых грибков наибольшее значение имеет Candida albicans. В нативных препаратах обнаруживают почкующиеся клетки и короткий ветвистый мицелий, на котором споры расположены мутовками (цветн. рис. 10). Плесневые грибки (искать в свежей мокроте) имеют широкие нити мицелия и круглые зеленоватые споры. На среде Сабуро дают характерный рост. Кристаллы Шарко — Лейдена — бесцветные октаэдры разной величины, образуются при распаде эозинофилов; кристаллы гематоидина буро-красные, ромбические или игольчатые появляются после легочных кровоизлияний; кристаллы холестерина, жирных кислот и мыл (см. рис. к ст. «Кал») — при длительном застое гнойной или гнилостной мокроты.

Цитологическое исследование. Изучают нативные и окрашенные препараты. Для исследования клеток комочки мокроты осторожно растягивают на предметном стекле при помощи лучинок. При поисках опухолевых клеток материал отбирают в нативном препарате. Высохший мазок фиксируют метанолом и окрашивают по Романовскому — Гимзе (или по Папаниколау). Раковые клетки характеризуются гомогенной, иногда вакуолизированной цитоплазмой от серо-голубого до синего цвета, большим рыхлым, а нередко гиперхромным, фиолетовым ядром с ядрышками. Ядер может быть 2—3 и более, порой они неправильной формы; характерен полиморфизм ядер в одной клетке.

Наиболее убедительны комплексы полиморфных клеток описанного характера (цветн. рис. 13 и 14). Эозинофилы окрашивают либо по Романовскому — Гимзе, либо последовательно 1% раствором эозина (2 мин.) и 0,2% раствором метиленового синего (0,5—1 мин.).

источник

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

  1. Предметные и покровные стекла.
  2. Чашки Петри.
  3. Зубоврачебные шпатель и игла.
  4. Черная и белая бумага.
  5. Микроскоп.
  6. Газовая или спиртовая горелка.
  7. Смесь Никифорова.
  8. Краска Романовского.
  9. Едкий натр.
  10. Эозин.
  11. Желтая кровяная соль.
  12. Концентрированная соляная кислота.
  13. Метиленовая синька.
  14. Вода.
  15. Спички.

Мокроту, помещенную в чашку Петри, распластывают с помощью шпателя и иглы до получения полупрозрачного слоя (шпатель и иглу захватывают правой и левой рукой в виде писчего пера); это делают очень осторожно, чтобы не разрушить имеющиеся в мокроте образования. Полупрозрачный слой мокроты изучают с целью выявления в нем линейных и округлых частиц и образований, клочков, отличающихся по цвету и консистенции. Для этого чашку Петри с мокротой располагают попеременно на белом и черном фоне. Найденные образования выделяют из основной массы (слизи, гноя, крови) режущими движениями инструментов, стараясь не повредить выделенные частицы. Полноценным приготовленный препарат будет лишь в том случае, если будут последовательно отобраны все интересующие исследователя частицы и образования. Отобранный материал помещают на предметное стекло. При этом более плотные по консистенции частицы помещают ближе к центру намечаемого препарата, а менее плотные, так же как и слизисто-гнойные, гнойно-слизистые, кровянисто окрашенные образования, — по периферии. Материал покрывают стеклом. Обычно на одном предметом стекле готовят два препарата, что обеспечивает максимальный просмотр отобранного материала. В правильно приготовленных препаратах мокрота не выходит за пределы покровного стекла.

Если мокрота вязкой или тягучей консистенции, то на покровное стекло слегка надавливают, чтобы равномернее распределить материал. Препараты, предназначенные для микроскопического исследования, изучают вначале под малым, а затем под большим увеличением микроскопа при опущенном конденсоре.

Важно уметь находить различные элементы мокроты не только при большом, но и при малом увеличении.

1. Слизь — волокнистая или сетевидная, вместе с форменными эле¬ментами (лейкоцитами, эритроцитами), сероватого цвета.

2. Эпителий — плоский, круглый (альвеолярные макрофаги), цилиндрический (мерцательный).

Плоский эпителий имеет форму полигональных бесцветных клеток с обильной цитоплазмой и одним ядром.
Эпителий цилиндрический, мерцательный (бронхов) (рис. 51, 3) представляет собой продолговатой формы клетки, один из концов которых сужен, а на другом — тупом — нередко видны реснички; ядро, круглой или овальной формы, расположено эксцентрично в широкой части клетки; цитоплазма содержит мелкую зернистость. Иногда (при бронхиальной астме) эпителий бронхов выявляется в виде железистоподобных образований, которые в свежевыделенной мокроте имеют движущиеся реснички.

Рис. 51. Клеточные элементы в мокроте и эластические волокна: лейкоциты (1), альвеолярные макрофаги (2), эпителий бронхов (3), миелин (4), эластические волокна простые (5), коралловидные (6), обызвествленные (7).

Альвеолярные макрофаги — это круглой формы клетки по размерам в несколько раз больше лейкоцитов, с выраженной зернистостью в цитоплазме, из-за которой в большинстве случаев не видно ядра. Зернистость обычно сероватого цвета. Подвергаясь, жировому перерождению, альвеолярные макрофаги становятся более темными, так как капли жира, накапливающиеся в клетке, сильнее преломляют лучи проходящего через них света.

При наличии угольного пигмента часть зернистости приобретает черный цвет. У курильщиков альвеолярные макрофаги содержат буровато-желтую зернистость. Золотисто-желтая зернистость обусловлена наличием в альвеолярных макрофагах кровяного пигмента, содержащего железо (гемосидерин). С целью обнаружения гемосидерина в мокроте используют химическую реакцию.

Читайте также:  Сильный кашель с мокротой у ребенка народными средствами

С препарата, в котором были обнаружены альвеолярные макрофаги с лимонно-желтой или золотисто-желтой зернистостью, снимают покровное стекло. Мокроту подсушивают на воздухе. На 8-10 минут на препарат наливают реактив (смесь равных объемов 3% раствора соляной кислоты и 5% раствора желтой кровяной соли). Через 8-10 минут реактив сливают. Препарат накрывают покровным стеклом и изучают под большим увеличением.
При наличии гемосидерина альвеолярные макрофаги окрашиваются в синий (голубой) цвет (рис. 52).

Рис. 52. Реакция на гемосидерин в мокроте. 1 — до окраски, 2 — после окраски.

3. Миелин (рис. 51, 4) — различной формы матово-серые образования, которые могут находиться в мокроте внеклеточно, а также внутри альвеолярных макрофагов.

Для отличия миелина от капелек жира используют микрореакцию: к материалу, в котором был обнаружен миелин, осторожно прибавляют одну каплю концентрированной H2SO4; при этом миелин окрашивается в оттенки от фиолетового до красного цвета.

4. Нейтрофилы . Морфологически нейтрофилы напоминают лейкоциты, встречающиеся в моче. В гнойной мокроте происходит разрушение лейкоцитов, поэтому в некоторых местах препарата находят зернистую бесструктурную массу (детрит).

