Меню Рубрики

Окраска мокроты в цитологии

«Новые методы диагностики в онкологии и рентгенологии»
Под редакцией И. Т. Шевченко.
Гос. мед. изд-во УССР, Киев, 1957 г.
OCR Wincancer.Ru
Приведено с некоторыми сокращениями

Методика исследования. Для получения четких диагностических данных при цитологическом исследовании мокроты большое значение имеет точное, аккуратное выполнение метода во всех его деталях. Так, очень важно; объяснить больному, как правильно собрать мокроту; внимательно отобрать нужные участки мокроты и изучить их под микроскопом; тщательно выполнять детали техники окраски.

Собиранию мокроты предшествует полоскание полости рта и зева водой. В мокроте, собранной без полоскания рта, содержится много слюны и плоского эпителия, что затрудняет микроскопическое изучение мазков.

Исследованию подвергают утреннюю порцию мокроты, собранную натощак после глубокого откашливания. Мокрота не должна храниться дольше 2—3 часов после того, как она собрана. При этом сохранять ее лучше в прохладном месте. Нельзя исследовать мокроту, собранную в течение суток, так как наступающий лизис клеточных элементов не позволит определить их характер. Для цитологического исследования достаточно небольших количеств мокроты — 15—20 мл. Если у больного не выделяется мокрота, тогда по назначению лечащего врача и при отсутствии угрозы кровотечения можно рекомендовать отхаркивающие средства.

Доставленную в лабораторию мокроту выливают в одну или несколько чашек Петри так, чтобы мокрота распределилась в них тонким слоем. Затем ее осматривают, помещая чашку поочередно на белый и черный фон. С помощью двух заостренных лучинок выделяют из общей массы подозрительные участки: хрящевидные комочки, пленки; беловатые или желтоватые крупинки; кровянистые прожилки. Не следует отбирать: хрящевидные комочки серого или темного цвета, представляющие собой скопления альвеолярных макрофагов, содержащих пигмент, а также сгустки крови, гной, слюну.

Отобранные комочки мокроты переносят на стекло. При этом важно не помещать на стекло много материала. С помощью тех же лучинок крупицы расправляют, затем покрывают покровными стеклами и изучают в нативном виде под микроскопом. Такое изучение позволяет контролировать отбор материала для последующей окраски и приобрести опыт по отбору нужных частиц для цитологического исследования, что особенно важно для начинающего цитолога. Изучают нативные препараты при опущенном конденсоре, вначале с малым (10 х 8), затем с большим (10 X 40) увеличением, без применения иммерсионных систем.

Из наиболее подозрительных частичек мокроты готовят три-четыре мазка для окраски. С этой целью, сняв покровные стекла, с помощью лучинок частицы мокроты еще растягивают, чтобы получить равномерный, возможно более тонкий мазок. Просматривать под микроскопом и готовить мазок надо быстро, чтобы опустить его в фиксатор во влажном виде, до высыхания, так как хорошо окрасится только тонкий, неподсушенный мазок.

Фиксатором служит смесь Никифорова. Смесь, приготовленная в количестве 150 мл, годна для фиксации 15—18 мазков мокроты. Без ущерба для окраски мазки могут находиться в смеси до двух недель. Свыше этого срока хранить мазки не следует, так как окраска их не будет четкой. Для окраски мазков мокроты можно применять метод Пананиколау в модификации Куницы, позволяющий с достаточной четкостью выявить морфологические особенности клеточных элементов в цитологических препаратах.

При изучении мазков мокроты можно наблюдать клетки неопухолевой и опухолевой природы. К неопухолевым элементам относятся: лейкоциты, эритроциты, клетки многослойного плоского, цилиндрического, базального и метаплазированного эпителия; альвеолярные макрофаги и др. Распознавание гематогенных элементов не представляет трудностей. Ядра лейкоцитов и лимфоцитов окрашиваются в сине-фиолетовые тона, протоплазма — в зеленовато-голубые. Эритроциты слабо окрашиваются в светло-желтый цвет, что является большим преимуществом при изучении кровянистой мокроты, так как кровь не мешает проведению исследования. Клетки плоского эпителия самые крупные из группы неопухолевых элементов, плоские, четко очерченные, неправильной полигональной формы.

Ядра однотипные по величине, форме и строению хроматина: небольшие, округлые, светлые, расположенные чаще всего в центре клетки. Цитоплазма окрашена в желтый или оранжевый цвет при ацидофилии, в зеленовато-голубой или зеленый — при базофилии. Клетки поверхностных слоев плоского эпителия имеют моноформные мелкие ядра и протоплазму, окрашенную в желтый цвет. Клетки более глубоких слоев эпителия меньше предыдущих по величине, овальной формы, ядра их крупнее, протоплазма более плотная, окрашена в зеленый цвет. Обычно клетки плоского эпителия в мокроте находятся в виде скоплений и пластов.

Клетки цилиндрического эпителия бронхов имеют характерную вытянутую, клиновидную форму. Ядра их также мономорфные, светлые, расположенные в центре клетки или у одного из концов ее. Протоплазма базофильная, голубовато-зеленого цвета, иногда содержит вакуоль. Реснички, как правило, отсутствуют. Располагаются клетки цилиндрического эпителия в виде скоплений. Клетки базалыюго эпителия бронхов недифференцированные, мелкие, округлой формы, напоминают лимфоциты. Ядра их круглые, занимают почти все тело клетки, темные, с плотной сетью хроматина, иногда располагаются эксцентрично. Протоплазма клеток в виде узкого пояса окружает ядро. Клетки базального эпителия могут встречаться в виде скоплений ядер, лишенных цитоплазмы.

Элементы метаплазированиого эпителия бронхов имеют морфологические черты, свойственные плоскому и цилиндрическому эпителию. Нередко в одном пласте метаплазированного эпителия можно видеть клетки вытянутой формы, напоминающие цилиндрические, и полигональные клетки, похожие на плоский эпителий. Обычно клетки метаплазированного эпителия полигональной формы, с небольшими, однотипными по величине и форме ядрами, расположенными в центре клетки. Ядра светлые или темные, с плотной сетью хроматина. Окраска протоплазмы клеток варьирует: при резкой ацидофилии она ярко-желтая, при базофилии — интенсивно зеленая. Эта вариабильность обусловливает своеобразный пестрый вид пласта клеток. Описанное разнообразие формы, величины и окраски протоплазмы объясняет трудности распознавания и отличия их от опухолевых элементов. Метаплазированный эпителий хорошо сохраняется, его можно часто видеть и в гнойной мокроте.

Альвеолярные макрофаги всегда имеются в утренней слизистой или слизисто-гнойной мокроте, значительно меньше их, а иногда и вовсе нет в гнойной и кровянистой мокроте. Форма альвеолярных макрофагов округлая, реже — вытянутая. Обычно они крупные, но есть и мелкие. Протоплазма обширная, вакуолизированная, окрашенная в светло-зеленый или голубоватый цвет. Макрофаги, находящиеся в тяжах слизи, окрашены в желтоватый или розовый цвет благодаря метахромазии, которой обладает слизь. Ядра клеток бобовидной или округлой формы, светлые или темные, небольшие, расположенные эксцентрично. Характерным отличием альвеолярных макрофагов является содержание в их протоплазме фагоцитированных частиц, представляющих собой пыль, частицы угля, кровяной пигмент и т. п. Включения могут быть разными: от отдельных еле заметных крупинок до сплошного заполнения клетки, от светло-коричневого цвета до черного. Разнообразие величины и формы клеток делает их похожими на клетки опухоли, за которые их ошибочно и принимают начинающие исследователи. Присутствие мельчайших включений позволяет определить их природу.

Изучение раковых клеточных элементов в мокроте необходимо проводить с учетом гистологических форм рака легкого. Это позволяет выделить те характерные для каждой формы морфологические особенности, которые облегчают цитологическую диагностику и позволяют распознавать трудные для определения в мазках формы железистого и недифференцированного рака. Однако определение гистологической формы раковых элементов, обнаруженных в мокроте при цитологическом исследовании, далеко не всегда возможно. В ряде наблюдений могут быть обнаружены обрывки ткани, группы и отдельные раковые клетки, которые не отличаются морфологическими особенностями, характерными для той или иной гистологической формы рака. В этом случае в заключении, выдаваемом лабораторией, констатируется наличие рака без указания на его форму.