5. Эозинофилы . Имеют ряд отличительных от нейтрофилов признаков. Они несколько больше их по размеру, содержат крупную зернистость, благодаря чему выглядят более темными. Их скопления при малом увеличении имеют желтоватый оттенок. Особенно много эозинофилов содержится в желтоватых рассыпчатых клочках мокроты больных бронхиальной астмой. Иногда среди эозинофилов находят кристаллы Шарко-Лейдена. Для более точного распознавания эозинофилов препарат окрашивают.

Техника окраски эозинофилов. Мокроту распределяют по предметному стеклу. Препарат высушивают на воздухе и фиксируют над пламенем горелки. Теплое стекло помещают на 3 минуты в 0,5% спиртовой раствор эозина, а затем промывают водой и красят в течение нескольких секунд 0,5-1% водным раствором метиленовой синьки. Вновь промывают водой, высушивают и изучают под микроскопом с иммерсией. В эозинофилах выявляют красную зернистость (рис. 53). Окрасить эозинофилы можно также способом Романовского. С этой целью препарат окрашивают точно так же, как мазки крови, но только меньше времени (8-10 минут).

Рис. 53. Эозинофильные лейкоциты в мокроте (масляная иммерсия).

6. Эритроциты — неизмененные выглядят так же, как и в моче. В бурых кровянистых частицах они обычно не обнаруживаются.

7. Жирно-зернистые клетки (рис. 54, 1) — округлой формы, в несколько раз больше лейкоцитов, содержат жировые капельки, сильно преломляющие свет.

8. Клетки злокачественных новообразований (рис. 54, 2) — разных размеров, жиро- и вакуольно-перерожденные. Встречаются отдельно и в виде тесных округлых групп или стержневидных образований, луковиц и пр.

Рис. 54. 1 — жирно-зернистые клетки; 2 — железистоподобная группа из атипического эпителия при железистом раке легкого. Нативный препарат. Увеличение 300х. Микрофотография.

9. Эластические волокна (см. рис. 51, 5, 6, 7):

а) простые эластические волокна — блестящие, тонкие, нежные двуконтурные образования, толщина которых равномерна на всем протяжении. Встречаются скоплениями среди гнойных частиц и в мелких плотноватых клочках, в виде обрывков и единичных волокон среди казеозного распада;

б) коралловидные эластические волокна. Представляют собой простые эластические волокна, покрытые мылами. В связи с этим они лишены блеска, грубее и толще простых эластических волокон;

в) обызвествленные эластические волокна. Они грубее и толще простых эластических волокон, часто фрагментированы, некоторые из них напоминают палочковидные образования. Наиболее часто этот вид волокон располагается среди аморфной массы солей извести и капелек жира, что называют обызвествляющим жировым казеозным распадом. Обызвествляющий жировой казеозный распад, обызвествленные эластические волокна, кристаллы холестерина и микобактерии туберкулеза называют тетрадой Эрлиха.

Элементы тетрады Эрлиха легче обнаружить, если при тщательном макроскопическом исследовании мокроты отобрать беловатые рассыпчатые клочки.

В некоторых случаях для отличия коралловидных волокон от обызвествленных используют микрохимическую реакцию. К исследуемому материалу добавляют 1-2 капли 10-20% раствора NaOH; мыла, покрывающие коралловидные волокна, растворяются, и из-под их покрова освобождаются простые эластические волокна; обызвествленные эластические волокна под влиянием воздействия щелочи не изменяются. При обнаружении в нативном препарате эластических волокон препарат обязательно окрашивают по Цилю-Нильсену. В некоторых случаях прибегают к обработке мокроты с целью обнаружения простых эластических волокон.

Техника обработки мокроты с целью выявления эластических волокон . К небольшому количеству мокроты прибавляют равный объем 10% раствора щелочи; смесь нагревают до растворения, а затем разливают в две центрифужные пробирки и центрифугируют, предварительно добавив по 5-8 капель 1% спиртового раствора эозина. Из осадка готовят препарат и рассматривают под микроскопом. Эластические волокна окрашиваются в оранжево-красный цвет (рис. 55).

Рис. 55. Эластические волокна в мокроте.

10. Фибрин — имеет форму тонких волоконец, расположенных параллельными пучками пли сетевидно.

11. Кристаллы гематоидина — ромбовидные или игольчатые, красновато-оранжевого цвета.

12. Холестерин — бесцветные таблички со ступенчатообразными уступами.

13. Кристаллы Шарко-Лейдена (рис. 56) — ромбовидные, бесцветные кристаллы, напоминающие стрелку магнитного компаса.

Рис. 56. Эозинофилы, кристаллы Шарко-Лейдена, спираль Куршмана.

14. Кристаллы жирных кислот (рис. 57) — имеют вид длинных слегка изогнутых серых игольчатых образований.

15. Спираль Куршмана (см. рис. 56) — слизистое, спиралевидное закругленное образование, имеющее центральную нить и мантию. В некоторых случаях спираль имеет либо центральную нить, либо мантию. Наряду со спиралью часто в одном и том же препарате обнаруживают эозинофилы и кристаллы Шарко-Лейдена.

16. Пробка Дитриха (см. рис. 57) — беловатого или желтовато-сероватого цвета комочки творожистой копсистенции, иногда со зловонным запахом, сходные по форме с зернами чечевицы. Состоят из кристаллов жирных кислот, нейтрального жира, детрита и скоплений бактерий.

Рис. 57. Пробка Дитриха. Иглы жирных кислот; жир нейтральный; детрит. Нативный препарат. Увеличение 280х.

17. Рисовидные тельца — округлые, плотные образования. Содержат скопления коралловидных волокон, продуктов жирового распада, мыла, кристаллы холестерина и большое количество микобактерий туберкулеза.

18. Друзы актином ицетов (рис. 58) — при малом увеличении представляют собой округлые образования с резко очерченными контурами, желтоватого цвета, с аморфной серединой и с более темной окраской по краям; при большом увеличении центр друзы представляет собой скопление лучистого грибка, нити которого на периферии заканчиваются колбовидными вздутиями. При окраске по Граму нити мицелия грибка грамположительны, а колбовидные вздутия грамотрицательны.

Рис. 58. Друзы актиномицетов.

19. Элементы эхинококка (рис. 59) — хитиновая оболочка эхинококкового пузыря (в тонких местах прозрачна и имеет нежную параллельную исчерченность), крючья и сколексы эхинококка.

Рис. 59. Элементы эхинококка. 1 — пленка эхинококкового пузыря, 2 — крючья эхинококка, 3 — сколексы

источник

Исследование мокроты предусматривает определение физи­ческих свойств мокроты, ее микроскопическое исследование в нативном мазке и бактериологическое исследование в окрашен­ных препаратах.

Мокроту, получаемую при откашливании утром до приема пи­щи, собирают в чистую сухую склянку. Перед исследованием боль­ной должен почистить зубы и тщательно прополоскать рот водой.