При цитологическом исследовании мокроты можно определить следующие гистологические формы рака легкого: плоскоклеточный рак с ороговением и без него; железистый рак; недифференцированный рак.

Плоскоклеточный рак. Клеточные элементы данной гистологической формы рака отличаются наиболее выраженным полиморфизмом. В значительных пределах варьируют величина и форма клеток и ядер, окраска протоплазмы, плотность сети хроматина и др. При плоскоклеточном раке с ороговением преобладают клетки вытянутой формы: игольчатые, булавовидные, лентовидные с изогнутыми концами или отростчатые, различной величины. Реже видны округлые и овальные клетки. Протоплазма гомогенная, контуры клеток четко очерчены. Большинство клеток окрашено в желтый и оранжевый цвет, реже — в зеленый. Ядра по отношению к величине тела клетки не велики, расположены в центре клетки или эксцентрично. Форма ядер разнообразна: округлая, палочковидная. Имеются двух- и трехядерные клетки. Сеть хроматина может быть плотной, неравномерной или тонкой, при этом окраска ядер колеблется от темно-фиолетовой или темно-коричневой до светлой. Ядрышки обычно не определяются.

При плоско клеточном раке легкого без ороговения в мокроте обнаруживаются также полиморфные клеточные элементы, но преобладают клетки округлой формы. Протоплазма, оставаясь гомогенной, плотной благодаря базофилии, у большинства клеток будет окрашена в интенсивно зеленый цвет. В меньшем количестве находятся клетки с протоплазмой, окрашенной в желтый цвет, или с протоплазмой, окрашенной в центре клетки в желтый, а к периферии — в зеленый цвет. Это явление названо асимметричной ацидофилией. Ядра по отношению к размерам клетки крупнее ядер клеток ороговевающих форм рака.

Отличительной особенностью плоско клеточного рака является характер обрывков ткани, групп и скоплений клеток, обнаруженных в мокроте. При выраженном ороговении имеются обрывки ткани или группы с концентрическим расположением клеток с плотной протоплазмой, окрашенной в желтый или оранжевый цвет. В периферически расположенных клетках заметны темные, палочковидные ядра, в центральных — ядра отсутствуют. Это так называемые жемчужины. Для данной гистологической формы характерно также присутствие стержневидных групп, состоящих из клеток удлиненной формы с гиперхромными, палочковидными ядрами. Но многих группах выражен выше описанный полиморфизм клеточных элементов. В скоплениях клеток плоскоклеточного рака наблюдается все то же разнообразие величины и формы клеток.

Железистый рак. Клеточные элементы данной гистологической формы, встречающиеся в мокроте в виде обрывков тканей, групп, скоплений и отдельных клеток, отличаются определенными морфологическими особенностями. Полиморфизм их выражен меньше, чем при плоскоклеточном раке. Характерно наличие клеток овальной, грушевидной и округлой формы. Протоплазма клеток базофильна, окрашена в зеленовато-голубые тона. Контуры клеток не всегда четко очерчены, нередко «размыты». В протоплазме заметна вакуолизация, что создает впечатление пенистости ее при наличии мелких вакуолей. При секреции слизи в протоплазме клеток содержится одна или несколько крупных вакуолей. В этом случае ядро изогнуто, оттеснено к периферии, клетка приобретает перстневидный характер. Ядра клеток железистого рака, занимающие большую часть клетки, обычно округлой формы, реже многолопастные, бобовидные, с неровными контурами. Хроматин имеет характерный вид тонкопетлистой сети, уплотненной по периферии ядра. В результате этого образуются светлые ядра с темным ободком краевого гиперхроматоза. В ядрах, как правило, содержатся два-три укрупненных ядрышка с четкими контурами. В некоторых ядрах хроматин образует неравномерную плотную сеть, обусловливающую интенсивную окраску ядер. Местами встречаются «голые» ядра без протоплазмы.

Для групп клеток данной формы рака характерно образование железистых структур, так называемых розеток, а также наличие обширных групп, имеющих характер ворсинок, папилл. Такие папиллы состоят из клеток округлой или кубической формы, с крупными ядрами и четкими ядрышками.

Недифференцированный рак. Наибольший мономорфизм клеточных элементов рака наблюдается именно при данной гистологической форме. Клетки малой величины, округлой формы, напоминают лимфоциты или клетки базального эпителия. Цитоплазма клеток окрашена в светлозеленып цвет, имеет вид узкого пояска, у большинства вообще отсутствует. Основными признаками, позволяющими распознать клеточные элементы этой формы рака, являются структура ядер и их расположение. Ядра преобладающего большинства клеток имеют плотную сеть хроматина, гиперхромны, окрашены в темно-фиолетовый цвет. Отдельные ядра пикнотичны, уменьшены в размере, иногда распавшиеся на отдельные глыбки хроматина. Другие — в состоянии лизиса, набухшие, светлые, теряют четкие контуры.

Форма ядер приближается к округлой, несколько неправильная, иногда треугольная или полулунная. Полиморфизм особенно выражен в некоторых случаях, когда на прилегающих друг к другу поверхностях ядер образуются площадки или вдавления, так называемые фасетки. Этот признак очень характерен, так как позволяет отличить клеточные элементы недифференцированной формы рака от лимфоцитов и клеток базального эпителия, у которых не наблюдается образования фасеток. Отличительной особенностью также является расположение клеток в группах в виде цепочек, цугов. Более обширные группы состоят из клеток, плотно прилегающих друг к другу. Наконец, имеются участки детрита, глыбок хроматина, гибнущих и сохранившихся клеток, лейкоцитов. Если при цитологическом исследовании мокроты обнаруживаются обрывки ткани, комплексы, группы и скопления раковых клеток, заключение о результатах исследования выдают с указанием на наличие рака.

При выявлении в мокроте отдельных экземпляров опухолевых клеток, нерезко выраженных признаках злокачественности и при наличии распада клеточных элементов рака в заключении пишут о подозрении на рак и рекомендуют повторные исследования мокроты. Многократные исследования мокроты имеют большое значение, так как при них с большей вероятностью исключаются допущенные погрешности. Кроме того, нередко удается получить дополнительные, более полные данные о характере процесса.

Цитологическое исследование мокроты является ценным методом, входящим в комплекс диагностических мероприятий при обследовании больного, у которого предполагается наличие рака легкого, особенно осложненного пневмонией, абсцессом и др. Комплексное применение клинико-рентгенологического, бронхоскопического и цитологического исследования в значительной степени расширяет диагностические возможности при раке легкого.

Каким должно быть питание при онкологических заболеваниях? Какие продукты абсолютно противопоказаны при той или иной форме рака?

Узнать подробности >>

Фитотерапия способна оказать существенную помощь не только в лечении онкологических заболеваний, но также и в их профилактике.

Узнать подробности >>

Многих людей, имеющих у себя или у родственников онкологическое заболевание, интересует вопрос: передается ли рак по наследству?

Узнать подробности >>

Лечение рака во время беременности является довольно сложным, ведь большинство лекарственных средств обладает токсичностью.

Узнать подробности >>

Какие перспективы у беременности после перенесенного онкологического заболевания? Следует ли выдерживать срок после лечения рака?

Узнать подробности >>

Профилактика является важной частью общей борьбы с онкологическими заболеваниями. Как же уменьшить вероятность возникновения рака?

Узнать подробности >>

Что представляет из себя паллиативное лечение рака? Как оно может повлиять на качество жизни онкологического больного и изменить ее к лучшему?

Узнать подробности >>

Учеными разработано достаточно много перспективных методов лечения рака, пока еще не признанных официальной медициной. Но все может измениться!

Узнать подробности >>

Статистика заболеваемости раком, к сожалению, неутешительна: наблюдается рост числа заболевших, при этом болезнь «молодеет».

Узнать подробности >>

Как найти силы для борьбы с раком? Как не впасть в отчаяние от возможной инвалидности? Что может послужить надеждой и смыслом жизни?