Мокроту помещают в чашку Петри, рассматривают на светлом и темном фоне, описывают ее свойства. Количество мокроты за сутки при различных патологических процессах может быть раз­лично: так например, при бронхите — скудное (5-10 мл), при абсцессе легкого, бронхоэктазах — большое количество (до 200—300 мл).

Деление на слои наблюдается в случаях опорожнения боль­ших полостей в легком, например, абсцесса легкого. В этом случае мокрота образует 3 слоя: нижний слой состоит из детри­та, гноя, верхний слой — жидкий, на поверхности его иногда имеется третий — пенистый слой. Такую мокроту называют трехслойной.

Характер: характер мокроты определяет содержание слизи, гноя, крови, серозной жидкости, фибрина. Характер ее может быть слизистый, слизисто-гиойный, слизисто-гнойно-кровянистый и т.п.

Цвет: зависит от характера мокроты, от выдыхаемых частиц, которые могут окрашивать мокроту. Так например, желтоватый, зеленоватый цвет зависит от наличия гноя, «ржавая» мокрота -от распада эритроцитов, встречается при крупозной пневмонии. Прожилки крови в мокроте или красная мокрота может быть при примеси крови (туберкулез, бронхоэктазы). Серый и черный цвет придает мокроте уголь.

Консистенция: зависит от состава мокроты, жидкая — в ос­новном от наличия серозной жидкости, клейкая — при наличии слизи, вязкая — фибрина.

Запах: свежевыделенная мокрота обычно без запаха. Непри­ятный запах свежевыделенной мокроты обычно появляется при абсцессе легкого, при гангрене легкого — гнилостный.

Нативные препараты готовят, выбирая материал из разных мecт мокроты, берут также для исследования все частицы, выде­ляющиеся окраской, формой, плотностью.

Отбор материала производят металлическими палочками, по­мещают его на предметное стекло и покрывают покровным. Мате­риал не должен выходить за покровное стекло.

Лейкоциты: всегда содержатся в мокроте, количество их зависит от характера мокроты.

Эозинофилы: распознаются в нативном препарате по более темной окраске и наличию в цитоплазме четкой, одинаковой, пре­ломляющей свет зернистости. Часто располагаются в виде больших скоплений. Эозинофилы встречаются при бронхиальной астме, других аллергических состояниях, гельминтозе, эхинококке лег­кого, новообразованиях, эозинофильном инфильтрате.

Эритроциты: имеют вид дисков желтого цвета. Единичные эритроциты могут встречаться в любой мокроте, в большом коли­честве — в мокроте, содержащей примесь крови: новообразовани­ях легкого, туберкулезе, инфаркте легкого.

Клетки плоского эпителия: попадают в мокроту из полости рта, носоглотки, большого диагностического значения не тлеют.

Цилиндрический мерцательный эпителий: выстилает слизистую оболочку гортани, трахеи, бронхов. В большом количестве обнаруживается при острых катарах верхних дыхательных путей, бронхитах, бронхиальной астме, новообразованиях легкого, пневмосклерозе и др.

Альвеолярные макрофаги: большие клетки различной величи­ны, чаще круглой формы, с наличием в цитоплазме включений черно-бурого цвета. Встречаются чаще в слизистой мокроте с небольшим количеством гноя. Обнаруживаются при различных па­тологических процессах: пневмонии, бронхитах, профессиональ­ных заболеваниях легких и др. Альвеолярные макрофаги, содер­жащие гемосидерин, старое название — «клетки сердечных поро­ков», имеют в цитоплазме золотисто-желтые включения. Для их выявления применяют реакцию на берлинскую лазурь. Ход реакции: кусочек мокроты помещают на предметное стекло, прибавляют 2 капли 5% раствора соляной КИОЛОТЫ и 1-2 капли 5% раствора желтой кровяной соли. Перемешивают стеклянной палочной и по-крывают покровным стеклом. Гемосидерин, лежащий внутриклеточно, окрашивается в голубой или синий цвет. Эти клетки обнару­живаются в мокроте при застойных явлениях в легких, инфарктах легкого.

Жирное перерождение клетки (липофаги, жировые шары): чаще округлые, цитоплазма их заполнена жиром. При прибавлении к препарату судана Ш капли окрашиваются в оранжевый цвет. Группы таких клеток встречаются при новообразованиях легкого, актиномикозе, туберкулезе и др.

Эластические волокна: в мокроте имеют вид извзитых блес­тящих волокон. Как правило располагаются на фоне лейкоцитов и детрита. Наличие их указывает на распад ткани легкого. Обнаруживаются при абсцессе, туберкулезе, новообразованиях легко­го.

Коралловые волокна: Грубые ветвящиеся образования с буг­ристыми утолщениями вследствие отложения на волокнах жирных кислот и мыл. Их обнаруживают в мокроте при кавернозном тубер­кулезе.

Обызвествленные эластические волокна — грубые, пропитанные солями извести палочковидные образования. Обнаруживают при распаде петрифицированного очага, абсцессе легкого, ново­образованиях, Элемента распада петрифицированнго очага носят название тетрады Эрлиха: I) обызвествленные эластические во­локна; 2)аморфные соли извести; 3) кристаллы холестерина; 4) микобактерии туберкулеза.

Спирали Куршмана_- уплотнены, закрученные в спираль слизевые образования. Центральная часть резко преломляет свет и выглядит спиралью, по периферии свободно лежащая слизь обра­зует мантию. Спирали Куршмана образуются при бронхиальной астме.

Кристаллические образования: кристаллы Шарко-Лейдена, вы­тянутые блестящие ромбы, можно обнаружить в желтоватых кусоч­ках мокроты, содержащих большое количество эозинофилов. Их образование связывают с распадом эозинофилов,

Кристаллы гематоидина: имеют форму ромбов и иголок золо­тистого цвета. Образуются при распаде гемоглобина при крово­излияниях, распаде новообразований. В препарате мокроты видны обычно на фоне детирита, эластических волокон.

Кристаллы холестерина: бесцветные четырехугольники с обло­манными ступенеобразным углом, обнаруживаются при распаде жирно перерожденных клеток, в полостях. Встречаются при туберку­лезе, абсцессе легкого, новообразованиях.

Пробки Дитриха: мелкие желтовато-серые зернышки с непри­ятным запахом, содержатся в гнойной мокроте. Микроскопически представляют собой детрит, бактерии, кристаллы жирных кислот в виде игл и капелек жира. Образуются при застое мокроты в полостях при абсцессе легкого, бронхоэктазах.

Исследование на туберкулезные микобактерии: Препарат готовят из гнойных частиц мокроты, высушивают

на воздухе и фиксируют над пламенем горелки. Окрашивают по

Методика окрашивания: Реактивы:

2) 2% спиртовой раствор соляной кислоты,

3) водный раствор 0,5% метиленового синего.

1. На препарат кладут кусочек фильтровальной бумаги и наливают раствор карболового фуксина.