Узнать подробности >>

Как помочь близкому человеку жить с диагнозом «рак»? Нужна ли «ложь во спасение»? Как вести себя, чтобы близкие люди меньше страдали?

Узнать подробности >>

Бытует такое мнение, что постоянные стрессовые ситуации способны привести к развитию онкологических заболеваний. Так ли это?

Узнать подробности >>

Многие онкологические больные часто страдают от резкой потери веса. Чем это вызвано и можно ли как-то справиться с этой проблемой?

Узнать подробности >>

Правила ухода за больными, вынужденными постоянно находиться в кровати, имеют свои особенности и их нужно обязательно знать.

источник

Что такое цитологическое исследование мокроты?

Цитологическое исследование мокроты по-другому называется исследованием мокроты на атипичные клетки, то есть клетки злокачественных опухолей. Анализ предполагает окрашивание мазков мокроты и изучение их под микроскопом специалистом-цитологом. При злокачественном перерождении клетки изменяют своё строение, что можно рассмотреть в микроскоп. Раковые клетки выделяются с мокротой в 85 % случаев. Часто это помогает поставить верный диагноз.

В каких случаях назначают цитологическое исследование мокроты?

Анализ должен проводиться во всех случаях, когда имеется даже малейшее подозрение на рак лёгкого. Наиболее информативен анализ, проведенный пятикратно. Это значительно повышает вероятность выявления атипичных клеток. Цитологическое исследование мокроты применяют врачи-терапевты, пульмонологи, фтизиатры.

У пациентов, имеющих длительный стаж курения, занятых на вредных производствах, а также у тех, чьи ближайшие родственники страдали злокачественными новообразованиями лёгких, этот анализ может использоваться в качестве скрининга для раннего выявления патологии даже при отсутствии симптомов со стороны органов дыхания.

Подозрение на рак лёгкого у врачей возникает, если пациент жалуется на постоянный кашель. Он может быть малопродуктивным, навязчивым или с отделением мокроты. Мокрота в одних случаях светлая слизистая, в других – желтовато-зелёная с прожилками крови, бурая или даже чёрная. Частые пневмонии, достаточно легко поддающиеся лечению, но непрерывно возникающие вновь, также могут навести врача на мысль о раке лёгкого. Неспецифические симптомы (слабость, снижение переносимости физических нагрузок, похудание, плохой аппетит) присущи всем онкологическим заболеваниям.

Значительно реже исследование назначают для диагностики бронхиальной астмы, обнаружения сердечных пороков (по наличию сидерофагов в мокроте), микоза лёгкого, кровотечения из трахеи или бронхов, туберкулёза или хронической обструктивной лёгочной болезни.

Как правильно подготовиться к исследованию и собрать материал?

Мокроту собирают утром в специальный стерильный контейнер, который пациент получает на руки у медперсонала. Следует почистить зубы и тщательно прополоскать рот и горло кипячёной водой. После этого мокроту, полученную при откашливании, сплёвывают в контейнер. Важно понимать, что собрать нужно именно отделяемое бронхов и трахеи, а не слюну из ротовой полости.

Если мокроты образуется мало, врач может назначить обильное питьё в сочетании с отхаркивающими препаратами за несколько дней до исследования, чтобы увеличить продукцию трахеобронхиального секрета.

Преимущества и недостатки метода

Исследование является достаточно недорогим. При сборе материала пациент не подвергается болезненным или неприятным манипуляциям. Однако информативность цитологического исследования мокроты уступает цитологическому исследованию промывных вод бронхов, полученных при бронхоскопии. Кроме того, при бронхоскопии доступен визуальный осмотр измененной области с возможностью взятия небольшого фрагмента тканей для исследования.

Каковы нормальные результаты исследования, и как трактовать полученное заключение?

Нормальное заключение, написанное врачом-цитологом на бланке анализа, выглядит так: «Атипичных клеток не обнаружено». Наличие же таких клеток всегда свидетельствует в пользу рака лёгкого и требует дополнительного обследования для установления локализации процесса, его распространённости и определения лечебной тактики.

Следует понимать, что отсутствие атипичных клеток даже в пятикратных исследованиях не позволяет на 100 % исключить рак лёгкого.

Информация размещена на сайте только для ознакомления. Обязательно необходима консультация со специалистом.
Если вы нашли ошибку в тексте, некорректный отзыв или неправильную информацию в описании, то просим вас сообщать об этом администратору сайта.

Отзывы размещенные на данном сайте являются личным мнением лиц их написавших. Не занимайтесь самолечением!

источник

Мокрота является секретом, выделяющимся при воспалении трахеи, бронхов и легких. Ее появление отмечается не только при поражении дыхательных органов, но и при нарушениях сердца и сосудов. Методы исследования мокроты подразумевают макроскопическое, химическое и микроскопическое определение ее характеристик.

Исследование мокроты дает возможность обнаружить микроорганизмы, вызывающие патологический процесс, обозначить наличие микобактерии при туберкулезе, выявить раковые клетки, кровяные и гнойные примеси, а также определить резистентность бактерий к антибиотикам.

Исследование мокроты на общий анализ проводится при следующих состояниях:

  • кашель;
  • воспаление легких;
  • воспаление бронхов;
  • нагноение легкого;
  • туберкулез;
  • бронхоэктатическая болезнь;
  • легочная гангрена;
  • опухоль в легких;
  • бронхит в острой форме;
  • бронхит в хронической форме;
  • тонзиллит в хронической форме;
  • туберкулез;
  • коклюш;
  • силикоз;
  • острая форма обструктивного бронхита;
  • воспаление легких;
  • сибирская язва.

Слизь будет лучше выделяться, если накануне перед сдачей анализа принять средство для отхаркивания или же употребить большое количество теплого питья. Перед сбором рекомендуется почистить зубы и ротовую полость, прополоскав ее теплой вскипяченной водой.

Сбор мокроты на бактериологическое исследование желательно производить в утренние часы (она скапливается за ночь до приема пищи) в стерильный контейнер, который выдается лабораторией. Для анализа достаточно количества 5 мл. Анализ секрета производится не позднее, чем через 2 часа после его сбора. До момента отправки на исследование контейнер с содержимым должен храниться закрытым в холодильнике.

Количество выделяемого секрета разнится в зависимости от характера патологического процесса. Обычно оно варьируется от нескольких плевков до 1 л за сутки. Малое количество выделяется при воспалении бронхов, застойных процессах легких и при начале приступа бронхиальной астмы. В конце приступа объем возрастает. Он может составлять до 0,5 л, а также выделяться в большом количестве, если имеется отек легких.

Много слизи выделяется при гнойном процессе в легких при сообщении с бронхами, при нагноении, бронхоэктазе и гангрене.

Исследование мокроты на туберкулез показывает распад тканей легких. В особенности такой процесс провоцирует каверна, которая сообщается с бронхами.

Увеличение количества выделяемого секрета может быть сопряжено с ухудшением состояния пациента и наблюдаться в период обострения. Увеличение может относиться и к положительной динамике развития болезни.

Уменьшение количества выделяемой слизи может свидетельствовать о регрессе воспаления или же нарушении в области дренирования полости, наполненной гноем. При этом отмечается ухудшение самочувствия больного.

Слизистый секрет выделяется при бронхитах в острой или хронической форме, бронхиальной астме, пневмонии, онкологической опухоли легкого, бронхоэктатической болезни, эхинококкозе легкого, сопровождающемся нагноением, актиномикозе.

Мокрота с примесью гноя наблюдается при абсцессе легкого, эхинококкозе и бронхоэктатической болезни.

Слизь с примесью крови или же состоящая полностью из крови присуща туберкулезу. Появление крови может свидетельствовать о наличии онкологии, бронхоэктатической болезни, нагноении легкого. Также такое явление наблюдается при синдроме средней доли, инфаркте в легком, травме, актиномикозе и сифилитическом поражении. Кровь может выделяться и при крупозном и очаговом воспалении легких, застойных процессах, сердечной астме и отечности легких.

Серозная мокрота отмечается при отечности легких.

Исследование мокроты выявляет ее различную окрашенность. Слизистые и серозные выделения не обладают цветом или же имеют беловатый оттенок.

Присоединение гноя придает секрету зеленоватый оттенок, что характеризует такие патологические процессы, как абсцесс легкого, гангрена, бронхоэктатическая болезнь, актиномикоз легкого.

Выделения с оттенком ржавчины или коричневого цвета указывают на то, что в них содержится не свежая кровь, а продукт ее распада — гематин. Такой секрет может выделяться при крупозном воспалении легких, сибирской язве, инфаркте легкого.

Зеленоватый цвет с примесью грязи или же желтый секрет свидетельствует о патологии органов дыхания в сочетании с желтухой.

В ярко-желтый цвет мокрота окрашивается при эозинофильной пневмонии.

Слизь цвета охры встречается при сидерозе легкого.

Черноватый или сероватый секрет отмечается при наличии примеси пыли от угля. При отеке легких серозная мокрота наблюдается в большом количестве. Как правило, она окрашена равномерно в розоватый цвет, что объясняется наличием эритроцитов. Такие выделения похожи на жидкий клюквенный морс.

Окрашиваться секрет может и от некоторых лекарственных препаратов. К примеру, антибиотик «Рифампицин» может придать ему красный цвет.

О характере патологического процесса в органах дыхания может свидетельствовать и запах секрета. Мокрота отдает запахом гнили при гангрене легкого или гнилостном поражении бронхов, онкологических новообразованиях, осложнившемся некрозе бронхоэктатической болезни.

Зачастую исследование выделений выявляет наличие слоев. При застойном характере мокрота с примесью гноя наблюдается при нагноении легкого и бронхоэктатической болезни.

Секрет с примесью гнили содержит в себе три слоя. Верхний слой похож на пену, средний серозный, а нижний с примесью гноя. Такой состав характеризует гангрену легкого.

Примесь пищи может отмечаться при наличии злокачественной опухоли в пищеводе при сообщении его с бронхами и трахеей. При попадании эхинококка в бронхи в мокроте могут быть обнаружены крючья или сколекс паразита. Очень редко обнаруживаются взрослые особи аскарид, которые проникают в органы дыхания у ослабленных людей.

Яйца легочной двуустки появляются при разрыве кисты, которая образуется в легких при наличии паразитов.

Гангрена и нагноение легких вызывают появление кусочков некрозов легких. При опухоли в выделениях могут присутствовать их фрагменты.

Свертки, содержащие фибрин, встречаются у пациентов с фибринозным бронхитом, туберкулезом и пневмонией.

Рисовые тельца, или линзы Коха, присущи туберкулезу.

Пробки Дитриха, включающие в себя продукты распада бактерий и ткани легких клеток жирных кислот, встречаются при гнилостном бронхите или же гангрене легкого.

Хроническая форма тонзиллита предполагает выделение из миндалин пробок, схожих с пробками Дитриха.

Исследование мокроты химическим способом предполагает определение:

  • Показателя белка, который может помочь в дифференциальной диагностике хронической формы бронхита и туберкулеза. При бронхите хронической формы в секрете отмечаются следы белка, а при туберкулезном поражении количество белка в мокроте будет намного выше, и оно может быть обозначено цифрами (до 100—120 г/л).
  • Пигментов желчи. Они обнаруживаются в мокроте при поражении органов дыхания в сочетании с гепатитом. В этом случае печень сообщается с легкими. Желчные пигменты присущи пневмонии, что обусловлено распадом внутри легких эритроцитов и последующим изменением гемоглобина.

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и многих других поражений легких широко применяется цитологический способ, который включает два этапа: клиническое и микроскопическое исследование мокроты.

Клиническое исследование помогает определить, каким методом должен быть собран материал для получения правильного результата анализа.

Существует два основных вида материала, которых требует микроскопическое исследование мокроты: спонтанный и редуцированный. Второй вид секрета получают воздействием разнообразных раздражителей (средства для отхаркивания, ингаляции и т. д.).

Цитологическое исследование мокроты предполагает изучение макроскопического и микроскопического анализа ее клеток.

Больше всего информации для цитологического анализа несет мокрота, взятая утром на голодный желудок. До исследования она должна храниться не больше 4 часов.

  • В мокроте встречаются клетки плоского эпителия, которые исследуются микроскопически. Но для постановки диагноза они не имеют никакого значения. Клетки цилиндрического эпителия — как единичные, так и в группе — могут отмечаться при таких заболеваниях, как бронхиальная астма, бронхит и рак легких. Следует отметить, что цилиндрический эпителий может появиться и по причине проникновения слизи из носоглотки.
  • Альвеолярные макрофаги представляют собой клетки ретикулоэндотелия. Макрофаги, которые содержатся в протоплазме (фагоцитирующие частицы или пылевые клетки), можно встретить у пациентов, которые длительное время вдыхали пыль.
  • Макрофаги протоплазмы (образуются при распаде гемоглобина) называют клетками сердечного порока. Они могут встречаться во время застойных процессов в легких, стенозе митрального клапана, инфаркте легких.
  • Небольшое количество лейкоцитов содержится в любой мокроте. Их повышенное содержание отмечается в секрете с примесью гноя.
  • Эозинофилы. Такими клетками богата мокрота у астматиков. Клетки могут отмечаться при эозинофильной форме воспаления легких, поражении организма гельминтами, туберкулезе и инфаркте легкого.
  • Эритроциты. Единичные эритроциты не отображают картины заболевания. Появление повышенного количества свидетельствует о наличии кровотечения в легких. В свежей крови определяются неизменные эритроциты. Если же есть примесь крови, которая застоялась в легких в течение долгого времени, то обнаруживаются выщелоченные эритроциты.
  • Раковые клетки. Их можно обнаружить в секрете группами. Они свидетельствуют о наличии опухоли. При нахождении единичных клеток часто возникает трудность при диагностике. В таких случаях проводится повторный анализ мокроты.
  • Эластические волокна, появление которых вызвано распадом легочной ткани, спровоцированным туберкулезом, абсцессом, гангреной, опухолью. Гангрену такие клетки характеризуют не всегда, так как из-за действия ферментов, находящихся в секрете, они могут быть растворены.
  • Спирали Куршмана. Это особые тела, похожие на трубки. Они обнаруживаются при исследовании под микроскопом. Иногда заметны и глазом. Обычно спирали присущи таким заболеваниям, как бронхиальная астма, туберкулез легких и пневмония.
  • Кристаллы Шарко-Лейдена обнаруживаются в мокроте с повышенным содержанием эозинофилов при таких поражениях, как бронхиальная астма, эозинофильная пневмония. Вскрытие очага туберкулеза в просвете бронхов может характеризоваться наличием в секрете эластических волокон-кристаллов ХС, МБТ и аморфной извести (так называемая тетрада Эрлиха) — 100%.

Сбор мокроты для исследования бактериоскопическим методом подразумевает анализ секрета на предмет обнаружения в нем микобактерий, характерных для туберкулеза. Они похожи на тонкие, утолщенные по бокам или же посередине кривые палочки разной длины, которые располагаются как поодиночке, так и группами.

Обнаружение микобактерии туберкулеза не является доминантным признаком для диагностики и требует подтверждения бактериологическим способом. Туберкулезные микобактерии при норме в секрете не обнаруживаются.

Основой для анализа служат гнойные частицы, которые берутся из сорока шести различных областей и тщательно растираются до однородной массы двумя стеклами. Далее они сушатся на воздухе и фиксируются пламенем горелки.

Бактериологическое исследование мокроты методом Циля-Нильсена предполагает ее окрашивание в красный цвет. При этом все частицы секрета, за исключением микобактерии, приобретают синий оттенок, а микобактерии приобретают красный цвет.

При подозрении на поражение организма туберкулезом после трехкратного исследования на наличие микобактерий с отрицательным ответом прибегают к применению метода флотации (анализ Поттенджера).

Обычный способ исследования окрашенного мазка на МТБ дает положительный результат только при количестве МТБ не менее 50 000 единиц в 1 мл мокроты. По числу микобактерий судить о наличии туберкулеза нельзя.