2. Препарат нагревают над пламенем горелки до появления паров, охлаждают и снова нагревают (так 3 раза).

3. С остывшего стекла снимают фильтровальную бумагу. Обесцвечивают мазок в солянокислом спирте до полного отхождения краски.

5. Докрашивают препарат метиленовнм синим 20-30 секунд.

6. Промывают водой и высушивают на воздухе. Микроскопируют с иммерсионной системой. Туберкулезные микобактерии окрашиваются в красный цвет,

все остальные элементы мокроты и бактерии — в синий. Туберку­лезные микобактерии имеют вид тонких, слегка изогнутых пало­чек с утолщениями на концах или посередине.

При окраске по Цилю-Нильсону в красный цвет красятся также кислотоупорные сапрофиты. Дифференциальная диагностика туберкулезных микробактерий и кислотоупорных сапрофитов ведет­ся методами посева и заражения животных.

Читайте также:  Что помогает при мокроте в горле

Исследование мокроты может проводиться также методом фло­тации. Метод Потенжера: ход исследования:

1. Свежевыделенную мокроту (не более 10-15 мл) помещают в узкогорлую бутылку, приливают двойное количество едкой ще­лочи, смесь энергично встряхивают (10-15 мин).

2. Приливают I мл ксилола (можно бензина, толуола) и около 100 мл дистиллированной вода для разжижения мокроты. Снова встряхивают 10-15 мин.

3. Доливают дистиллированную воду до горлышка бутылки и оставляют стоять на 10-50 мин.

4. Образовавшийся верхний слой (беловатый) снимают по каплям пипеткой и наносят на предметные стекла, предвари­тельно нагретые до 60°. Каждую последующую каплю наносят на подсохшую предыдущую.

5. Препарат фиксируют и красят по Цилю-Нильсону.

Исследование на другие бактерии:

Другие бактерии, встречающиеся в мокроте, например, стрептококки, стафилококки, диплобациллы и др. могут быть распознаны только методом посева. Бактериологическое иссле­дование препарата в этих случаях имеет только ориентировоч­ное значение. Препараты красят метиленовым синим, фуксином или по граму. Окраска по Граму: Реактивы: I) карболовый раствор генцианвиолета,

4) 40% раствор карболового фуксина.

1. На фиксированный препарат кладут полоску фильтроваль­ной бумаги, наливают раствор генцианвиолета, красят 1-2 мин.

2. Бумажку снимают и препарат заливают раствором Люголя на 2 минуты.

3. Раствор Люголя сливают и прополаскивают препарат в спирте до серого цвета.

4. Промывают водой и окрашивают 10-15 секунд раствором фуксина.

5. МОКРОТА ПРИ РАЗЛИЧНОЙ ПАТОЛОГИИ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ
Нозологическая форма Колич. Макрос. Хар-р изучен. Микроскопия
I
Бронхит Скудное,за- Цилиндрический эпи-
тем боль- телий ,лейкоциты,иног-
шое. Слизи — да эритроциты,много
стая или флоры,макрофаги .
слизисто-
гнойная
Бронхопневмо- Большое Цилиндрический эпите-
ния количество лий, альвеолярный эпи-
слизистой телий, лейкоциты,
-или слизис- пневмококки
ТО-ГНОЙНОЙ
Крупозная Скудное,за- Свертки Макрофаги, лейкоциты,
пневмония тем обиль- фибрина, эритроциты, кристал-
ное к-во изменен- лы гематоидина,
ржавой мо- ная гемосидерин, пневмо-
кроты кровь кокки
Бронхиальная Скудное, Спирали Цилиндрический эпи-
астма слизистая Куршмана телий, кристаллы
Шарко-Лейдена,
эозинофилы
Бронхоэктати- Обильное Пробки Лейкоциты сплошь,
ческая бо- (утром- Дитриха кристаллы жирных
лезнь полным кислот,гематоидина,
ртом) холестерина, обильная разнообразная флора

Приложение: посуда и оборудование: Препарат промывают водой и высушивают на воздухе. Смотрят с иммерсией.

2. Инструменты для отбора мокроты: металлические палоч­ки с расплющенными концами, препаровальные иглы и др.

7. Дезинфицирующая жидкость.

Абсцесс лег­кого Обильное, гнойная, со зловонным запахом Обрывки ткани легкого. Сплошь лейкоциты, эла­стические волокна, кристаллы жирных кис­лот, гематоидина, хо-лестерша, разнообраз­ная обильная флора

Различное, рисовидные тельца слизисто-гнойная, иногда с примесью кро­ви Микобактерии тубер­кулёза, эластические волокна, различные кристаллы

Различное, слизисто-кровянистое Обрывки ткани. Атипические клетки.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: При сдаче лабораторной работы, студент делает вид, что все знает; преподаватель делает вид, что верит ему. 9249 — | 7275 — или читать все.

193.124.117.139 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)

очень нужно

источник

Анализ мокроты расшифровка — это микроскопическое изучение клеток и их расшифровка. которая позволяет установить активность процесса при хронических болезнях бронхов и легких, диагностировать опухоли легкого.

Расшифровка анализа мокроты позволяют выявить различные заболевания.

Эозинофилы, составляют до 50-90% всех лейкоцитов, повышенные эозинофилы диагноструют заболевания:

  • аллергические процессы;
  • бронхиальная астма;
  • эозинофильные инфильтраты;
  • глистная инвазия лёгких.

Если количество нейтрофиов более 25 в поле зрения это говорит о наличии в организме инфекционного процесса.

Плоский эпителий, более 25 клеток в поле зрения — примесь отделяемого из полости рта.

Эластические волокна — Деструкция лёгочной ткани, абсцедирующая пневмония.

Спирали Куршмана диагностируют — бронхоспастический синдром, диагностика астмы.

Кристаллы Шарко-Лейдена диагностируют — аллергические процессы, бронхиальная астма.

Альвеолярные макрофаги — Образец мокроты идет из нижних дыхательных путей.

Мокрота выделяется при разнообразных заболеваниях органов дыхания. Анализ мокроты собирать ее лучше утром, перед этим надо прополоскать рот слабым раствором антисептика, затем кипяченой водой.

При осмотре отмечают суточное количество мокроты характер, цвет и запах мокроты, ее консистенцию, а также расслоение при стоянии в стеклянной посуде.

Анализы мокроты могут содержать:

  • клеточные элементы крови,
  • опухолевые клетки,
  • простейшие микроорганизмы,
  • личинки аскарид,
  • растительные паразиты,
  • различные бактерии и др.

Показатель Норма
Количество 10-100 мл в сутки
Цвет бесцветная
Запах отсутствует
Слоистость отсутствует
Реакция pH нейтральная или щелочная
Характер слизистая

Повышенное выделение мокроты наблюдается при:

  • отеке легких;
  • абсцессе легких;
  • бронхоэктатической болезни.