Лабораторные исследования мокроты при наличии неспецифических заболеваний легких при бактериоскопии могут выявить следующие бактерии:

  • При воспалении легких — пневмококки, диплококки Френкеля, бактерии Фридлендера, стрептококки, стафилококки (100%).
  • При гангрене легких можно обнаружить веретенообразную палочку в сочетании со спирохетой Венсана (80%).
  • Дрожжеподобные грибы (70%), для выяснения вида которых требуется посев секрета.
  • Друзы актиномицета (100%) при актиномикозе.

Объем слизи, выделяемой трахеей и бронхами у человека, не страдающего никакими патологиями, колеблется от 10 до 100 мл/сут.

В норме уровень лейкоцитов невысок, а исследование окрашенного мазка на микобактерии дает отрицательный результат.

источник

Правила приготовления препаратов (мазков) из биологического материала для цитологического исследования

— основы получения материала для цитологического исследования;

— характеристику основных способов получения биоматериала для цитологического исследования;

— методику приготовления стекол для получения мазков.

— оценить правильность получения материала для цитологических исследований.

Материалом для цитологической диагностики может быть:

• соскоб с ткани молочной железы (или опухоли), удаленной во время операции;

• выделения из соска (метод практически неэффективен для диагностики злокачественных новообразований молочной железы, за исключением внутрипротокового рака);

• материал, полученный с эрозивных поверхностей.

Для диагностического заключения по цитологическим препаратам важно получение полноценного материала: он должен быть взят не из окружающих тканей, а из очага поражения. Трудности могут отмечаться при выраженном фиброзе или наличии кистозно измененных участков, в таких случаях нужно пытаться получить материал из разных участков опухоли, из стенок кисты; при некротических изменениях — стараться брать материал из периферии опухоли.

Клеточный материал наносят сухим инструментом тонким слоем в продольном направлении (или готовят отпечатки с ткани) на чисто вымытые, обезжиренные 96% спиртом и натертые досуха предметные стекла или помещают в среду накопления («жидкостная» цитология).

Емкости для доставки материала: пробирки, чашки Петри и т.д. должны быть чистыми, после обработки в сухожаровом шкафу. Подсушивание цитологических мазков проводят при комнатной температуре на воздухе.

Если методика окрашивания (Папаниколау и др.) требует влажной фиксации мазка, то сразу после получения материала мазок обрабатывают аэрозолем для фиксации или капельным фиксатором или помешают на 10 минут в 96 % спирт, после чего препарат высушивают на воздухе.

Цитологические препараты с тканевого кусочка готовят до его обработки формалином. Направляемый на цитологическое исследование материал нельзя делить ни части и рассылать в разные лаборатории, т.к. характерные изменения могут быть в одной части материала и не быть в другой.

Цитологический метод технически прост, быстр, сравнительно дешев, малотравматичен. Однако «легкость» цитологического метода обманчива, так как цитологическое исследование должно заканчиваться формулировкой заключения, основываясь на котором разрабатывается тактика лечения.

По способу получения материала цитологию можно подразделить на дооперационную (эксфолиативную, абразивную, аспирационную) и интраоперационную.

1. Эксфолиативная цитология включает в себя исследование вагинальных мазков, мокроты, мочи, плевральной, перитонеальной, перикардиальной, цереброспинальной, синовиальной жидкости и т.д. Этот раздел цитологии отличается простотой техники получения большого количества различного типа клеток, в том числе воспалительного ряда. Клеточный материал может быть не очень хорошо сохранен. Для получения информативного материала с поверхности патологического очага удаляют гноевидные массы, корочки, некротический налет. Если полученный материал представляет жидкость, то в нее добавляется цитрат натрия, чтобы жидкость не свернулась.

Абразивная цитология получает материал из определенного участка внутренних органов, в том числе исследуются субэпителиальные поражения с помощью фиброоптических инструментов. При таком взятии материала клетки хорошо сохраняются, и препараты легко интерпретировать. Материал получают из шейки матки, вагины, эндометрия, респираторного, желудочно-кишечного, мочеполового тракта.

2. Наибольшее значение имеет интраоперационное цитологическое исследование, применяемое для диагностики и определения тактики лечения опухоли в процессе оперативного вмешательства. Результат интраоперационного цитологического исследования может быть получен в более короткие сроки, чем гистологический анализ криостатных срезов, при этом точность обоих методов сопоставима.

Получение эксфолиативного материала. Мазки из отделяемого для цитологического исследования готовятся из клеточных элементов, которые легко слущиваются с поверхности слизистых и серозных оболочек и/или спонтанно попадают в различные выделения (выпоты, секреты, мокроту, патологические выделения из молочной железы, плевральный эксудат, мочу). Для приготовления препарата капля отделяемого (из молочной железы, свищей и др.) наносится на стекло и готовится мазок.

Мазки — отпечатки: к месту поражения прикладывается предметное стекло, на котором остается некоторое количество клеточных элементов и слизистого отделяемого:

— с места выделения (сосок молочной железы, выходное отверстие свища);

со слизистой оболочки, изъязвленной поверхности слизистых и кожных покровов;

— материал с пораженного участка можно брать также с помощью ватного тампона и наносить на предметное стекло в виде отпечатков.

Мазки-отпечатки из соскоба готовятся с помощью шпателя, края предметного стекла, скальпеля: соскобы делаются осторожно с легкодоступных очагов поражения, обилие слизи и некротических масс в биологическом материале препятствуют правильному приготовлению мазка, поэтому гнойные корки и некротические массы должны быть удалены. В настоящее время появились новые технологии приготовления цитологических препаратов («жидкостная» цитология), обеспечивающие высокую степень концентрации клеток («Cellprint», Cytospin и т.д.). Использование «жидкостной» цитологии особенно рекомендуется при выполнении иммуноцитохимических исследований. Цитологические препараты из осадка доставленной в лаборатории жидкости серозных полостей и содержимого кист получают путем пункции плевральной, перикардиальной, брюшной полости и кист: в жидкость добавляют консервант, чтобы предотвратить свертывание (1 г лимоннокислого натрия на 1 л жидкости), тщательно перемешивают стеклянной палочкой. В лабораторию доставляют всю полученную жидкость для исследования, если количество жидкости слишком велико (несколько литров), то жидкость отстаивают (около часа), сливают верхний слой, а отстоявшийся нижний (в пределах 1 л) доставляют в лабораторию.

Что такое жидкостная цитология?

Основная идея этой технологии заключается в том, что клеточный материал, полученный с поверхности шейки матки и из цервикального канала посредством щеточки, не переносится сразу на стекло, а вместе со съемной щеточкой погружается в специальный флакон с особым раствором.

Этот раствор «консервирует» собранный врачом клеточный материал, препятствует повреждению клеток, позволяет преодолеть бактериальное «засорение» и дает возможность в оптимальных условиях транспортировать собранные клетки в лабораторию. И для врача, и для его пациенток преимуществами при использовании жидкости являются ее устойчивость к колебаниям температуры, возможность хранения клеточного материала в течение нескольких лет и возможность проведения любых ПЦР-исследований, в том числе и на вирус папилломы человека.

Все исследования можно проводить из одного флакона с жидкостным цитологическим материалом; от пациентки не требуются дополнительные визиты к врачу, а это значит, что осуществление одновременного или последовательного проведения цитологии и генетической детекции вируса, а, следовательно, полноценного скрининга поражений шейки матки в данном случае максимально облегчено.

Использование жидкостного способа сбора материала для обследования женщин на инфекционную патологию шейки матки является наиболее логичным и экономически обоснованным подходом. Но самое главное заключается в том, что эта новая технология позволяет усилить эффективность цервикального скрининга и не «пропустить» тех женщин, у которых поражения на шейке уже приобрели статус «предрака».

Только при одновременном отсутствии патологии и в цитологическом мазке, и при ПЦР-тестировании вероятность пропустить поражения шейки матки высокой степени тяжести практически отсутствует и минимальна для более легких поражений.

Получение пункционного материала. Пункцию проводит врач, как правило, под контролем ультразвукового исследования, реже под контролем рентгеновского исследования. Для получения полноценного материала для цитологического исследования при проведении диагностической пункции необходимо соблюдать ряд правил:

— пункцию проводят с соблюдением правил асептики и антисептики.

— нельзя пунктировать опухоль при подозрении на меланому;

— перед проведением пункции опухоль тщательно пальпируют, определяют ее подвижность, связь с окружающими тканями и возможность оптимальной фиксации;

— игла и шприц для пункции должны быть абсолютно сухими;

— не следует проводить обследуемому анестезию пунктируемого образования (сама пункция не более болезненна, чем прокол иглой для анестезии, кроме того, применение новокаина может вызвать изменение клеточных элементов);

— мандреном, как правило, не пользуются, так как используемые для диагностических пункций иглы имеют очень маленький диаметр и косой срез на конце, игла легко продвигается через ткани, расположенные над опухолью (кожу, подкожную клетчатку, мышцы), расслаивая их, закупорка иглы происходит очень редко. Однако при пункции богато васкуляризированных образований (щитовидная железа, сосудистые опухоли, кости и др.) необходимо использовать иглу с мандреном, последний извлекается после введения иглы в исследуемое образование;

— пункцию различных образований, в том числе опухолей производят тонкой иглой (наружный диаметр 0,6-0,7 мм), которая присоединяется к шприцу 20 мл.

Методика проведения пункции тонкой иглой. Опухоль фиксируют пальцами левой руки. Иглу без шприца (или с присоединенным шприцем с опущенным поршнем) вводят перпендикулярно через кожу в исследуемое образование. По достижении очага поражения осторожно пальпируют ткань вокруг введенной иглы, определяя правильность прокола; при небольшом подкожном узле можно несколько наклонить иглу, при этом опухоль на игле сместится, что ощущается пальцами и подтверждает правильное положение иглы. Не рекомендуется производить вращательные движения иглой, так как это наносит лишнюю травму и не приводит к получению более полноценного материала. После этого присоединяют шприц с опущенным поршнем (если он не был присоединен сразу) и делают 2-3 резких насасывающих движения, снимая шприц с иглы после каждого подъема поршня. По окончании взятия шприц необходимо снять, иглу извлекают без шприца, что позволяет сохранить материал; для цитологического исследования достаточно материала попавшего в просвет иглы. Содержимое иглы выдувается на предметное стекло при помощи шприца, который наполняется воздухом и вновь соединяется с иглой. Содержимое размазывается по стеклу другим стеклом или ребром иглы. Если при проколе опухоли появляется жидкость, то под иглу подставляют пробирку и собирают жидкость. Если жидкость не стекает, можно использовать шприц, осторожно оттягивая поршень и, набирая жидкость в шприц, после чего шприц снимают и жидкость сливают в пробирку. После удаления жидкости иглу вводят в более плотную ткань пунктируемого образования и получают пунктат в просвете иглы.

Получение биопсийного и операционного материала. Цитологические препараты (отпечатки и соскобы) можно делать из материала, полученного при биопсии или хирургической операции:

— отпечатки выполняются путем прикладывания стекла к биопсированному кусочку или разрезу удаленной опухоли;

— разрез опухоли или лимфатического узла необходимо проводить сухим скальпелем, чтобы избежать разрушения клеток водой;

— если консистенция ткани плотная (костная, хрящевая) и не позволяет сделать отпечатки, производят соскоб с поверхности свежего разреза опухоли (путем легкого соскабливания предметным стеклом или скальпелем). При проведении эндоскопического обследования материал для цитологического исследования берут с помощью специальных приспособлений: аспираты промывных вод — с помощью отсасывающего устройства, при бронхоскопии — для приготовления мазков из бронхоальвеолярных лаважей используется технология цитоцентрифугирования (Cytospin); мазки-отпечатки из материала щипковых биопсий, браш-биоптаты, пунктаты и др.).

Правила доставки биологического материала в лабораторию.

1. Флаконы с материалом и стекла-мазки должны иметь идентификацию (маркировку): на них должна быть четко нанесены код или фамилия больного, идентичные коду и фамилии в бланке направления материала для цитологического исследования. Для приготовления цитологических препаратов предпочтительнее использовать предметные стекла со шлифованным краем. которые легко маркируются.

2. Цитологический материал доставляют в лабораторию в ближайшие сроки после его взятия. Особенно это относится к жидкостям, мокроте, содержимому кист и любому кровянистому материалу.

3. Для доставки необходимо иметь специализированные контейнеры для предметных стекол, пробирки, чашки Петри, емкости разного объема. Не допускается контакт нативного материала, в том числе подсушенного предметного стекла с бланком — направлением.

4. Полученный материал доставляют в лабораторию с бланком-направлением, в котором должны быть представлены паспортные данные обследуемого пациента, диагноз, проведенная терапия, точно должно быть указано место участка, откуда был взят материал, и способ его получения.

5. Сотрудник лаборатории, который принимает материал, должен проверить маркировку препаратов, пробирок и т.д., оформление направления, отметить характер и количество биоматериала, число присланных мазков

Правила приготовления препаратов (мазков) из биологического материала для цитологического исследования.

Методика приготовления мазка.

Необходимой предпосылкой для точной оценки морфологических особенностей клеток в мазке является правильно сделанный, качественно фиксированный, хорошо окрашенный и методологически корректно изученный мазок, поступающий в лабораторию в сопровождении необходимых клинико-инструментальных и анамнестических данных. Невыполнение этих условий ведет к неправильному распределению клеток ткани, неполному выявлению их морфологических особенностей, «пропуску» важной диагностической информации на предметном стекле или отсутствию корригирующей клинической информации и, тем самым, к ошибочной оценке цитологической картины, а значит к неполноценному или ошибочному диагнозу. Если мазки были приготовлены вне лаборатории, то в соответствии с теми же требованиями оценивается их макроскопический вид. Сотрудники лаборатории должны постоянно обучать представителей клинических отделений, участвующих в приготовлении мазков.

Правильно приготовленный мазок из нормальной или патологически измененной ткани должен отвечать следующим условиям:

1. Мазок должен начинаться на 1 см от узкого края предметного стекла и заканчиваться примерно в 1.5 см от другого края предметного; мазок не должен достигать длинного края стекла, между мазком и краем предметного стекла должно оставаться расстояние примерно 0.3 см.

2. Хороший мазок должен быть максимально тонким (максимально приближающимся к однослойному), равномерной толщины (не волнообразным) на всем протяжении.

3. Мазок из осадка жидкого материала (жидкость из серозной полости, смыв из различных органов, содержимое кистозной полости и т.п.) должен заканчиваться у одного из узких краев предметного стекла в виде следа, оставленного как бы тонкой щеткой.

4. Клетки в мазке должны быть равномерно распределены, все участки мазка должны хорошо просматриваться и не содержать «толстые участки», содержащие непросматриваемые (плохо просматриваемые) скопления или комплексы клеток.

Фиксация мазка проводится в соответствии с методикой, обусловленной биологическим материалом, взятым для цитологического исследования (влажная фиксация биологического материала или подсушивание его на воздухе). При влажной фиксации приготовленный мазок помещается в фиксирующую жидкость, затем подсушивается на воздухе. Недостаточная фиксация мазка ведет к некачественному окрашиванию клеток.

1. Правильная фиксация мазка обусловливает стойкость клеток по отношению к содержащейся в красках воде, которая в нефиксированном мазке изменяет строение клеточных элементов. При фиксации мазка происходит коагуляция белка, в результате чего клетки прикрепляются к предметному стеклу;

2. При фиксации цитологических препаратов должны использоваться фиксаторы, прописи приготовления которых приводятся в соответствующих руководствах.

3. Рекомендуемые фиксаторы: — метиловый спирт; — этиловый спирт; — смесь Никифорова; — фиксатор Май-Грюнвальда; — фиксатор Лейшмана; — ацетон (для иммуноцитохимии). Лучшим фиксатором является метиловый спирт, на основе которого готовят фиксатор Лейшмана и Май-Грюнвальда.

Правила окрашивания мазка.

Качественное окрашивание позволяет правильно идентифицировать клеточные элементы мазка и оценить их особенности при микроскопии. В адекватно окрашенном мазке структуры цитоплазмы, ядра, ядерного хроматина, ядрышек окрашены селективно.

1. При применении любой методики окрашивания мазка важно точно соблюдать последовательность процедур приготовления растворов и временные промежутки в течение процесса окрашивания.