Если увеличение количества мокроты связано с нагноительным процессом в органах дыхания, это является признаком ухудшения состояния больного, если с улучшением дренирования полости, то расценивается как положительный симптом.

  • гангрене легкого;
  • туберкулезе легких, который сопровождается распадом ткани.

Пониженное выделение мокроты наблюдается при:

  • остром бронхите;
  • пневмонии;
  • застойных явлениях в легких;
  • приступе бронхиальной астмы (в начале приступа).

Зеленоватый

Зеленоватый цвет мокроты наблюдается при:

  • абсцессе легкого;
  • бронхоэктатической болезни;
  • гайморите;
  • посттуберкулезных нарушениях.

Различные оттенки красного

Отделение мокроты с примесью крови наблюдается при:

  • туберкулезе;
  • раке легкого;
  • абсцессе легкого;
  • отеке легких;
  • сердечной астме.

Ржавый цвет мокроты наблюдается при:

  • очаговой, крупозной и гриппозной пневмонии;
  • туберкулезе легких;
  • отеке легких;
  • застойных явлениях в легких.

Иногда на цвет мокроты влияет прием некоторых лекарственных препаратов. При аллергии мокрота может быть ярко-оранжевого цвета.

Желто-зеленый или грязно-зеленый

Желто-зеленый или грязно-зеленый цвет мокроты наблюдается при различной патологии легких в сочетании с желтухой.

Черноватый или сероватый

Черноватый или сероватый цвет мокроты наблюдается у курящих людей (примесь угольной пыли).

Гнилостный запах мокроты наблюдается при:

  • абсцессе легкого;
  • гангрене легкого.

При вскрытии эхинококковой кисты мокрота приобретает своеобразный фруктовый запах.

  • бронхите, осложненном гнилостной инфекцией;
  • бронхоэктатической болезни;
  • раке легкого, осложненном некрозом.

Двухслойная мокрота

Разделение гнойной мокроты на два слоя наблюдается при абсцессе легкого.

Трехслойная

Разделение гнилостной мокроты на три слоя – пенистый (верхний), серозный (средний) и гнойный (нижний) – наблюдается при гангрене легкого.

Кислую реакцию, как правило, приобретает разложившаяся мокрота.

Густая слизистая

Выделение густой слизистой мокроты наблюдается при:

  • остром и хроническом бронхите;
  • астматическом бронхите;
  • трахеите.

Слизисто-гнойная

Выделение слизисто-гнойной мокроты наблюдается при:

  • абсцессе легкого;
  • гангрене легкого;
  • гнойном бронхите;
  • стафилококковой пневмонии;
  • бронхопневмонии.

Выделение гнойной мокроты наблюдается при:

  • бронхоэктазах;
  • абсцессе легкого;
  • стафилококковой пневмонии;
  • актиномикозе легких;
  • гангрене легких.

Серозная и серозно-гнойная

Выделение серозной и серозно-гнойной мокроты наблюдается при:

Кровянистая

Выделение кровянистой мокроты наблюдается при:

  • раке легкого;
  • травме легкого;
  • инфаркте легкого;
  • сифилисе;
  • актиномикозе.

Альвеольные макрофаги

Большое количество альвеольных микрофагов в мокроте наблюдается при хронических патологических процессах в бронхолегочной системе.

Жировые макрофаги

Наличие в мокроте жировых макрофагов (ксантомных клеток) наблюдается при:

  • абсцессе легкого;
  • актиномикозе легкого;
  • эхинококкозе легкого.

Клетки цилиндрического мерцательного эпителия

Наличие в мокроте клеток цилиндрического мерцательного эпителия наблюдается при:

Наличие в мокроте плоского эпителия наблюдается при попадании в мокроту слюны. Этот показатель не имеет диагностического значения.

  • бронхите;
  • бронхиальной астме;
  • трахеите;
  • онкологических болезнях.

Большое количество эозинофилов в мокроте наблюдается при:

  • бронхиальной астме;
  • поражении легких глистами;
  • инфаркте легкого;
  • эозинофильной пневмонии.

Эластические

Наличие эластических волокон в мокроте наблюдается при:

  • распаде ткани легкого;
  • туберкулезе;
  • абсцессе легкого;
  • эхинококкозе;
  • раке легкого.

Наличие в мокроте обызвествленных эластических волокон наблюдается при туберкулезе легких.

Коралловидные

Наличие коралловидных волокон в мокроте наблюдается при кавернозном туберкулезе.

Спирали Куршмана

Наличие в мокроте спиралей Куршмана наблюдается при:

  • бронхиальной астме;
  • бронхите;
  • опухоли легкого.

Кристаллы Шарко – Лейдена

Наличие в мокроте кристаллов Шарко -Лейдена – продуктов распада эозинофилов – наблюдается при:

  • аллергии;
  • бронхиальной астме;
  • эозинофильных инфильтратах в легких;
  • заражении легочной двуусткой.

Кристаллы холестерина

Наличие в мокроте кристаллов холестерина наблюдается при:

  • абсцессе легкого;
  • эхинококкозе легкого;
  • новообразованиях в легких.

Кристаллы гематодина

Наличие в мокроте кристаллов гематодина наблюдается при:

  • абсцессе легкого;
  • гангрене легкого.

Бактериологический анализ мокроты необходим для уточнения диагноза выбора метода лечения, для определения чувствительности микрофлоры к различным лекарственным средствам, имеет большое значение для выявления микобактерии туберкулеза.

Появление кашля с мокротой требует обязательного обращения к врачу.

источник

Методическая разработка Правила приготовления препаратов для микроскопического исследования мокроты ПМ.01 Проведение лабораторных общеклинических исследований Специальность 31.02.03 Лабораторная диагностика (стр. 3 )

Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4

Гемосидерин обнаруживают с помощью реакции Персла.

С препарата, в котором были обнаружены альвеолярные макрофаги, снимают покровное стекло и подсушивают его на воздухе. На препарат наливают реактив (смесь равных объемов 3% раствора хлористоводородной кислоты и 5% раствора кровяной соли). Через 8-10 минут реактив сливают. Не подсушивая препарата, его накрывают покровным стеклом и изучают под большим увеличением (окуляр х7 объектив х40). При наличии гемосидерина альвеолярные макрофаги окрашиваются в синий цвет.

Миелин – различной формы матово – серые образования, которые находятся внеклеточно или внутри альвеолярных макрофаги

Лейкоциты (нейтрофилы) — мелкозернистые круглые тельца.

Эритроциты — круглые желтоватые диски с двойным контуром, иногда выщелоченные.

— простые – блестящие, тонкие, нежные двухконтурные образования, толщина которых равномерна на всем протяжении; встречаются скоплениями при абсцессе легкого, туберкулезе;

— коралловидные – простые эластические волокна, покрытые мылами, в связи с чем, они лишены блеска, более грубые и толстые, имеющие неровные контуры и часто желтоватый оттенок;

— обезвествленные – грубее и толще простых, располагаются среди аморфной массы солей извести и капелек жира. В некоторых случаях для отличия коралловидных волокон от обызвествленных используют микрохимическую реакцию. К исследуемому материалу добавляют 1-2 капли 10% NaОН; мыла, покрывающие коралловидные волокна, растворяются, и из-под их покрова освобождаются простые эластические волокна; обызвествленные эластические волокна.