2. Существующие в продаже партии красителя имеют различную интенсивность окраски. Это обязывает опытным путем установить оптимальные концентрации (разведение) и время окрашивания для каждого флакона красителя, которые устанавливают при окрашивании серии препаратов растворами с различной концентрацией красителя, меняя длительность его воздействия. При приготовлении растворов необходимо учитывать рН воды: она должна быть нейтральной (pH 6,8 -7,2), что обеспечивается использованием буферных растворов.

3. Рекомендуемые методы окрашивание цитологических мазков: — азур-эозиновый, (по Романовскому, Лейшману, Май-Грюнвальду, Панпенгейму и др.); — гематоксилиновый; — гематоксилин-эозиновый; — метод Папаниколау.

4. Для уточнения диагноза рекомендуется использование цитохимических и иммуноцитохимических методов анализа в соответствии с принятыми методиками.

Приготовление стекол

Стекла для приготовления цитологических препаратов должны быть чистые, обезжиренные и сухие.

1. Стекла тщательно промывают щеткой в теплой мыльной (или с моющим средством) воде.

2. Основательно промывают в проточной теплой воде.

3. Затем кипятят 1-2 часа в воде с добавлением соды (2-3%) или моющего средства.

4. После хорошо ополаскивают в чистой горячей воде и промывают в проточной (1-2 часа).

Обработанные и промытые в воде стекла протирают мягкой тряпкой, держа стекла за края, и хранят в смеси Никифорова (равные части 96° спирта и эфира). По мере надобности пинцетом извлекают стекла из смеси Никифорова и протирают сухой тряпкой. Обработанные таким образом стекла могут быть использованы для приготовления цитологических препаратов.

Для проведения цитохимических исследований очень хорошие результаты дает обработка предметных стекол и других стеклянных предметов в хромовой смеси следующего состава:

Двухромовокислый калий (бихромат калия) — 100 г; вода горячая — 1000 мл; неочищенная серная кислота — 100 мл.

Для приготовления хромовой смеси растворяют в горячей воде двухромовокислый калий, затем охлаждают раствор и после этого добавляют серную кислоту. Кислоту льют осторожно (обязательно в вытяжном шкафу), при этом смесь весьма сильно нагревается и приобретает темно-коричневый цвет. В этом составе предметные стекла и другую стеклянную посуду выдерживают 2-3 дня, а после промывают в проточной воде в течение 1-2 часов.

На хорошо обезжиренном предметном стекле вода должна растекаться тонким слоем, а не собираться в капли.

Для обеспечения надежной маркировки стекол используют механический и химический способы «матирования» края поверхности стекла. Механический способ основан на обработке предметного стекла абразивным камнем на станке. При использовании второго способа в пластмассовый сосуд вместимостью около 300 мл помещают 50 г фторида аммония и 50 мл концентрированной соляной кислоты. Смесь тщательно перемешивают до кашицеобразной консистенции (в вытяжном шкафу). Высота слоя смеси в сосуде не должна превышать 1,5 см. Чистые предметные стекла устанавливают вдоль стенок сосуда таким образом, чтобы один конец стекла был погружен в смесь. В сосуде последовательно размещают 20 — 25 предметных стекол. Через 1 мин стекла переносят на 10-15 мин в пластмассовое ведро с большим количеством воды. Затем воду сливают и стекла обрабатывают слабым раствором серной кислоты (5 мл концентрированной кислоты на 8-10 л воды) для их обезжиривания. После этого стекла тщательно промывают водой и просушивают (можно с помощью вентилятора). Всю работу по подготовке предметных стёкол выполняют в резиновых перчатках. Смесь фторида аммония и концентрированной соляной кислоты можно использовать многократно, добавляя небольшое количество кислоты. Маркировать стекла можно также, подписывая один край стекла тушью.

1.Основные этапы цитологического исследования

2. Способы получения материала для цитологического исследования

3. Дооперационные и интраоперационные способы получения материала, характеристика

4. Получение эксфолиативного материала, характеристика

6. Получение пункционного материала

7. Методика проведения пункции тонкой иглой

8. Получение биопсийного и операционного материала

9. Правила приготовления стекол для цитологических исследований

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ

1. Записать протокол практического занятия с указанием цели и задачи, способов взятия и подготовки материала для цитологических исследований.

2. Записать правила приготовления стекол и мазков для цитологических исследований.

3. Записать основные различия эксфолиативной и интраоперационной цитологии.

источник

Исследование мокроты предусматривает определение физи­ческих свойств мокроты, ее микроскопическое исследование в нативном мазке и бактериологическое исследование в окрашен­ных препаратах.

Мокроту, получаемую при откашливании утром до приема пи­щи, собирают в чистую сухую склянку. Перед исследованием боль­ной должен почистить зубы и тщательно прополоскать рот водой.

Мокроту помещают в чашку Петри, рассматривают на светлом и темном фоне, описывают ее свойства. Количество мокроты за сутки при различных патологических процессах может быть раз­лично: так например, при бронхите — скудное (5-10 мл), при абсцессе легкого, бронхоэктазах — большое количество (до 200—300 мл).

Деление на слои наблюдается в случаях опорожнения боль­ших полостей в легком, например, абсцесса легкого. В этом случае мокрота образует 3 слоя: нижний слой состоит из детри­та, гноя, верхний слой — жидкий, на поверхности его иногда имеется третий — пенистый слой. Такую мокроту называют трехслойной.

Характер: характер мокроты определяет содержание слизи, гноя, крови, серозной жидкости, фибрина. Характер ее может быть слизистый, слизисто-гиойный, слизисто-гнойно-кровянистый и т.п.

Цвет: зависит от характера мокроты, от выдыхаемых частиц, которые могут окрашивать мокроту. Так например, желтоватый, зеленоватый цвет зависит от наличия гноя, «ржавая» мокрота -от распада эритроцитов, встречается при крупозной пневмонии. Прожилки крови в мокроте или красная мокрота может быть при примеси крови (туберкулез, бронхоэктазы). Серый и черный цвет придает мокроте уголь.

Консистенция: зависит от состава мокроты, жидкая — в ос­новном от наличия серозной жидкости, клейкая — при наличии слизи, вязкая — фибрина.

Запах: свежевыделенная мокрота обычно без запаха. Непри­ятный запах свежевыделенной мокроты обычно появляется при абсцессе легкого, при гангрене легкого — гнилостный.

Нативные препараты готовят, выбирая материал из разных мecт мокроты, берут также для исследования все частицы, выде­ляющиеся окраской, формой, плотностью.

Отбор материала производят металлическими палочками, по­мещают его на предметное стекло и покрывают покровным. Мате­риал не должен выходить за покровное стекло.

Лейкоциты: всегда содержатся в мокроте, количество их зависит от характера мокроты.

Эозинофилы: распознаются в нативном препарате по более темной окраске и наличию в цитоплазме четкой, одинаковой, пре­ломляющей свет зернистости. Часто располагаются в виде больших скоплений. Эозинофилы встречаются при бронхиальной астме, других аллергических состояниях, гельминтозе, эхинококке лег­кого, новообразованиях, эозинофильном инфильтрате.

Эритроциты: имеют вид дисков желтого цвета. Единичные эритроциты могут встречаться в любой мокроте, в большом коли­честве — в мокроте, содержащей примесь крови: новообразовани­ях легкого, туберкулезе, инфаркте легкого.

Клетки плоского эпителия: попадают в мокроту из полости рта, носоглотки, большого диагностического значения не тлеют.

Цилиндрический мерцательный эпителий: выстилает слизистую оболочку гортани, трахеи, бронхов. В большом количестве обнаруживается при острых катарах верхних дыхательных путей, бронхитах, бронхиальной астме, новообразованиях легкого, пневмосклерозе и др.