Фибрин — тонкие волоконца, расположенные параллельно пучками или сетевидно.

Кристаллы Шарко – Лейдена – ромбовидные, бесцветные, напоминающие стрелку магнитного компаса.

Кристаллы жирных кислот – длинные слегка изогнутые серые игольчатые образования.

Спираль Куршмана – слизистое, спиралевидное, закругленное образование имеющая центральную нить и мантию.

Пробка Дитриха – беловатого или желтоватого – серого цвета комочки творожистой консистенции иногда со зловонным запахом, по форме напоминают зерна чечевицы.

Рисовидные тельца — округлые, беловатые плотные образования, содержащие скопления коралловидных волокон, продуктов жирового распада, мыла, иногда кристаллы холестерина и большое количество микобактерий туберкулеза.

Друзы актиномицетов – при малом увеличении округлые образования с резко очерченными контурами, желтоватого цвета, с аморфной серединой и с более темной окраской по краям; при большом увеличении центр друзы скопление лучистого гриба, нити которого на периферии заканчиваются колбовидными вздутиями.

Элементы эхинококка – хитиновая оболочка эхинококкового пузыря, крючья и сколексы эхинококка.

Техника приготовления и изучения окрашенных препаратов

Два препарата готовят под окраску (один на общую флору, второй на туберкулезные микобактерии).

Для приготовления мазка из мокроты используют два предметных стекла. Небольшое количество материала переносят стерильной петлей или иглой на середину предметного стекла и покрывают вторым так, чтобы осталась свободной треть первого и второго стекол. Стекла раздвигают в стороны и получают два больших мазка одинаковой толщины. Расщепленные и размазанные тонким слоем комочки высушивают на воздухе и затем фиксируют быстрым проведением через пламя спиртовой горелки 3-4 раза (1-2 минуты).

рис. 2 Схема приготовления препарата мокроты для окрашивания

При исследовании мазков мокроты незаменима окраска по Граму. Окраска мазка по Граму дает ценную информацию, если патогенная бактерия имеет какой-либо доступный определению признак ( биологический сигнал).

Реактивы:
Карболовый раствор генцианового фиолетового;

10 % раствор карболового фуксина.

На фиксированный над пламенем горелки препарат кладут полоску фильтровальной бумаги и наливают раствор генцианового фиолетового. Красят 1 — 2 мин. Бумажку сбрасывают и заливают препарат раствором Люголя на 2 мин, а потом прополаскивают препарат в спирту до сероватого цвета. Промывают водой и окрашивают 10% раствором карболового фуксина 10—15 с. После этого препарат опять промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионным объективом.

При микроскопическом изучении препаратов мокроты обнаруживают следующие элементы: стрептококки, стафилококки, диплококки, палочки Пфейфера, и другие микроорганизмы.

Для выявления и подсчета количества эозинофилов в мокроте применяют окраску азур – эозином по Романовскому при которой зерна (гранулы) эозинофилов окрашиваются в красный цвет.

Краску непосредственно перед окрашиванием разводят с дистиллированной водой в соотношении 2 капли : 1мл. Мазки оставляют в краске при комнатной температуре на 18-24 часа, а в термостате при 37° — на 1-2 часа. Основательно промывают в водопроводной воде. Мазки должны быть резко перекрашены, темно-синего цвета.

Ознакомиться с опорным конспектом методической разработки; Составить

— алгоритм приготовления нативного и окрашенного препарата;

— алгоритм окраски препарата по Граму и по Романовскому;

Пронаблюдать за манипуляциями преподавателя во время приготовления нативного и окрашенного препарата и сопоставить их с составленными алгоритмами;

4. Сформировать индивидуальное рабочее место для приготовления и микроскопирования нативного препарата (получить допуск у преподавателя для проведения практической работы);

5. Приготовить нативный препарат из учебного «биологического материала» оценить его качество продемонстрировать преподавателю провести

микроскопирование продемонстрировать преподавателю.

Читайте также:  После еды появилась мокрота

6. После получения положительной оценки взять у преподавателя тестовое задание и решить его.

    Сделайте иллюстрации включений мокроты обнаруживаемых в нативном препарате; Сделайте иллюстрации включений мокроты обнаруживаемых в препарате окрашенном по Граму;
    Ответьте на контрольные вопросы:

Значимость проведения микроскопического исследования мокроты? 2. Приведите алгоритм приготовления нативного препарата 3. Приведите алгоритм приготовления окрашенного по Граму препарата мокроты. 4. Перечислите элементы, которые обнаруживаются в нативных препаратах мокроты. 5. Перечислите элементы, которые обнаруживаются в окрашенных препаратах мокроты. 6. Для чего проводят реакцию Персла.

источник

Клинический анализ мокроты и бронхо-альвеолярной жидкости

Это патологическое отделяемое, выделяющееся с кашлем из органов дыхания при их заболеваниях.

Главные компоненты мокроты: слизь, серозная жидкость, клеточные элементы крови и дыхательных путей, фибрин, микробная флора.

Цель исследования мокроты: установить характер, локализацию, этиологию патологического процесса.

Требования к получению материала

Сбор материала: утро, после туалета полости рта. Получают мокроту путем откашливания, а не отхаркивания – в чистую сухую стеклянную широкогорлую банку или чашку Петри (в специализированных стационарах – в специальную плевательницу – градуированные стеклянные баночки с герметически закрывающимися крышками). Материал доставляют сразу, хранение нежелательно.

Особенности работы с мокротой

С мокротой работают как с заразным материалом:

v Чашки с материалом не взбалтывать во избежание образования инфицирующих аэрозолей.

v Готовить и окрашивать препараты необходимо в вытяжном шкафу.

v Все манипуляции выполнять на специальном лотке (дезинфекция каждый день огнем либо хлорамином). Столы смачивать дезраствором на 6 часов, а затем промывать теплым содовым раствором.

v По окончании работы остатки мокроты слить в специальную посуду и обеззаразить сухой хлорной известью в соотношении 1:5 в течение 1 часа.

v Микроскоп протереть 70 0 спиртом.

Клинический анализ мокроты

Ø определение физических свойств

Ø микроскопия нативного материала и окрашенных мазков

Физические свойства мокроты

Количество мокроты – определяется в мерной стеклянной посуде. Небольшое — при острых воспалительных заболеваниях бронхов и легких.

Большое (200-300 мл) — из полостей в легочной ткани.

Расслоение мокроты при стоянии (следствие разницы в относительной плотности составных частей):

на 3 слоя – пенистый, серозный, гнойный — при гнилостном бронхите, гангрене легких, бронхоэктазах.

на 2 слоя — серозный, гнойный — при абсцессе легкого: верхний – серозный.