Альвеолярные макрофаги: большие клетки различной величи­ны, чаще круглой формы, с наличием в цитоплазме включений черно-бурого цвета. Встречаются чаще в слизистой мокроте с небольшим количеством гноя. Обнаруживаются при различных па­тологических процессах: пневмонии, бронхитах, профессиональ­ных заболеваниях легких и др. Альвеолярные макрофаги, содер­жащие гемосидерин, старое название — «клетки сердечных поро­ков», имеют в цитоплазме золотисто-желтые включения. Для их выявления применяют реакцию на берлинскую лазурь. Ход реакции: кусочек мокроты помещают на предметное стекло, прибавляют 2 капли 5% раствора соляной КИОЛОТЫ и 1-2 капли 5% раствора желтой кровяной соли. Перемешивают стеклянной палочной и по-крывают покровным стеклом. Гемосидерин, лежащий внутриклеточно, окрашивается в голубой или синий цвет. Эти клетки обнару­живаются в мокроте при застойных явлениях в легких, инфарктах легкого.

Жирное перерождение клетки (липофаги, жировые шары): чаще округлые, цитоплазма их заполнена жиром. При прибавлении к препарату судана Ш капли окрашиваются в оранжевый цвет. Группы таких клеток встречаются при новообразованиях легкого, актиномикозе, туберкулезе и др.

Эластические волокна: в мокроте имеют вид извзитых блес­тящих волокон. Как правило располагаются на фоне лейкоцитов и детрита. Наличие их указывает на распад ткани легкого. Обнаруживаются при абсцессе, туберкулезе, новообразованиях легко­го.

Коралловые волокна: Грубые ветвящиеся образования с буг­ристыми утолщениями вследствие отложения на волокнах жирных кислот и мыл. Их обнаруживают в мокроте при кавернозном тубер­кулезе.

Обызвествленные эластические волокна — грубые, пропитанные солями извести палочковидные образования. Обнаруживают при распаде петрифицированного очага, абсцессе легкого, ново­образованиях, Элемента распада петрифицированнго очага носят название тетрады Эрлиха: I) обызвествленные эластические во­локна; 2)аморфные соли извести; 3) кристаллы холестерина; 4) микобактерии туберкулеза.

Спирали Куршмана_- уплотнены, закрученные в спираль слизевые образования. Центральная часть резко преломляет свет и выглядит спиралью, по периферии свободно лежащая слизь обра­зует мантию. Спирали Куршмана образуются при бронхиальной астме.

Кристаллические образования: кристаллы Шарко-Лейдена, вы­тянутые блестящие ромбы, можно обнаружить в желтоватых кусоч­ках мокроты, содержащих большое количество эозинофилов. Их образование связывают с распадом эозинофилов,

Кристаллы гематоидина: имеют форму ромбов и иголок золо­тистого цвета. Образуются при распаде гемоглобина при крово­излияниях, распаде новообразований. В препарате мокроты видны обычно на фоне детирита, эластических волокон.

Кристаллы холестерина: бесцветные четырехугольники с обло­манными ступенеобразным углом, обнаруживаются при распаде жирно перерожденных клеток, в полостях. Встречаются при туберку­лезе, абсцессе легкого, новообразованиях.

Пробки Дитриха: мелкие желтовато-серые зернышки с непри­ятным запахом, содержатся в гнойной мокроте. Микроскопически представляют собой детрит, бактерии, кристаллы жирных кислот в виде игл и капелек жира. Образуются при застое мокроты в полостях при абсцессе легкого, бронхоэктазах.

Исследование на туберкулезные микобактерии: Препарат готовят из гнойных частиц мокроты, высушивают

на воздухе и фиксируют над пламенем горелки. Окрашивают по

Методика окрашивания: Реактивы:

2) 2% спиртовой раствор соляной кислоты,

3) водный раствор 0,5% метиленового синего.

1. На препарат кладут кусочек фильтровальной бумаги и наливают раствор карболового фуксина.

2. Препарат нагревают над пламенем горелки до появления паров, охлаждают и снова нагревают (так 3 раза).

3. С остывшего стекла снимают фильтровальную бумагу. Обесцвечивают мазок в солянокислом спирте до полного отхождения краски.

5. Докрашивают препарат метиленовнм синим 20-30 секунд.

6. Промывают водой и высушивают на воздухе. Микроскопируют с иммерсионной системой. Туберкулезные микобактерии окрашиваются в красный цвет,

все остальные элементы мокроты и бактерии — в синий. Туберку­лезные микобактерии имеют вид тонких, слегка изогнутых пало­чек с утолщениями на концах или посередине.

При окраске по Цилю-Нильсону в красный цвет красятся также кислотоупорные сапрофиты. Дифференциальная диагностика туберкулезных микробактерий и кислотоупорных сапрофитов ведет­ся методами посева и заражения животных.

Исследование мокроты может проводиться также методом фло­тации. Метод Потенжера: ход исследования:

1. Свежевыделенную мокроту (не более 10-15 мл) помещают в узкогорлую бутылку, приливают двойное количество едкой ще­лочи, смесь энергично встряхивают (10-15 мин).

2. Приливают I мл ксилола (можно бензина, толуола) и около 100 мл дистиллированной вода для разжижения мокроты. Снова встряхивают 10-15 мин.

3. Доливают дистиллированную воду до горлышка бутылки и оставляют стоять на 10-50 мин.

4. Образовавшийся верхний слой (беловатый) снимают по каплям пипеткой и наносят на предметные стекла, предвари­тельно нагретые до 60°. Каждую последующую каплю наносят на подсохшую предыдущую.

5. Препарат фиксируют и красят по Цилю-Нильсону.

Исследование на другие бактерии:

Другие бактерии, встречающиеся в мокроте, например, стрептококки, стафилококки, диплобациллы и др. могут быть распознаны только методом посева. Бактериологическое иссле­дование препарата в этих случаях имеет только ориентировоч­ное значение. Препараты красят метиленовым синим, фуксином или по граму. Окраска по Граму: Реактивы: I) карболовый раствор генцианвиолета,

4) 40% раствор карболового фуксина.

1. На фиксированный препарат кладут полоску фильтроваль­ной бумаги, наливают раствор генцианвиолета, красят 1-2 мин.

2. Бумажку снимают и препарат заливают раствором Люголя на 2 минуты.

3. Раствор Люголя сливают и прополаскивают препарат в спирте до серого цвета.

4. Промывают водой и окрашивают 10-15 секунд раствором фуксина.

5. МОКРОТА ПРИ РАЗЛИЧНОЙ ПАТОЛОГИИ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ
Нозологическая форма Колич. Макрос. Хар-р изучен. Микроскопия
I
Бронхит Скудное,за- Цилиндрический эпи-
тем боль- телий ,лейкоциты,иног-
шое. Слизи — да эритроциты,много
стая или флоры,макрофаги .
слизисто-
гнойная
Бронхопневмо- Большое Цилиндрический эпите-
ния количество лий, альвеолярный эпи-
слизистой телий, лейкоциты,
-или слизис- пневмококки
ТО-ГНОЙНОЙ
Крупозная Скудное,за- Свертки Макрофаги, лейкоциты,
пневмония тем обиль- фибрина, эритроциты, кристал-
ное к-во изменен- лы гематоидина,
ржавой мо- ная гемосидерин, пневмо-
кроты кровь кокки
Бронхиальная Скудное, Спирали Цилиндрический эпи-
астма слизистая Куршмана телий, кристаллы
Шарко-Лейдена,
эозинофилы
Бронхоэктати- Обильное Пробки Лейкоциты сплошь,
ческая бо- (утром- Дитриха кристаллы жирных
лезнь полным кислот,гематоидина,
ртом) холестерина, обильная разнообразная флора

Приложение: посуда и оборудование: Препарат промывают водой и высушивают на воздухе. Смотрят с иммерсией.

2. Инструменты для отбора мокроты: металлические палоч­ки с расплющенными концами, препаровальные иглы и др.

7. Дезинфицирующая жидкость.

Абсцесс лег­кого Обильное, гнойная, со зловонным запахом Обрывки ткани легкого. Сплошь лейкоциты, эла­стические волокна, кристаллы жирных кис­лот, гематоидина, хо-лестерша, разнообраз­ная обильная флора

Различное, рисовидные тельца слизисто-гнойная, иногда с примесью кро­ви Микобактерии тубер­кулёза, эластические волокна, различные кристаллы

Различное, слизисто-кровянистое Обрывки ткани. Атипические клетки.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Учись учиться, не учась! 10289 — | 7838 — или читать все.

193.124.117.139 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)

очень нужно

источник