Определяют, располагая чашку с мокротой на белом фоне.

v Слизистая и серозная бесцветная или беловато-серая.

v Гнойная- зеленовато-желтая.

v Разные оттенки красного — при появлении крови.

v Ржавая — при крупозной пневмонии, туберкулезе легких с распадом, инфаркте легкого.

Консистенцию определяют с помощью препаровальной иглы над чашкой Петри.

v Мокрота почти вся тянется за иглой — консистенция тягучая (гной).

v Тянется в виде толстой нити – вязкая (слизь, гной).

v Тянется в виде тонкой и быстроотрывающейся нити — умеренно вязкая (слизь, гной).

v Не приподнимается над чашкой – студенистая (примесь фибрина).

v полужидкая и жидкая консистенция (серозная).

v Запаха обычно не имеет. Зловонный, гнилостный при задержке в бронхах и при распаде легочной ткани.

Определяется при осмотре, зависит от соотношения различных компонентов:

Ø кровянисто-слизистая и т д.

Преобладающий субстрат ставят на первое место.

Дополнительные признаки при осмотре мокроты

v Наличие патологических примесей (кусочки ткани при распаде злокачественной опухоли, рисовидные зерна при туберкулезе)

v спирали Куршмана (плотные извитые нити — при бронхиальной астме)

v пробки Дитриха — небольшие беловато-сероватые комочки, при раздавливании издающие зловонный запах — при хроническом абсцессе, бронхоэктатической болезни. Состоят из детрита, бактерий, жирных кислот, капелек жира.

v друзы актиномицетов — желтоватые зернышки в виде крупы — при актиномикозе

Включает изучение нативных и окрашенных препаратов.

Подготовка к исследованию: Узким шпателем или иглой выбрать кусочек величиной с булавочную головку →на предметное стекло, накрыть покровным стеклом (материал не должен выходить за пределы покровного стекла).

Ø под малым увеличением (7х8) – обнаружение элементов, встречающихся в мокроте в небольшом количестве (эластические волокна, спирали Куршмана и т.д.)

Ø под большим (7х40) — детальное исследование мазка. При необходимости окрашивания покровное стекло сдвигают, отмечают на предметном интересующее место, затем препарат высушивают и окрашивают.

N.B! Необходимо исследовать все частицы, отличающиеся от фона мокроты.

Элементы нативного препарата мокроты

v волокнистые образования

v кристаллические образования

Клеточные элементы нативного препарата мокроты

v Плоский эпителий – из полости рта. Единичный встречается всегда. Большое количество — примесь слюны. Диагностического значения не имеет.

v Цилиндрический мерцательный эпителий — эпителий слизистой оболочки бронхов и трахеи — в больших количествах при бронхиальной астме и остром бронхите.

Клеточные элементы нативного препарата мокроты (продолжение)

Лейкоциты —встречаются в любой мокроте. В слизистой мокроте — едининичные, а в гнойной -сплошь покрывают поле зрения.

Эритроциты — единичные в любой мокроте, в большом количестве в кровянистой мокроте при застое, инфаркте легких.

Альвеолярные макрофаги — при бронхитах, пневмониях и профессиональных заболеваниях легких (пылевые клетки — кониофаги), застойных явлениях в легких (сидерофаги – Мф, содержащие гемосидерин, определяют реакцией на берлинскую лазурь). пороках сердца.

Опухолевые клетки попадают в мокроту при распаде опухоли в бронхах.

Волокнистые образования в нативном препарате мокроты

Эластические волокна – элементы соединительной ткани. Следствие деструкции ткани. Имеют вид извитых, блестящих, тонких волокон. Обнаруживаются при туберкулезе, абсцессе, гангрене, новообразованиях.

Обызвествленные эластические волокна – грубые, толстые, пропитанные солями палочковидные образования — при распаде петрифицированного туберкулезного очага.

Спирали Куршмана –образуются при спастическом состоянии бронхов и наличии в них слизи. Во время кашлевого толчка вязкая слизь выбрасывается в просвет более крупного бронха, закручиваясь спиралью. Появляются при БА, бронхитах, иногда при опухолях легкого, сдавливающих бронхи.

Кристаллические образования в нативном препарате мокроты

Кристаллы Шарко-Лейдена – образуются из распадающихся эозинофилов. Для выявления необходимо выдерживание мокроты в течение 24 часов. Встречаются при БА (и на высоте приступа и в межприступном периоде)., при глистных поражениях легких.

Кристаллы гематоидина – продукт распада гемоглобина. Образуются в глубине гематом и обширных кровоизлияний, в некротизированной ткани.

Кристаллы холестерина – образуются при распаде жироперерожденных клеток, при задержке мокроты в полостях — при туберкулезе, новообразованиях, абсцессе.

Тетрада Эрлиха – обызвествленный детрит, обызвествленные эластические волокна, кристаллы холестерина, микобактерии туберкулеза – при распаде обызвествленного первичного туберкулезного очага.

Окрашенные препараты мокроты

Приготовление: При необходимости окрашивания покровное стекло после микроскопии нативного препарата сдвигают, отмечают на предметном стекле интересующее место, затем препарат высушивают, окрашивают по Романовскому или Папенгейму.

Окрашенные препараты мокроты (продолжение)

Элементы окрашенных препаратов:

Нейтрофилы составляют основную массу лейкоцитов в окрашенном мазке. Могут быть дегенеративные — в гнойной мокроте.

Эозинофилы отдельные или скоплениями, сособенно при БА.

Гистиоциты встречаются постоянно в различных количествах.

Эпителиоидные клетки — клетки туберкулезной гранулемы — при туберкулезе, саркоидозе.

Клетки Пирогова-Ланхганса – гигантские многоядерные клетки, входят в состав туберкулезной гранулемы. В мокроте встречаются редко.

Плоский эпителий, эпителий бронхов, реснитчатые клетки, бокаловидные клетки – единичные.

Бактериоскопическое исследование мокроты

Ø микроскопия препаратов, окрашенных по Циль-Нильсену — для выявления микобактерий туберкулеза

Ø микроскопия препаратов, окрашенных по Граму — для изучения микрофлоры мокроты (стрептококки, стафилококки и т.д.).

Исследование мокроты на микобактерии туберкулеза

1-через 1-2 часа после сна (под наблюдением медицинского работника).

2 – в тот же день через несколько часов после взятия первой пробы.

Необходимое количество материала — 3-5 мл мокроты, мокроту откашливать из глубоких отделов легких!

Исследование мокроты на микобактерии туберкулеза (продолжение)

Подготовка препаратов: Выбрать плотные гнойные частицы мокроты из 4-6 разных мест, распределить по предметному стеклу тонким слоем (или растереть комочки между двумя предметными стеклами). Высушить на воздухе 15-30 мин, фиксировать над пламенем спиртовки.

Основные ошибки – слишком толстые препараты, плохая фиксация, фиксация плохо высушенных мазков, слишком длительная фиксация (обугливание мазков).

Окраска по Циль-Нильсену и микроскопия

Методика окрашивания (инструкция МЗ РБ): на мазки – фильтровальная бумага, сверху карболовый фуксин Циля → медленно нагреть над пламенем спиртовки до появления пара (но не закипания!) → выдержать 5 мин при комнатной температруе→ удалить фильтровальную бумагу → ополоснуть стекло под проточной водой до полного удаления краски → обработать 25% раствором серной кислоты до полного отхождения краски → смыть → фиксировать 96 0 этиловым спиртом 5 мин → промыть водой → докрасить 0,3% водным раствором метиленового синего 60 сек →промыть, высушить, микроскопировать.

Окраска по Циль-Нильсену и микроскопия (продолжение)

Микроскопия: Просмотр не менее 100 полей зрения под иммерсией. Если не обнаружены – еще 100 полей. В сомнительных случаях – весь мазок. Микробактерии окрашиваются в красный цвет (тонкие, слегка изогнутые палочки), остальные элементы мокроты и бактерии – в синий. Подсчитывают количество на 100 полей.

Выражение результата бактериоскопии

1-9 на 100 полей – указать число

После просмотра мазки обрабатывают толуолом или ксилолом для удаления иммерсионного масла. Мазки с обнаруженными микобактериями туберкулеза хранят в течение года.

Исследование мокроты методом флотации

Метод накопления (флотации) – метод Поттенджера — применяется при подозрении на туберкулезный процесс в легких после трехкратного отрицательного исследования мокроты на микобактерии туберкулеза обычным способом.

Методика — мокроту обрабатывают ксилолом или бензолом, встряхивают → возбудитель в связи с гидрофобностью всплывает с пеной →из пены готовят мазок и окрашивают по Цилю-Нильсену.

Микроскопия препаратов мокроты, окрашенных по Грамму

Используется для выявления другой бактериальной флоры в мазке. Грамположительные бактерии (стрептококки, стафилококки, пневмококки, дифтерийные палочки и др.) – фиолетового цвета.

Грам-отрицательные (диплобациллы Фридлендера — пневмобациллы, палочки брюшного тифа, катаральные микрококки и т.д.) – красного цвета.

Стрептококки (в виде цепочек), стафилококки (грозди винограда) – при гнойных заболеваниях легких. Пневмобациллы – при пневмониях и других легочных заболеваниях. Пневмококки – возбудители крупозного воспаления легких. Исследование по Граму имеет ориентировочное значение – далее следует делать посев.

Мокрота при различных заболеваниях

Слизисто-гнойная или гнойно-слизистая. Небольшое количество лейкоцитов, единичные эритроциты. В значительном количестве клетки эпителия бронхов. При хроническом – с дегенеративными изменениями.

Мокрота скудная, слизистая, вязкая, бесцветная. Много эозинофилов, единичные эритроциты, клетки эпителия бронхов, разное количество лейкоцитов, кристаллы Шарко-Лейдена, спирали Куршмана.

Мокрота при различных заболеваниях (продолжение)

Мокроты много (при прорыве в бронх), при стоянии расслаивается на 2 слоя. Микроскопия – лейкоциты, эритроциты, фибрин, эластические волокна (признак деструкции ткани легкого), кристаллы гематоидина, микробная флора.

Мокроты много с гнилостным запахом, расслаивается на 3 слоя. Микроскопия – много лейкоцитов в стадии распада, эластические волокна, кристаллы гематоидина.

Мокроты много по утрам (переход из лежачего положения), чаще гнойного характера, иногда с гнилостным запахом. Небольшое количество лейкоцитов, единичные эритроциты, пробки Дитриха. Эластических волокон не содержит.

Мокрота при различных заболеваниях (продолжение)

v в начальной стадии: мокроты мало – слизистая, вязкая с примесью отдельных гнойных комочков. Лейкоцитов и альвеолярного эпителия мало. Микобактерий может на быть.

v в поздней стадии – обызвествленные эластические волокна, признаки казеозного распада (крошковатые белые массы), кристаллы холестерина, микобактерии.

Наиболее часто плоскоклеточный (45-60%), недифференцированный (20-40%), аденокарцинома (9-12%). В мокроте – клеточные элементы рака со слизью, гноем, кровью, комплексы атипичных клеток с признаками злокачественности.

Общеклиническое исследование бронхиального и бронхоальвеолярного смыва

Бронхиальный смыв: с помощью фибробронхоскопа вводят в просвет бронха 50 мл изотонического раствора хлористого натрия с последующей аспирацией. Бронхоаьвеолярный смыв: с помощью фибробронхоскопа катетер продвигают на 6-7 см внутрь сегментарного бронха, дробно вводя 4 порции по 50 мл изотонического раствора хлористого натрия с последующей аспирацией. Эти смешанные порции – бронхоальвеолярный смыв.

Состав бронхиального смыва в норме

Клетки Содержание, %
Бронхиальный эпителий 5 — 20
Цилиндрический эпителий 4 – 15
Плоский эпителий 1 — 5
Макрофаги 64 — 68
Нейтрофилы 5 — 11
Лимфоциты 2 — 4
Тучные клетки 0 – 0,5
Эозинофилы 0 – 0,5

Состав бронхоальвеолярного смыва в норме

Клетки Содержание % Клетки Содержание %
Общее кол-во клеток, шт. 10 — 15 Эозинофилы
Макрофаги 84 — 99 Эритроциты
Лимфоциты 1 — 14 Недифференцированные лимфоциты
Полиморфно-ядерные 0,1 — 4 Дифференцированные лимфоциты: Т-клетки: — хелперы — супрессоры
Реснитчатые 1 — 5
В — клетки 5 — 10

Клинико-диагностическое значение исследования БС и БАС

Показания: оценка уровня и характера воспаления в трахеобронхиальном дереве. Клинические возможности: Установление характера и оценка динамики эндобронхита

Тип эндобронхита Цитоз (Ц), •10 9 /л Альвео-лярные макро-фаги, % Нейтрофи-лы (НЛ), % Лимфо-циты, % Микро-флора, %
Нет эндобронхита 0,3 88,1 5,6 5,1
Катаральный 1,9 32,2 48,0 20,6
Катарально-гнойный 2,5 2,4 82,5 15,6
Гнойный 23,6 3,1 94,2 2,5

Оценка динамики альвеолита

Дифференциальная диагностика неспецифической легочной патологии

Клетки норма БА ЭП ГП С ИФА ХБ
Макрофаги
Лимфоциты
Нейтрофилы 0,5
Эозинофилы 0,5

Условные обозначения: БА – бронхиальная астма; ЭП – эозинофильная пневмония; ГП – гиперчувствительный пневмонит; С – саркоидоз; ИФА – идиопатический фиброзирующий альвеолит; ХБ – хронический бронхит

Дата добавления: 2014-01-11 ; Просмотров: 3498 ; Нарушение авторских прав? ;

Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет

источник